漿膜腔積液檢驗

1、漿膜腔積液檢驗,第六小組組員：鄭錢，周棟，朱鑫宇，朱允嵩 鄒小玲，劉婉君，倪佳麗，袁麗芬，鐘聰聰,主要內(nèi)容,第一節(jié) 概述 第二節(jié) 漿膜腔積液理學(xué)檢驗 第三節(jié) 漿膜腔積液化學(xué)檢驗 第四節(jié) 漿膜腔積液顯微鏡檢驗 第五節(jié) 漿膜腔積液檢驗的臨床應(yīng)用,第一節(jié) 概述,一、漿膜腔積液的形成 二、標(biāo)本采集與處理,漿膜腔積液的形成,胸膜腔 人體漿膜腔 腹膜腔 心包腔 20ml 在正常情況下 50ml 1530ml 在腔內(nèi)主要起潤滑作用，一般不易采集,在病理情況下可以形成漿膜腔積液 胸腔積液 根據(jù)部位可分為 腹腔積液 心包腔積液 滲出液 根據(jù)產(chǎn)生原因及性質(zhì)可分 漏出液,標(biāo)本采集與處理,標(biāo)本一般由臨床醫(yī)生行漿膜腔穿

2、刺術(shù)獲得 留取中段液體于4支試管，每管12ml 第1管細菌學(xué)檢查 第2管生化及免疫學(xué)檢查 第3管細胞學(xué)檢查 第4管觀察積液的凝固性,第二節(jié)漿膜腔積液理學(xué)檢驗,一、外觀 二、凝固性 三、比重,外觀顏色,正常情況下，積液為清亮、淡黃色的液體 病理情況下，一般漏出液顏色淺，滲出液顏色深。 （1）紅色：由于出血量和出血時間的不同，可致積液呈淡紅色、暗紅色或鮮紅色等，常見于穿刺損傷、結(jié)核、腫瘤、內(nèi)臟損傷以及出血性疾病等,2）白色：化膿性感染時大量膿細胞存在可使色澤呈乳酪樣。見于真性乳糜液和假性乳糜液，前者見于胸導(dǎo)管或淋巴管梗阻與破裂引起；后者見于積液含有大量脂肪變性細胞。 （3）其他顏色：綠色見于銅綠假

3、單胞菌感染或膽汁混入，棕色多由阿米巴膿腫破潰進入胸腔或腹腔所致，黑色多由曲霉菌感染引起,外觀透明度,可用“清晰透明”“微渾”“渾濁”描述。 漏出液為清晰透明液體。 滲出液常因含大量細胞、細菌而呈現(xiàn)不同程度混濁。 乳糜液因含大量脂肪也呈混濁外觀,凝固性,可報告“凝固”“不凝固”。 漏出液中因含纖維蛋白原少，一般不易凝固。 滲出液因含較多的纖維蛋白原以及細胞核組織碎解產(chǎn)物，往往會自行凝固或有凝塊出現(xiàn)，但滲出液中如含有大量纖維蛋白溶解酶時，其將纖維蛋白原降解，也可導(dǎo)致積液不凝固,比重,常用比重計法、折射儀法或硫酸銅比重法 漏出液比重1.018,第三節(jié) 漿膜腔積液化學(xué)檢驗,一、蛋白質(zhì)檢查 二、葡萄糖定

4、量 三、脂類測定 四、酶學(xué)檢查 五、腫瘤標(biāo)志物,蛋白質(zhì)檢查,黏蛋白定性試驗 漿膜上皮細胞在炎性反應(yīng)的刺激下分泌粘蛋白量增加，粘蛋白是一種酸性糖蛋白，等電點為PH3-5，因此可在稀乙酸中出現(xiàn)白色沉淀。 漏出液為陰性 滲出液為陽性 但實際工作中并不能單靠本試驗來鑒別, 最好由蛋白定量來確定。 注意：標(biāo)本應(yīng)離心；結(jié)果觀察仔細；最好有陽性對照,蛋白質(zhì)定量檢查（積液蛋白電泳） 測定方法與血清蛋白定量相同 滲出液蛋白質(zhì) 30g/L ；積液總蛋白/血清總蛋白比值 0.5； 漏出液蛋白質(zhì) 25g/l ；積液總蛋白/血清總蛋白比值0.5; 白蛋白梯度（血清/積液白蛋白梯度，SAAG）： 滲出液SAAG11g/L

