培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、培養(yǎng)液中酵母菌 種群數(shù)量的變化,酵母菌的種群數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的? 酵母菌用肉眼看不見,怎樣才能計(jì)數(shù),一、血球計(jì)數(shù)板,1、血球計(jì)數(shù)板的使用方法步驟,計(jì)數(shù): 稍待片刻(約5min),待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部后,低倍鏡下找到位置,高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄,鏡檢計(jì)數(shù)室: 在加樣前,先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物,則需清洗,吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù),加樣品: 將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋蓋玻片,用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液,滴于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去,2、血球計(jì)數(shù)板的使用注意事項(xiàng),從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前,要將試管輕輕震蕩幾下,這樣使酵母菌分布均

2、勻,提高計(jì)數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性,誤差小,如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多,難以數(shù)清,應(yīng)當(dāng)對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于酵母菌的計(jì)數(shù)。具體方法是:搖勻試管,取1mL酵母菌培養(yǎng)液,加入成倍的無菌水稀釋,稀釋n倍后,再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有45個(gè)酵母細(xì)胞為宜。特別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計(jì)數(shù),對(duì)于壓在方格界線上的酵母菌應(yīng)當(dāng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù),另兩邊不計(jì)數(shù),對(duì)每個(gè)樣品可計(jì)數(shù)三次,再取其平均值,計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)不時(shí)調(diào)節(jié)焦距,才能觀察到不同深度的菌體,血球計(jì)數(shù)板使用后,用自來水沖洗,切勿用硬物洗刷,以免損壞網(wǎng)格,血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu),血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器

3、,上面刻有一個(gè)方格網(wǎng),大方格,中方格,小方格,方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格,其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室,供微生物計(jì)數(shù)用,大方格(計(jì)數(shù)室)的長(zhǎng)和寬各為1mm,深度為0.1mm,即1mm1mm0.1mm,其容積為0.1mm3,中方格,計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格,1625型: 即大方格內(nèi)分為16中格,每一中格又分為25小格,2516型: 即大方格內(nèi)分為25中格,每一中格又分為16小格,不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造,其每一大方格都是由1625=2516=400個(gè)小方格組成,2、計(jì)數(shù),1625型: 一般取四角的四個(gè)中方格(100個(gè)小方格)計(jì)數(shù),2516型: 一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格(80個(gè)小方格)的細(xì)胞數(shù)

4、,3、計(jì)算,以1mm1mm0.1mm型為例,計(jì)數(shù)室容積為0.1mm3,由400個(gè)小方格組成,每個(gè)小方格平均細(xì)胞數(shù)(n) 40010000.1 = 4n106,1mL培養(yǎng)液酵母細(xì)胞個(gè)數(shù),若待測(cè)液是由1ml培養(yǎng)液稀釋后而來的,則: 1mL培養(yǎng)液酵母細(xì)胞個(gè)數(shù) = 每個(gè)小方格平均細(xì)胞數(shù)(n) 40010000.1稀釋倍數(shù) = 4n106 稀釋倍數(shù),例1 通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù),若計(jì)數(shù)室為1mm1mm0.1mm方格,由400個(gè)小方格組成。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后,算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌,則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個(gè),2108,例2 檢測(cè)員將1 mL水樣稀釋10倍后,用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量;將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上,用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室,并用濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由2516400個(gè)小格組成,容納液體的總體積

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