苯酚降解菌的分離和鑒定.doc

.目 錄目 錄.1摘要.2Abstract.3第一章 緒論.41.1 苯酚降解菌的定義及分類41.2苯酚降解菌的性質(zhì)及其用途41.3苯酚降解的研究現(xiàn)狀51.4苯酚降解菌生產(chǎn)菌的篩選61.5本課題的研究思路及意義6第二章 材料與方法.72.1試驗(yàn)材料72.2試驗(yàn)方法82.2.2苯酚降解菌的馴化82.2.3菌種在不同條件下的降解能力92.2.4最優(yōu)菌種的鑒定93.1苯酚降解菌篩選結(jié)果及性狀初步研究113.11篩選結(jié)果113.1.1.1初步篩選的結(jié)果113.1.1.2 菌種馴化中的結(jié)果113.1.2 H-1菌株的性狀初步結(jié)果133.2 H-1菌株分類鑒定結(jié)果13第四章 結(jié)論144.1菌種的篩選結(jié)果144.2菌種的鑒定14參考文獻(xiàn)15致 謝16一株苯酚降解菌的分離和鑒定摘要為了尋找能高效降解苯酚的微生物, 從土壤中篩選得到了一株苯酚降解菌,通過逐漸增加苯酚的濃度,然后馴化出一株高效降解苯酚的細(xì)菌H-1. 當(dāng)在30 培養(yǎng)48h 時其降解率高達(dá)92.11%. 經(jīng)理化特征測定及外觀鑒定,將其初步鑒定為假單胞菌屬.再經(jīng)過對比實(shí)驗(yàn)測各種因素(碳源、溫度、pH、通氣) 對該菌生長及降解苯酚能力的影響,得知該菌能以苯酚作為唯一碳源,最適生長溫度為32 ,最適pH 為7.0. 該菌為好氧菌,在空氣充足的條件下可提高降解能力.該菌菌落較小，菌落呈微黃色。菌體呈直或微彎的桿裝，沒有菌柄也沒有鞘。不產(chǎn)芽孢。對該菌做生化鑒定，可知該菌革蘭氏染色為陰性，可水解苯酚，生長溫度為32，生長pH為pH 6.57.5。參照東秀珠,蔡妙英的常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊等文獻(xiàn)方法，以形態(tài)和培養(yǎng)特征為主，生理生化特性及生態(tài)特性為輔，經(jīng)初步鑒定為假單胞菌屬，命名為H-1，具體確定到種則需要進(jìn)一步的研究。【關(guān)鍵詞】：篩選 苯酚 降解 鑒定;.Isolation and Identification of a Phenol-degrading BacteriaAbstractIn order to find efficient microbial degradation of phenol, screened from the soil has been a phenol-degrading bacteria, through a gradual increase in the concentration of phenol, and then domesticated from a phenol-degrading bacteria in H-1. When at 30 48h culture, when the maximum degradation of rate was as high as 92.11%. Manager of the characteristics of measurement and the appearance of identification, be identified as Pseudomonas. After comparing the experimental test a variety of factors (carbon source, temperature, pH, ventilation) on the bacteria growth and phenol degradation ability, that the bacteria to phenol as the sole carbon source, the optimal growth temperature of 32 , the optimum pH was 7.0. bacteria for aerobic bacteria in t air under the conditions of sufficient capacity to enhance the degradation.Bacteria colony small micro-colonies