子宮頸鱗癌中E-cadherincatenin的表達(dá)及意義.doc

子宮頸鱗癌中E-cadherin，catenin的表達(dá)及意義【關(guān)鍵詞】子宮頸鱗 【摘要】 目的 探討上皮鈣依賴粘附素（E-cadherin，E-cad），連環(huán)素（Catenin，cat）、在子宮頸鱗癌中的表達(dá)及意義。方法 應(yīng)用免疫組化S-P法觀察70例子宮頸鱗癌組織中E-cad，-cat，-cat，-cat的表達(dá)并結(jié)合臨床隨訪資料進(jìn)行分析。結(jié)果 E-cad，-cat，-cat，-cat陽(yáng)性病例分別為42例（60%），35例（50%），35例（50%），31例（44.3%）;其中E-cad與-cat、-cat表達(dá)呈正相關(guān)性（P0.05）;E-cad、-cat的表達(dá)缺失與子宮頸鱗癌的去分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及術(shù)后生存期短有顯著相關(guān)性（P0.05）。結(jié)論E-cad、-cat蛋白的表達(dá)可作為判斷子宮頸鱗癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后的指標(biāo)之一。關(guān)鍵詞 子宮頸腫瘤 上皮鈣依賴粘附素 連環(huán)素 免疫組織化學(xué)Expression of E-cadherin and catenin andits significance in cervical squamous carcinomasZhao Yang，Cui Yongxing，Luo MinghuaDepartment of Pathology，Shenzhen Hospital of Peking University，Shenzhen518036.【Abstract】 Objective To investigate the expression of E-cad，-cat，-cat，-cat and its clinicopathology in cervical squamous carcinomas.Methods E-cad，-cat，-cat and-cat expression were examined immunohistochemically in70cases of cervical squamous carcinomas and the clinical data were analyzed.Result The expression rates of E-cad，-cat，-cat and-cat were60%，50%，50%and44.3%respectively.E-cad expression was correlated positivelywith-cat and-cat.The loss expression of E-cad and-catwas related to the degree of tumor diffe rentation，survive time and lymph-node metastasis of tumor（P0.05）.ConclusionExpression of E-cad and-cat may serve as a parameter for evaluating metastasisand prognosis in cervical squamous carcinomas.Key words cervix neoplasms E-cadherin catenin immunohistochemistryE-cadherin是鈣依賴上皮細(xì)胞間跨膜糖蛋白，是介導(dǎo)同質(zhì)型粘附的粘附分子，同質(zhì)型粘附是指相同細(xì)胞間的粘附，如瘤細(xì)胞與瘤細(xì)胞之間的粘附，同質(zhì)型粘附的增強(qiáng)使瘤細(xì)胞難以離開原發(fā)瘤侵入周圍組織、血管，E-cad通過與連接蛋白cats（-cat，-cat，-cat）結(jié)合形成細(xì)胞骨架，發(fā)揮同質(zhì)型粘附功能，在腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移中扮演非常重要的作用，而cats又與細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)有關(guān)。子宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤，其中鱗狀細(xì)胞癌占90%95%，而子宮頸鱗癌中E-cad，cats的表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系，目前國(guó)內(nèi)報(bào)道較少。筆者應(yīng)用免疫組化S-P法觀察E-cad，-cat，-cat，-cat在子宮頸鱗癌中的表達(dá)并探討其臨床意義。1 材料與方法1.1 材料 選自北京大學(xué)深圳醫(yī)院19982000年手術(shù)切除的子宮頸鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本70例，患者平均年齡53.2歲，術(shù)前均未做過放療或化療。研究標(biāo)本均為10%中性福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋。按照WHO子宮頸鱗癌組織學(xué)分類標(biāo)準(zhǔn)將其分為:高分化鱗癌19例，中分化鱗癌38例，低分化鱗癌13例。按照1994年國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟制訂子宮頸癌臨床分期標(biāo)準(zhǔn)將其分為:0期16例，期54例。鼠抗人E-cadherin，-catenin，-catenin，-catenin。單克隆抗體及免疫組化S-P試劑盒均為福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司產(chǎn)品。1.2 方法 切片脫蠟、水化后用0.01ml/L檸檬酸緩沖液（pH6.0）高壓修復(fù)抗原，常規(guī)S-P法顯色，蘇木精復(fù)染，以各抗體的陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照，以PBS緩沖液代替一抗作陰性對(duì)照。1.3 結(jié)果判斷 以各種抗體細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性信號(hào)，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的百分比分為:（1）陰性:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)10%;（2）陽(yáng)性（+）:陽(yáng)性細(xì)胞10%。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 不同表達(dá)情況的比較采用X 2 檢驗(yàn)，單因素分析用Kaplan-Meier法描繪曲線進(jìn)行生存率估計(jì)，曲線比較用log-rank檢驗(yàn)，均用SPSS10.0進(jìn)行分析。2 結(jié)果2.1 4種抗體表達(dá)的陽(yáng)性率及定位 70例宮頸癌E-cad，-cat，-cat，-cat陽(yáng)性表達(dá)率分別為60%（42/70），50%（35/70），50%（35/70），44.3%（31/70）。