免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀以及臨床應(yīng)用-達(dá)盟生物.ppt

免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀以及臨床應(yīng)用達(dá)盟生物 主要內(nèi)容 病理概述病理科主要研究方法免疫組化臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀 病理概述 診斷病理學(xué) diagnosticpathology 即外科病理學(xué) 人體病理學(xué) 是病理學(xué)一分支 指臨床上由于診斷和治療的需要 對(duì)取自病人活體內(nèi)的病變組織 細(xì)胞 進(jìn)行病理診斷的一門醫(yī)療實(shí)踐科學(xué) 研究對(duì)象 患者病變組織 細(xì)胞研究目的 確診和治療疾病 提供判定療效和預(yù)后信息研究方法 組織切片 細(xì)胞涂片應(yīng)用技術(shù) HE IHC ISH CISH FISH 發(fā)展歷史 150年歷史 國內(nèi)不到100年歷史 與傳統(tǒng)IVD的區(qū)別 研究對(duì)象不同血液 尿液等VS細(xì)胞和組織取材過程不同病理通常通過手術(shù)方式獲取樣本結(jié)果判斷方法不同病理不能通過機(jī)器直接得到標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果 主要內(nèi)容 病理概述病理科主要研究方法免疫組化臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀 H E 染色 蘇木精 伊紅染色法 hematoxylin eosinstaining 石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 蘇木精染液為堿性 使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 伊紅為酸性染料 使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 HE染色法是組織學(xué) 胚胎學(xué) 病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本 使用最廣泛的技術(shù)方法 免疫組化免疫組織化學(xué)技術(shù) immunohistochemistry IHC 基本原理 抗原抗體反應(yīng) 即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理 通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑 熒光素 酶 金屬離子 同位素 顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原 多肽和蛋白質(zhì) 對(duì)其進(jìn)行定位 定性及定量的研究 主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類 前者包括石蠟切片 病理切片和組織芯片 和冰凍切片 后者包括組織印片 細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片 在常規(guī)腫瘤病理診斷中 有時(shí)單靠H E 染色難以作出明確的形態(tài)學(xué)診斷 需要IHC進(jìn)行確診 免疫組化具有特異性強(qiáng) 敏感性高 定位準(zhǔn)確 形態(tài)與功能相結(jié)合等特點(diǎn) 原位雜交 insituhybridization ISH 是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交 從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精確定量定位的過程 原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行 按標(biāo)記類型可分為DNA DNA DNA RNA RNA RNA 熒光原位雜交技術(shù) fluorescenceinsituhybridization FISH 將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報(bào)告分子如生物素 地高辛 可利用該報(bào)告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的免疫化學(xué)反應(yīng) 經(jīng)熒光檢測(cè)體系在鏡下對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行定性 定量或相對(duì)定位分析 特殊染色為了顯示與確定組織或細(xì)胞中的正常結(jié)構(gòu)或病理過程中出現(xiàn)的異常物質(zhì) 病變及病原體等 需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進(jìn)行染色 包括 膠原纖維染色 Masson等 網(wǎng)狀纖維染色 彈力纖維染色 肌肉組織染色 磷鎢酸蘇木素 脂肪染色 蘇丹III 糖原染色 PAS 粘液染色 PAS 等 主要內(nèi)容 病理概述病理科主要研究方法免疫組化臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀 免疫組化的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面 惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷 確定轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤的原發(fā)部位 對(duì)某類腫瘤進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型 軟組織腫瘤的治療一般需根據(jù)正確的組織學(xué)分類 因其種類多 組織形態(tài)相像 有時(shí)難以區(qū)分其組織來源 應(yīng)用多種標(biāo)志物進(jìn)行免疫組化研究對(duì)軟組織腫瘤的診斷是不可缺少的 發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶 有助于臨床治療方案的確定 包括手術(shù)范圍的確定 為臨床提供治療方案的選擇 小B細(xì)胞淋巴瘤免疫組化特點(diǎn) 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌免疫組化分子分型與治療預(yù)后關(guān)系 cerBb 2 CD20 ER CK 主要內(nèi)容 病理概述病理科主要研究方法免疫組化臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀 1天 4小時(shí) 1天 1塊組織從取材到最終出報(bào)告至少需3天時(shí)間 目前病理診斷的瓶頸 市場(chǎng)需求的病理診斷 手工操作 自動(dòng)化操作 時(shí)間和試劑不能精確控制 影響結(jié)果 產(chǎn)出率低 醫(yī)院和病理醫(yī)生收益低 操作復(fù)雜 技術(shù)含量高 對(duì)醫(yī)生要求高 完全手工操作耗時(shí)耗力 結(jié)果準(zhǔn)確 操作簡便 快速診斷 節(jié)約成本 免疫組化主要玩家 國際 羅氏 萊卡 DAKO占據(jù)國內(nèi)絕大部分免疫組化自動(dòng)化市場(chǎng)主要問題 價(jià)格高 基層醫(yī)院無法承受 免疫組化主要玩家 國內(nèi) 試劑有一定積累 儀器剛剛起步 質(zhì)量和穩(wěn)定性不行邁新 試劑研發(fā)歷史最長 有試劑優(yōu)勢(shì) 儀器近年推出 基因 有試劑 有一款半自動(dòng)免疫組化中杉 有試劑無機(jī)器深達(dá) 剛推出機(jī)器 效果未知 達(dá)盟全自動(dòng)免疫組化 核心專利技術(shù) 使清洗更加徹底 染色效果更有保障 核心專利技術(shù) 提高試劑使用效率 最小試劑使用量80ul更多人性化設(shè)計(jì)和本地快捷服務(wù) 醫(yī)生使用更加順心 試劑情況 輔助試劑 包括抗原修復(fù)液 脫蠟液 清洗