were yellow. Cell was under the direct or Micro bend installed, there is no there is no sheath stripe. Did not produce spores. To do biochemical identification of bacteria, bacteria known as Gram stain negative, can be hydrolyzed phenol, the growth temperature of 32 , the growth of pH for the pH 6.5 7.5.Reference to bacteria Berger Identification Manual (Eighth Edition) and other literature methods, in order to shape and cultivate the characteristics of the main physiological and biochemical characteristics and ecological characteristics of supplement, preliminary identified as Pseudomonas, named for the H-1 specific to the species to determine the need for further research.【Key words】: Screening identify degradation phenol第一章 緒論1.1 苯酚降解菌的定義及分類苯酚降解菌(Phenol-degrading bacteria)是能夠降解苯酚成為其他物質(zhì)的菌的總稱，它廣泛存在于土壤，水體中。苯酚俗名石炭酸，分子式C6H5OH，比重1.071，熔點(diǎn)4243，沸點(diǎn)182，燃點(diǎn)79。無色結(jié)晶或結(jié)晶熔塊，具有特殊氣味（與漿糊的味道相似）。置露空氣中或日光下被氧化逐漸變成粉紅色至紅色，在潮濕空氣中，吸濕后，由結(jié)晶變成液體。酸性極弱（弱于HCO），有特臭，有毒，有強(qiáng)腐蝕性。室溫微溶于水，能溶于苯及堿性溶液，易溶于乙醇、乙醚、氯仿、甘油等有機(jī)溶劑中，難溶于石油醚。常用于測定硝酸鹽、亞硝酸鹽及作有機(jī)合成原料等實(shí)驗(yàn)室可用溴（生成白色沉淀2,4,6三溴苯酚，十分靈敏）及FeCl3 （生成Fe(C6H5O)63-絡(luò)離子呈紫色）檢驗(yàn)11苯酚主要用于生產(chǎn)酚醛樹脂、己內(nèi)酰胺、雙酚A、己二酸、苯胺、烷基酚、水楊酸等，此外還可用作溶劑、試劑和消毒劑等，在合成纖維、合成橡膠、塑料、醫(yī)藥、農(nóng)藥、香料、染料以及涂料等方面具有廣泛的應(yīng)用。苯酚的毒理 低濃度酚能使蛋白變性,高濃度能使蛋白沉淀。對皮膚、粘膜有強(qiáng)烈的腐蝕作用,也可抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)或損害肝、腎功。水溶液比純酚易經(jīng)皮膚吸收,而乳劑更易吸收。吸入的酚大部分滯留在肺內(nèi),停止接觸很快排出體外。吸收的酚大部分以原形或與硫酸、葡萄糖醛酸或其他酸結(jié)合隨尿排出,一部分經(jīng)氧化變?yōu)猷彵蕉雍蛯Ρ蕉与S尿排出,使尿呈棕黑色(酚尿)。11人口服致死量報(bào)道不一,LD為215g,或MLD為140mg/kg,14g/kg。國外報(bào)道酚液污染皮膚面積為25%,10分鐘死亡,血酚為0.74mmol/L。苯酚是重要的化工原料,被廣泛應(yīng)用于酚醛樹脂、殺蟲劑、染料、農(nóng)藥和醫(yī)藥的生產(chǎn)中. 但苯酚本身是有毒的有機(jī)化合物,具有使蛋白質(zhì)變性的作用,對皮膚粘膜有腐蝕性;此外,它還可以作用于中樞神經(jīng)而引起痙攣. 美國環(huán)保局和我國相繼把苯酚列入有毒污染物名單.處理含酚廢水的方法很多,其中生物降解法是一種經(jīng)濟(jì)有效且無二次污染的方法,許多學(xué)者在這方面進(jìn)行了大量研究.111.2苯酚降解菌的性質(zhì)及其用途苯酚降解菌一般多為不動桿菌、假單胞菌、好氧產(chǎn)堿菌等。