高中生物《第三章 第二節(jié) 月季的花藥培養(yǎng)》課件 新人教版選修1.ppt

月季的花藥培養(yǎng) 1 被子植物定義 凡是種子有果皮包被著 胚珠有子房壁包被著的植物 就叫做被子植物 一 被子植物和裸子植物 2 裸子植物定義 凡是胚珠裸露 外面沒有子房壁包被 種子外面沒有果皮包被的植物稱為裸子植物 實例 玉米 大豆 梨 杏 實例 松 杉 柏 3 花的結(jié)構(gòu) 花的結(jié)構(gòu) 花梗 花托 萼片 花瓣 雌蕊和雄蕊 4 花的作用 被子植物的有性生殖是在花里進(jìn)行的 雌蕊和雄蕊是進(jìn)行有性生殖的主要部分 二 被子植物花粉粒的形成 1 雄蕊的結(jié)構(gòu) 雄蕊 花粉是小孢子母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的 因此 花粉是單倍體的生殖細(xì)胞 2 被子植物的花粉發(fā)育 花粉粒的形成 經(jīng)歷時期 四分體時期 單核期 雙核期 兩個精子和一個營養(yǎng)核的基因型相同 花粉落到雌蕊柱頭上以后 在柱頭上黏液的刺激下 花粉開始萌發(fā)并形成花粉管 花粉管沿著花柱向胚珠方向生長 到達(dá)胚珠后從珠孔繞過卵細(xì)胞進(jìn)入胚囊 到達(dá)胚囊中卵細(xì)胞和極核之間 這時花粉管的前端破裂 兩個精子釋放出來 其中一個精子與兩個極核結(jié)合形成受精極核 另一個精子與卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵 這是被子植物特有的雙受精現(xiàn)象 4 受精過程 三 產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑 四 影響花藥培養(yǎng)的因素 1 材料的選擇 接種的花藥時期 不同植物的誘導(dǎo)成功率很不相同 就同一種植物來說親本的生理狀況對誘導(dǎo)成功率也有直接影響 選擇合適的花粉發(fā)育時期是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素 因為并不是任何時期的花粉都可以經(jīng)過培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織或胚狀體 花粉發(fā)育的過程中 只有某一個時期對離體刺激敏感 選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵 選材 一般來說 在單核期 細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期 花藥培養(yǎng)的成功率最高 即 最適合花藥培養(yǎng)的小孢子發(fā)育時期為單核靠邊期 選擇單核期以前的花藥接種 質(zhì)地幼嫩 極易破碎 選擇單核期之后的花藥接種 花瓣已有些松動 又給材料的消毒帶來困難 且難以挑選到單核期的花藥 花藥培養(yǎng)時期的選擇 其它時期選擇的缺點 花藥培養(yǎng)時間 為了挑選到單核期的花藥 通常選擇完全未開放的花蕾 盛開的或略微開放的花 都不宜選作實驗材料 選擇完全未開放花蕾的原因 完全未開放的花蕾 可挑選到單核期的花藥 菌少 易消毒 單核期花藥的挑選 一般月季的花藥培養(yǎng)時間選在五月初到五月的中旬 即月季的初花期 初花期的花蕾營養(yǎng)狀態(tài)及生理狀態(tài)會比較好 可能提高花粉的誘導(dǎo)成功率 月季花藥培養(yǎng)時的花粉粒最好是 a 四分體時期b 單核居中期c 單核靠邊期d 二核或三核花粉粒 c 2 其他因素親本植株的生長條件 材料的低溫預(yù)處理以及接種的密度等對誘導(dǎo)成功都有一定的影響 五 實驗操作 一 材料的選取 某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色 需采用焙花青 鉻礬法 這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色 最常用的方法有醋酸洋紅法 1 方法 醋酸洋紅法染色機理 醋酸洋紅為堿性染色劑 而花粉細(xì)胞內(nèi)有染色體 染色體主要成分是dna和蛋白質(zhì) 易被堿性染料著色染成紅色 將體積分?jǐn)?shù)45 的醋酸100ml煮沸 緩緩加入1g洋紅 在加熱回流8h 冷卻至50 過濾即可 醋酸洋紅的配置 2 醋酸洋紅法 將花藥放在載玻片上 加一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)1 的醋酸洋紅 用鑷柄將花藥搗碎 蓋上蓋玻片在顯微鏡下檢查 染色操作 3 焙花青 鉻釩法 將無水酒精與冰醋酸按體積比為3 1的比例混勻 卡諾氏固定液的配制方法 花藥應(yīng)該在卡諾氏固定液中固定20min 然后取出放在載玻片上 加焙花青 鉻釩溶液染色 蓋上蓋玻片后在顯微鏡下檢查 將5g鉻明礬 k2so4cr2 so4 24h2o 加入90ml蒸餾水中 溶解后加入0 1g焙花青 混勻并加熱至沸騰 煮沸5分鐘后冷卻至室溫 過濾 加蒸餾水定容至100ml 焙花青 鉻釩溶液的配制方法 染色操作 二 材料的消毒 1 酒精處理 花蕾用體積分?jǐn)?shù)為70 的酒精浸泡30秒 立即取出 無菌水清洗 無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分 2 消毒液處理 三 接種和培養(yǎng) 放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0 1 的氯化汞溶液中2 4分鐘 也可質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1 的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液 無菌水沖洗3 5次用于培養(yǎng)花藥 實際上多數(shù)未熟 由于它的外面有花萼 花瓣或穎片保護 通常處于無菌狀態(tài) 所以只要將整個花蕾或幼穗消毒即可 在無菌條件下除去萼片和花瓣用鑷子取出花藥 要徹底去除花絲 因為與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成 取出花藥后立即將其接種于培養(yǎng)基上 通常每瓶接種花藥7 10個 1 剝?nèi)』ㄋ?勿損傷花藥 以免誘導(dǎo)出非花粉愈傷組織 2 接種 注意 培養(yǎng)條件 溫度控制在25 左右 不需要光照 幼小植株形成后才需要光照 3 培養(yǎng) 培養(yǎng) 一般經(jīng)過20 30天培養(yǎng)后 會發(fā)現(xiàn)花藥開裂 長出愈傷組織或釋放出胚狀體長出愈傷組織則將愈傷組織及時轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上 以便進(jìn)一步分化出再生植株 注意 如果花藥開裂釋放出胚狀體 則一個花藥內(nèi)就會產(chǎn)生大量幼小植株 必須在花藥開裂后盡快將幼小植株分開 分別移植到新的培養(yǎng)基上 否則這些植株將很難分