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專題一 基因工程1.(2009年高考浙江理綜)下列關(guān)于基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物B限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)2.(2010年高考天津理綜)下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamH、Hind、Sma直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答:(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用_限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含_的培養(yǎng)基上進(jìn)行。(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是_(填字母代號(hào))。A啟動(dòng)子BtetRC復(fù)制原點(diǎn)DampR(3)過(guò)程可采用的操作方法是_(填字母代號(hào))。A農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化B大腸桿菌轉(zhuǎn)化C顯微注射 D細(xì)胞融合(4)過(guò)程采用的生物技術(shù)是_。(5)對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割,經(jīng)過(guò)程可獲得多個(gè)新個(gè)體。這利用了細(xì)胞的_性。(6)為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá),可采用_(填字母代號(hào))技術(shù)。A核酸分子雜交 B基因序列分析C抗原抗體雜交 DPCR3.(2010年高考上海卷)分析有關(guān)基因表達(dá)的資料,回答問(wèn)題。取同種生物的不同類型細(xì)胞,檢測(cè)其基因表達(dá),結(jié)果如圖。(1)現(xiàn)欲研究基因1和基因7連接后形成的新基因的功能,導(dǎo)入質(zhì)粒前,用限制酶切割的正確位置是_。(2)如圖是表達(dá)新基因用的質(zhì)粒的示意圖,若要將新基因插入到質(zhì)粒上的A處,則切割基因時(shí)可用的限制酶是_。AHindBEcoRCEcoB DPst(3)新基因與質(zhì)粒重組后的DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的概率很小,因此需進(jìn)行_,才能確定受體細(xì)胞已含有目的基因。(4)在已確定含有目的基因的受體細(xì)胞中,若質(zhì)粒的抗青霉素基因缺失了兩個(gè)堿基,將這樣的受體細(xì)胞接種到含有青霉素的培養(yǎng)中,該細(xì)胞中可能出現(xiàn)的結(jié)果是_(多選)。A抗青霉素基因不能轉(zhuǎn)錄B基因1和7沒(méi)有表達(dá)C基因1和7不能連接D質(zhì)粒上的酶切位置發(fā)生改變答案1.【解析】人胰島素原基因中有內(nèi)含子存在,因此在大腸桿菌中表達(dá)后無(wú)生物活性。載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞,但由于它和目的基因是相互獨(dú)立的,并不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。【答案】D2.【解析】(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程中,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞之前,要用同一種限制性內(nèi)切酶切割目的基因和載體。從圖中可以看出,在目的基因和載體中都有Hind和BamH 限制酶的切割位點(diǎn),因此要用Hind和BamH 限制酶同時(shí)切割載體和人乳鐵蛋白基因;載體切割后四環(huán)素抗性基因被破壞,因此篩選時(shí)要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行。(2)啟動(dòng)子是一段有特殊序列的DNA片段,位于目的基因的首段,它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,在啟動(dòng)子存在時(shí)才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。(3)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射技術(shù)。 (4)過(guò)程是將早期胚胎移入受體母牛體內(nèi),用到的技術(shù)是胚胎移植技術(shù)。(5)胚胎分割是利用機(jī)械方法將早期胚胎等分,經(jīng)移植后獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù),可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法,利用了細(xì)胞的全能性。(6)檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),需要用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原抗體雜交,其他三項(xiàng)技術(shù)檢測(cè)的對(duì)象都是核酸。【答案】(1)Hind 和BamH 氨芐青霉素(2)A(3)C(4)胚胎移植技術(shù)(5)全能(6)C3. 【解析】(1)由題意知,基因1和基因7連接形成新基因,新基因作為一個(gè)整體,因此,切割時(shí),不應(yīng)切在基因1和基因7的中間。(2)若將新基因插入到質(zhì)粒A處,應(yīng)用限制酶在A處切割。選項(xiàng)中,所選擇的酶只有EcoB。(3)目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá),只有通過(guò)檢測(cè)與鑒定才能知道。若新基因已導(dǎo)入,受體細(xì)胞產(chǎn)生了新基因表達(dá)的物質(zhì),經(jīng)選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)后,可篩選出含有新基因的細(xì)胞。若新基因未導(dǎo)入,或?qū)氲幢磉_(dá),受體細(xì)胞未產(chǎn)生新基因表達(dá)的物質(zhì),細(xì)胞在選擇培養(yǎng)基中無(wú)法生長(zhǎng)。(4)分析題意知,受體細(xì)胞中已確定含有目的基因,故抗青霉素基因缺失兩個(gè)堿基不影響新基因(目的基因)的連接與導(dǎo)入??骨嗝顾鼗蛉笔蓚€(gè)堿基后,質(zhì)粒的堿基序列有了變化,可能會(huì)影響到酶切位點(diǎn)的變化,且重組質(zhì)粒的堿基序列也有了變化,可能會(huì)影響到目的基因的表達(dá)。