有的可以以苯酚為單一碳源，有的是混合碳源。目前,治理含酚廢水的途徑主要有化學(xué)試劑法(如萃取、吸附、離子交換、化學(xué)沉淀、化學(xué)氧化、反滲透、生化處理等) 和生物降解兩種。國內(nèi)外許多學(xué)者在生物降解苯酚方面進(jìn)行了廣泛的研究,已鑒定存在苯酚降解能力的微生物有乙酸鈣不動桿菌( Acinetobactercal coaceticus) 、假單胞菌( Pseudomonas sp. ) 、富養(yǎng)產(chǎn)堿菌( Alcaligenes eutrophus) 等。苯酚降解菌可用于，降解廣泛存在于化工、造紙、鋼鐵等工業(yè)廢水中。含酚的污水，防止由于酚污染而導(dǎo)致的江河湖泊中的魚蝦的死亡,含酚的污水會使莊稼死亡或減產(chǎn),嚴(yán)重危害人類的健康。101.3苯酚降解的研究現(xiàn)狀苯酚降解技術(shù)主要有:1、催化濕式氧化技術(shù)：催化濕式氧化技術(shù)是80年代國際上發(fā)展起來的一種治理高濃度有機(jī)廢水的新技術(shù)，是在一定溫度、壓力下，在催化劑作用下，經(jīng)空氣氧化使污水中的苯酚氧化分解成CO2、H2O等無害物質(zhì)，達(dá)到凈化目的。其特點(diǎn)是凈化效率高，流程簡單，占地面積少。2、生物強(qiáng)化技術(shù) 生物強(qiáng)化技術(shù)是指在生物處理體系中投加具有特定功能的微生物來改善原有處理體系的處理效果。投加的微生物可以來源于原有的處理體系，經(jīng)過馴化、富集、篩選、培養(yǎng)達(dá)到一定數(shù)量后投加，也可以是原來不存在的外源微生物。實(shí)際應(yīng)用中這兩種方法都有采用，主要取決于原有處理體系中的微生物組成及所處的環(huán)境。這一技術(shù)可以充分發(fā)揮微生物的潛力，改善難降解有機(jī)物生物處理效果。Selvaratnam等通過在活性污泥中投加苯酚降解菌Psendomonas Pvotida ATCC11172，提高了苯酚的去除率，系統(tǒng)在40d內(nèi)一直保持在95100的苯酚去除率，而沒有進(jìn)行生物強(qiáng)化的對照組中苯酚去除率開始很高，但很快降到40左右。3、芬頓試劑技術(shù) 芬頓試劑對有機(jī)分子的破壞是非常有效的，其實(shí)質(zhì)是二價鐵離子和過氧化氫之間的鏈反應(yīng)催化生成OH自由基，三價鐵離子催化劑（稱芬頓類試劑）也能激發(fā)這個反應(yīng)，這兩個反應(yīng)生成的OH自由基能有效地氧化各種有毒的和難處理的有機(jī)化合物如苯酚；或者采用紫外燈作為輻射能源放射紫外線進(jìn)入廢水，當(dāng)過氧化氫被紫外光激活后，反應(yīng)產(chǎn)物是一個高反應(yīng)性的OH自由基，這個OH基團(tuán)迅速引發(fā)氧化鏈反應(yīng)，最終有機(jī)化合物被分解為CO2和H2O。91.4苯酚降解菌生產(chǎn)菌的篩選苯酚降解菌的篩選主要有兩種方式:第一種是將從廢水中和土壤中富集的細(xì)菌進(jìn)行馴化，使其達(dá)到可以以苯酚為單一碳源的高效菌種。第二種是將自然界得來的細(xì)菌直接接入只有以苯酚為單一碳源的培養(yǎng)液中進(jìn)行缺陷培養(yǎng)，得到的就是可以以苯酚為單一碳源的菌種。1.5本課題的研究思路及意義上面提到的主要苯酚處理方式中 催化濕式氧化技術(shù)優(yōu)點(diǎn)是經(jīng)濟(jì)但是它的催化過程中需要高溫高壓，消耗能源、水資源而且需要設(shè)備的支持，前期投入大。芬頓試劑技術(shù)中催化中需要Fe2+ pH限定pH3.5 酸性環(huán)境催化效率高。Fe2+可能導(dǎo)致二次Fe2+污染，酸性環(huán)境不僅容易造成設(shè)備的耐久度降低而且需要大量的堿來中和它。而生物技術(shù)連續(xù)性好，反應(yīng)條件溫和，無劇烈反應(yīng)條件，且不消耗能源，從長遠(yuǎn)的角度來看它無疑是最好的解決苯酚污染的辦法。而且近年來不少科學(xué)家利用科學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)了可以使苯酚分解成為細(xì)菌的原材料來生產(chǎn)其他生產(chǎn)資料。