HIV快診檢測點作業(yè)指導書.doc

涼山彝族自治州HIV快診檢測點實驗室作業(yè)指導書涼山州人民政府防治艾滋病工作委員會辦公室涼山州疾病預防控制中心中國-默沙東艾滋病合作項目涼山辦公室二0一一年七月涼山州HIV快速檢測點實驗室作業(yè)指導書目 錄前言（1）涼山州艾滋病快速檢測樣本的接收、登記與運送（2）涼山州艾滋病快診檢測點檢測步驟及要求（3）涼山州HIV抗體快速檢測流程圖（6）涼山州HIV抗體快速檢測質(zhì)量控制（7）涼山州HIV抗體快速檢測實驗室消毒與污物處理（9）涼山州HIV抗體快速檢測實驗室生物安全及職業(yè)暴露 （10）涼山州HIV抗體快速檢測實驗記錄及結(jié)果上報 （13）涼山州HIV快診檢測實驗室管理制度 （14）涼山州HIV抗體快速檢測保密程序 （15）涼山州艾滋病檢測點資格審批申請表（16）涼山州醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)HIV常規(guī)檢測登記表 （19）涼山州HIV快速實驗原始記錄表 （20）涼山州HIV抗體篩查報告單 （21）涼山州艾滋病檢測點HIV抗體復檢檢測單 （22）涼山州艾滋病檢測各類試劑入庫、領取使用登記表 （23）涼山州艾滋病檢測實驗室儀器使用溫度記錄（24）涼山州艾滋病檢測實驗室廢棄物及生物垃圾處理記錄表（25）四川省艾滋病檢測點審評驗收情況一覽表（26）涼山州HIV抗體檢測月報表 （27）涼山州HIV抗體檢測季度報表 （28）前 言為認真貫徹落實溫家寶總理考察涼山州艾滋病防治工作的重要指示精神，實現(xiàn)國家艾滋病防治工作目標，加大艾滋病檢測力度，加強對基層工作人員的技術指導，進一步規(guī)范HIV快速檢測工作，提升防治工作的質(zhì)量，我辦委托州疾控中心，在國家艾滋病防治技術指南和規(guī)范的基礎上，結(jié)合我州實際情況，制定了涼山彝族自治州HIV快速檢測點實驗室作業(yè)指導書（試行）（以下簡稱指導書）。指導書內(nèi)容包括“樣本的接收、登記和處理”、“HIV抗體快速檢測流程圖”“HIV抗體快速檢測質(zhì)量控制”、“實驗室消毒與污物處理”、“實驗室生物安全及職業(yè)暴露”、“檢測實驗記錄及結(jié)果上報”“保密程序”、“記錄表格”等。為提高指導書科學性、權(quán)威性和可操作性，特邀請國家和省級專家共同參與了指導書的制定工作。在此，我辦對給予指導和支持的所有單位和機構(gòu)，以及為指導書做出貢獻的相關領導和專家表示衷心的感謝。由于時間和水平等諸多因素和限制，本書難免存在疏漏、不當之處，請各使用單位和檢測人員提出修改意見，我為將對指導書進行修訂和完善。 涼山州人民政府防治艾滋病工作委員會辦公室2011年8月涼山州艾滋病快速檢測樣本的接收、登記與運送一、標本的接收登記：對受檢人群的所有信息（檢測日期、編號、姓名、性別、年齡、民族、婚姻、文化、身份證號碼、戶籍所在地、樣本類型）詳細登記在艾滋病咨詢檢測登記表和快診原始記錄表中。二、標本的采集：采集樣品應按臨床采血技術規(guī)范采集指尖血或靜脈血，采集標本時應注意生物安全，直接接觸HIV感染者或艾滋病病人血液和體液時操作應戴手套，避免職業(yè)暴露。三、標本運送：陽性標本在送往縣疾控進行復檢時，嚴格按照“生物安全運輸管理條例”包裝。