紫外-可見分光光度計(jì)操作規(guī)程

1、紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程紫外 -可見分光光度計(jì)操作規(guī)程(TU1810)1目的：制訂本標(biāo)準(zhǔn)的目的是為規(guī)范檢驗(yàn)人員在質(zhì)量檢驗(yàn)過程中的操作，保證檢驗(yàn)結(jié)果的正確性。2適用范圍：本標(biāo)準(zhǔn)適用于二廠檢驗(yàn)員對產(chǎn)品質(zhì)量的檢驗(yàn)。3職責(zé)：QC 檢驗(yàn)員對本標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施負(fù)責(zé)。4程序：4.1 簡述紫外 -可見分光光度法是利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來進(jìn)行分析的一種儀器分析方法。 這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價電子和分子軌道上的電子在電子能級間的躍遷，它廣泛用于無機(jī)和有機(jī)物質(zhì)的定性和定量分析。朗伯比耳定律（ Lambert Beer）是光吸收的基本定律，俗稱光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。當(dāng)入射光波長

2、一定時， 溶液的吸光度是吸光物質(zhì)的濃度及吸收介質(zhì)厚度（吸收光程）的函數(shù)。其常用表達(dá)式為，式中為系數(shù)：A= C式中A 為吸光度； 為吸收系數(shù)；C 為溶液濃度； 為光路長度。如溶液的濃度（ C）為 1%（g/ml），光路長度（ L）為 1cm，相應(yīng)的吸光度即為吸1%收系數(shù)以 E1cm 表示。如溶液的濃度（ C）的摩爾濃度（ mol/L ），光路長度為 1cm時，則相應(yīng)有吸收系數(shù)為摩爾吸收系數(shù)，以 表示。4.2 儀器專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程紫外可見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法的原理工作的常規(guī)分析儀器。根據(jù)光路設(shè)計(jì)的不同， 紫外可見分光光度計(jì)可以分為單光束分光

3、光度計(jì)、雙光束分光光度計(jì)和雙波長分光光度計(jì)。4.2.1 儀器測量條件選擇1.測量波長的選擇通常都是選擇最強(qiáng)吸收帶的最大吸收波長 max作為測量波長，稱為最大吸收原則，以獲得最高的分析靈敏度。而且在max附近，吸光度隨波長的變化一般較小，波長的稍許偏移引起吸光度的測量偏差較小，可得到較好的測定精密度。 但在測量高濃度組分時，寧可選用靈敏度低一些的吸收峰波長（較小）作為測量波長，以保證校正曲線有足夠的線性范圍。如果 max所處吸收峰太尖銳，則在滿足分析靈敏度前提下，可選用靈敏度低一些的波長進(jìn)行測量，以減少比耳定律的偏差。2.適宜吸光度范圍的選擇任何光度計(jì)都有一定的測量誤差，這是由于測量過程中光源的

4、不穩(wěn)定、讀數(shù)的不準(zhǔn)確或?qū)嶒?yàn)條件的偶然變動等因素造成的。由于吸收定律中透射比T與濃度 C是負(fù)對數(shù)的關(guān)系，從負(fù)對數(shù)的關(guān)系曲線可以看出，相同的透射比讀數(shù)誤差在不同的濃度范圍中，所引起的濃度相對誤差不同，當(dāng)濃度較大或濃度較小時，相對誤差都比較大。因此，要選擇適宜的吸光度范圍進(jìn)行測量，以降低測定結(jié)果的相對誤差。在實(shí)際工作中，可通過調(diào)節(jié)待測溶液的濃度或選用適當(dāng)厚度的吸收池的方法，使測得的吸光度落在所要求的范圍內(nèi)。3.儀器狹縫寬度的選擇狹縫的寬度會直接影響到測定的靈敏度和校準(zhǔn)曲線的線性范圍。狹縫寬度過大時，入射光的單色光降低，校準(zhǔn)曲線偏離比耳定律，靈敏度降低；狹縫寬度過窄時，光強(qiáng)變?nèi)酰瑒荼匾岣邇x器的增益，

5、隨之而來的是儀器噪聲增大，于測量不利。選擇狹縫寬度的方法是： 測量吸光度隨狹縫寬度的變化。狹縫的寬度在一個范圍內(nèi)， 吸光度是不變的，當(dāng)狹縫寬度大到某一程度時，吸光度開始減小。因此，在不減小吸光度時的最大狹縫寬度，即是所欲選取的合適的狹縫寬度。4.3 紫外 -可見分光光度計(jì)的檢定4.3.1 波長示值誤差與重復(fù)性儀器波長示值誤差指標(biāo)為0.3nm，波長重復(fù)性指標(biāo)為 0.2nm，您可以用儀器氘燈的兩條特征譜線檢驗(yàn)，具體檢驗(yàn)方法如下：專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程確認(rèn)儀器光譜寬帶為“ 2.0nm”。開機(jī)初始化完成后，按數(shù)字 5鍵進(jìn)入系統(tǒng)應(yīng)用界面， 在系統(tǒng)應(yīng)用界面中按數(shù)字鍵

