病原微生物第9章腸桿菌科

1、復(fù) 習(xí) 題,1在化膿性感染中，能促感染局限化的細(xì)菌產(chǎn)物是 A血漿凝固酶 B鏈道酶 C透明質(zhì)酸酶 D鏈激酶 E以上都不是,A.金黃色葡萄球菌 B.甲型溶血型鏈球菌 C乙型溶血型鏈球菌 D M蛋白 1可引起風(fēng)濕熱的是 2可引起食物中毒的是 3.常引起感染性心內(nèi)膜炎的致病菌是 4.與腎小球腎炎有關(guān)的抗原蛋白是,攜帶NDM-1的大腸桿菌感染，會導(dǎo)致許多病人出現(xiàn)尿路感染和血液中毒。在已發(fā)現(xiàn)的NDM-1細(xì)菌感染病例中，至少有一例已經(jīng)對所有已知的抗生素具有抗藥性,超 級 細(xì) 菌,NDM-1的大腸埃希菌,第十章 腸桿菌科,知 識 要 點(diǎn),1.掌握： （1）大腸埃希菌的生物學(xué)性狀、致病性。 （2）志賀菌的生物學(xué)

2、性狀、致病性、微生物學(xué)檢查法。 （3）沙門菌的生物學(xué)性狀、致病性、微生物學(xué)檢查法；血清學(xué)診斷和肥達(dá)試驗(yàn)。 2. 熟悉： （1）大腸埃希菌的微生物學(xué)檢查法及防治原則。 （2）志賀菌和沙門菌感染的防治原則； 3.了解： （1）大腸埃希菌在衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查中的意義。 （2）志賀菌感染的免疫性； （3）沙門菌的分類及其感染的免疫性； （4）其他菌屬的致病性,概 述,大多數(shù)為正常菌群,少數(shù)是致病菌，如： 致病性大腸埃希菌、傷寒沙門菌、痢疾志賀菌,腸桿菌科細(xì)菌是一大群寄居在人類和動物腸道中生物學(xué)性狀近似的革蘭陰性桿菌,形態(tài)結(jié)構(gòu),形態(tài)相似。中等大小的革蘭陰性桿菌。多有鞭毛，少數(shù)有莢膜或包膜，致病菌多有菌毛。從

3、形態(tài)上無法區(qū)別,共同特性,生 化 反 應(yīng) 活 潑,致病菌株多不能分解乳糖。 乳糖發(fā)酵試驗(yàn)可初步鑒別腸道致病菌和非致菌,能分解多種糖類和蛋白質(zhì)，形成不同的代謝產(chǎn)物，常以此作為鑒別手段,共同特性,大腸埃希菌 和痢疾志賀 菌，你能 區(qū)分嗎,用鑒別培養(yǎng)基， 不就行了,SSA指示劑為中性紅，分解乳糖產(chǎn)酸的細(xì)菌呈紅色菌落（大腸），不分解乳糖的細(xì)菌呈無色菌落,抗原結(jié)構(gòu)：復(fù)雜,1）O抗原（菌體抗原）：LPS的最外層核心多糖 （2）H抗原（鞭毛抗原） （3）莢膜抗原：如Vi抗原、K抗原,共同特性,對一般消毒劑敏感。 膽鹽、煌綠等染料對大腸埃希菌等非致病菌有選擇性的抑制作用。借選擇培養(yǎng)基來分離致病性腸道菌,抵 抗

4、 力 弱,共同特性,Escherichia,Escherichia 的細(xì)菌一般不致病，是人類和動物腸道中的正常菌群。其中以大腸埃希菌（E.coli）最為重要（代表菌,埃希菌屬,形態(tài)染色,G-桿菌 多有周鞭毛 致病株有菌毛,兼性厭氧、營養(yǎng)要求不高 普通平板：灰白色、光滑、濕 潤、中等大小的菌 落。選擇培養(yǎng)基中菌 落為紅色 液體培養(yǎng)基：均勻混濁生長,培養(yǎng)特性,生化反應(yīng),能發(fā)酵葡萄糖等多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。 大部分菌株迅速發(fā)酵乳糖。 在克氏雙糖管中，斜面和底層均產(chǎn)酸產(chǎn)氣同沙門菌、志賀菌區(qū)分 硫化氫陰性、動力陽性 IMViC 試驗(yàn)為+ + -,抗原結(jié)構(gòu)：復(fù)雜,1）O抗原（菌體抗原）：170種 （2）H抗