5、；漏出液SAAG 11g/L,葡萄糖定量,測定方法與血清葡萄糖定量相同。 漏出液：葡萄糖含量與血糖相近或稍低些。 滲出液：葡萄糖因受細菌或炎癥細胞的酵解作用，積液中葡 萄糖含量降低（2.22mmol/L） 化膿性細菌感染 1.1mmol/L 結(jié)核性3.0mmol/L 腫瘤性積液一般不低于3.3mmol/L,脂類測定,酶學(xué)檢查,1.乳酸脫氫酶（LD） 主要用于鑒別滲出液與漏出液、良性與惡性積液。 漿膜腔積液中LD200U/L，積液LD/血清 LD比值0.6可作為滲出液的指標(biāo)。在各類滲出液中化膿性感染積液LD活性癌性結(jié)核性正常。LD同功酶測定如 LD3、LD4、LD5或僅LD5增高可疑為惡性腫瘤。

6、 2.溶菌酶（LZM） 結(jié)核性積液中溶菌酶含量超過30mg/L，積液和血清中溶菌酶比值1.0，明顯高于癌性積液、結(jié)締組織病。因此測定積液中溶菌酶對結(jié)核性胸膜炎的診斷有幫助，連續(xù)觀察可估計預(yù)后。而癌細胞不含溶酶體，無LZM產(chǎn)生，故癌性積液LZM無增高,同時檢測LZM和LD有助于鑒別積液性質(zhì),3.腺苷脫氫酶（ADA） ADA大于100U/L應(yīng)考慮為結(jié)核性，結(jié)核性 癌性非炎癥性積液，當(dāng)抗結(jié)核藥物治療有效時，其胸腹炎內(nèi)ADA也應(yīng)隨之下降，因此也能作為抗結(jié)核治療效觀察指標(biāo),腫瘤標(biāo)志物,1.癌胚抗原（CEA ）：CEA是一種分子量較大的糖蛋白，當(dāng)積液中CEA20g/L，積液CEA/血清CEA比值1時，應(yīng)高

7、度懷疑為癌性積液。有時強調(diào)胸水CEA/血清CEA比值4.3是惡性病變的一個指標(biāo)。 2.鐵蛋白（Ft）：癌性積液中鐵蛋白多大于1500g/L，結(jié)核性時也升高但一般小于600g/L ，因此如果與溶菌酶一起測定對癌性和結(jié)核性鑒別則有價值，癌性積液鐵蛋白明顯升高，積液Ft/血清Ft1，而溶菌酶含量不高；結(jié)核性者兩者均升高，溶菌酶升高極為明顯,第四節(jié) 漿膜腔積液顯微鏡檢驗,一、細胞總數(shù)及有核細胞計數(shù) 二、有核細胞分類 三、細胞學(xué)檢查與染色體檢查 四、病原生物學(xué)觀察,細胞總數(shù)及有核細胞計數(shù),同腦脊液細胞總數(shù)和白細胞計數(shù) 方法有直接計數(shù)法和稀釋計數(shù)法兩種； 應(yīng)將全部有核細胞（包括間皮細胞）都列入細胞計數(shù)內(nèi)

8、參考范圍： 紅細胞：無 有核細胞：少許，以單核細胞為主,注意事項： 計數(shù)應(yīng)在標(biāo)本采集后1小時內(nèi)完成 計數(shù)前應(yīng)混勻標(biāo)本 應(yīng)計數(shù)上下2個計數(shù)池，共計10個大方格 因穿刺引起的出血，需要校正,臨床意義： 紅細胞計數(shù)對鑒別漏出液與滲出液意義不大。若積液中紅細胞100 10 9/L,見于創(chuàng)傷、惡性腫瘤、結(jié)核病及穿刺損傷。 漏出液中白細胞在300 106/L以下；滲出液白細胞較多，在500 106/L以上,有核細胞分類,1.方法：積液離心 取沉淀制成涂片 瑞氏染色 油鏡分類 2.臨床應(yīng)用： 1）漏出液：細胞較少，以淋巴細胞和間皮細胞為主 2）滲出液：細胞數(shù)較多，各種細胞增加,中性粒細胞增多：常見于化膿性炎

