新鮮血清作為標(biāo)準(zhǔn)品用于國(guó)產(chǎn)試劑在AU640的溯源性.doc

新鮮血清作為標(biāo)準(zhǔn)品用于國(guó)產(chǎn)試劑在AU640的溯源性作者：左瑞菊,郭愛(ài)蘭單位：河北省滄州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科【關(guān)鍵詞】 溯源性 檢測(cè)系統(tǒng) 標(biāo)準(zhǔn)品 標(biāo)準(zhǔn) 新鮮血清隨著醫(yī)療事業(yè)發(fā)展,各種型號(hào)和功能不同的全自動(dòng)生化分析儀不斷涌現(xiàn)，使醫(yī)院臨床生化檢驗(yàn)實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化，許多實(shí)驗(yàn)室擁有多臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀1，但是儀器常是品牌不同,而在品牌分析儀上又用非品牌試劑，使多臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀結(jié)果的一致性和溯源性成為我們檢驗(yàn)工作者討論的熱點(diǎn)。為此,我們做了用新鮮血清作為臨時(shí)標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)現(xiàn)國(guó)產(chǎn)試劑在奧林帕斯AU640分析儀上的溯源性。報(bào)告如下。1 對(duì)象與方法1.1 對(duì)象 (1)儀器：羅氏C501全自動(dòng)生化分析儀奧林巴斯AU640全自動(dòng)生化分析儀；(2)試劑：羅氏試劑、尿素(3V)、葡萄糖(申能)、總蛋白(科華)、白蛋白(科華)、鈣(利德曼)、膽固醇(科華)、三酰甘油 (科華)；(3)校準(zhǔn)品：羅氏校準(zhǔn)品cfas(批號(hào)：180181121)；(4)質(zhì)控品：羅氏質(zhì)控品(批號(hào)：17646903、17628702)；(5)樣本：院門診及住院患者新鮮血標(biāo)本。1.2 方法 (1)按照操作規(guī)程進(jìn)行分析前準(zhǔn)備,用羅氏校準(zhǔn)品cfas校準(zhǔn)C501系統(tǒng), 做2個(gè)批號(hào)羅氏質(zhì)控,重復(fù)測(cè)定患者新鮮混合血清8次,除去可疑值,算出平均值,其值作為臨時(shí)校準(zhǔn)品的值立即校準(zhǔn)AU640上的項(xiàng)目。(2)根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)批準(zhǔn)的用患者標(biāo)本進(jìn)行方法對(duì)比及偏倚評(píng)估EP9A2指南文件(EP9A2)2每天選取8份患者新鮮血清(其濃度范圍盡可能覆蓋檢測(cè)項(xiàng)目的高、中、低)按常規(guī)操作方法分別在羅氏C501全自動(dòng)生化分析儀和奧林巴斯AU640全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行操作。測(cè)定順序1、2、3、4、5、6、7、8、8、7、6、5、4、3、2、1，檢測(cè)患者新鮮血清的尿素、葡萄糖、總蛋白、白蛋白、鈣、膽固醇、三酰甘油，以上步驟連續(xù)重復(fù)5 d。(3)數(shù)據(jù)收集與處理：按照NCCLS P9A2文件對(duì)2種方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。檢查實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中有無(wú)離群點(diǎn)，包括同一儀器內(nèi)測(cè)得結(jié)果離群點(diǎn)和2臺(tái)儀器間測(cè)得結(jié)果離群點(diǎn)，若檢驗(yàn)中有1個(gè)離群點(diǎn)，可刪去，有兩個(gè)或以上，檢查原因，補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。若無(wú)離群點(diǎn)，則進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，應(yīng)用SPSS 15.0軟件進(jìn)行線性回歸統(tǒng)計(jì)，可得到線性方程Y=bX+a以及相關(guān)系數(shù)R。檢查X范圍是否恰當(dāng)。若R2≥0.95，認(rèn)為X范圍恰當(dāng)，即X變量的誤差可由數(shù)據(jù)的范圍予以補(bǔ)償，也說(shuō)明回歸統(tǒng)計(jì)的斜率b和截距a可靠，可用它們估計(jì)新鮮血清定標(biāo)帶來(lái)的系統(tǒng)誤差；若R20.95，必須再做實(shí)驗(yàn)擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍。以美國(guó)Satland建議的醫(yī)學(xué)決定水平估計(jì)的系統(tǒng)誤差(SE)判斷用新鮮血清作為標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)現(xiàn)2臺(tái)生化分析儀結(jié)果的一致性。SE=|(b-1)Xc+a|SE%=|(b-1)Xc+a|/Xc×100%以美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正法案(CLIA88)對(duì)室間質(zhì)評(píng)的允許誤差(Enorallowable,Ea)為判斷依據(jù)，若SE不大于Ea，認(rèn)為此系統(tǒng)誤差可接受3。