所以本課題的要就思路就是篩選自然界中的細(xì)菌通過逐步增加培養(yǎng)基中的苯酚含量來馴化得到可以高效分解以及耐受高濃度苯酚的優(yōu)秀菌種。第二章 材料與方法2.1試驗(yàn)材料2.1.1土樣采自學(xué)校操場附近地土壤，學(xué)校門口糧油店門口土壤，學(xué)校西山土壤。2.1.2培養(yǎng)基1、斜面培養(yǎng)基：牛肉膏3.0g/L 蛋白胨5.0g/L NaCL5.0g/L 瓊脂15g/L pH7.0-7.2 2、 富集培養(yǎng)基：牛肉膏 3.0g/L蛋白胨0.5 苯酚0.4g/L K2HPO4 0.1 MgSO4 0.05 瓊脂15.0g/L pH7.2-7.5 。 3、 測試培養(yǎng)基：牛肉膏3.0g/L 蛋白胨5.0g/L NaCL5.0g/L苯酚0.4g/L 瓊脂15g/L pH7.0-7.2 4、 篩選培養(yǎng)基：（NH4）SO4 2.0g/L MgSO4 CaCL2 0.1g/L K2HPO4 0.5g/L NaH2PO4 0.5g/L 苯酚0.3g/L pH6.5-7.55、 測試用苯酚培養(yǎng)液：（NH4）SO4 2.0g/L 苯酚0.5g/L pH6.5-7.56、 甲基紅（M.R）試驗(yàn)培養(yǎng)基：蛋白胨5 g，葡萄糖5 g， KH2PO4 5 g，蒸餾水 1000ml pH 7.07.27、 乙?；谆迹╒.P）實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基：同M.R配制時先將除指示劑外的藥品加熱溶解、過濾、調(diào)pH 6.87.0，再加指示劑，分裝試管。70kPa滅菌20min。8、過氧化氫酶試驗(yàn)培養(yǎng)基：LB肉湯培養(yǎng)基9、 明膠液化培養(yǎng)基：蛋白胨0.5%，明膠20%，葡萄糖2%，pH7.27.4。115高壓蒸汽滅菌30min。10、 纖維素水解培養(yǎng)基MgS04 0.05%，NaC10.05%，K2HPO4 0.05% ，KNO3 0.1%， pH7.2 濾紙片(長5cm，寬0.8cm)121高壓蒸汽滅菌20min。2.1.3溶液與試劑1、菌活性測定用溶液原FeCl3液:稱取0.77gFeCl3和5ml 0.1mol/L的HCL溶于少量去離子水中，然后定容到100 mL，貯于棕色瓶中備用(每月制備一次).稀FeCl3液:取lmL原FeCl3液用蒸餾水稀釋100倍(每天制備一次).2、革蘭氏染色液A)結(jié)晶紫液甲液: 結(jié)晶紫2g，95%乙醇20 mL。乙液: 草酸銨 0.8g，蒸餾水80 mL。將甲、乙兩液相混，靜置48h后過濾使用，染色液應(yīng)放置棕色瓶中保存.B)碘液碘片1g， 碘化鉀2g，蒸餾水30 mL。先用少量(35mL)蒸餾水溶解碘化鉀，再投入碘片，待碘全溶解后，加入水稀釋至300ml。放置棕色瓶貯存數(shù)月。C)復(fù)染液(番紅2.5%的乙醇溶液)蕃紅 2.5g ， 95%乙醇 100 mL。復(fù)染液保存于棕色瓶中。用復(fù)染液與蒸餾水1:4混和即得到革蘭氏染色所需的0.5%蕃紅水溶液.3、調(diào)用pH酸堿液lmol/L 鹽酸:量取36%的濃鹽酸86.2 mL，用水溶解并定容至1000 mL.0.lmol/L 鹽酸:lmol/L 鹽酸10 mL，蒸餾水90 mL。lmol/L氫氧化鈉稱取氫氧化鈉40g，用蒸餾水溶解并定容至1000 mL.0.lmol/L氫氧化鈉lmol/L氫氧化鈉10 mL，蒸餾水90 mL。主要試劑均為國產(chǎn)分析純。2.14儀器垂直流超凈工作臺 上海智城分析儀器有限公司雙目型顯微鏡XSP-4C 上海長方光學(xué)儀器有限公司新型恒溫鼓風(fēng)干燥箱 寧波江南儀器廠250D恒溫光照培養(yǎng)箱 常州式華普達(dá)教學(xué)儀器有限公司立式滅菌器 山東新華醫(yī)療器械股份有限公司電子分析天平 SHIMADZU corporation Japan艾科普超純水系統(tǒng) 頤洋企業(yè)發(fā)展有限公司2.2試驗(yàn)方法2.2.1苯酚降解菌的初篩稱取土壤5 g加入裝有50 mL無菌水的小三角瓶中，振蕩均勻后靜置，取上清液進(jìn)行梯度稀釋3次，取稀釋液涂布于三個富集培養(yǎng)基上，30倒置培養(yǎng)36h，從三個培養(yǎng)基上選取優(yōu)勢菌株進(jìn)行培養(yǎng)，并先命名為H-1,H-2,H-3。