事先檢查樣品管有無破損和溢漏，如發(fā)現(xiàn)溢漏應立即將樣品移出，對樣品管和盛器消毒。同時與“艾滋病檢測點HIV抗體復檢檢驗單”一并送往縣疾控，雙方簽字驗收。對所采集的血樣不能及時送往縣疾控中心，可短期內(nèi)將樣品存放28冰箱。涼山州艾滋病快診檢測點檢測步驟及要求一、工作步驟【步驟一】對受檢人群的所有信息（檢測日期、編號、姓名、性別、年齡、民族、婚姻、文化、身份證號、戶籍所在地、樣本類型）詳細登記在艾滋病咨詢檢測登記表和快診原始記錄表中。見附表1?！静襟E二】按臨床采血技術規(guī)范采集指尖血或靜脈血，無菌條件下采集指尖血或（靜脈血35ml）室溫靜置，讓血漿自然分離。（做HIV快診等實驗用）?！静襟E三】按照試劑盒說明書要求，從包裝盒中取出測試卡，平衡至室溫并編號，準確加入血漿（或全血、稀釋液）樣品于測試卡的架處。30分鐘內(nèi)觀察結(jié)果，結(jié)果判定見圖。對照區(qū)（C）線SCTCTCTCTCT檢測區(qū)（T）線加樣孔（S）線SSSS陽性陽性陰性無效無效快診試劑保存條件：1、 可以保存230,有稀釋液和快速試劑,建議保存在28冰箱.2、 試劑出入庫一定要有記錄,包括試劑廠家名稱、規(guī)格、試劑效期、批號、接收人、使用人簽名、使用日期等。見附表2。3、 每天記錄存放試劑冰箱溫度、實驗溫度、環(huán)境溫濕度。【步驟四】加入樣品后，一般在1530分鐘內(nèi)觀察結(jié)果（根據(jù)各試劑廠家的要求）不得超過30分鐘，否則無效。在質(zhì)控區(qū)和反應區(qū)均出現(xiàn)紅線，結(jié)果評定為陽性。只在質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)紅線，反應區(qū)不出現(xiàn)紅線，結(jié)果陰性。不出現(xiàn)質(zhì)控帶，實驗無效，（實驗溫度保持在2025）。【步驟五】陽性結(jié)果做好記錄，并認真填寫二表二卡，同時將血漿樣本 一同送往縣疾控中心做復檢實驗。初篩實驗按全國艾滋病檢測規(guī)范技術2009年版?！静襟E六】待確證結(jié)果返回后，一并裝入個人隨訪檔案袋中。二、篩查點實驗室生物安全要求：所有使用過的采血針頭、真空采血器、測試卡、一次性手套、一次性工作服必須經(jīng)過嚴格消毒或高壓消毒，焚燒處理。禁止在實驗室內(nèi)進食、喝水、吸煙、化妝等違反生物安全規(guī)定的行為。三、艾滋病檢測實驗室常用的消毒方法：（一）物理消毒方法：1、高壓蒸汽消毒，121，消毒1520分鐘。2、干烤消毒，140，消毒23小時。3、定點集中式焚燒，要有專人看管。（二）化學消毒方法：1、含氯消毒劑，有效含氯量20005000mg/L。2、使用75%乙醇消毒儀器表面2030分鐘。3、使用2%的戊二醛消毒儀器表面2030分鐘。四、艾滋病篩查點實驗室房屋要求：（一）房屋面積：要求在1620平方米獨立的實驗用房，決不允許和疫苗預防注射、配制輸液液體，注射液體等無關聯(lián)的工作混合使用。（二）房間內(nèi)擺放一張清潔的桌子，專門用于登記記錄，另外一張桌子用于采血和做快診實驗專用。擺放一個文件柜，存放文件檔案。一臺消毒高壓鍋（有條件的單位），一個帶蓋的消毒桶，內(nèi)裝含氯量在20005000mg/L的消毒液，專門用于裝被污染過的或使用過的實驗耗材。