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1、實(shí)驗(yàn)一、顯微鏡油鏡的使用和保養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1. 學(xué)會(huì)顯微鏡油鏡的使用與保養(yǎng)方法。2. 學(xué)會(huì)認(rèn)識(shí)細(xì)菌的基本形態(tài)與特殊結(jié)構(gòu)。 油鏡的原理由于油鏡的透鏡很小,自標(biāo)本玻片透過的光線因介質(zhì)密度(從載物玻片到空氣,再進(jìn)入油鏡)的不同,部分光線因發(fā)生折射而散失(如下圖AA),不能進(jìn)入透鏡,致使射入的光線較少,物像呈現(xiàn)不清。當(dāng)在油鏡與標(biāo)本片之間加鏡油后(鏡油的折光率為1.515和玻璃的折光率1.52相近似),從而減少了光線通過標(biāo)本片與油鏡之間空氣(折光率1.0)引起的散光現(xiàn)象,增加了進(jìn)入透鏡的光線(如下圖中CC),使視野的明亮度加強(qiáng),物像可看清楚,此外,加用鏡油能增加油鏡的數(shù)值孔徑,提高顯微鏡分辨能力。油鏡加香
2、柏油的原理實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(一)顯微鏡的使用材 料顯微鏡,鏡油(香柏油),擦鏡紙,玻片標(biāo)本。方 法1檢查:使用前必須對(duì)所用顯微鏡進(jìn)行詳細(xì)檢查,如發(fā)現(xiàn)問題應(yīng)及時(shí)向老師報(bào)告。2調(diào)光:檢查未染色標(biāo)本時(shí),以弱光線為宜,此時(shí)可將集光器下降或縮小光柵,檢查染色標(biāo)本時(shí),以光線強(qiáng)為宜,此時(shí)應(yīng)適當(dāng)升高集光器或?qū)⒐鈻糯蜷_。3標(biāo)本觀察:將標(biāo)本置于載物臺(tái)上,先用低倍鏡觀察。用粗調(diào)節(jié)器調(diào)至看出物象后,再調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)器,使物像更加清晰。在換高倍鏡觀察前,鑒于高倍鏡視野范圍比低倍鏡小,故須將被觀察內(nèi)容移至視野中央后再換之。 (二)油鏡的使用和保養(yǎng)1油鏡頭的識(shí)別:油鏡頭上一般刻有100、或Oil、油等標(biāo)記。2油鏡的使用方法:(1)將顯
3、微鏡直立于桌上,不要扳動(dòng)傾斜關(guān)節(jié),使載物臺(tái)保持水平。(2)對(duì)光:用低倍鏡對(duì)光,檢查染色標(biāo)本時(shí)光線宜強(qiáng)。要抬高集光器,放大光圈。(3)滴加香柏油一小滴于染色標(biāo)本片上,將標(biāo)本置于載物臺(tái)上,移置待檢部分于接物鏡下。(4)換用油鏡,眼睛從側(cè)面看著物鏡,轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器,使鏡筒下降至油鏡頭浸入鏡油并幾乎接觸標(biāo)本片。(5)左眼看接目鏡,一面觀察,一面緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器,使鏡筒上升,直到觀察到模糊的物像時(shí),再適當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器,使物像完全清晰,即可正式觀察。注意 切不可在眼看目鏡時(shí)向下轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器,以免壓碎標(biāo)本片及損壞鏡頭。觀察標(biāo)本時(shí)養(yǎng)成左眼看接目鏡的習(xí)慣。(三)油鏡的保養(yǎng)1標(biāo)本觀察完畢,向上轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器將鏡筒提起
4、,取下標(biāo)本,用擦鏡紙將鏡頭上的油擦凈。若油已干,可用擦鏡紙沾少許二甲苯擦去油跡,隨即用擦鏡紙擦去二甲苯。因二甲苯能溶解粘固透鏡的膠質(zhì),如不擦去二甲苯,日久后鏡片會(huì)脫落。2將物鏡轉(zhuǎn)成“八字形,以免損壞油鏡。降低集光器,豎起反光鏡,將顯微鏡放入鏡箱。3填寫顯微鏡使用登記卡。注意事項(xiàng):1細(xì)調(diào)節(jié)器是顯微鏡最精細(xì)、最脆弱的機(jī)械部分,每旋轉(zhuǎn)一周使鏡筒上升或下降0.1毫米,只能做往返回轉(zhuǎn),不要向單一方向轉(zhuǎn)動(dòng)數(shù)周。2觀察滴片標(biāo)本時(shí),載物臺(tái)應(yīng)放平,注意勿將物鏡鏡頭接觸糞液。3觀察封片標(biāo)本時(shí),勿使鏡頭與蓋玻片接觸,以免壓壞標(biāo)本或損傷鏡頭。4觀察血涂片標(biāo)本時(shí),必須按一定順序,逐個(gè)視野檢查,以免遺漏。實(shí)驗(yàn)二、細(xì)菌的形
5、態(tài)檢查細(xì)菌在適宜的環(huán)境條件下,保持著一定的形態(tài)。細(xì)菌的正常形態(tài)基本上分為球菌、桿菌和螺形菌三類。球菌按其分裂方向與分裂后排列情況又分成雙球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、八迭球菌、葡萄球菌等;桿菌也有球桿菌、鏈桿菌、分枝桿菌、棒狀桿菌等之分;螺形菌中菌體僅有一個(gè)彎曲,呈逗點(diǎn)狀者叫弧菌,菌體有23個(gè)回轉(zhuǎn),且較堅(jiān)硬者為螺菌。細(xì)菌除具有基本結(jié)構(gòu)外,某些細(xì)菌在一定條件下尚具有某些特殊結(jié)構(gòu),如莢膜、鞭毛、芽胞、菌毛。細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)除菌毛須用電鏡觀察外,莢膜、鞭毛、芽胞均可用光鏡觀察。材 料葡萄球菌、鏈球菌、腦膜炎雙球菌、大腸桿菌、霍亂弧菌示教片。鞭毛(傷寒桿菌)、莢膜(肺炎鏈球菌)、芽胞(破傷風(fēng)桿菌)示教片。方 法1. 細(xì)菌基本形態(tài)的觀察 注意細(xì)菌菌體大小、形狀、排列特點(diǎn)及染色性。球菌:葡萄球菌革蘭染色標(biāo)本片。桿菌:大腸埃希菌標(biāo)本片。螺形菌:霍亂弧菌標(biāo)本片。2. 特殊結(jié)構(gòu)的觀察 莢膜:肺炎鏈球菌莢膜標(biāo)本片。注意莢膜的厚薄。芽胞:破傷風(fēng)梭菌芽胞標(biāo)本片。注意芽胞
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