5、原（鞭毛抗原）：50種 （3）K抗原：100種,致病性,致病物質(zhì) 所致疾病,致病物質(zhì),黏 附 素：黏附于泌尿道和腸道的細(xì)胞上。 外 毒 素： 1、不耐熱腸毒素和 2、耐熱腸毒素a和b 3、志賀毒素和 4、溶血素A,A,LT的結(jié)構(gòu)和作用部位,B,B,B,B,B,A亞單位：毒素的活性部位 B亞單位：與腸黏膜上皮細(xì)胞表面的GM1神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合后,使A亞單位穿過細(xì)胞膜與腺苷環(huán)化酶作用,腸粘膜細(xì)胞上的腺苷環(huán)化酶,A亞單位,ATP,cAMP,活化,小腸分泌過度，腹瀉,ST的作用： 激活腸粘膜細(xì)胞上的鳥苷環(huán)化酶,GTP,cGMP,液體平衡紊亂，腹瀉,所致疾病,1、腸道外感染 化膿性感染：腹膜炎、闌尾炎、手術(shù)

6、創(chuàng)口感染，體弱者可引起敗血癥。新生兒引起新生兒腦膜炎。 泌尿道感染：為上行感染，尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎。表現(xiàn)為尿頻、排尿困難、血尿和膿尿,腸出血性大腸埃希菌 EHEC (enterohemorrhagic E.coli,腸產(chǎn)毒素性大腸埃希菌 ETEC (enterotoxigenic E.coli,腸侵襲性大腸埃希菌 EIEC (enteroinvasive E.coli,腸致病性大腸埃希菌 EPEC (enteropathogenic E.coli,腸集聚性大腸埃希菌EAEC (enteroaggregative E.coli,2、腸道感染：胃腸炎,腸產(chǎn)毒素性大腸埃希菌(ETEC,疾?。?

7、歲以下嬰幼兒腹瀉和旅行者腹瀉 癥狀： 從輕微的腹瀉至水瀉，有惡心、低熱 作用部位：小腸粘膜細(xì)胞 致病物質(zhì)：定植因子、 不耐熱腸毒素(LT) 、耐熱腸毒素(ST,腸侵襲性大腸埃希菌 （ EIEC,疾病：較大兒童和成人腹瀉。 癥狀：發(fā)熱、腹痛、腹瀉、膿血便和有里急后重。 類似細(xì)菌性痢疾。 作用部位：大腸 致病物質(zhì)：內(nèi)毒素 致病機(jī)理：不產(chǎn)生腸毒素，侵襲和破壞結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞，造成炎癥和潰瘍，產(chǎn)生黏液膿血便,腸致病性大腸埃希菌（ EPEC,疾病：嬰幼兒腹瀉。 癥狀：發(fā)熱、嘔吐、腹瀉、粘液便。 作用部位：小腸 致病物質(zhì)：不產(chǎn)生毒素，粘附素破壞微絨毛刷狀緣，絨毛萎縮、上皮細(xì)胞排列紊亂，功能受損,腸出血性大

8、腸埃希菌(EHEC,疾?。撼鲅越Y(jié)腸炎，溶血性尿毒綜合征 多見于5歲以下兒童。 癥狀：劇烈腹痛、水瀉、大量鮮血便。 作用部位：小腸遠(yuǎn)端、結(jié)腸 致病物質(zhì)：菌毛、志賀毒素等。 致病機(jī)理：志賀毒素滅活核糖體，終止蛋白質(zhì)合成。引起腸黏膜水腫、出血、液體蓄積、腸黏膜脫落、腸細(xì)胞水腫、壞死、引起血性便。 細(xì)菌血清型：O157：H7,視頻,疾?。簨雰焊篂a。 癥狀：持續(xù)性水瀉、嘔吐、脫水、低熱、偶有血便。 致病物質(zhì)：毒素和黏附素 致病機(jī)理：聚集性黏附腸道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致微絨毛變短，單核細(xì)胞浸潤和出血,腸集聚性大腸埃希菌（EAEC,微生物學(xué)檢查,病人標(biāo)本中細(xì)菌的分離與鑒定 1、標(biāo)本的采集：不同的病變采集不同的標(biāo)本