6、2強(qiáng)狹縫設(shè)定為“ 2.0nm”。在系統(tǒng)應(yīng)用界面按 RETURN 鍵返回儀器主界面，按 2鍵選擇光譜測量功能。按 F1鍵選擇參數(shù)設(shè)定功能，按相應(yīng)數(shù)字鍵設(shè)定采樣間隔為 0.2nm、掃描速度為中速、波長范圍為 660nm480nm、縱坐標(biāo)范圍 0-100、測光方式 Es、光源選擇氘燈按 RETURN 鍵返回光譜掃描界面。按 START/STOP鍵并輸入增益值為 6，按 ENTER 鍵確認(rèn)，開始掃描。掃描結(jié)束后，按 F2鍵并輸入閾值（ 1100）后，按 ENTER鍵進(jìn)行峰值檢出（如果檢出峰波長為 0.000nm，則需要按鍵返回，然后重新按F2鍵輸入比前次輸入小的數(shù)值作為閾值，重新進(jìn)行峰值檢出）按 F4

7、鍵打印輸出重復(fù)掃描三次，并做峰值檢出，氘燈的兩個峰標(biāo)準(zhǔn)值為656.1nm和486.0nm。4.3.2基線平直度樣品池中不放任何遮擋物， 以空氣為空白進(jìn)行測量， 用波長掃描功能測量全波段的吸光度值，其具體測量方法如下首先確認(rèn)儀器光譜寬帶為2.0nm在儀器主界面俺 2鍵選擇光譜測量模式按 F1鍵進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)置界面， 按相應(yīng)的數(shù)字鍵設(shè)置測光方式Abs、采樣間隔為 1nm、掃描速度為中速、波長范圍為1100190nm、縱坐標(biāo)范圍為 -0.01Abs.0.01Abs按 RETURN 鍵，返回光譜測量主界面，按AUTOZERO 鍵進(jìn)行基線校正。按 START/STOP鍵進(jìn)行掃描按 F4鍵打印輸出。讀取曲線的

8、吸光度值，在1090nm200nm波長，測量掃描圖譜中起始點(diǎn)與最大偏移之差即為儀器的基線平直度。分光光度法允差范圍1%波長（ nm）吸收強(qiáng)度吸收系數(shù)（ E1cm）允差范圍235最小124.5123.0126.0257最大144.0142.8146.2313最小48.6247.050.3350最大106.6105.5108.5可按下表所列的試劑和濃度，配制成水溶液，置1cm石英池中，在規(guī)定的波長處測定透光率，應(yīng)符合下表中規(guī)定。專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程試劑濃度（ %， g/ml ）測定用波長（ nm）透光率（ %）碘化鈉1.002200.8亞硝酸鈉5.00340

9、0.8合規(guī)定。4.4.1 計(jì)算分光光度法按中國藥典規(guī)定，計(jì)算分光光度法一般不宜用于含量測定，對于少數(shù)采用計(jì)算分光光度法的品種， 應(yīng)嚴(yán)格按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法進(jìn)行。用本法時應(yīng)注意： 有一些吸光度是在待測成分吸收曲線的上升或下降陡坡處測定，影響精度的因素較多， 故應(yīng)仔細(xì)操作， 盡量使供試品和對照品的測定條件一致。若該品種不用對照品， 如維生素A 測定，則應(yīng)在測定前對儀器作仔細(xì)的校正和檢定。4.4.2 比色法供試品本身在紫外 -可見光區(qū)沒有強(qiáng)吸收，或在紫外光區(qū)雖有吸收但為了避免干擾或提高靈敏度，加入適當(dāng)?shù)娘@色劑，使反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收移至可見光區(qū)。用比色法測定時， 由于顯色是影響顯色深淺的因素較多，

10、應(yīng)取供試品與對照品或標(biāo)準(zhǔn)品同時操作。 除另有規(guī)定外， 比色法所用的空白系指用同體積的溶劑代替對照品或供試品溶液，然后依次加入等量的相應(yīng)試劑，并用同樣方法處理。當(dāng)吸光度和濃度關(guān)系不呈良好線性時， 應(yīng)取數(shù)份梯度量對照品溶液， 用溶劑補(bǔ)充至同一體積，顯色后測定各份溶液的吸光度， 然后以吸光度與相應(yīng)的濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，再根據(jù)供試品的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得其相應(yīng)的濃度，并求出其含量。4.5 注意事項(xiàng)4.5.1試驗(yàn)中所用的量瓶和移液管均應(yīng)經(jīng)檢定校正、洗凈后使用。4.5.2使用的石英吸收池必須潔凈。當(dāng)吸收池中裝入同一溶劑，在規(guī)定波長測定各吸收池的透光率，如透光率相差在 0.3%以下者可配對使用，否則必須加以