將H-1、H-2、H-3接入篩選培養(yǎng)基，并將選取同一菌種分別接入測試培養(yǎng)基，30倒置培養(yǎng)2d后加入菌活性測定溶液，觀察未變色部位大小并記錄。此為原細(xì)菌初始分解能力。2.2.2苯酚降解菌的馴化將H-1,H-2,H-3分別接入篩選培養(yǎng)液（苯酚為唯一碳源的培養(yǎng)液）并以35.120r/min搖床進(jìn)行培養(yǎng).每隔1d測一次苯酚濃度（4-氨基安替吡林試劑），待到苯酚分解完后加入比原溶液苯酚稍多的苯酚，如此增加苯酚濃度連續(xù)馴化2周使菌種能夠完全以苯酚為唯一碳源并快速生長。在期間注意培養(yǎng)液pH 維持在6.8-7.2之間。苯酚含量大于1000mg/L的的可以考慮回收酚，所以我們的最大酚濃度定為900mg/L 2.2.3菌種在不同條件下的降解能力溫度測試：將馴化過后的菌種H-1,H-2,H-3分別在不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng)，溫度區(qū)間24-36，以兩度為一個梯度增加，其他條件相同，并記錄其降解苯酚量，并計(jì)算出苯酚在不同溫度下的降解率。pH值測試：將馴化過后的菌種H-1,H-2,H-3分別在不同pH值下進(jìn)行培養(yǎng)，pH值區(qū)間6.0-8.0，以0.5為一個梯度增加，其他條件相同，并記錄其降解苯酚量，并計(jì)算出苯酚在不同pH下的降解率。是否需氧測試：將馴化過后的菌種H-1,H-2,H-3分別以靜止做兩組平行測試；搖床培養(yǎng)做兩組平行測試，并記錄其降解苯酚量，并計(jì)算出苯酚在不同培養(yǎng)狀態(tài)下的降解率。然后分析三種菌種得出的結(jié)果，并算出那種菌種的降解率最高得出最優(yōu)菌種及其最適宜條件。2.2.4最優(yōu)菌種的鑒定7將得到的最優(yōu)菌種進(jìn)行生理生化測試，以及菌種斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)所得的菌種外觀特性。2.2.4.1革蘭氏染色：1.取無油跡的干凈載玻片，滴上一滴無菌蒸餾水，用接種環(huán)挑取少許菌苔，于水滴邊緣輕輕涂幾下。2.自然風(fēng)干，在火焰上通過幾次，固定涂片。3.滴加結(jié)紫液，染一分鐘。用水沖凈結(jié)晶紫液。4.滴加碘液沖凈殘水，并覆蓋約l min。用水沖去碘液，將片上的水甩干。5.滴加 95%乙醇液脫色約20-30sec，并立即用水沖凈乙醇.6.用蕃紅液染12min。用水洗凈番紅，風(fēng)干，用顯微鏡油鏡觀察涂片。7.菌體紅色為革蘭氏染色陰性，藍(lán)紫色為革蘭氏染色陽性。2.2.4.2淀粉水解試驗(yàn)：取菌種點(diǎn)種于淀粉水解實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基平板上，適溫培養(yǎng)24d，形成菌落后，再平板上滴加盧哥爾氏碘液，以鋪滿菌落周圍為度。平板呈藍(lán)色。菌落周圍如有無色透明圈出現(xiàn)，說明淀粉被水解。2.2.4.3唯一碳源試驗(yàn)：取菌懸液接種于唯一碳源培養(yǎng)基（苯酚為唯一碳源），連續(xù)移種三代，37培養(yǎng)3天，觀察是否生長，生長者為陽性。2.2.4.4 M.R. 和 V.P.試驗(yàn):分別將試驗(yàn)菌種裝入葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)液的試管中，置于37恒溫培養(yǎng)2天，取出培養(yǎng)好的試管，沿管壁加入M.R.或V.P.試劑34滴，觀察是否變色，若M.R.培養(yǎng)液由原來的橘黃色變?yōu)榧t色則為M.R.陽性反應(yīng),V.P.培養(yǎng)液中加入等量的40%的KOH溶液，猛烈振蕩，210min內(nèi)有紅色出現(xiàn)即為V.P.正反應(yīng)。2.2.4.5過氧化氫酶試驗(yàn):將菌株接種于斜面培養(yǎng)基，28恒溫培養(yǎng)2448h；用接種還取一小環(huán)涂抹于已滴有5%過氧化氫的玻璃片上，如果有氣泡產(chǎn)生則為陽性，無氣泡則為陰性。2.2.4.6明膠水解試驗(yàn):將測試菌接種于明膠水解培養(yǎng)基中，在室溫溫度下培養(yǎng)1520d，放入4冰箱，觀察培養(yǎng)基還能不能凝固，不能凝固者明膠水解為陽性，能凝固者為陰性。