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文檔簡介
課時跟蹤檢測(一)dna重組技術(shù)的基本工具一、選擇題1實施基因工程的最終目的是()a提取生物體的dna分子b對dna分子進行人工剪切c在生物體外對dna分子進行改造d創(chuàng)造符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品2有關(guān)dna重組技術(shù)中的工具“分子縫合針”“分子手術(shù)刀”“分子運輸車”的組合正確的是()dna連接酶dna聚合酶限制酶rna聚合酶運載體abcd3下圖為dna分子的某一片段,其中分別表示某種酶的作用部位,則相應(yīng)的酶依次是()adna 連接酶、限制酶、解旋酶b. 限制酶、解旋酶、dna連接酶c解旋酶、限制酶、dna連接酶d限制酶、dna連接酶、解旋酶4下列有關(guān)基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶的描述,錯誤的是()一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列限制性核酸內(nèi)切酶的活性受溫度影響限制性核酸內(nèi)切酶能識別和切割rna限制性核酸內(nèi)切酶可從原核生物中提取限制性核酸內(nèi)切酶的操作對象是原核細胞a b c d5下列關(guān)于dna連接酶作用的敘述,正確的是()a將單個核苷酸加到某dna片段末端,形成磷酸二酯鍵b將斷開的兩個dna片段的骨架連接起來,重新形成磷酸二酯鍵c連接兩條dna鏈上堿基之間的氫鍵d只能將雙鏈dna片段互補的黏性末端之間連接起來,而不能將雙鏈dna片段平末端之間進行連接6下列四條dna片段,可能是由同一種限制酶切割而成的是()a b c d7據(jù)圖判斷,有關(guān)工具酶功能的敘述錯誤的是()a限制性核酸內(nèi)切酶可以切斷a處bdna聚合酶可以連接a處c解旋酶可以使b處解開ddna連接酶可以連接c處8下面是四種不同質(zhì)粒的示意圖,其中ori為復(fù)制必需的序列,amp為氨芐青霉素抗性基因,tet為四環(huán)素抗性基因,箭頭表示一種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點。若要得到一個能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長的含重組dna的細胞,應(yīng)選用的質(zhì)粒是()二、非選擇題9(全國卷改編)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識,回答下列問題:(1)限制性內(nèi)切酶切割dna分子后產(chǎn)生的片段,其末端類型有_和_。(2)質(zhì)粒運載體用ecor切割后產(chǎn)生的片段如下:aattcggcttaa為使運載體與目的基因相連,含有目的基因的dna除可用ecor切割外,還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點是_。(3)按其來源不同,基因工程中所使用的dna連接酶有兩類,即_dna連接酶和_dna連接酶。(4)基因工程中除質(zhì)粒外,_和_也可作為運載體。(5)請畫出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過程圖。10下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題:限制酶bamhhindecorsma識別序列及切割位點atcccctagcttttcgattccttaccggggcc(1)一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)sma切割前后,分別含有_個游離的磷酸基團。(2)若對圖中質(zhì)粒進行改造,插入的sma酶切位點越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越_。(3)用圖中的質(zhì)粒和外源dna構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用sma切割,原因是_。(4)與只使用ecor相比較,使用bamh和hind兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源dna的優(yōu)點在于可以防止_。(5)為了獲取重組質(zhì)粒,將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合,并加入_酶。(6)現(xiàn)使用bamh和hind兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源dna,并經(jīng)拼接獲得的重組質(zhì)粒進行再次酶切,假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開,請根據(jù)圖1、2中標示的酶切位點及表所列的識別序列,對以下酶切結(jié)果作出判斷。