11、校正。4.5.3取吸收池時，手指拿毛玻璃面的兩側(cè)。裝樣品溶液的體積以池體積的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時應(yīng)加蓋， 透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈， 檢視應(yīng)無殘留溶劑，為防止溶劑揮發(fā)后溶質(zhì)殘留在池子的透光面， 可先用醮有空白溶劑的擦鏡紙擦拭， 然后再用干擦鏡紙拭凈。 吸收池放人樣品室時應(yīng)注意每次放入方向相同。 使用后用溶劑及水沖洗干凈，晾干，防塵保存，吸收池如污染不易洗凈時可用硫酸發(fā)煙硝酸 （3:1 v/v）混合液稍加浸泡后， 洗凈備用。 如用鉻酸鉀清潔液清洗時， 吸收池不宜在清潔液中長時間浸泡，否則清潔液中的鉻酸鉀結(jié)晶會損壞吸收池的光學(xué)表面， 并應(yīng)充分用水沖洗，以防鉻酸鉀吸附于吸收池表面。專

12、業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程4.5.4 含有雜原子的有機(jī)溶劑， 通常均具有很強(qiáng)的末瑞吸收。因此，當(dāng)作溶劑使用時，它們的范圍均不能小于截止使用波長。例如甲醇、乙醇的截止使用波長為205nm。另外，當(dāng)溶劑不純時，也可能增加干擾吸收。因此，在檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即將溶劑置1cm石英吸收池中，以空氣為空白（即空白光路中不置任何物質(zhì)）測定吸光度，溶劑和吸收池的吸光度應(yīng)符合下表規(guī)定。以空氣為空白測定溶劑在不同波長處的吸光度的規(guī)定波長范圍（ nm）220240241250251300300以上吸光度 0.40 0.20 0.10 0.05每次測定時

13、應(yīng)采用同一廠牌批號，混合均勻的同批溶劑。4.5.5 稱量應(yīng)按藥典規(guī)定要求。配制測定溶液時稀釋轉(zhuǎn)移次數(shù)應(yīng)盡可能少，轉(zhuǎn)移稀釋時所取容積一般應(yīng)不少于 5ml。含量測定時供試品應(yīng)稱取 2份，如為對照品比較法， 對照品一般也應(yīng)稱取 2份。吸收系數(shù)檢查也應(yīng)稱取供試品 2份，平行操作，每份結(jié)果對平均值的偏差應(yīng)在 0.5%以內(nèi)。作鑒別或檢查可取樣品 1份。4.5.6 供試品溶液的濃度，除各品種項(xiàng)下已有注明者外，供試品溶液的吸光度以在0.30.7之間為宜，吸光度讀數(shù)在此范圍誤差較小， 并應(yīng)結(jié)合所用儀器吸光度線性范圍，配制合適的讀數(shù)濃度。4.5.7 選用儀器的狹縫譜帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶半高寬的 10%，否則測

14、得的吸光度值會偏低，或以減小狹縫寬度時供試品溶液的吸光度不再增加為準(zhǔn)， 對于中國藥典紫外分光光法測定的大部分品種， 可以使用 2nm縫寬，但當(dāng)吸收帶的半高寬小于 20nm 時，則應(yīng)使用較窄的狹縫，例如青霉素鉀及鈉的吸光度檢查需用 1nm縫寬或更窄，否則其 264nm的吸光度會偏低。4.5.8 測定時除另有規(guī)定者外，應(yīng)在規(guī)定的吸收峰2nm 處，再測幾點(diǎn)的吸光度，以核對供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸光度最大的波長作為測定波長，除另有規(guī)定外吸光度最大波長應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長2nm以內(nèi)，否則應(yīng)考慮試樣的同一性、純度以及儀器波長的準(zhǔn)確度。4.5.9 用于制劑含量測定時， 應(yīng)注意供試液與對照液的p

15、H值是否一致， 如pH值對吸收有影響，則應(yīng)調(diào)溶液的 pH值一致后再測定吸光度。4.6 結(jié)果計(jì)算4.6.1 對照品比較法可根據(jù)供試品溶液及對照品溶液的吸光度與對照品溶液的濃度以正比法算出供試品溶液的濃度，再計(jì)算含量。C樣品 =A樣品 C對照 /A對照專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程式中A 為吸光度值； C為測試液濃度（以 mg/ml 計(jì)）。1 %，即在指定波長時，光路長度為 1cm，4.6.2 吸收系數(shù)法規(guī)定的吸收系數(shù)， 系指 E1cm試樣濃度換算為 1%（g/ml）時的吸光度值，故應(yīng)先求被測樣品的E11cm% 值，再與規(guī)定的 E11%cm 值比較，可計(jì)算出供試樣品的