2.2.4.7纖維素水解試驗(yàn):將菌種接種在試管中一般浸在無碳源合成培養(yǎng)基內(nèi)的濾紙條上，于適溫培養(yǎng)，第10天時觀察結(jié)果，如果菌種能在濾紙片上生長，并分解紙條，表示該菌株產(chǎn)生纖維素酶，若紙條不被分解，則該菌株不產(chǎn)生纖維素酶。第三章 結(jié)果與分析3.1苯酚降解菌篩選結(jié)果及性狀初步研究3.1.1篩選結(jié)果3.1.1.1初步篩選的結(jié)果將加入了菌種活性測試液的菌種進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)H-1周圍的培養(yǎng)基無紅色圈最大，H-3其次，H-2最小，由此可知H-1的原始分解能力最好。3.1.1.2 菌種馴化中的結(jié)果表1菌株H-1、H-2、H-3降解苯酚結(jié)果30搖床培養(yǎng)苯酚濃度(mg/L)H-1降解苯酚濃度(mg/L)H-2降解苯酚濃度(mg/L)H-3降解苯酚濃度(mg/L)H-1降解率%H-2降解率%H-3降解率%20017717517788.588.188.530027526526692.1188.388.340033533033283.7582.5083.0050037236035474.4072.0070.8060031928830153.1648.0050.1770026725024038.1435.7134.2880014511510518.1314.3813.129006747407.445.224.44由表1可知在續(xù)培養(yǎng)馴化當(dāng)中H-1的分解速率提升速度是最快的。當(dāng)在30培養(yǎng)1d時其降解率高達(dá)92.11 %. H-1較為良好。圖一 菌株H-1 H-2 H-3苯酚降解率表2 溫度對苯酚降解菌的影響-500ml（500mg/L苯酚）測試培養(yǎng)液搖床培養(yǎng)pH7.5溫度H-1降解苯酚濃度(mg/L)H-2降解苯酚濃度(mg/L)H-3降解苯酚濃度(mg/L)H-1降解率%H-2降解率%H-3降解率%2430230930060.461.860.02634034133868.068.267.62834834434669.668.869.23036436136472.872.272.83237236035474.472.070.83435535035871.070.071.63631130830662.261.661.2由表2可以看出，問對于苯酚降解菌有著較大的影響，H-3菌的最適溫度是30，但是當(dāng)30時，H-3的降解率并沒有H-1 32時的降解率大，所以H-1菌在溫度測試時還是最出色的。表3 pH對苯酚降解菌的影響-500ml（500mg/L苯酚）測試培養(yǎng)液搖床培養(yǎng)30pH值H-1降解苯酚濃度(mg/L)H-2降解苯酚濃度(mg/L)H-3降解苯酚濃度(mg/L)H-1降解率%H-2降解率%H-3降解率%6.04645429.29.08.46.535234834970.469.669.87.036436036172.872.072.27.537236035474.472.070.88.054525210.810.410.4由表3可以看出pH對于苯酚降解菌的影響，他們的最適pH值都是7.0-7.5之間，大于或小于都會影響到苯酚的分解速度。在最適合pH值中H-1菌依然是最快降解的。所以H-1菌株依然具有優(yōu)勢。表4 O2對苯酚降解菌的影響-500ml（500mg/L苯酚）測試培養(yǎng)液30pH7.5通氣環(huán)境H-1降解苯酚濃度(mg/L)H-2降解苯酚濃度(mg/L)H-3降解苯酚濃度(mg/L)H-1降解率%H-2降解率%H-3降解率%搖床137236035474.472.270.8搖床237136635074.273.270.0靜止136835434273.671.268.4靜止236635634473.270.868.8由表4可以看出，這三種苯酚降解對于O2的需求不是很大，但是在有氧氣的環(huán)境中會使分解率提高。3.1.2 H-1菌株的性狀初步結(jié)果H-1是我所培養(yǎng)且馴化較為成功的菌種，它的最適溫度是32最適pH7.0-7.5之間。在苯酚濃度為400mg/L左右的濃度時分解速度最大。3.2 H