質(zhì)譜基礎(chǔ)知識(shí)-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀原理及應(yīng)用36255ppt課件VIP

.,飛行時(shí)間質(zhì)譜儀,龐鈞文12210300012,.,質(zhì)譜儀是按照離子的質(zhì)荷比(m/z)不同,來分離不同分子量的分子.測(cè)定分子量進(jìn)行成分和結(jié)構(gòu)分析.離子的生成方式有失去或捕獲電荷(如:電子發(fā)射,質(zhì)子化或去質(zhì)子化),質(zhì)譜儀簡(jiǎn)介,離子源,質(zhì)量過濾/分析器,檢測(cè)器,進(jìn)樣部分樣品板LC或GC,EI源FAB源MALDI源ESI源,QuadruopoleIontrapTime-of-flight,電子倍增器閃爍計(jì)數(shù)器,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,.,1906年J.JThomson在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)帶電荷離子在電磁場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)軌跡與它的質(zhì)荷比(m/z)有關(guān),并于1912年制造出第一臺(tái)質(zhì)譜儀.1946年發(fā)明飛行時(shí)間質(zhì)量分析器(Time-of-flightAnalyzer)1953-1958年出現(xiàn)四極桿質(zhì)量分析器(Quadrupole)1956年GC-MS開始聯(lián)用1959年質(zhì)譜首次用于peptidesequencing1965年離子共振質(zhì)譜出現(xiàn)1968年電噴霧離子源ElectrosprayIonization1973年LC-MS1974年FouriertransformioncyclotorresonanceMS1987-1988年Matrise_assistedlaserdesorptionionization1996年電噴霧離子源開始用于生物大分子的研究,質(zhì)譜的發(fā)展歷史,.,基本原理,.,基本原理公式推導(dǎo),當(dāng)飛行距離L和工作電壓V一定時(shí)，離子飛行時(shí)間T和離子質(zhì)荷比一一對(duì)應(yīng)。,.,質(zhì)量分辨（Massresolution,m/m）：質(zhì)譜儀器分辨不同成分物質(zhì)的能力；10000質(zhì)量精度（massaccuracy）：衡量質(zhì)譜儀器測(cè)量物質(zhì)成分的準(zhǔn)確度；ppm質(zhì)量范圍（massrange）：質(zhì)譜儀器測(cè)量物質(zhì)成分的質(zhì)量大小范圍；1靈敏度（sensitivity）：質(zhì)譜儀器所能測(cè)量物質(zhì)成分的最低含量；單分子檢測(cè),飛行時(shí)間質(zhì)譜儀性能指標(biāo),.,離子源：電噴霧電離源（ESI）主要用于極性、難氣化的成分在液相狀態(tài)下的電離。大氣壓化學(xué)電離源（APCI）主要用于中等極性、易揮發(fā)的小分子化合物在氣相狀態(tài)下的電離基質(zhì)輔助激光解吸電離源（MALDI）主要用于多肽、核苷酸、蛋白質(zhì)和高分子聚合物等生物大分子的電離大氣壓光電離源（APPI）主要用于芳烴、甾體等不宜用以上三種離子化的樣品。,飛行時(shí)間質(zhì)譜儀TOF-MS的構(gòu)成,.,質(zhì)量分析器TOF-MS分辨率低的原因時(shí)間分散空間分散能量分散改進(jìn)方法脈沖電離離子延遲引出反射器技術(shù),飛行時(shí)間質(zhì)譜儀TOF-MS的構(gòu)成,目前,TOF-MS大都裝有反射器,使離子經(jīng)過多電極組成的反射器后沿V型或W型路線飛行到達(dá)檢測(cè)器,使得分辨率可達(dá)20000以上,最高檢測(cè)質(zhì)量可超過300000Da,且具有很高的靈敏度。,.,直線型飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的主要缺點(diǎn)：分辨率低。離子初始能量不同，使得具有相同質(zhì)荷比的離子達(dá)到檢測(cè)器的時(shí)間有一定分布，造成分辨能力下降。改進(jìn)的方法在線性檢測(cè)器前面的加上一組靜電場(chǎng)反射鏡，將自由飛行中的離子反推回去，初始能量大的離子由于初始速度快，進(jìn)入靜電場(chǎng)反射鏡的距離長(zhǎng)，返回時(shí)的路程也就長(zhǎng)，初始能量小的離子返回時(shí)的路程短，這樣就會(huì)在返回路程的一定位置聚焦，從而改善了儀器的分辨能力。這種帶有靜電場(chǎng)反射鏡的飛行時(shí)間質(zhì)譜儀被稱為反射式飛行時(shí)間質(zhì)譜儀,直線式VS反射式,.,反射式飛行時(shí)間質(zhì)譜儀,.,質(zhì)量分析器；可以單獨(dú)使用，也可以和其他儀器串聯(lián)使用與四級(jí)桿質(zhì)譜串聯(lián)與