16、含量。1%AE1cm （樣品） =C L式中A 為供試品溶液測得的吸光度值；C 為供試品溶液的百分濃度，即 100ml中所含溶質(zhì)的克數(shù)（ g/ml）；L 為吸收池的光路長度（ cm）。供試品的含量 %=E1cm1% (樣品 )1 %100（標(biāo)準(zhǔn)）E1cm式中 E11%cm （樣品）為根據(jù)前式計(jì)算出的供試品吸收系數(shù)；1 %E（標(biāo)準(zhǔn)）為藥典或藥品標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的吸收系數(shù)。1 cm4.7 吸收系數(shù)測定法本法主要用于新品種的吸收系數(shù)測定。4.7.1 測定方法取精制樣品精密稱取一定量，使樣品溶液配成吸光度讀數(shù)在0.60.8之間，置 1cm吸收池中，在規(guī)定波長處按5.5.8項(xiàng)的規(guī)定測出吸光度讀數(shù)，然后再用同批

17、溶劑將溶液稀釋1倍，使吸光度在 0.30.4之間，再按上述方法測定。樣品應(yīng)同時測定 2份，同一臺儀器測定的 2份結(jié)果，對平均值的偏差應(yīng)不超過0.3%，否則應(yīng)重新測定。測定時，先按儀器正常靈敏度測試，然后再減小狹縫測定，直到減小狹縫吸光值不增加為止，取吸光度不改變的數(shù)據(jù)。再用4臺不同型號的儀器復(fù)測。吸收系數(shù)可根據(jù)朗伯 -比爾定律求算，以下例說明：已知某化合物的分子量為287，用乙醇配成濃度為 0.0030%的溶液，在波長 297nm處，用 1cm石英池，測得吸光度為0.6139，求 E11cm% 值及摩爾吸收系數(shù) 值。1%297nm0.614=205E1cm=A/CL=0.0030 1297nm

18、=A/CL=0.614=587410000.00301001287專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可 分光 操作 程4.8 開機(jī)開機(jī)前打開儀器樣品室蓋，觀察確認(rèn)樣品室內(nèi)無擋光物。開機(jī)后，儀器顯示初始化工作界面，儀器將進(jìn)行自檢并初始化整個過程需要約2min 左右，如果初始化正常結(jié)束，系統(tǒng)進(jìn)入儀器的操作界面，如下圖所示：系 初始化 1.內(nèi)存檢 ：正常2. 品池 機(jī)復(fù)位：正常3.波 機(jī)復(fù)位：正常4.狹 機(jī)復(fù)位：正常5. 光片 機(jī)復(fù)位：正常6.光源 機(jī)復(fù)位：正常7.鎢 燈 ：8.氘 燈 ：9.波 長 ：10.參數(shù)初始化：系 忙儀器初始化完成后， 您便可以開始對儀器進(jìn)行操作。 儀器通常需要經(jīng)過

19、60min 的預(yù)熱時間使光源達(dá)到穩(wěn)定，為保證測量數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，盡量不要在儀器預(yù)熱時進(jìn)行測量。5.0 光度測量在此功能模塊下，可測定樣品在確定波長下的吸光度或透過率，完成K 系數(shù)運(yùn)算和測量數(shù)據(jù)打印等功能。5.1 進(jìn)入光度測量模式在儀器主界面下根據(jù)提示按1 鍵選擇光度測量方式，儀器進(jìn)入光度測量模式，專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程顯示界面變?yōu)楣舛葴y量主界面，按RETURN 鍵返回儀器主界面，如圖所示：退出光度測量時，系統(tǒng)在信息提示區(qū)顯示“數(shù)據(jù)將丟失，繼續(xù)？（是：ENTER，否 CLE）” 的信息提示您對當(dāng)前已測得的數(shù)據(jù)進(jìn)行操作。測試按ENTER 鍵，系統(tǒng)將返回儀器主界面

20、，所有已測得的數(shù)據(jù)將丟失。按CANCLE 鍵，系統(tǒng)退回到光度測量主界面，提示信息變?yōu)椤罢埌碨TART 鍵測量”，您可以繼續(xù)光度測量的操作。下面根據(jù)圖 3-2 給出了光度測量主界面的具體介紹：此處“光度測量”表示目前為光度測量模式；“990nm”為當(dāng)前的工作波長；“0.000Abs”表示目前實(shí)時測得的吸光度值。此部分為工作區(qū)， 以表格的形式顯示具體測量的數(shù)據(jù)，每屏可顯示最多9 個測量數(shù)據(jù)值，超過則會自動分屏顯示。此部分為信息提示區(qū)，當(dāng)前的信息提示您按START/STOP 鍵開始測量。此處顯示當(dāng)前時間，圖中顯示的時間為4 月 15 日 8 時 34 分。此部分為功能鍵提示區(qū)，顯示F1F4 鍵的功能