另外在放置一個垃圾桶，放置無污染性垃圾。涼山州HIV抗體快速檢測流程圖樣品快診實驗陽性反應陰性反應將樣本送篩查實驗室復檢實驗均陽性反應均陰性反應一陰一陽送確證實驗室做確證實驗報告陰性涼山州HIV抗體快速檢測質(zhì)量控制一、目的監(jiān)控每次檢測的重復性和穩(wěn)定性以及檢驗試劑盒批間差異、批間操作的重復性，驗證檢測結(jié)果。二、適用范圍適用于HIV-1/2抗體定性快速檢測。三、作業(yè)程序（一）檢測前質(zhì)控：1、樣品要求唯一編號，實驗前仔細核對，檢查。2、檢測人員每日檢查室內(nèi)溫度，實驗環(huán)境溫濕度應在試劑盒說明書的范圍內(nèi)，試劑和樣品應按要求存放，并做好記錄。3、檢查是否有足夠的試劑庫存量，確證試劑是在有效期范圍內(nèi)，禁止使用過期試劑。4、每批實驗如果應用不同批號的試劑，應做好記錄。（二）檢測過程質(zhì)控：1、準備好試驗區(qū)域，擺放好必要器具。2、詳細記錄樣品編號、姓名、地址、試劑名稱及批號，操作者、復檢者簽名。3、核對樣品編號、標記、檢測、防止錯號。4、實驗前仔細閱讀試劑盒說明書，嚴格按照說明書操作。5、需要在冰箱保存的試劑，先從冰箱內(nèi)取出，放置室溫，平衡后在使用。剩余的試劑條應立即放入自封袋中密封28保存，可以存放在室溫的試劑，要盡可能避免高溫。6、建議每一次最多做10份樣品，確保試劑條和編號與標本編號準確對應，防止錯號和交叉污染。7、結(jié)果判定時，質(zhì)控帶必須出現(xiàn)實驗條帶才能成立。如實驗完成后未出現(xiàn)質(zhì)控條帶，本次實驗結(jié)果無效，實驗需重做。8、外部質(zhì)控，由國家或省疾控中心提供，或試劑廠家購買。要求在更換不同試劑批號時，更換不同廠家時，更更換不同檢測人員時做外部質(zhì)控。（三）檢測后質(zhì)控：1、實驗結(jié)果進行判讀時，應保證判讀地點光線充足。對于難以判讀的條帶，最好有2人判讀。2、復核樣品編號并填寫實驗結(jié)果。3、向?qū)嶒炇邑撠熑藞蟾鏅z測結(jié)果。4、檢查試劑庫存量，根據(jù)實際需要，提前向上級實驗室申請補充。5、在收到或檢測時，發(fā)現(xiàn)試劑出現(xiàn)外包裝盒或內(nèi)容物已損傷，標簽出現(xiàn)錯誤、缺失或字跡模糊（特別是產(chǎn)品廠家名稱、批號、生產(chǎn)日期或失效期），應詳細記錄。涼山州HIV抗體快速檢測實驗室消毒與污物處理按照“生物安全管理條例”對污染物品、進行有效消毒處理。一、血液標本應置于運輸箱內(nèi)，按照三層包裝后運送，切勿污染盛器外部。如果盛器被污染，要用消毒液消毒。送檢單位外面套清潔的塑料袋封口一并運送。二、各種化學消毒劑均應貼有標簽，放置于合適和位置，試驗臺上不放置不必要的物品。實驗室環(huán)境一旦污染，限在污染區(qū)外周圍倒入消毒液，逐漸向中心消毒處理。并做好記錄。三、實驗室所有生物垃圾，包括用過的一次性手套和工作衣，置于黃色污物袋內(nèi)，經(jīng)焚燒或有效消毒處理后定點深埋。污染的非一次性工作衣應先消毒后洗滌。四、所有尖銳品、血樣管和血液標本放置于不宜刺破的容器內(nèi)（銳器盒，帶蓋塑料桶），限制在實驗室內(nèi)消毒后在指定地點焚燒處理。五、常用的消毒劑和消毒方法與病毒性肝炎消毒法相同。（一）銳器盒或塑料消毒桶：5000mg/L次氯酸鈉。