9、癥和結(jié)核性積液早期，以化膿性滲出液中性粒細胞增多最明顯，常1000106/L. 淋巴細胞：數(shù)量增多提示存在慢性炎癥、病毒、結(jié)核菌感染或結(jié)締組織病所致滲出液，少量淋巴細胞亦見于漏出液。 嗜酸性粒細胞增多：10%以上為增多。腹腔積液中增多見于充血性心力衰竭、慢性腹膜透析、血管炎、淋巴瘤等。胸腔積液中增多見于血胸和氣胸，也見于肺梗死、寄生蟲或真菌感染、間皮瘤等,間皮細胞增多：瑞特染色下細胞偏大，圓形或橢圓形，核大，位于中心或偏位，核仁較大有13個，均為紫色，含有少數(shù)空泡，滲出液中形態(tài)可能不規(guī)則，有時與惡性細胞難于區(qū)分。見于惡性腫瘤，淤血等。 漿細胞：明顯增多可能為多發(fā)性骨髓瘤浸潤漿膜所引起。 組織細

10、胞：比白細胞大，細胞染色較淡，核呈腎形，偏位，染色質(zhì)致密，胞質(zhì)多呈泡沫狀。見于淤血或惡性腫瘤等,中性粒細胞,間皮細胞,淋巴細胞,細胞學(xué)檢查與染色體檢查,1.細胞學(xué)檢查：若遇到可疑細胞或懷疑惡性積液時，應(yīng)離心，染色查找癌細胞。積液中找到癌細胞是診斷惡性腫瘤的有力證據(jù)，但難以確定其的來源。 2.染色體檢查：診斷惡性腫瘤陽性率較高，可達75%左右。主要有染色體數(shù)量變化、染色體形態(tài)異常,病原生物學(xué)觀察,1.微生物學(xué)檢查：如標(biāo)本通過一般性狀、顯微鏡以及化學(xué)檢查已肯定為漏出液，一般則無檢查細菌的必要； 如肯定為或疑為滲出液，則應(yīng)經(jīng)無菌操作離心沉淀，取沉淀物作涂片染色（革蘭氏染色、抗酸染色、真菌）檢查及細菌

11、培養(yǎng)。 2.寄生蟲檢驗：取成渣在鏡下找蟲卵或微絲蚴。乳糜積液中可找到微絲蚴；包蟲病胸腔積液可找到棘球蚴的頭節(jié)和小鉤；阿米巴胸腔積液進行碘液染色可找到阿米巴滋養(yǎng)體,第五節(jié)漿膜腔積液檢驗的臨床應(yīng)用,一級檢查：顏色、透明度、比重、Rivalta試驗、總蛋白、細胞計數(shù)及分類 二級檢查：乳酸脫氫酶、腺苷脫氫酶、溶菌酶、C反應(yīng)蛋白、糖蛋白 三級檢查：癌胚抗原、腫瘤特異性抗原、蛋白質(zhì)組分分析、同工酶譜分析,幾種常見滲出液特點,1.膿性滲出液：黃色渾濁、含有大量膿細胞，顯微鏡下可見脂肪滴、脂肪結(jié)晶、膽固醇結(jié)晶。常見于葡萄糖球菌、肺炎球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、放線菌等感染。 2.漿液性滲出液：黃色黏稠液體，半透明狀，蛋白質(zhì)3050g/L，細胞數(shù)為（200500）106/L，無細菌者葡萄糖含量較高，結(jié)核性葡萄糖含量較低。常見于結(jié)核性、化膿性積液,3.血性滲出液：積液呈不同程度的紅色、暗紅甚至果醬色。常見于惡性腫瘤、結(jié)核、外傷及肺梗死等。 4.乳糜性滲出液：積液呈乳白色混濁，以脂肪為主，因胸