21、。具體按鍵功能如下：專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程 F1進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)定界面； F2刪除測量數(shù)據(jù)，刷新屏幕； F3設(shè)置樣品池狀態(tài)； F4打印測量結(jié)果。另外在此畫面下，按鍵盤的操作鍵GOTOWL可進(jìn)行工作波長的設(shè)置；按AUTOZERO 鍵可完成當(dāng)前波長下自動校零的功能。5.2 參數(shù)設(shè)置在光度測量主界面下， 按 F1 鍵進(jìn)入光度測量參數(shù)設(shè)置界面， 按 RETURN 鍵返回到光度測量主界面，如圖所示：在該界面下可設(shè)置測量的光度方式，測量波長和K 系數(shù)運(yùn)算的系數(shù)，根據(jù)界面下方的提示按相應(yīng)的數(shù)字進(jìn)行各項(xiàng)參數(shù)的設(shè)置。所有參數(shù)設(shè)置完成后，按 RETURN 鍵返回到光度測量主界面。5

22、.3 設(shè)置光度方式在光度測量模式下，儀器提供Abs（吸光度）、 T%透光率和 R%（反射率）兩種光度方式供您選擇。在光度測量參數(shù)設(shè)置界面按1 鍵設(shè)置光度方式，每按一次1 鍵， Abs、T%和 R%交替變換，如圖所示。專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程5.4 設(shè)置測量波長在光度 量參數(shù) 置界面按2 可 行 量波 置，如 所示： 置波 界面的底部，系 提示您 入您想要 置的 量波 ，用數(shù)字 09和“ .” 入您想要 置的 量波 ，如果 入 按CANCEL 可清楚當(dāng)前的 入， 入完成按 ENTER 確 后，系 提示“系 忙”，此 系 正在 定您所 置的波 ，完成 定后系 退

23、出 量波 定，返回到光度 量參數(shù) 置界面。您也可以在下 所示的光度 量主界面下，按 GOTOWL 置光度 量的工作波 。專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程在光度 量界面的底部，系 提示您 入您想要 置的 量波 ，用數(shù)字 09和“.” 入您想要 置的 量波 ， 如果 入 按CANCEL 可清楚當(dāng)前的 入， 入完成按 ENTER 確 后，系 提示“系 忙”，此 系 正在 定您 置的波 ，完成 定后系 退出 量波 置界面，返回到光度 量主界面； 不 入數(shù)據(jù)按 RETURN 可直接退出 量波 定界面，返回到光度 量主界面。5.5 輸入 K 系數(shù)值在光度 量參數(shù) 置界面按3 可

24、 行光度 量K 系數(shù)的 置，如 所示： 置 K 系數(shù)界面的底部，系 提示您 入你您想要 置的K 系數(shù)，用數(shù)字 09、“.”和“” 入 K 系數(shù)，如果 入 按 CANCEL 可清除當(dāng)前的 入， 入完后按 ENTER 確 ，系 定完成 入的 K 系數(shù)后退出 K 系數(shù) 置界面，返回到光度 量參數(shù) 置界面。5.6 暗電流校正 行暗 流校正可以消除 器部分噪聲， 保 品的 量 果更 準(zhǔn)確。 一般在 器 境 生 化 ， 您必 行 器的暗 流校正， 所 的 境 化主要是指： 環(huán)境溫度 化 大 、 安裝位置改 、 做高吸收度 品 等。 （建 您在啟 器 專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作

25、規(guī)程后，在 行 量前 行暗 流校正，保 數(shù)據(jù) 果的準(zhǔn)確性）。暗 流校正的具體操作如下：在光度 量參數(shù) 置界面按 4 行暗 流校正，此 在提示區(qū) 示 “系 忙”，大 10s 后提示信息 “ 按數(shù)字 ”，此 表示暗 流校正完成，如上 所示5.7 試樣池設(shè)置在 池 置界面下，您可以 您所配置的 池（包括：固定池、五 池和八 池）。如果所配置的 池 八 池或者五 池，您 可以 置使用的 池?cái)?shù)，并 行移 池， 池復(fù)位等操作。在下 所示的光度 量主界面下，按F3 入 池 置界面，如果所示在 池 置界面下 ，根據(jù)提示按相 的數(shù)字 行您所需要的 置， 完成 置后，按 RETURN 返回到光度 量主界面。專業(yè)文

26、檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程5.8 選擇試樣池類型在試樣池設(shè)置界面下按 1 鍵進(jìn)行試樣池類型的設(shè)置。 系統(tǒng)提供的試樣池類型有固定池架、五聯(lián)池架和八聯(lián)池架三個選項(xiàng)，每按一次 1 鍵，系統(tǒng)在固定池、五聯(lián)池和八聯(lián)池之間交替轉(zhuǎn)換， 如圖所示。請根據(jù)自己實(shí)際所配置的試樣池類型， 選擇適合您的試樣池類型。5.9 設(shè)定使用試樣池?cái)?shù)此項(xiàng)參數(shù)僅對五聯(lián)池或八聯(lián)池有效。在試樣控制界面下，按2 鍵進(jìn)行使用樣品池?cái)?shù)設(shè)置，如圖所示：專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程在 池 置界面的底部， 系 提示您 入您想要 置的使用 池?cái)?shù)，用數(shù)字鍵 09 入使用 池?cái)?shù)，如果 入 按C