（二）生物安全柜、工作臺面和儀器表面：使用75%乙醇。（三）溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。涼山州HIV抗體快速檢測實驗室生物安全及職業(yè)暴露一、建立安全制度（一）成立生物安全領導小組，隨時自查和督導生物安全隱患。（二）實驗室的設備、建筑和設施的安全必應通過專家的評審。（三）建立安全標準操作程序，該程序應適用于現(xiàn)有的實驗條件，并與實驗室其他規(guī)章制度一致。（四）無論是否發(fā)生意外事故，每年都要對安全標準操作程序及其實施情況進行檢查。（五）制定意外事故處理預案，建立意外事故的登記和報告制度。出現(xiàn)職業(yè)暴露意外事故應及時處理，同時報告主管領導。二、人員管理和培訓（一）人員管理1、新調(diào)入人員、外來合作、進修學習的人員在進入實驗室前，須經(jīng)過實驗室主任批準。非實驗室人員和非實驗室物品不得進入實驗室。2、實驗室工作人員每年采血檢測HIV、HBV、HCV、PT抗體檢測，建立個人健康檔案制度，血清樣本應長期保留。（二）培訓1、所有工作人員必須經(jīng)過HIV檢測技術和實驗室安全培訓，包括上崗培訓和復訓，并接受管理人員的監(jiān)督。實驗室的安全責任人要對工作和環(huán)境的安全負責，所有工作人員都有責任保護自己和他人的安全。2、必須告知新上崗人員實驗室工作的潛在危險，進行安全教育，直至有能力后方可單獨工作。三、安全保障措施（一）個人保健和防護1、高標準的個人保健對于減少感染的危險性很重要。皮膚受損、患病都會增加感染的危險。手部皮膚有開放性傷口及其它不適于工作的情況，應暫停工作。2、進實驗室前要摘除首飾，修剪長的帶刺的指甲，以免刺破手套。3、進入實驗室應穿隔離衣、戴手套。如手套破損，立即丟棄，洗手后換上新手套。4、離開實驗室前必須脫去隔離衣、手套并洗手。5、嚴禁在艾滋病檢測實驗室內(nèi)進食、飲水、吸煙和化妝。（二）帶入和帶出實驗室的物品1、對所有帶入實驗室的樣品都應進行檢查，裝有測試樣品的包裝箱（袋）應在安全柜或其他適當?shù)难b置內(nèi)打開。2、將HIV測試樣品轉(zhuǎn)送到上級實驗室復檢時，應按照生物安全三層包裝，防止對人員和環(huán)境的污染。運送樣品的人應明確接收地點為和接收人，在樣品接收單上雙方簽名，確認樣品無外溢，無不合格現(xiàn)象。3、污染或可能造成污染的材料在帶出實驗室前應進行嚴格消毒。（三）減少利器的使用1、實驗室最好不使用玻璃器皿，應作用塑料器皿。2、盡量使用安針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以降低直接接觸血液的刺傷的危險性。應將用過的針頭直接放入銳器盒內(nèi)，消毒處理。四、意外事故處理（一）緊急處理措施1、皮膚針刺傷或切割傷：立即用肥皂洗和大量流水沖洗，盡可能擠出損傷處的血液，用70%乙醇或其他消毒劑消毒傷口。2、皮膚污染：用水和肥皂沖洗污染部位，并用適當?shù)南緞┙荩?0%乙醇或其他皮膚消毒劑。3、粘膜污染：用大量流水或生理鹽水徹底沖洗污染部位。4、衣物污染：盡快脫掉污染的衣物，進行消毒處理。5、污染物潑濺：無論發(fā)生大、小范圍污染物潑濺事故時，應立即進行消毒處理。（二）事故登記1、記錄事故發(fā)生的時間、地址及詳細經(jīng)過。