若將標(biāo)本檢測(cè)的隨機(jī)誤差考慮在內(nèi)，則要判斷估計(jì)的總誤差是否小于允許誤差，此時(shí)較簡(jiǎn)便的方法是將CLLA88允許誤差的1/2作為2臺(tái)生化分析儀結(jié)果的允許限值，從而判斷用新鮮血清作為標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)現(xiàn)2臺(tái)生化分析儀結(jié)果的一致性是否可行。2 結(jié)果2.1 經(jīng)過(guò)2種方法內(nèi)離群點(diǎn)的檢驗(yàn)及方法間配對(duì)結(jié)果離群點(diǎn)的檢驗(yàn)，均未發(fā)現(xiàn)離群點(diǎn)。2.2 通過(guò)SPSS 15.0軟件進(jìn)行直線回歸，得到線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表1，可見(jiàn)7個(gè)比對(duì)項(xiàng)目均有良好的相關(guān)性(R2均大于0.95)，這說(shuō)明了回歸統(tǒng)計(jì)的斜率b 和截距a可靠，可以用它們?nèi)ス烙?jì)新鮮血清定標(biāo)帶來(lái)的系統(tǒng)誤差。2.3 各項(xiàng)目醫(yī)學(xué)決定水平系統(tǒng)誤差及1/2Ea(CLIA’88)見(jiàn)表2。3 討論3.1 EP9A2文件為臨床實(shí)驗(yàn)室提供了一個(gè)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室方法試劑儀器性能的指南，用于評(píng)價(jià)測(cè)定同一被測(cè)物的2種方法(試劑或儀器)間的偏倚，它要求(1)操作者有足夠的時(shí)間熟悉儀器操作及維護(hù)步驟；(2)操作者有足夠時(shí)間熟悉評(píng)價(jià)方案；(3)在評(píng)價(jià)過(guò)程中，2種方法必須保證適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量控制；(4)2種方法必須有足夠的數(shù)據(jù)以保證結(jié)果具有代表性。我們嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程、試劑參數(shù)操作，進(jìn)行儀器保養(yǎng)，用羅氏試劑及程序羅氏校準(zhǔn)品cfas羅氏質(zhì)控 一系列羅氏系統(tǒng)保證結(jié)果可以溯源，參加全國(guó)衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)，所測(cè)7項(xiàng)均優(yōu)良，保證測(cè)量結(jié)果準(zhǔn)確及與其他實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的可比性，堅(jiān)持每天做室內(nèi)質(zhì)控，保證儀器狀態(tài)穩(wěn)定，結(jié)果準(zhǔn)確。3.2 羅氏系統(tǒng)結(jié)果具有溯源性，用新鮮血清作為標(biāo)準(zhǔn)品去校準(zhǔn)奧林巴斯AU640，通過(guò)常規(guī)測(cè)定方法測(cè)人的新鮮血清標(biāo)本的結(jié)果，比較兩系統(tǒng)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明奧林巴斯AU640全自動(dòng)生化分析儀系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果具有溯源性，從而實(shí)現(xiàn)2臺(tái)生化分析儀結(jié)果的一致性。3.3 許多實(shí)驗(yàn)室擁有多臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀，品牌不同，所用試劑不同，試劑方法學(xué)不一定相同，但是同一實(shí)驗(yàn)室所測(cè)結(jié)果差異必須在臨床可接受范圍之內(nèi),因此實(shí)驗(yàn)室要經(jīng)常進(jìn)行同一項(xiàng)目不同檢測(cè)系統(tǒng)間的偏倚評(píng)估4，按照EP9A2文件提供的方法，通過(guò)對(duì)比研究，我們認(rèn)為用新鮮血清作為標(biāo)準(zhǔn)品可以實(shí)現(xiàn)2臺(tái)不同品牌生化分析儀所用試劑不同，試劑方法學(xué)不一定相同所測(cè)結(jié)果的一致性。表1 線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)（略）表2 各項(xiàng)目醫(yī)學(xué)決定水平及系統(tǒng)誤差（略）【參考文獻(xiàn)】 1 王樹(shù)輝，楊永紅，安任剛，等.病人新鮮血清作為校準(zhǔn)液用于7170A全自動(dòng)生化分析儀的溯源性分析.貴州醫(yī)藥,2006，30：256266.2 National Committee for Clinical Laboratory Standards. Method comparison and bias estimation using patient sampies.Approved Guideline EP 9A2.Pennsylvania,NCCLS.2002.3 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.南