—-細胞工程(課件

1、六 細胞工程,細胞的結構與功能,一、 植物細胞工程,1. 細胞的全能性 （1）概念 生物體的細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能的特性,2）細胞全能性的物質(zhì)基礎 生物體的每一個細胞都包含有該種所特有的全部遺傳物質(zhì)，既發(fā)育成為完整個體所必需的全部基因,3）全能性表達的條件,離體-必要條件 一定的營養(yǎng)物質(zhì)-水 無機鹽 維生素 氨基 酸等 激素-細胞分裂素 生長素 適宜的條件-無菌 溫度 酸堿度,在生物的所有細胞中，受精卵的全能性最高，生殖細胞尤其是卵細胞有較高的全能性,4）全能性的差異性,植物細胞動物細胞（動物細胞中細胞核具有全能,受精卵生殖細胞（配子、精子、卵子）體細胞,體細胞中分化程度低分化程

2、度高,幼嫩衰老,細胞分裂能力強細胞分裂能力,具體表現(xiàn)為,2. 植物組織培養(yǎng),1）原理-植物細胞的全能性,2）過程-脫分化 再分化,離體的器官、組織和細胞,植物激素、無機鹽和糖類等,愈傷組織,胚狀體,有根、莖、葉的試管苗,特點： a. 植物細胞的有絲分裂是植物組織培養(yǎng)基礎,b. 愈傷組織 細胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞,c. 具有光合作用能力的類型是胚狀體以后的結構和個體,脫分化,再分化,再分化,d. 親代與子代保持遺傳的連續(xù)性與穩(wěn)定性,脫分化與再分化的比較,3.植物體細胞雜交,概念 將兩個來自不同植物的體細胞融合成一個雜種細胞并把這雜種細胞培養(yǎng)成新的植物體的方法,

3、過程 原生質(zhì)體制備原生質(zhì)體融合誘導雜種細胞的篩選和培養(yǎng) 雜種植株的再生與鑒定,第二節(jié) 細胞工程簡介二 動物細胞工程,動物細胞工程概述,動物細胞工程,動物細胞培養(yǎng)基本概念,培養(yǎng)液的成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等 原代培養(yǎng)：單個細胞 傳至十代左右 傳代培養(yǎng)：經(jīng)原代培養(yǎng)的細胞 傳40到50代。 細胞株：10到40、50代的細胞，遺傳物質(zhì)沒發(fā)生改變。 細胞系：超過50代的細胞，遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，可無限增殖,動物細胞培養(yǎng)過程,胚胎成幼齡動物的組織器官（細胞來源,單個細胞,原代細胞,細胞株,細胞系,剪碎胰蛋白酶,分離細胞,洗滌、稀釋、分離,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變,遺傳物

4、質(zhì)發(fā)生改變,動物細胞融合,仙臺病毒,融合過程示意圖,單克隆抗體制備過程,植物細胞工程,二、植物組織培養(yǎng),植物組織培養(yǎng)過程,二、植物組織培養(yǎng),植物組織培養(yǎng)應用舉例（一,二、植物組織培養(yǎng),植物組織培養(yǎng)應用舉例（三,人工種子,融合體,雜種細胞,去壁的常用方法,酶解法（纖維素酶、果膠酶等,原生質(zhì)體融合方法,物理法：離心、振動、電刺激等,化學法：聚乙二醇（PEG,三、植物體細胞雜交,過程,三、植物體細胞雜交,過程示意圖,白菜,甘藍,白菜甘藍,三、植物體細胞雜交,植物體細胞雜交應用,核心要點突破,4單克隆抗體的制備 (1)過程,基礎知識梳理,3過程,單克隆抗體的制備過程,核心要點突破,核心要點突破,植物組

5、織培養(yǎng)和植物體細胞雜交,5）動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較,六）細胞分化,3癌細胞 在個體正常發(fā)育過程中，細胞有控制地通過有絲分裂增殖，有秩序地發(fā)生分化，執(zhí)行特定的功能。可是，有時部分細胞由于受到某種因素的作用則發(fā)生轉化，不再進行終未分化，而變成了不受調(diào)節(jié)的惡性增殖細胞，這種細胞即稱為癌細胞。 （1）癌細胞的主要特征 癌細胞的主要特征表現(xiàn)在無限增殖；接觸抑制現(xiàn)象喪失；細胞間的粘著性降低，易分散和轉移；易于被凝集素凝集；粘壁性下降；細胞骨架結構紊亂；產(chǎn)生新的膜抗原；對生長因子需要量降低等方面。 （2）致癌因子及癌基因?qū)W說 凡能引起細胞發(fā)生癌變的因子稱為致因子。主要包括三類：化學致癌因子，物理

6、致癌因子，病毒致癌因子。 一些學者對細胞癌變的機理提出了“癌基因?qū)W說”：認為病毒對細胞的致癌作用是由于病毒基因組中的癌基因引起，而正常細胞中存在的癌基因是在早期進化過程中通過病毒感染而從病毒基因組中獲得。如果細胞癌基因受阻，則細胞能正常發(fā)育；在各種致癌因子作用下，細胞癌基因被活化而使細胞發(fā)生癌變,1、兩個DNA能夠連接在一起的原因 2、抗蟲基因在棉花細胞中表達的過程 3、基因工程的原理 4、蛋白質(zhì)工程中改造基因的兩種方式 5、生產(chǎn)抗蟲作物的優(yōu)點 6、如何從個體水平確定人胰島素基因在大腸桿菌中已經(jīng)表達 7、把目的基因?qū)胫参锖蛣游锓椒ǚ謩e是什么 8、蛋白質(zhì)工程的目的 9、基因工程的工具酶 10、基因工程第一步和第四步分別是什么 11、常用的運載體是12、分子水平確定目的基因已經(jīng)導入受體細胞的方法是,動物胚胎或幼齡動物的組織、器官（取材,細胞懸液,10代細胞,傳代培養(yǎng)