27、ANCEL 可以清楚當(dāng)前的 入， 入完后按 ENTER 確 ，系 定完成 入的使用池?cái)?shù)后返回到 池參數(shù) 置界面；不 入數(shù)據(jù)按 RETURN 可直接返回到 池參數(shù) 置界面。在 量 程中，系 根據(jù) 置 指定 目的 池逐一 行 量，序號以n-1,n-2, ， n 第 n 次 量，后面的數(shù)字表示 品池序號。如果使用 池?cái)?shù) 1 個，或者將多 池修改 池?cái)?shù) 1， 重新回到主界面 行 量后，已 得數(shù)據(jù)按照 1-1,2-1,3-1,4-1 . 序 號。6.0 一號池空白校正此 參數(shù)用來 定是否要 行一號池空白校正 （ 五 池和八 池有效） ，此 置有“否”和“是”兩個 ，每按一次 3 ， 在“否”和“是”之

28、交替切 ，如 所示?？瞻仔Ｕ囊?是把位于 1 號 池內(nèi)的 作 空白， 其他 池（除一號 品池外的其他 定的 品池） 行 定。在 量開始 ， 系 將以 1 號 品池內(nèi)的專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程試樣作為空白進(jìn)行校零。6.1 移動試樣池此項(xiàng)參數(shù)僅對五聯(lián)池和八聯(lián)池有效。在試樣池設(shè)置界面下，按數(shù)字鍵4 將移動試樣池架到下一試樣池。此選項(xiàng)后面的數(shù)值標(biāo)示當(dāng)前在光路上的試樣池編號，每按一次4 鍵，試樣池架將向下移動一個單位，此選項(xiàng)后面的數(shù)值也相應(yīng)的加1，直到樣品池編號的最大值后，樣品池復(fù)位到1 號樣品池，以此循環(huán)。樣品池的最大編號五聯(lián)池為5，八聯(lián)池為8.6.2 試樣池復(fù)位

29、此項(xiàng)參數(shù)僅對五聯(lián)池和八聯(lián)池有效。不管當(dāng)前光路上是幾號樣品池，在試樣池設(shè)置界面下按數(shù)字鍵5 將試樣池架復(fù)位，使得1 號樣品池回到光路上。6.3 單池測樣在試樣池類型選擇為八聯(lián)池或者五聯(lián)池時，當(dāng)使用試樣池?cái)?shù)設(shè)置為1,1 號池空白校正選項(xiàng)為“否”時，可用功能選擇八個試樣池（或五個試樣池）中的任一個作為測量樣池，隨后的測量僅對選中的樣池操作。6.4 自動校零（校 100% ）在光度測量設(shè)置界面下，ZERO 鍵可對當(dāng)前工作波長進(jìn)行零吸光度（透過率100%）校正。在校正前，應(yīng)先放入空白樣品（如：溶解待測樣品的溶劑等），然后進(jìn)行校正操作。當(dāng)使用單樣品池進(jìn)行測量時， 單樣品池測量包括使用單樣品池架和多樣品池的

30、單池測樣，（關(guān)于多樣品池的單池測樣請參考）。測量時首先參考 和 設(shè)置好各種測量參數(shù)和試樣池參數(shù)（主要是選擇樣品池類型和多樣品的單池設(shè)置），然后參考進(jìn)行校零操作；校零后將裝好樣品的比色皿放入樣品池內(nèi)，按START/STOP 鍵，重復(fù)測量一次樣品，測量的結(jié)果將顯示在界面上，如圖所示。專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程測量結(jié)果的表格中“ No.”表示測量數(shù)據(jù)的編號，圖中表示第2 次測量的第 1 號樣品池的結(jié)果（如果是多樣品的單池測量，編號“1”表示的是當(dāng)前使用的樣品池）；“Abs”表示測得樣品的吸光度值； “K*Abs ”表示吸光度值經(jīng)過K 系數(shù)運(yùn)算后的值，圖中測量時的 K

31、 系數(shù)的值為 10.6.5 當(dāng)使用多樣品池進(jìn)行測量時只有配置多樣品池架（如：八聯(lián)池、五聯(lián)池等）后才能進(jìn)行多樣品池測量，您可以根據(jù)實(shí)際需要選擇您需要使用的樣品池個數(shù)。使用多樣品池測量可以大大的提高您的工作效率。使用多樣品池測量時的測量結(jié)果如圖所示， 表格中“ No.”表示測量數(shù)據(jù)的編號，圖中“ 2-3”表示第 2 次測量的第 3 號樣品池的結(jié)果；“ Abs”表示測得樣品的吸光度值；“ K*Abs ”表示吸光度值經(jīng)過 K 系數(shù)運(yùn)算后的值，圖中測量時的 K 系數(shù)的值為10.圖中表示的是使用 3 個樣品池進(jìn)行 2 次測量的結(jié)果。專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程測量結(jié)果查閱，

