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1、1、-氨基半乳糖苷酶(N-acetyl-galactosaminase ,NAG)活力檢測(cè)1.1檢測(cè)原理白色念珠菌和陰道毛滴蟲有強(qiáng)的-氨基半乳糖苷酶活性。-氨基半乳糖苷酶能與對(duì)(鄰)硝基苯-N-乙酰-D-氨基半乳糖苷反應(yīng),釋放出的對(duì)(或鄰)硝基苯在堿性條件下顯黃色,顏色的深淺與-氨基半乳糖苷酶含量呈正比。1.2結(jié)果分析NAG活力檢測(cè)樣本是否感染念珠菌和陰道毛滴蟲是需要結(jié)合鏡檢來判定的。該指標(biāo)結(jié)果與鏡檢結(jié)果不一致的樣本主要有以下原因:(1)五聯(lián)檢測(cè)法主要以試紙顏色的變化來判斷陰陽性,而帶血樣本會(huì)對(duì)結(jié)果判讀有影響。因此我們的使用說明書中明確要求慎用帶血樣本(2)鏡檢時(shí)發(fā)現(xiàn)念珠菌而NAG檢測(cè)為陰性時(shí)
2、,說明該樣本中念珠菌(據(jù)文獻(xiàn)資料顯示,80%的念珠菌分泌的酶是高活性,而還有20%的念珠菌分泌的酶是低活性的,且同一念珠菌在不同的生長(zhǎng)期分泌的酶活性也是不同的)分泌的酶活性很低,不足以引起NAG這項(xiàng)指標(biāo)發(fā)生生化反應(yīng)或該念珠菌不分泌NAG(陰道感染的念珠菌中只有白色念珠菌和近平滑念珠菌分泌此酶,其他念珠菌不分泌此酶,且陰道念珠菌感染中白色念珠菌感染所占比例在80%以上)。結(jié)合以上原因,該指標(biāo)在鏡檢與生化試劑兩者結(jié)合互補(bǔ)的情況下才能更好的指導(dǎo)臨床。NAG不顯色為“陰性”(提示正常);NAG顯黃色為“陽性”(提示陰道粘膜處于易感狀態(tài)或已被念珠菌、滴蟲、人型支原體、脆弱桿菌等致病菌感染,建議進(jìn)一步鏡檢
3、或微生物培養(yǎng));NAG顯淡黃色為“弱陽性”,(提示陰道粘膜處于易感狀態(tài)或已被念珠菌、滴蟲、人型支原體、脆弱桿菌等致病菌感染,建議進(jìn)一步鏡檢或微生物培養(yǎng))。 2、唾液酸苷酶(Sialidase ,SNA)活力檢測(cè)2.1檢測(cè)原理唾液酸苷酶是加德納菌、動(dòng)彎桿菌等BV致病菌分泌的特異性酶。唾液酸苷酶能水解5-溴-4-氯-3-吲哚神經(jīng)氨酸鹽,釋放出溴吲哚基,遇特殊物質(zhì)后起反應(yīng)呈藍(lán)綠色,呈色深淺與唾液酸苷酶含量呈正比。2.2結(jié)果分析該指標(biāo)結(jié)果與鏡檢結(jié)果不一致的樣本主要有以下原因:(1)線索細(xì)胞造成假陽性結(jié)果:由于退化的上皮細(xì)胞,黏附化膿菌或細(xì)小細(xì)胞碎片的上皮細(xì)胞在鏡下形態(tài)類似線索細(xì)胞,容易誤判,造成假陽性
4、。此外上皮細(xì)胞自身含有大量顆粒時(shí)也易被誤認(rèn)為線索細(xì)胞。(2)線索細(xì)胞的局限性:盡管線索細(xì)胞是Amsel標(biāo)準(zhǔn)中最特異、敏感的指標(biāo),但據(jù)文獻(xiàn)資料顯示約有10%-20%的健康女性也可檢出線索細(xì)胞。通過線索細(xì)胞檢測(cè)診斷BV的陽性預(yù)測(cè)值為85%-90%。那意味著,即使線索細(xì)胞被正確檢出,它對(duì)診斷BV任顯得特異性不足。SNA不顯色為陰性(提示正常);SNA顯淡藍(lán)色為陰性(提示正常);SNA顯藍(lán)綠色為陰性(提示細(xì)菌性陰道?。?;3、白細(xì)胞酯酶(LE)活力檢測(cè)3.1檢測(cè)原理白細(xì)胞酯酶為多形核白細(xì)胞釋放的羧酸酯酶,在發(fā)生炎癥時(shí),多形核白細(xì)胞在病灶聚集而大量釋放白細(xì)胞酯酶,細(xì)菌性及霉菌性陰道病均可見明顯多形核白細(xì)胞
5、,正常時(shí)無此現(xiàn)象。白細(xì)胞酯酶能水解5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽,釋放出無色的溴吲哚基,遇特殊物質(zhì)后起反應(yīng)呈藍(lán)綠色,呈色深淺與白細(xì)胞酯酶活性呈正比。3.2結(jié)果分析該指標(biāo)設(shè)計(jì)的檢測(cè)原理來看,其是專用于檢測(cè)多形核白細(xì)胞釋放的酯酶,在正常情況下難以檢測(cè)。當(dāng)人體發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí),多形核白細(xì)胞的趨化性在炎性病灶聚集而大量釋放酯酶,只有在這種炎癥情況下(白細(xì)胞104/ml),炎性白細(xì)胞酯酶才有可能檢測(cè)到。在鏡下看到的大量白細(xì)胞一般為炎癥感染的初期。待中性粒細(xì)胞吞噬了足量的病菌后LE測(cè)試塊顯示為陽性,一般為炎癥感染的中后期,此時(shí)期鏡下的白細(xì)胞數(shù)量較少。因此LE生化檢測(cè)與鏡檢有一定的優(yōu)勢(shì),鏡檢無法反映炎癥感染各期的變化。LE不顯色為陰性(提示正常),LE顯淡藍(lán)色為弱陽性(提示正常)LE顯藍(lán)色為陽性(提示陰道有炎癥)4、過氧化氫(H2O2)濃度檢測(cè)4.1檢測(cè)原理過氧化氫是陰道乳酸桿菌的標(biāo)志物。在過氧化物酶存在的前提下,過氧化氫分解為產(chǎn)生氧,后者能使顯色底物發(fā)生由無色到紫紅色的顏色變化,呈色深度與H2O2濃度成正比。4.2結(jié)果分析H2O2濃度檢測(cè)結(jié)果判定陽性表示陰道菌群失調(diào),乳酸桿菌減少,相當(dāng)于白帶常規(guī)陰道清潔度度以上;陰性表示陰道菌群在正常范圍內(nèi),弱陽性表示有輕微菌群失調(diào)。此項(xiàng)目給臨床對(duì)于是否需要使用調(diào)理乳桿菌的藥物治療提供導(dǎo)向。H2O2顯紫紅色為陰性(提示正常)H2O2顯極淺紅色為
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