實(shí)體瘤的單克隆抗體治療.doc

實(shí)體瘤的單克隆抗體治療實(shí)體瘤的單克隆抗體治療來源：醫(yī)學(xué)論文 /lunwen4456/【關(guān)鍵詞】 單克隆抗體【摘要】 單克隆抗體是以腫瘤的特異性蛋白為靶點(diǎn)，在腫瘤治療中具有特異性、有效性、低毒性的特點(diǎn)。單克隆抗體治療的靶點(diǎn)包括細(xì)胞表面抗原和生長因子受體等。單克隆抗體單一治療和聯(lián)合化療、放療在實(shí)體瘤治療中顯示出了很好的療效，抗體與放射性核素結(jié)合的放射免疫性治療也有明顯的療效。本文通過單抗治療機(jī)制和臨床治療試驗(yàn)兩方面介紹了幾種單克隆抗體以及抗體的治療戰(zhàn)略。【關(guān)鍵詞】 單克隆抗體;實(shí)體瘤；免疫治療【Abstract】 Monoclonal antibodies have emerged as an important therapeutic properties for tumor by targeting specific proteins of tumor. Those reagents have the advantage of specificity, and efficiency, low toxicity. Those targets for monoclonal antibodies therapy include cellular growth factor receptors and cell surface antigens, etc. Unconjugated antibodies show significant efficacy in the treatment of solid tumors by monotherapy and combining with chemotherapy or radiotherapy. Radioimmunotherapy is that antibodies conjugate to radionuclides shows significant efficacy, too. This review presents some of the moloclonal antibodies and Mab-guided strategies by focusing on the mechanisms and some of experiences reported for Mab evaluated in clinical trials. 【Key words】 monoclonal antibody;tumor;immune therapy腫瘤的免疫治療和放射免疫治療開始于世紀(jì)年代，早期用于治療的抗體是多克隆抗體，但因?yàn)槠洚愘|(zhì)性和藥學(xué)特性不適宜而被淘汰。年Kohler和Milstein利用雜交瘤技術(shù)成功制備出單克隆抗體，成為世紀(jì)生物領(lǐng)域的一大技術(shù)革命。隨著單克隆抗體在制備技術(shù)和應(yīng)用方面的發(fā)展，目前單克隆抗體已在生物學(xué)及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用，尤其是在腫瘤的診斷和治療方面發(fā)揮了重要作用。單克隆抗體抗腫瘤的機(jī)制包括抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒效應(yīng)（CDCC）或補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒效應(yīng)（CDC）殺死腫瘤細(xì)胞；通過抗體競爭地與受體結(jié)合，干擾配體-受體的結(jié)合和相互作用，影響其發(fā)揮生物效應(yīng)，抑制腫瘤生長；和受體結(jié)合直接誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等。由于單克隆抗體大部分為鼠源性抗體，在人體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生人抗鼠抗體（HAMA）,與單抗結(jié)合后降低了抗腫瘤效應(yīng)。單克隆抗體對(duì)血液腫瘤的治療取得了顯著的療效，而實(shí)體瘤治療療效不如前者。這可能和抗體分子很難通過毛細(xì)血管的內(nèi)皮層，組織穿透力差，腫瘤攝取率低以及實(shí)體瘤內(nèi)部的“高壓狀態(tài)有關(guān)。