9、 2、分離培養(yǎng)與鑒定： 選擇培養(yǎng)基，生化反應(yīng)鑒定 致病性大腸埃希菌須用血清學(xué)試驗(yàn)定型 必要時鑒定腸毒素（ELISA、基因探針等） 尿路感染：確定大腸埃希菌+計(jì)數(shù)， 尿菌量10萬/mL時才有診斷意義,微生物學(xué)檢查,衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查 大腸菌群數(shù)：每1000ml樣品中的大腸菌群數(shù),微生物學(xué)檢查,標(biāo)準(zhǔn)： 大腸菌群數(shù)飲水3個/ 1000ml 果汁、瓶裝汽水 5個/100ml,尿路感染：確定大腸埃希菌+計(jì)數(shù)， 尿菌量10萬/mL時才有診斷意義,防治原則,預(yù)防：菌毛疫苗,治療： 磺胺藥、慶大霉素等,Shigella,志賀菌屬,志賀菌屬是人類細(xì)菌性痢疾的病原菌，俗稱痢疾桿菌（dysentery bacteriu

10、m,主要致病特點(diǎn)是能侵襲結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞，引起自限性化膿性感染病灶,形態(tài)染色與培養(yǎng)特性,無鞭毛、有菌毛 生化反應(yīng)不活躍 SS培養(yǎng)基上呈無色半透明菌落 克氏雙糖管斜面不發(fā)酵底層產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 硫化氫陰性、動力陰性,抗原構(gòu)造與分類,我國以福氏志賀菌引起的菌痢最常見,O抗原,K抗原 阻抑抗O抗體與O抗原結(jié)合,分為4群44個血清型（包括亞型,對理化因素的抵抗力較其他腸道桿菌為弱。 對氯霉素、鏈霉素、氟哌酸、四環(huán)素、痢特靈、黃連素、磺胺類等藥物敏感，但容易出現(xiàn)耐藥變異株,抵抗力,抗原結(jié)構(gòu)、生化反應(yīng)、毒力及對藥物的敏感性易發(fā)生變異,變異,致病物質(zhì),侵襲力：菌毛黏附回腸末端和結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞， 并侵入生長繁殖，

11、產(chǎn)生炎癥,派伊爾淋巴 結(jié)的M細(xì)胞,通過型分泌系統(tǒng)向上皮細(xì) 胞和巨噬細(xì)胞分泌4種蛋白,志賀菌,IpaA IpaB,黏附并侵入,IpaC,IpaD,誘導(dǎo)細(xì)胞膜凹陷 導(dǎo)致細(xì)菌內(nèi)吞,志賀菌溶解吞噬小泡 進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)內(nèi)繁殖,宿主細(xì)胞內(nèi)肌動纖維 的重排,推動細(xì)菌進(jìn)入 毗鄰細(xì)胞細(xì)胞到細(xì)胞傳播,細(xì)菌逃避了免疫的清除 作用而得到了自身保護(hù),通過誘導(dǎo)細(xì)胞程序性死亡 從吞噬中得到了存活,1.侵襲力,作用,1.侵襲力,2.內(nèi)毒素,內(nèi)毒素,腸黏膜,通透性,內(nèi)毒素 的吸收,促進(jìn),發(fā) 熱 神志障礙 中毒性休克,作用,內(nèi)毒素,腸黏膜,破壞,炎癥 潰瘍,形成,典型的膿血 黏液便,內(nèi)毒素,腸壁自主 神經(jīng)系統(tǒng),作用于,腸功能紊亂,腸