【答案】(1)B(2)C(3)篩選(4)BD1下列有關(guān)基因工程中限制酶的描述,錯(cuò)誤的是()A一種限制性內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列B限制性內(nèi)切酶的活性受溫度影響C限制性內(nèi)切酶能識(shí)別和切割RNAD限制性內(nèi)切酶可從原核生物中提取2(2011年濱州模擬)科學(xué)家運(yùn)用轉(zhuǎn)基因技術(shù),將蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因DXT轉(zhuǎn)移到大白菜細(xì)胞中,培育出抗蟲效果很好的優(yōu)質(zhì)大白菜,減少了農(nóng)藥的使用量,減輕了農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染。下列說(shuō)法正確的是()ADXT基因的編碼區(qū)由內(nèi)含子和外顯子組成BDXT基因在大白菜細(xì)胞中沒(méi)有表達(dá)C該技術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶D限制酶的切口一定是GAATTC堿基序列3科學(xué)家培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因綿羊乳腺細(xì)胞能夠合成并分泌抗胰蛋白酶,這是動(dòng)物乳房作為生物反應(yīng)器研究的重大進(jìn)展。下列與合成并分泌抗胰蛋白酶無(wú)關(guān)的是()A核糖體上遺傳信息的翻譯B分裂間期細(xì)胞產(chǎn)生了兩組中心粒C內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜與高爾基體膜聯(lián)系D綿羊基因與抗胰蛋白酶基因重組4科學(xué)家將干擾素基因進(jìn)行定點(diǎn)突變導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá),使干擾素第十七位的半胱氨酸改變成絲氨酸,結(jié)果大大提高了干擾素的抗病活性,并且提高了儲(chǔ)存穩(wěn)定性。該生物技術(shù)為()A基因工程B蛋白質(zhì)工程C基因突變 D細(xì)胞工程5(2011年衡陽(yáng)聯(lián)考)基因工程有廣闊的應(yīng)用前景?;卮鹣铝懈黝}:(1)獲取目的基因后,短期內(nèi)要得到大量目的目的基因,可利用_擴(kuò)增。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程要使用的工具酶有_。(3)受體種類不同,導(dǎo)入方法不同。選育優(yōu)良動(dòng)物,目的基因?qū)氲某S梅椒ㄊ莀;選育優(yōu)良植物,目的基因?qū)氩捎米疃嗟姆椒ㄊ莀。目的基因進(jìn)入動(dòng)植物細(xì)胞并且在受體細(xì)胞維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程,稱為_。(4)檢測(cè)目的基因在轉(zhuǎn)基因生物中是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物的體細(xì)胞中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行_雜交,看是否有雜交帶。6(2008年高考山東理綜)為擴(kuò)大可耕地面積,增加糧食產(chǎn)量,黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國(guó)科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。(1)獲得耐鹽基因后,構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性核酸內(nèi)切酶作用于圖中的_處,DNA連接酶作用于_處。(填“a”或“b”)(2)將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和_法。(3)由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用_植物組織培養(yǎng)_技術(shù),該技術(shù)的核心是_脫分化_和_再分化_。(4)為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功,既要用放射性同位素標(biāo)記的_目的基因_作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè),又要用_一定濃度鹽水澆灌(移栽到鹽堿地中)_方法從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。答案1.解析:考查限制酶的來(lái)源和作用特點(diǎn)。限制酶主要存在于微生物中,具有一般酶的特點(diǎn):高效性、專一性(限制酶只能切割DNA)、受環(huán)境影響等。答案:C2.解析:DXT基因?qū)儆谠嘶颍渚幋a區(qū)是連續(xù)的,故A錯(cuò);限制酶的種類不同,其切口也不同,故D錯(cuò);抗蟲效果明顯,說(shuō)明DXT基因已經(jīng)正常表達(dá),B錯(cuò)誤。答案:C3.解析:要使綿羊的乳腺細(xì)胞分泌抗胰蛋白酶,首先要將抗胰蛋白酶基因?qū)刖d羊細(xì)胞中,并與綿羊基因進(jìn)行重組,然后轉(zhuǎn)錄出mRNA,在核糖體上翻譯出抗胰蛋白酶,由于此酶是分泌蛋白,所以要經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體進(jìn)行加工,再排出細(xì)胞外,進(jìn)行此過(guò)程的細(xì)胞不發(fā)生細(xì)胞分裂,故與分裂間期細(xì)胞產(chǎn)生了兩組中心粒并無(wú)關(guān)聯(lián)。答案:B4.解析:基因工程是通過(guò)對(duì)基因的操作,將符合人們需要的目的基因?qū)脒m宜的生物體,使其高效表達(dá),從中提取所需的基因控制合成的蛋白質(zhì),或表現(xiàn)某種性狀,蛋白質(zhì)產(chǎn)品仍然為天然存在的蛋白質(zhì),而蛋白質(zhì)工程卻是對(duì)控制蛋白質(zhì)合成的基因進(jìn)行改造,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)其編碼的蛋白質(zhì)的改變,所得到的已不是天然的蛋白質(zhì)。題目中的操作中涉及的基因顯然不再是原來(lái)的基因,其合成的干擾素也不是天然干擾素,而是經(jīng)過(guò)改造的,是人類所需優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì),因而整個(gè)過(guò)程利用的生物技術(shù)應(yīng)為蛋白質(zhì)工程。答案:B5.解析:短期內(nèi)要得到大量的基因可利用PCR技術(shù)擴(kuò)增;構(gòu)建基因表達(dá)載體需要切割目的基因和運(yùn)載體,還需要將目的基因和運(yùn)載體連接起來(lái),培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用顯微注射法,目的基因?qū)胫参锍S棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ;檢測(cè)是否翻譯成蛋白質(zhì)應(yīng)用抗原抗體雜交法。答案:(1)PCR技術(shù)(2)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶(3)顯微注射法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化(4)抗原抗體6.解析:限制酶可水解DNA分子中特定

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