隨著抗體技術(shù)的發(fā)展和新的靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)，近年來FDA批準(zhǔn)了數(shù)個(gè)單克隆抗體用于實(shí)體瘤臨床治療，實(shí)體瘤的免疫導(dǎo)向治療取得了飛速的發(fā)展。下面對(duì)幾種用于實(shí)體瘤治療的單克隆抗體進(jìn)行介紹。 抗CD單克隆抗體CD抗原是分子量為kD的非糖基化跨膜蛋白。CD表達(dá)在前-B細(xì)胞和成熟B細(xì)胞膜上，同時(shí)有超過%的B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤（NHL）細(xì)胞也表達(dá)CD，而漿細(xì)胞、造血干細(xì)胞及T細(xì)胞則無CD的表達(dá)。CD可能對(duì)Ca的跨膜運(yùn)輸、B淋巴細(xì)胞的分化、增殖具有調(diào)節(jié)作用。在血清中無游離CD存在，最重要的是B淋巴細(xì)胞上的CD很少內(nèi)化和脫落，是B淋巴細(xì)胞瘤免疫導(dǎo)向治療的理想靶點(diǎn)。利托昔（Rituximab）是年FDA批準(zhǔn)用于治療B淋巴細(xì)胞NHL的抗CD嵌合型單克隆抗體，是由鼠抗CD的可變區(qū)Fab和人IgG抗體的穩(wěn)定區(qū)Fc段構(gòu)成。Rituximab能夠有效地降低淋巴瘤患者血液循環(huán)中的B細(xì)胞數(shù)量，其機(jī)制包括：()CDC效應(yīng)；()ADCC效應(yīng)；()誘導(dǎo)瘤細(xì)胞凋亡，同時(shí)它還增加細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。在期臨床試驗(yàn)中對(duì)例復(fù)發(fā)性、難治性和濾泡型NHL進(jìn)行治療觀察，每周的治療劑量為mg/m，經(jīng)過周治療，有效率為%,其中完全緩解率（CR）為%，部分緩解率（PR）為%。腫瘤體積縮小的患者例，占總數(shù)的%，平均藥效持續(xù)時(shí)間為.個(gè)月。聯(lián)合其他的化療藥物進(jìn)行治療的期試驗(yàn)中，例患者接受rituximab和CHOP方案的聯(lián)合治療周，結(jié)果表明例患者（其中例患者因其他原因退出試驗(yàn)）有效率為%，其中CR為%，PR為%。平均藥效持續(xù)時(shí)間為.個(gè)月。運(yùn)用PCR技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)例bcl-陽性患者經(jīng)治療后例患者轉(zhuǎn)陰，這些治療效果是單一使用CHOP方案達(dá)不到的。目前，rituximab已在臨床廣泛運(yùn)用。 抗CD單克隆抗體CD是一個(gè)kD的限制性唾液酸糖蛋白，表達(dá)在生長期B細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中。只有分化成熟以后的B細(xì)胞表面出現(xiàn)。在人類，大部分循環(huán)系統(tǒng)中的免疫球蛋白IgM陽性和IgD陽性的B細(xì)胞在細(xì)胞表面表達(dá)CD。CD在濾泡型、套型和緣區(qū)型B細(xì)胞中強(qiáng)烈表達(dá)。通過免疫組化、流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)得出，在B細(xì)胞淋巴瘤中至少%的細(xì)胞表達(dá)CD。CD的功能尚不確定，最近的研究表明CD是B細(xì)胞活化復(fù)合物的一個(gè)連接分子。在對(duì)CD缺乏的小鼠的研究中發(fā)現(xiàn)骨髓和循環(huán)中成熟的B細(xì)胞數(shù)量減少，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)這些B細(xì)胞壽命較短，易凋亡。說明CD是B細(xì)胞生長和成熟的關(guān)鍵因子。在與天然配體和抗體結(jié)合以后，CD迅速內(nèi)化，給B淋巴瘤細(xì)胞提供凋亡前信號(hào)。LL抗體（以前叫HPB-）是一個(gè)IgGa型抗CD的鼠源單克隆抗體，體外免疫組化證實(shí)LL抗體和個(gè)NHL的B細(xì)胞樣本中的個(gè)樣本抗原反應(yīng)，但不和其他的惡性非淋巴組織反應(yīng)。