12、蠕動失調(diào)和痙攣,腹痛里急后重,3.外毒素：志賀毒素由1個A亞單位和5個B亞單位組成,毒素作用:引起上皮細(xì)胞微絨毛的破壞。個別病人志賀毒素可介導(dǎo)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，導(dǎo)致溶血性尿毒綜合征(HUS,所致疾病細(xì)菌性痢疾,傳染途徑： 糞-口,傳染源： 病人和帶菌者,臨床表現(xiàn),急性細(xì)菌性痢疾,急性典型：發(fā)熱、腹痛、里急后重,粘液膿血便,急性中毒型：小兒中毒型,慢性細(xì)菌性痢疾：病程遷移二月以上,視頻,中毒性痢疾病人,免 疫 性,志賀菌感染局限于腸粘膜，一般不入血，消化道黏膜表面的分泌型IgA（SIgA）為主，病后免疫力短暫,及時送/暫用30%甘油緩沖水保存,SS平板（無色透明小菌落,血清學(xué)反應(yīng)（玻片凝集,

13、最后診斷,分離培養(yǎng),新鮮膿血便/肛拭,雙糖培養(yǎng)基（生化反應(yīng),快速診斷,熒光菌球試驗(yàn),協(xié)同凝集試驗(yàn),微生物學(xué)檢查,防治原則,1）控制傳染源、切斷傳播途徑、增進(jìn)機(jī)體免疫力 （2）口服減毒活疫苗,預(yù)防,多種抗菌素可選擇，但很易引起耐藥性,治療,Salmonella,沙門菌屬,目的要求,掌握：對人致病的沙門氏菌的種類、致病物質(zhì)和所致疾??；肥達(dá)試驗(yàn)的原理、結(jié)果分析與判斷。 熟悉：沙門氏菌的主要生化反應(yīng)、特異性預(yù)防。 了解：沙門氏菌的形態(tài)、抵抗力及變異,概 述,是一大群寄生于人類和動物腸道中，生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造相似的革蘭氏陰性桿菌,菌群菌型甚多，僅少數(shù)對人致病（傷寒沙門菌、副傷寒沙門氏菌等,有些沙門菌對動

14、物致病，可傳染人，引起食物中毒，如鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、鴨沙門菌、豬霍亂沙門菌等,生物學(xué)性狀,大都周身鞭毛、有菌毛,不分解乳糖 在SS選擇培養(yǎng)基上形成無色菌落,克氏雙糖管中，斜面不發(fā)酵，底層產(chǎn) 酸產(chǎn)氣（傷寒沙門菌除外），硫化氫 陽性或陰性、動力陽性,常見沙門菌的主要生化特性,抗原構(gòu)造與分類,O抗原：脂多糖，群特異性 O抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM型抗體,H抗原：鞭毛蛋白 H抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG型抗體,Vi抗原：多糖，與毒力有關(guān)。測定Vi抗體有助于檢出傷寒及副傷寒帶菌者,抵 抗 力,較差，對一般消毒劑敏感,但對膽鹽、煌綠等的耐受性較其他腸道菌強(qiáng)，故膽鹽、煌綠可用作沙門菌選擇培養(yǎng)基，利于分離糞便中

15、的沙門氏菌,致 病 物 質(zhì),1、侵襲力：菌毛粘附作用,2、內(nèi)毒素：發(fā)熱、白細(xì)胞減少、中毒性休克,3、腸毒素：類似ETEC產(chǎn)生的腸毒素、引起水樣腹瀉,1.侵襲力,具有耐酸應(yīng)答基因,氧化酶、超氧化物歧化酶,Vi抗原,1、腸熱癥（傷寒和副傷寒,傳染源：病人和帶菌者、水源 傳播途徑： 糞口 典型病程：分四個階段,所 致 疾 病,潛伏期,傷寒沙門菌經(jīng)口到小腸，侵入小腸末端的M細(xì)胞，被巨噬細(xì)胞吞噬后在細(xì)胞內(nèi)繁殖。部分細(xì)菌通過淋巴液到達(dá)腸系膜淋巴結(jié)大量繁殖,初期,細(xì)菌隨淋巴液經(jīng)胸導(dǎo)管進(jìn)入血液（第一次菌血癥），并擴(kuò)散到肝、脾、腎、膽、骨髓等到部位。 此階段為臨床上的發(fā)病第一周，出現(xiàn)發(fā)熱、不適、全身疼痛等前驅(qū)期