采用bamh和hind酶切,得到_種dna片段。采用ecor和hind酶切,得到_種dna片段。答案1選da、b、c三項均為基因工程操作的具體內(nèi)容,但不是基因工程的目的。實施基因工程的最終目的是通過基因操作定向改造生物的遺傳物質(zhì),創(chuàng)造符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。2選c基因工程中,“手術(shù)刀”是限制酶,“縫合針”是dna連接酶,“運輸車”是指將目的基因?qū)胧荏w細胞的運載體,常用的“運輸車”是質(zhì)粒。3選c解旋酶可催化堿基之間氫鍵()的斷裂,限制酶可使兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵()斷開,而dna連接酶則催化磷酸二酯鍵()的形成。4選c限制性核酸內(nèi)切酶主要存在于微生物中,酶的活性受溫度的影響,限制性核酸內(nèi)切酶識別和切割的是dna分子,而不是原核細胞。5選bdna連接酶和dna聚合酶都是催化兩個脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵。dna連接酶是在兩個dna片段之間形成磷酸二酯鍵,將兩個dna片段連接成重組dna分子。dna聚合酶是將單個核苷酸加到已存在的核酸片段上形成磷酸二酯鍵,合成新的dna分子。6選d只有和的黏性末端的堿基都是互補的,它們可能是由同一種限制酶切割而成的。7選da處指的是兩個相鄰脫氧核苷酸之間的脫氧核糖與磷酸之間的磷酸二酯鍵,而c處指的是同一個脫氧核苷酸內(nèi)的脫氧核糖和磷酸之間的化學(xué)鍵,dna連接酶不能連接此化學(xué)鍵。8選ca項破壞了復(fù)制必需的序列。b項氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因都完好,在四環(huán)素培養(yǎng)基上和氨芐青霉素培養(yǎng)基上都能生長。c項氨芐青霉素抗性基因被破壞,四環(huán)素抗性基因完好,能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長。d項氨芐青霉素抗基因完好,四環(huán)素抗性基因被破壞。9解析:當限制酶在它識別序列的中心軸線兩側(cè)將dna的兩條鏈分別切開時,產(chǎn)生的是黏性末端,而當限制酶在它識別序列的中心軸線處切開時,產(chǎn)生的則是平末端。為使運載體與目的基因相連,用另一種限制酶切割后形成的黏性末端必須與ecor切割形成的黏性末端相同。根據(jù)酶的來源不同,可以將dna連接酶分為兩類:一類是從大腸桿菌中分離得到的,稱為大腸桿菌dna連接酶;另一類是從t4噬菌體中分離出來的,稱為t4dna連接酶?;蚬こ讨谐|(zhì)粒外,還有噬菌體、動植物病毒等也可作為運載體。答案(1)黏性末端平末端(2)切割產(chǎn)生的dna片段末端與ecor切割產(chǎn)生的相同(3)大腸桿菌t4(4)噬菌體動植物病毒(5)10解析:(1)該質(zhì)粒為環(huán)狀dna,經(jīng)sma切割前,不含有游離的磷酸基團,經(jīng)sma切割后形成平末端,含有2個游離的磷酸基團。(2)sma識別的是cccggg序列,在c與g之間切割,sma酶切位點越多,也就是cg堿基對越多,由于c與g之間的氫鍵(3個)比a與t之間的氫鍵(2個)數(shù)量多,故其含量越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高。(3)據(jù)圖1可知,sma切割位點在抗生素抗性基因(標記基因)中,據(jù)圖2可知,sma切割位點在目的基因中,因此使用sma切割會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源dna中的目的基因。(4)用同一種限制酶處理質(zhì)粒和外源dna,再用dna連接酶連接時,往往會有三種連接形式:目的基因質(zhì)粒、目的基因目的基因(環(huán)化)、質(zhì)粒質(zhì)粒(環(huán)化),后兩種是我們不需要的,因而要進行篩選。用兩種限制酶處理質(zhì)粒和外源dna,因形成的末端不同可避免上述情況的發(fā)生。(5)連接質(zhì)粒與目的基因的工具酶是dna連接酶。(6)由bamh 和hind 兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源dna,并經(jīng)拼接獲得的重組質(zhì)粒,這兩種酶的識別序列仍然完整存在,如再用bamh 和hind 兩種限制酶進行酶切時,可再度被切開,形成2種dna片段;而ecor 的識別序列在原質(zhì)粒中存在并沒有破
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