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文檔簡介

1、用紙層析法分離鐵離子和銅離子,綠色植物的細(xì)胞中含有豐富的色素,許多色素結(jié)構(gòu)相近,性質(zhì)相似,如何才能將它們分離開來呢,1903年,俄國植物學(xué)家Mikhail Tswett 最先解決了這一難題。他采用填充有CaCO3細(xì)粒子的玻璃柱,將植物色素的混合物(葉綠素和葉黃素)加于柱頂端,然后以溶劑淋洗,被分離的組分在柱中顯示了不同的色帶,他稱之為色譜。這種方法被稱為色譜法,常用于分離結(jié)構(gòu)相近、物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)相似物質(zhì),紙層析法也是色譜分析法的一種,色譜分析法,一、紙層析法基本原理,惰性支持物 固定相 流動相,由于吸附在濾紙上的樣品的各組分在水(固定相)或有機(jī)溶劑(流動相)中的溶解能力各不相同,各組分會在

2、兩相之間產(chǎn)生不同的分配現(xiàn)象,遵循相似相溶原理,濾紙: 水: 有機(jī)溶劑,樣品中親脂性強(qiáng)的成分在_相中分配得多一些,隨流動相移動的速度就_一些;而親水性強(qiáng)的成分在_相中分配得多一些,隨 相移動的速度就_一些。 隨著流動相的移動,性質(zhì)不同的組分就分離在濾紙的不同位置上, 實(shí)現(xiàn)了分離,閱讀課本第三段填空,流動,快,固定,流動,慢,二、紙層析法分離Fe3+和Cu2,一)實(shí)驗(yàn)原理 含有Cu2和Fe3的水溶液涂在濾紙一端,丙酮作展開劑,在濾紙的毛細(xì)作用下,展開劑攜帶Cu2和Fe3沿濾紙纖維向上移動的速度不同,一段時間后,Cu2和Fe3距起點(diǎn)的距離會不同,從而達(dá)到分離的目的,固定相: 流動相,丙酮,水,2、裁

3、紙,3、畫原點(diǎn),6、展開,7、顯色,裁剪適當(dāng)尺寸的濾紙條,濾紙不可觸及試管的內(nèi)壁,紙條末端浸入展開劑約0.5cm,不能讓試樣點(diǎn)浸入展開劑,靜置,二)操作方法,1、配制試樣溶液,離濾紙末端約2cm處鉛筆畫一原點(diǎn),4、點(diǎn)樣,用毛細(xì)管取樣品溶液,輕輕點(diǎn)樣于原點(diǎn)上,晾干,重復(fù)35次。斑點(diǎn)直徑需0.5cm,5、加展開劑,不能粘到試管壁上,約2cm,試樣點(diǎn),將濾紙置于濃氨水試劑瓶口上方,進(jìn)行氨熏,交流與討論,顯色反應(yīng),點(diǎn)樣為什么要重復(fù)35次? 斑點(diǎn)的直徑為何不宜太大,2. 為什么不要讓試樣點(diǎn)接觸展開液,斑點(diǎn)過大會導(dǎo)致試樣各組分在分離過程中色帶容易出現(xiàn)重疊,增加試樣中各組分的含量,試樣接觸展開液會溶解在展開

4、液中導(dǎo)致無法分離,問題與解決,1.下列關(guān)于紙層析法實(shí)驗(yàn)的說法正確的是(,A.濾紙作為固定相,濾紙上吸附的水作為流動相 B.濾紙作為惰性支持物,濾紙上吸附的水作為流動相 C.濾紙上吸附的水作為固定相,不溶于水的有機(jī)溶劑 作為流動相 D.濾紙上吸附的水作為流動相,不溶于水的有機(jī)溶劑 作為固定相,C,鞏固應(yīng)用,2. 色譜分析法是現(xiàn)代分離實(shí)驗(yàn)技術(shù)中的一種,試回答下列問題 (1)已知兩種液態(tài)有機(jī)色素A 與B混合在一起,經(jīng)測定A的親 脂性比B弱,則下列說法正確的是( ) A用溶解過濾法分離,A比B難溶于水 B. 用重結(jié)晶法分離,A在水中的溶解度比B大 C. 用蒸餾法分離,因?yàn)锽的熔沸點(diǎn)高 D. 用紙層析法分離,丙酮為展開劑,下端為A,上端為B,2)紙層析法的原理是( ) A. 萃取原理 B. 毛細(xì)現(xiàn)象 C. 蒸餾原理 D. 相似相溶原理,D,B、D,用粉筆進(jìn)行層析分離紅墨水和藍(lán)墨水的混合物,課外探究,1)為防止水解,飽和FeCl3和CuSO4可加少量 HCl或H2SO4酸化,不影響實(shí)驗(yàn)效果,三、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng),4)濾紙吸水性很強(qiáng),點(diǎn)樣

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