16、癥狀,極期,在肝、脾、腎、膽、骨髓等部位繁殖。由巨噬細(xì)胞帶入血液（第二次菌血癥），膽囊中細(xì)菌通過膽汁進(jìn)入腸道，部分隨糞便排出，部分再次進(jìn)入腸壁淋巴組織而激發(fā)超敏反應(yīng)，導(dǎo)致局部壞死和潰瘍，嚴(yán)重可造成腸出血及腸穿孔，腎中的細(xì)菌可隨尿排出。 此階段為臨床上的第2、3周，出現(xiàn)持續(xù)高熱、相對緩脈、肝脾腫大、白細(xì)胞下降、皮膚玫瑰疹、全身中毒癥狀顯著,第2、3周取什么樣品為標(biāo)本？抗體的水平如何,恢復(fù)期,進(jìn)入恢復(fù)階段。病愈后部分患者可自糞便或尿液繼續(xù)排菌3周至3個月，甚至1年，稱恢復(fù)期帶菌者。約有3%的傷寒患者成為慢性帶菌者,膽囊-腸道-糞排菌 皮膚-玫瑰疹 腎-尿排菌 肝脾-腫大,傷寒和副傷寒桿菌,小腸黏膜

17、,腸系膜淋巴結(jié),派伊爾淋巴結(jié)的M細(xì)胞,進(jìn)入血液,再次進(jìn)入血液,第一次菌血癥,第二次菌血癥,腸熱癥（傷寒和副傷寒）的致病過程,糞口途徑,傷 寒 瑪 麗,2、腸炎型食物中毒,臨床表現(xiàn)：發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。為攝入污染的食物，細(xì)菌在腸內(nèi)繁殖所至。 引起細(xì)菌：鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌,視頻,3、敗血癥,引起細(xì)菌：豬霍亂沙門菌、丙型副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門菌。 臨床表現(xiàn)：高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血,免 疫 性,腸熱癥病后產(chǎn)生牢固免疫，細(xì)胞免疫為主。 特異性體液免疫也有輔助殺菌的作用,傷寒和副傷寒 食物中毒 敗血癥 第1周取外周血 可疑食物 血液 第1-3周取骨髓液 嘔吐物

18、 第2周起糞便 第3周取尿液 糞便,微生物學(xué)檢查：查病原,標(biāo)本,SS平板,生化反應(yīng),血清學(xué)鑒定,雙糖發(fā)酵等,凝集試驗(yàn),血清學(xué)檢查：查抗體,1、肥達(dá)試驗(yàn)（Widal test,原理：用已知傷寒沙門菌菌體O抗原、H抗原以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌和希氏沙門菌H抗原的診斷菌液與受檢血清作試管或微孔板凝集試驗(yàn)，測定受檢血清中有無中相應(yīng)抗體及其效價的試驗(yàn),用途：輔助診斷腸熱癥（傷寒副傷寒,2、帶菌者檢查,測Vi抗體，若效價1：10有診斷價值,肥達(dá)氏反應(yīng)的結(jié)果及分析,1、正常值：因隱性感染或預(yù)防接種含有一定量的抗體； 當(dāng)傷寒沙門菌O凝集效價1：80，H凝集效價1：160， 引起副傷寒的沙門菌H凝集效價1：80，有診斷意義,2、動態(tài)觀察：發(fā)病初期和恢復(fù)期雙份血清， 后者有四倍或四倍以上增高才有診斷意義,3、O與H抗體在診斷上的意義,O抗體為IgM，出現(xiàn)早，消退快,H抗體為IgG，出現(xiàn)晚，消退慢,防 治 原 則,早期發(fā)現(xiàn)，隔離治療,預(yù)防：三聯(lián)死疫