人源化的Ig型LL是epratuzumab,它降低了免疫原性，延長了半衰期，增強(qiáng)了功能。在單一使用epratuzumab的/臨床試驗(yàn)研究中，對(duì)例套性NHL患者連續(xù)周使用epratuzumab單一治療，劑量分別為、mg/(m&#;week)。對(duì)例患者（其中例患者因其他原因退出試驗(yàn)）進(jìn)行評(píng)價(jià)，例患者治療有效(OR )，有效率為%；例患者達(dá)到CR，占%；例患者達(dá)到PR，占%；例患者處于穩(wěn)定期，占%；例患者病情惡化，占%。%的患者腫瘤的體積有一定的減小。平均藥效持續(xù)時(shí)間為.周。治療有效的患者的用藥劑量分別在mg/m和mg/m兩個(gè)水平。Sharkey RM等用In和Y標(biāo)記epratuzumab比較治療NHL，發(fā)現(xiàn)Y-DOTA-epratuzumab半衰期較短，對(duì)機(jī)體的損傷相對(duì)較小，是一種很有前途的放射免疫治療藥物。 抗HER-/neu抗體HER-/neu是一種原癌基因，位于人染色體q，編碼kD的跨膜糖蛋白受體，具有酪氨酸激酶活性，屬于表皮生長因子受體（EGFR）家族。已發(fā)現(xiàn)%的晚期乳腺癌患者HER-/neu過度表達(dá)和擴(kuò)增，同樣在卵巢癌、前列腺癌、肺癌、胃癌、膀胱癌中也有表達(dá)。在乳腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)HER-的過表達(dá)與預(yù)后不良有關(guān)，有資料表明HER-過表達(dá)的乳腺癌患者緩解率和生存率降低，復(fù)發(fā)率增高。而且HER-的過表達(dá)的乳腺癌具有抗藥性，研究表明這類腫瘤對(duì)激素治療缺乏反應(yīng)，特別是tamoxifen聯(lián)合化療藥如CMF(環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤、-氟尿嘧啶)治療時(shí)效差。Herceptin（Trastuzumab）是采用生物工程技術(shù)制作人源化的單克隆抗體，年月FDA批準(zhǔn)上市。Herceptin能有效地抑制過表達(dá)HER-的細(xì)胞的增生效應(yīng)，其作用機(jī)制還不完全清楚，可能包括：()與HER-受體蛋白特異性結(jié)合阻斷配體與其結(jié)合而產(chǎn)生的促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長的作用，降低細(xì)胞周期S期的腫瘤細(xì)胞的比例，使大部分細(xì)胞停留在G/G期；()促進(jìn)HER-的內(nèi)化；()通過抗體依賴性細(xì)胞毒作用（CDCC）殺死腫瘤細(xì)胞；()下調(diào)血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)，抑制異常細(xì)胞DNA的修復(fù)功能，從而增加腫瘤細(xì)胞對(duì)放療和化療的敏感性。在期臨床試驗(yàn)早期單一使用Herceptin對(duì)例HER-陽性的已有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移乳腺癌患者進(jìn)行治療，結(jié)果總有效率為%，其中CR 例，PR 例。在后期的臨床試驗(yàn)對(duì)例同樣的患者進(jìn)行的治療觀察，總有效率為%。其中CR 例，PR 例，治療效果持續(xù)時(shí)間為.個(gè)月，其他患者中%病情穩(wěn)定無惡化，優(yōu)于使用二線化療藥物治療的結(jié)果。在期臨床試驗(yàn)中，對(duì)HER-陽性的轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者進(jìn)行治療，Herceptin與anthracycline聯(lián)合治療和單一用anthracycline相比有效率分別為%、%；聯(lián)合taxane和單一使用taxnae相比有效率分別為%、%。聯(lián)合治療效果優(yōu)于單一使用Herceptin治療。Herceptin作為靶向藥物治療HER-陽性轉(zhuǎn)移性乳腺癌取得了可觀的療效。無論單用還是聯(lián)合運(yùn)用，都能產(chǎn)生理想的臨床效果。 抗CO-A（Ep-Cam）抗體Edrecolomab是一種鼠源性Iga單克隆抗體，它能識(shí)別人腫瘤相關(guān)抗原CO-A。