E-cad，-cat，-cat，-cat棕黃色陽(yáng)性顆粒定位于細(xì)胞膜，呈網(wǎng)格狀。2.2 E-cad，cats蛋白表達(dá)的關(guān)系 對(duì)5種蛋白表達(dá)進(jìn)行相互關(guān)聯(lián)分析，發(fā)現(xiàn)E-cad和-catenin蛋白表達(dá)有正相關(guān)性（r=0.2510，P0.05）;-catenin和E-cad蛋白表達(dá)有正相關(guān)性（r=0.2430，P0.05）;其余蛋白表達(dá)差異未見相關(guān)性。2.3 E-cad，cat與子宮頸鱗癌臨床病理特征的關(guān)系 如表1所示，E-cad、-cat蛋白表達(dá)與鱗癌分化程度有關(guān)，鱗癌分化程度越高，E-cad、-cat陽(yáng)性表達(dá)率越高（P0.05），E-cad、-cat缺乏表達(dá)易出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移（P 0.05）。表1 E-cadherin，cats蛋白表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系略2.4 生存情況及預(yù)后因素的分析 70例宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者隨訪852個(gè)月，死亡22例，Kaplan-Meier法求得病例總體中位隨訪期生存率為70%。單因素分析結(jié)果腫瘤分化程度，腫瘤臨床分期，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否，E-cad、-cat蛋白表達(dá)異常與生存期長(zhǎng)短有關(guān)。高、中、低分化鱗狀細(xì)胞癌平均生存時(shí)間分別為45個(gè)月、30個(gè)月、15個(gè)月（P0.05），臨床分期0期的3年生存率為71%，期3年生存率為51.2%（P0.05），淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性和陽(yáng)性的3年生存率分別為87.2%和42.1%（P0.05），E-cad陽(yáng)性表達(dá)3年生存率為91%，陰性表達(dá)3年生存率為52%（P0.05），-cat陽(yáng)性表達(dá)3年生存率為86%，陰性表達(dá)3年生存率為63%（P0.05）。3 討論E-cad是鈣依賴細(xì)胞之間粘附跨膜糖蛋白，為上皮細(xì)胞表達(dá)的粘附分子，介導(dǎo)同質(zhì)性粘附，即相同細(xì)胞間的粘附，它與連接蛋白-cat，-cat，-cat結(jié)合后發(fā)揮功能，有報(bào)告E-cad的表達(dá)與腫瘤分化程度、浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān) 13 ，但也有無(wú)關(guān)報(bào)道 4 。本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，分化差的及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸鱗癌，E-cad表達(dá)陽(yáng)性率下降。估計(jì)E-cad表達(dá)下降時(shí)瘤細(xì)胞之間粘附能力下降，瘤細(xì)胞易于脫離瘤母體而出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。連接蛋白（、）與E-cad結(jié)合形成cad/cat復(fù)合體，發(fā)揮同質(zhì)性粘附功能 5，現(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)-cat同時(shí)也是wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的下游元件，-cat的異常表達(dá)，可啟動(dòng)c-myc，CD44v6，cyclinD1等基因轉(zhuǎn)錄，使細(xì)胞過度增殖 6 ，本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，分化差及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的子宮頸鱗癌，-cat表達(dá)陽(yáng)性率下降，證明在子宮頸鱗癌中-cat與E-cad結(jié)合，發(fā)揮同質(zhì)型粘附功能，抑制腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移，而未體現(xiàn)wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路下游元件促細(xì)胞過度增殖的作用。本組 研究未發(fā)現(xiàn)-cad，-cat與宮頸鱗癌分化，轉(zhuǎn)移有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，腫瘤分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、E-cad、-cat的表達(dá)是影響宮頸癌術(shù)后生存期長(zhǎng)短的主要指標(biāo)。當(dāng)E-cad、-cat表達(dá)缺失時(shí)預(yù)示著術(shù)后生存率下降，可考慮進(jìn)行輔助性放療和化療，以進(jìn)一步提高生存率。而-cat、-cat表達(dá)與腫瘤分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期的關(guān)系，可能涉及到細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)，多個(gè)基因協(xié)同作用，可于今后在相關(guān)方面做更多研究。參考文獻(xiàn)1 Tamura S，Shiozai H，Miyata M，et al.Decreased E-cadherin expression is associated with hematogenous recurrence and poor prognosis in patients with squamous cell carcinomas of the esophagus.Br J Surg，1996，83（11）:1608-1614.2 曹志新，楊傳永，吳在德.E-鈣粘附素（E-CD）和CD44v6在胃癌中的表達(dá)與侵潤(rùn)轉(zhuǎn)移的關(guān)系.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2000，17（2）:191.3 Shimada Y，Imamural M，Watanabe G，et al.Prognostic factors of oesophageal squamous cell carcinoma from the perspective of molecular biology.Br J Cancer，1999，80（8）:1281-1288.4 Shiozaki H，Doki Y，Kawanishi K，et al.Clinical application of malignancy potential grading as a prognostic factor of human 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