2、記錄暴露方式，受傷部位、傷口深淺、暴露程度。3、處理方法：經(jīng)專家評估暴露級別和是否采用暴露后藥物預防，如果是，應詳細記錄用藥情況。4、隨訪檢測日期：0、1、3、6、12，記錄每次檢測結(jié)果。（三）發(fā)生上述事件后，遵循三條原則，及時處理原則，報告原則，保密原則。涼山州HIV抗體快速檢測實驗記錄及結(jié)果上報一、目的由于快速檢測結(jié)果難以進行電子化記錄，檢測條無法作為原始記錄長期保存，因此現(xiàn)場檢測數(shù)據(jù)的記錄和管理就變得十分重要。真實和準確的原始記錄是審核檢測結(jié)果報告的唯一基礎性數(shù)據(jù)，記錄信息不全或錯誤，將導致感染者無法追蹤和管理。二、內(nèi)容快速檢測記錄本用于登記日常快速檢測結(jié)果，包括的基本內(nèi)容有：檢測日期、檢測序號、受檢者姓名、年齡、性別、民族、文化、婚姻、人群來源、戶籍所在地和單位住址，身份證號碼或新農(nóng)合號。三、要求（一）對于陽性樣本，除了要記錄詳細地址、身份證號碼或新農(nóng)合號外，還要求填寫二表二卡（傳染病報告卡、艾滋病性病附卡、個案隨訪表、艾滋病感染者/病人及家屬情況登記表），用指尖血檢測的的要重新采集靜脈血（35ml），分離血漿，按規(guī)范包裝好和送檢單一同送往當?shù)乜h疾控中心復檢。（二）檢測點每月將結(jié)果統(tǒng)計一報到縣疾控中心，縣疾控中心再把轄區(qū)內(nèi)各個檢測點數(shù)據(jù)收集匯總后，上報到?jīng)錾街菁部刂行陌滩〈_證實驗室，涼山州疾控中心艾滋病確證實驗室將全州的數(shù)據(jù)匯總后，上報省疾控中心。（詳見：涼山州醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)HIV常規(guī)檢測登記表及檢驗原始記錄）涼山州HIV快診檢測實驗室管理制度一、進入本實驗室的人員必須是經(jīng)過上崗培訓合格的人員。外來人員需經(jīng)領導同意后，方可進入。二、本實驗室為專用實驗室，不能和其他科室共用。實驗室分為清潔區(qū)和污染區(qū)，必須嚴格遵守生物安全管理條例。三、進入實驗室前要換上一次性鞋套，口罩、工作帽，穿上本實驗室專用的工作服，戴上一次性乳膠手套方可進行實驗操作。四、實驗結(jié)束后，要對工作臺面消毒，工作臺面應當用含氯消毒劑（20005000mg/L）或75%的乙醇進行消毒。五、離開實驗室之前應脫去工作服、手套，禁止將實驗室工作服穿出，按照標準程序徹底洗凈雙手。六、實驗室不能放置任何玻璃器皿。清潔區(qū)桌子只能放置檢測登記本和原始記錄表格，實驗用桌子用于采血和做快診檢測。七、遇見意外事故，應立即處理并分別以口頭和書面報告上級部門。八、每天實驗前記錄冰箱、孵箱溫度，登記在維護記錄本上。九、注意門窗、水電安全防護。十、保持實驗室清潔，每天清掃地面，桌面。所有廢棄物品須消毒后焚燒處理。十一、嚴格按照全國艾滋病檢測技術規(guī)范（2009版）進行操作，對所有檢測結(jié)果遵行保密制度。涼山州HIV抗體快速檢測保密程序一、HIV抗體檢測實驗室要有專人負責妥善保存各種試驗記錄、感染者檔案，不得擅自修改和銷毀；嚴格遵守保密制度，未經(jīng)省級衛(wèi)生行政部門許可，不得向無關人員或單位提供任何情況。