32、如果測量結(jié)果超過了顯示器顯示的范圍（一屏最多顯示 9 個），您可以用方向鍵逐行查閱測量結(jié)果。測量結(jié)果的刪除測量結(jié)果結(jié)束后，您可以按 F2 鍵清楚測量數(shù)據(jù)，此時系統(tǒng)提示“數(shù)據(jù)將丟失，繼續(xù)？（是：，否）”根據(jù)提示按鍵確認(rèn)，系統(tǒng)將清除所有測量數(shù)據(jù)；按 CANCEL 取消刪除操作，系統(tǒng)提示變回“請按 START 鍵測量”，您可以繼續(xù)其他操作，如果所示專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程請您在刪除測量結(jié)果前進(jìn)行數(shù)據(jù)的打印輸出，以避免數(shù)據(jù)丟失造成損失。7.0光譜測量在此功能模塊下，可對樣品在一段確定波長內(nèi)的吸光度Abs、透過率 T%和樣品光束（或者燈）能量Es 和參比光束能量Er

33、進(jìn)行測量及打印。7.1 進(jìn)入光譜掃描測量模式在儀器主界面下根據(jù)提示按 2 鍵選擇光譜測量方式，儀器進(jìn)入光譜測量模式，顯示界面變?yōu)楣庾V測量主界面，按 RETURN 鍵返回儀器主界面，如圖所示：退出光譜測量時，系統(tǒng)在信息提示區(qū)顯示“數(shù)據(jù)將丟失，繼續(xù)？（是：ENTER，否： CLE ）”的信息，提示您對當(dāng)前已測得的數(shù)據(jù)進(jìn)行操作。此時按ENTER 鍵，系統(tǒng)將返回儀器主界面，所有已測得的數(shù)據(jù)將丟失。按CANCEL 鍵，系統(tǒng)退回到光譜測量主界面，提示信息變?yōu)椤罢埌碨TART 鍵測量”，您可以繼續(xù)光譜測量的操作下圖給出了光譜測量主界面的具體介紹：此處“光譜測量”表示目前為光譜測量模式；“990nm”為當(dāng)前的

34、工作波長；專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。START/STOP 鍵開始測量紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程“0.000Abs”表示目前實(shí)時測得的吸光度值。此部分為工作區(qū)， 以平面坐標(biāo)圖的形式顯示測得的譜線。 圖中的橫坐標(biāo)為波長值，縱坐標(biāo)為吸光度值 Abs（根據(jù)光度方式的不同，縱坐標(biāo)還可以為透過率 T%和能量值 Es、Er）。此部分為信息提示區(qū)，當(dāng)前的信息提示區(qū)您按此處顯示當(dāng)前時間，圖中顯示的時間為4 月 15 日 8 時 34 分此部分為功能鍵提示區(qū)，顯示F1F4 鍵的功能。具體按鍵如上圖所示。7.2 參數(shù)設(shè)置在光譜測量主界面下，按 F1 鍵進(jìn)入光譜測量參數(shù)設(shè)置界面，按 RETURN 鍵返回到光譜

35、測量主界面，如圖在該界面下可設(shè)置光度方式、掃描速度、采樣間隔、波長范圍、縱坐標(biāo)范圍、光源選擇、等。根據(jù)界面下方的提示按相應(yīng)的數(shù)字進(jìn)行各項(xiàng)參數(shù)的設(shè)置。7.3 設(shè)置光度方式在光譜測量模式下， 儀器提供 Abs（吸光度）、T%（透過率）、R%（反射率）、Es（樣品光路能量）和Er（參比光路能量）五中光度方式供您選擇。在光度測量參數(shù)設(shè)置界面下按1 鍵設(shè)置光度方式， 每按一次 1 鍵，五種光度方式之間交替轉(zhuǎn)換，如圖所示。專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程7.4 設(shè)定掃描速度儀器提供快速，中速，慢速三種掃描速度。如果是在寬的波長范圍內(nèi)簡單的了解樣品大概什么地方有吸收峰，峰值為多少

36、時， 可以選擇快速掃描； 如果需要在較小的波長范圍內(nèi)準(zhǔn)確讀取峰的位置和峰值，選擇慢速掃描，可以保證結(jié)果的準(zhǔn)確可靠；中速掃描則是介于二者之間。在光譜測量參數(shù)設(shè)置界面下按2 鍵可進(jìn)行掃描速度的設(shè)置。每按一次2 鍵，中速、快速和慢速之間交替切換，如圖所示專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程7.5 設(shè)置采樣間隔儀器提供的采樣間隔有 0.1nm、0.2nm、0.5nm、 1.0nm、2.0nm、5.0nm 六種，采用的采樣間隔越小， 儀器所繪制的掃描曲線也越精確， 但同時測量所花的時間也會越長。在光譜測量參數(shù)設(shè)置界面下按 3 鍵設(shè)定采樣間隔，每按一次 3 鍵，采樣間隔的值在 0.