CO-A廣泛表達(dá)在多種腫瘤細(xì)胞表面，包括直腸癌、結(jié)腸癌、胰腺癌和胃癌，正常上皮組織細(xì)胞也有少量表達(dá)。Edrecolomab的作用機(jī)制包括抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCC）和抗體依賴補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCMC）。在體外試驗(yàn)研究其ADCC作用中，發(fā)現(xiàn)孵化出的加入了Edrecolomab的大腸癌細(xì)胞可以被人的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞溶解破壞。進(jìn)一步研究Edrecolomab的ADCC作用表明，干擾素-、干擾素-、白細(xì)胞介素-與Edrecolomab共同孵化大腸癌細(xì)胞系HT時(shí)明顯地增加Edrecolomab的抗腫瘤作用，而粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞-集落刺激因子（GM-CSF）、巨噬細(xì)胞集落刺激因子、腫瘤壞死因子-沒有這種作用。Edrecolomab聯(lián)合其他非競爭性的鼠源單克隆抗體孵化大腸癌細(xì)胞可以產(chǎn)生ADCMC效應(yīng)，然而單獨(dú)用Edrecolomab孵化就不會(huì)產(chǎn)生這種效應(yīng)。對(duì)例經(jīng)過手術(shù)切除原發(fā)灶的Dukes C期大腸癌患者運(yùn)用Edrecolomab單一治療研究，隨訪年發(fā)現(xiàn)和對(duì)照組相比，死亡率下降了%; 腫瘤的復(fù)發(fā)率下降了%; 研究還表明Edrecolomab對(duì)原發(fā)灶的大腸癌的復(fù)發(fā)率沒有影響。然而，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移作為復(fù)發(fā)的第一信號(hào)，Edrecolomab明顯降低其發(fā)生率。Punt等用-FU與Edrecolomab聯(lián)合治療試驗(yàn)表明二者聯(lián)用沒有增加藥物的毒性，但聯(lián)合用藥和單一使用-FU相比生存率并沒有增加。Della M等用Edrecolomab與capecitabine聯(lián)合治療CO-A陽性的腺癌包括乳腺癌、大腸癌、胃癌、肺癌、膽囊癌等，表明二者聯(lián)合治療對(duì)進(jìn)展性和轉(zhuǎn)移性腺癌有效，毒、副作用沒有增加。目前，Edrecolomab被用于結(jié)腸癌的輔助治療，在延長存活期和抑制腫瘤轉(zhuǎn)移具有很好的效果. 實(shí)體瘤的放射免疫治療(RIT) 放射免疫治療是利用放射性核素和單克隆抗體結(jié)合，放射性核素對(duì)腫瘤的殺傷依靠電離輻射，再借助高特異親腫瘤的抗體為載體，不僅對(duì)與標(biāo)記抗體直接結(jié)合細(xì)胞，而且對(duì)周圍一定射程內(nèi)未結(jié)合的腫瘤細(xì)胞都有殺傷作用。由于抗體在腫瘤組織中濃度比周圍組織高，使放射性核素主要聚集在腫瘤組織內(nèi)，從而降低了核素對(duì)機(jī)體的毒性，提高了療效。目前，放射免疫治療實(shí)體瘤顯示出了令人鼓舞的前景。抗CD的Y標(biāo)記的鼠源性單抗Zevalin和I標(biāo)記的單抗Bexxar已被美國FDA批準(zhǔn)用于非霍奇金淋巴瘤臨床治療并取得良好的治療效果，特別是使用化療藥物和利托昔治療無效的NHL。許多新的放療藥物正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)和評(píng)價(jià)中，預(yù)計(jì)這些藥物將相繼問世。 小結(jié)使用單克隆抗體治療惡性腫瘤是一個(gè)正在迅速發(fā)展的領(lǐng)域。大量文獻(xiàn)表明單克隆抗體在實(shí)體瘤的治療中取得了很好的療效，特別是在小的轉(zhuǎn)移灶和術(shù)后殘余瘤的治療中。隨著上世紀(jì)年代抗體工程和噬菌體展示技術(shù)的迅速發(fā)展，基因工程抗體，如嵌合抗體、小分子抗體、雙特異性抗體和人源化抗體等相繼獲得成功。這些改造過的抗體在免疫原性、穿透性以及對(duì)各種水解酶的抵抗力等方面都優(yōu)于常規(guī)單抗。并且隨著分子生物學(xué)、免疫學(xué)