二、HIV抗體快診檢測實驗室檢測的陽性結(jié)果不是最終結(jié)果，應及時作進一步復檢、確認?？煸\檢測實驗室不能出具HIV抗體陽性的結(jié)果報告，不能告知無關聯(lián)人員。三、HIV抗體確認實驗室確認的陽性結(jié)果，以注意保密形勢向送檢單位出具陽性報告，送檢單位接到陽性報告后，應報告當?shù)丶部睾托l(wèi)生行政部門，在對陽性者告知檢測結(jié)果時要先杉好法律、醫(yī)學、生活等方面的咨詢。四、經(jīng)確認的陽性標本，應存放在實驗室走低溫冰箱保存，冰箱要求上鎖（雙人雙鎖保管），不得擅自處理。標本保存時間根據(jù)衛(wèi)生行政部門要求。五、電腦保存的所有HIV資料應加密保存。涼山州艾滋病檢測點資格審批申請表申請單位： 地 址： 郵 編： 電 話： 聯(lián) 系 人： Email： 年 月 日填一、艾滋病檢測點人員名單及基本情況：姓名性別年齡技術職稱何時何時取得檢測點上崗證備注二、實驗室儀器、設備情況：儀器設備名稱廠家型號購買時間運轉(zhuǎn)狀況核實者注：1.儀器、設備表格不夠可另附頁2.運轉(zhuǎn)狀況可按運轉(zhuǎn)正常、需小修、需大修三檔填寫三、申請理由：單位（蓋章） 年 月 日四、縣（區(qū)、市）衛(wèi)生行政主管部門意見：單位（蓋章） 年 月 日五、市（州）級專家組驗收意見：組長（簽字）專家（簽字） 年 月 日六、衛(wèi)生行政（或主管）部門審評結(jié)果：單位（簽字） 年 月 日涼山州醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)HIV常規(guī)檢測登記表略涼山州HIV抗體篩查報告單HIV抗體篩查報告REPORT OF HIV ANTBODY SCEENING TESTING秘密 SECRET 編號 NO：送檢單位FROM送檢日期DATE送檢標本SPECIMEN送檢人群POPULATION姓名NAME性別SEX年齡AGE職業(yè)OCCUPATION國籍或民族NATIONALITY地址ADDRESS檢測方法METHOD檢測日期DATE檢測結(jié)果RESULTS快速檢測結(jié)論CONCLUSION檢測者OPERATOR簽發(fā)者HEAD報告日期DATE篩查單位或?qū)嶒炇遥ü拢㊣NSTITUTION OR LABORATORY備注 NOTE本報告僅對送檢樣品負責 縣 HIV抗體篩查快診實驗原始記錄 實驗批次：樣品來源 收樣日期 檢測日期 樣品名稱 樣品性狀 樣品數(shù)量 試劑名稱 試劑批號 試劑效期 室內(nèi)溫度 檢驗標準 全國艾滋病檢測技術規(guī)范 實驗流程：取出檢測卡放至室溫，取樣品 l于加樣處， 分鐘內(nèi)讀取結(jié)果。在試劑盒規(guī)定結(jié)果讀取時間內(nèi)檢測卡反應如下圖：1212TCCTTC對照區(qū)（C）線TCTC檢測區(qū)（T）線加樣孔（S）圖A （陽性） 圖B（陰性） 圖C（無效）實驗編號結(jié)果描述結(jié)果判斷實驗編號結(jié)果描述結(jié)果判斷檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符檢測卡反應與圖 相符備注: 檢測人： 復核人：涼山州艾滋病檢測點HIV抗