37、1nm、 0.2nm、0.5nm、1.0nm、 2.0nm、5.0nm 之間交替切換，如下圖所示專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程7.6 設(shè)置測量波長范圍在光譜測量參數(shù)設(shè)置界面下按4 鍵可進(jìn)行測量波長范圍的設(shè)置，如下圖所示專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程7.7設(shè)置測光值坐標(biāo)范圍在光譜測量參數(shù)設(shè)置界面下5 鍵可進(jìn)行縱坐標(biāo)范圍的設(shè)置，如圖7.8 光源選擇儀器允許您自己選擇光源進(jìn)行光譜測量，但這僅限于 ES（樣品光能量） 和 Er(參比能量）這兩種光度方式。要進(jìn)行光源選擇，首先確定您選擇的光度方式為Es 或 Er。在光譜測量參數(shù)設(shè)置界面下按 6

38、鍵選擇光源，每按一次6 光源在“鎢燈”和“氘燈”之間交替轉(zhuǎn)換，如圖所示專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程暗 流校正，具體操作如下:7.9 測量采用光 量的模式 行 量 首先參考 置好各種 量參數(shù)， 然后參考 行基 校正；最后將裝好 品的比色皿放入 品池內(nèi)（當(dāng)前光路上的 品池），按START/STOP 開始 量，系 將在您 置的波 范 內(nèi) 品 行 描，此 系 提示“正在 行光 描”，您可以 的 察到 描曲 的生成。當(dāng)系 信息提示 回 “ 按START 量” ，表示系 完成 量。 量完成后的 果如 專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程8.0 峰值檢

39、出測量完成后，在光譜測量主界面下，按 F2 鍵可對測量得到的譜線進(jìn)行峰值檢出操作，如圖所示在光譜測量的界面底部，系統(tǒng)提示您輸入閾值，用數(shù)字鍵09 和 “.”輸入閾值，如果輸入錯誤按CANCEL 鍵可清楚當(dāng)前的輸入，輸入完后按ENTER 鍵確認(rèn)，系統(tǒng)設(shè)定完成輸入的閾值后將進(jìn)行峰值檢出并將結(jié)果顯示在界面上；不輸入數(shù)據(jù)按RETURN 鍵可直接退出檢出操作，系統(tǒng)將返回到光譜測量界面。系統(tǒng)接受的閾值的輸入值為整數(shù)或保留小數(shù)點(diǎn)后一位的小數(shù)，范圍為 0.1100.0；輸入超出給定范圍時， 系統(tǒng)將判定輸入的數(shù)值不符合要求，此時系統(tǒng)自動清除已輸入的數(shù)據(jù)，您需要重新輸入。輸入閾值后， 系統(tǒng)即對當(dāng)前譜圖進(jìn)行峰值檢出

40、運(yùn)算，將結(jié)果顯示在畫面上， 在檢出的峰值出標(biāo)示箭頭，在界面下方顯示該峰谷點(diǎn)的波長值和測光值，如圖所示：專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程8.1 試樣池設(shè)置在光譜測量主界面下，按 F3 鍵進(jìn)入試樣池設(shè)置界面，按 RETURN 鍵返回到光譜測量主界面，如圖所示：該界面下的選項(xiàng)使用與光度測量的試樣池設(shè)置界面下的使用相同， 您可以參考光度測量一章的 進(jìn)行操作。9.0 定量測量利用此功能， 您可以對樣品進(jìn)行單波長的定量測定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線等。 定量方法有系數(shù)法和標(biāo)準(zhǔn)曲線法。9.1 進(jìn)入定量測量模式在儀器主界面下根據(jù)提示按 3 鍵選擇定量測量方式， 儀器進(jìn)入定量測量模式， 顯示界面

41、變?yōu)槎繙y量主界面，按 RETURN 鍵返回儀器主界面，如圖所示：專業(yè)文檔供參考，如有幫助請下載。紫外 -可見分光檢測操作規(guī)程退出定量測量時，系統(tǒng)在信息提示區(qū)顯示“數(shù)據(jù)將丟失，繼續(xù)？（是:ENTER,否： CLE ）”的信息提示您對當(dāng)前已測得的數(shù)據(jù)進(jìn)行操作。此時按ENTER 鍵，系統(tǒng)將返回儀器主界面，所有已測得的數(shù)據(jù)將丟失。按CANCEL 鍵，系統(tǒng)退回到定量測量主界面，提示信息變?yōu)椤罢埌碨TART 鍵測量”，您可以繼續(xù)定量測量的操作。下面根據(jù)下圖給出了定量測量主界面的具體介紹：此處“定量測量”表示目前為定量測量模式；“990nm”為當(dāng)前的工作波長；“0.000Abs”表示目前實(shí)時測得的吸光度值。此部分為工作區(qū)， 以表格的形式顯示具體測量的數(shù)據(jù)， 每屏可顯示最多 9 個測量數(shù)據(jù)值，超過則會自動分屏顯示。此部分為信息提示區(qū)，當(dāng)前的信息提示您按 START/STOP 鍵開始測量。此處顯示當(dāng)前時間，圖中顯示的時