大腸桿菌ppt課件

,小組成員分工包升制作PPT馮宇講解PPT李春雷查找并整理第一部分資料劉磊查找并整理第一、五部分資料王鵬查找并整理第二、三部分資料熊志江查找并整理第四部分資料,大腸桿菌（Escherichiacoli）,1,第二部分,遺傳物質(zhì),第三部分,基因突變及修復(fù),目錄,第四部分,基因轉(zhuǎn)移及重組,第五部分,研究應(yīng)用,第一部分,概述,2,概述,一、形態(tài)特征：大腸桿菌為革蘭氏陰性無芽孢的直桿菌，大小約0.4-0.7m2.0-3.0m，兩端鈍圓，多單獨(dú)存在或成雙，但不呈長鏈狀排列。大多數(shù)菌株具有周生鞭毛而能運(yùn)動，有的菌株具有莢膜或微莢膜，不形成芽胞，對普通堿性染料著色良好。,二、培養(yǎng)特性：大腸桿菌為兼性厭氧菌，在普通培養(yǎng)基上生長良好，最適生長溫度37，最適生長pH7.2-7.4,伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上產(chǎn)生黑色帶金屬閃光的菌落,電鏡下的大腸桿菌,3,注：產(chǎn)酸產(chǎn)氣；+：陽性；-：陰性；+/-：大多數(shù)菌株陽性/少數(shù)陰性；V：種間有不同反應(yīng)。,三、生化特性：,普通營養(yǎng)瓊脂上生長24h后，形成圓形凸起、光滑、濕潤、半透明、灰白色、中等大小菌落。,微生物資源數(shù)據(jù)庫共享平臺菌株保藏編號NKCCMRNK7.C7037,大腸桿菌在麥康凱培養(yǎng)基上長成紅色菌落,概述,4,四、致病性：,五、微生物診斷：從可疑癥狀著手分析，再采集病變組織或者收集糞便或腸內(nèi)容物，劃線接種于麥康凱或伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，挑取可疑菌落同時(shí)接種于TSI瓊脂和普通瓊脂斜面，然后革蘭氏染色、鏡檢形態(tài)，淘汰不符合者，最后做生化試驗(yàn)；也可用多重PCR法檢測細(xì)菌的特異性基因。,概述,5,E.coli基因組中還包含有許多插入序列，這些插入的片段都是由基因的水平轉(zhuǎn)移和基因重組而形成的。利用大腸桿菌基因組的這種特性對其進(jìn)行改造，使其中的某些基因發(fā)生突變或缺失，從而給大腸桿菌帶來可以觀察到的變化，這種能觀察到的特征叫做大腸桿菌的表現(xiàn)型(Phenotype)，把引起這種變化的基因構(gòu)成叫做大腸桿菌的基因型(Genotype)。具有不同基因型的菌株表現(xiàn)出不同的特性。,遺傳物質(zhì),6,遺傳物質(zhì),二、主要基因型：,7,遺傳物質(zhì),三、染色體：,8,基因突變及修復(fù),9,大腸桿菌的SOS修復(fù)系統(tǒng)細(xì)胞損傷時(shí)，參與DNA修復(fù)的基因，包括切除修復(fù)基因（uvrA、uvrB、uvrC）、重組修復(fù)基因（recA）及其他基因（umuC、umuD）。OS修復(fù)主要通過增加切除修復(fù)酶和重組修復(fù)酶的含量，來增強(qiáng)對損傷DNA的修復(fù)。正常細(xì)胞中，LexA阻遏蛋白與lexA、recA、uvrA、uvrB、uvrC基因的操縱區(qū)結(jié)合，阻遏它們表達(dá)，只合成少量RecA蛋白和修復(fù)酶，修復(fù)零星的DNA損傷。大腸桿菌受到UV照射后，產(chǎn)生大量二聚體，出現(xiàn)大量單鏈DNA部位，與細(xì)胞內(nèi)少量RecA蛋白結(jié)合，激活其蛋白酶功能，使LexA阻遏蛋白自我切割，并且促進(jìn)DNA同源配對。,基因突變及修復(fù),10,大腸桿菌甲基化介導(dǎo)的錯配修復(fù)系統(tǒng)特異性不強(qiáng)，基本能修復(fù)DNA雙鏈結(jié)構(gòu)中任何輕微的損傷，包括錯配、移碼、堿基類似物的替代等。,基因突變及修復(fù),大腸桿菌錯配修復(fù)機(jī)制模式,步驟：,11,基因轉(zhuǎn)移及重組,12,基因轉(zhuǎn)移及重組,局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)：被轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA片段僅僅是靠近染色體溶源化位點(diǎn)的基因。噬菌體：只轉(zhuǎn)導(dǎo)gal和bio基因。攜帶gal基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體稱為dgal或dg，攜帶bio基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體稱為dbio或db。（d表示缺陷）80噬菌體：80整合部位靠近色氨酸基因（trp），可用80dt轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體對基因trp進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)。,13,基因轉(zhuǎn)移及重組,注：Holliday模型，是第一個被廣泛接受的重組模型，它是通過要發(fā)生重組的2個DNA分子的2條單鏈在同一部位斷裂，斷裂的游離末