淺談腫瘤標志物.ppt

淺談腫瘤標志物 黃慧瑾2016年5月19日 腫瘤標志物 tumormarkers TM 腫瘤標志物是指在腫瘤發(fā)生和增殖的過程中 由腫瘤細胞合成 釋放或者是機體對腫瘤細胞反應而產(chǎn)生的一類物質 這些物質在血液 體液及組織中可檢測到 達到一定的水平時能提示某些腫瘤的存在 腫瘤標志物高與查到癌細胞是兩回事 也不一定是代表患有腫瘤 血清腫瘤標志物分類 一 為什么要查腫瘤標記物 我們知道 早期診斷是治愈腫瘤的關鍵 而有些腫瘤標記物的升高往往早于臨床癥狀的出現(xiàn) 因此腫瘤標記物有助于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤跡象 早診斷 早治療 從而提高療效 比如 我們國家70年代以后在上海等地 通過對大量人群的甲胎蛋白普查 曾檢出不少肝癌特別是小肝癌患者 使很多病人得到了及時手術切除的機會 二 腫瘤標記物還能用于以下方面出現(xiàn)腫瘤癥狀或可疑腫物后的鑒別診斷腫瘤生物特點和疾病階段的判斷腫瘤治療后的療效觀察和判斷預后提示腫瘤的復發(fā) 轉移 腫瘤指標升高是不是肯定就有腫瘤了 答案是不一定 腫瘤標志物不僅存在于惡性腫瘤中 也存在于良性腫瘤 胚胎組織 甚至正常組織中 腫瘤的診斷不能單獨依靠腫瘤標志物的檢查 需要由臨床檢查 影像檢查 內(nèi)鏡檢查或手術探查等綜合判斷 而病理診斷是腫瘤診斷的 金標準 腫瘤標記物篩查結果判讀 腫瘤標記物檢查陰性 患相關惡性腫瘤的概率相對較低 如有家族史 癌前病變或有癥狀 仍需定期復查 結合其他檢查 腫瘤標記物檢查陽性 檢測可能有假陽性或患良性疾病 優(yōu)先考慮復檢 復檢仍陽性者進一步檢查 指標輕度升高 不要輕下結論 持續(xù)觀察腫瘤標志物的動態(tài)變化 如進行性升高 患惡性腫瘤的概率比較高 中重度升高或多項指標持續(xù)升高 提示腫瘤發(fā)生的可能性很高 必須盡快做醫(yī)學影像學和細胞病理學等檢查 不同醫(yī)院檢驗科儀器 試劑各不相同 參考值不一定一樣 因此 不能隨意比較不同醫(yī)院測量值的高低 除了惡性腫瘤 引起腫瘤標記物升高的其他因素包括 良性疾病 如炎癥性疾病 肝臟良性疾病時 AFP CA19 9 CEA會升高 腎功能衰竭時 2 微球蛋白及CA15 3 CA19 9 CEA和PSA會升高 風濕病時CA19 9濃度可增高 生理變化 妊娠時AFP CA125 HCG會升高 不良習慣 吸煙 酗酒 檢查引起 屢次進行直腸指檢后 PSA值可升高 服用某些藥物 飼養(yǎng)寵物 此外 抽血過程中的污染 抽血引起的紅細胞破裂 標本保存不當 試劑差異及檢測欠規(guī)范等因素也會干擾檢查結果 腫瘤標志物升高了 可不可以明確是哪個部位的腫瘤 有時可以 但多數(shù)不能單憑借腫瘤標記物來明確 還需要結合其他檢查 一種腫瘤標記物往往與多種惡性腫瘤有關 以下是一些常見的腫瘤標記物及其所提示可能有腫瘤發(fā)生的臟器 CA19 9胰腺 胃腸道和肝膽CA15 3乳腺 肺 卵巢 肝CA242結直腸 胰腺 卵巢CA72 4胃 卵巢 胰腺 乳腺CA125卵巢 子宮 胰腺 肝 肺CA50胰腺 乳腺 肺 胃腸道和肝膽 常見腫瘤的標志物檢測 ADVIACentaurXP全自動化學發(fā)光分析系統(tǒng)檢測原理 經(jīng)典直接化學發(fā)光方法 吖啶酯 AE 為放光劑采用微磁顆粒分離兩種結合模式 競爭法夾心法 免疫測定 抗體抗原示蹤 發(fā)光劑 吖啶酯分離方法 微磁顆粒分離檢測裝置 抗原抗體特意專一結合是檢測的基礎 發(fā)光劑是檢測的技術核心 吖啶酯簡介 提升擴散速率最大程度避免結合位點的遮蔽提高分析靈敏度 堿性磷酸酶 哎啶酯 一秒鐘高強度的光釋放使報告結果更快 吖啶酯簡介 哎啶酯直接化學發(fā)光法的優(yōu)點 無需額外的信號放大或底物光的釋放快速對溫度和pH值的影響不敏感背景干擾最小 微磁顆粒分離技術 氧化鐵顆粒被吸引至磁場區(qū)與抗原或抗體發(fā)生共價結合 微磁顆粒 PMP 抗體 用于分離結合與未結合的反應物 磁場 未結合的AE 微磁顆粒分離技術 檢測原理的反應模式 夾心法競爭法標記抗原檢測方法標記抗體檢測方法抗體捕獲模式 21 可編輯 夾心法 步驟1 AE 標記抗體加入樣品中 與樣品抗原結合 哎啶酯 AE 抗體 樣品中的分析物特異性抗原 其它顆粒 PMP 抗體 抗原 抗體AE復合物 加入與特異性抗體結合的微磁顆粒PMP 孵育 結合抗原的PMP再與AE 標記抗體結合 夾心法 步驟2 將未結合的AE分離并去除 夾心法 步驟3 加入酸堿試劑啟動化學發(fā)光反應 計算濃度 夾心法 步驟4 采用標記抗原的競爭法 步驟1 AE 標記抗原與樣品抗原競爭結合與PMP共價結合的有限的抗體結合位點 孵育后將反應混合物置于磁場下 分離并除去未結合的AE 采用標記抗原的競爭法 步驟2 加入酸堿啟動化學發(fā)光反應 計算濃度 采用標記抗原的競爭法 步驟3 采用標記抗體的競爭法 步驟1 結合抗原的PMP與樣品抗原競爭AE 標記抗體上有限的抗原結合位點 孵育后將反應混合物置于磁場下 分離并除去未結合的AE 采用標記抗體的競爭法 步驟2 加入酸堿試劑啟動化學發(fā)光反應 計算濃度 采用標記抗體的競爭法 步驟3 夾心法與競爭法反應原理小結 競爭法 夾心法 樣品濃度 樣品濃度 光釋放 RLUs 光釋放 RLUs 抗體捕獲模式 分析物是樣品中含有的抗體采用一種直接針對樣品中抗體的特異性抗體 抗體捕獲模式 結合有抗人類IgM特異性抗體的微磁顆粒 PMP 被加入到樣品中人類IgM抗體與PMP上結合的抗人類IgM抗體進行結合 樣品中的抗體通過磁場作用與可能造成干擾的其它物質進行分離 抗體捕獲模