方法驗(yàn)證和雜質(zhì)研究

1、化藥質(zhì)控分析方法驗(yàn)證和雜質(zhì)研究化藥質(zhì)控分析方法驗(yàn)證和雜質(zhì)研究 venturepharm pds 2 質(zhì)控分析方法驗(yàn)證質(zhì)控分析方法驗(yàn)證 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 2. 含量方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn) 3. 有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn) 4. 溶出方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn) venturepharm pds 3 質(zhì)控分析方法驗(yàn)證質(zhì)控分析方法驗(yàn)證 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 2. 含量方法驗(yàn)證 3. 有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證 4. 溶出方法驗(yàn)證 venturepharm pds 4 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 v驗(yàn)證內(nèi)容：驗(yàn)證內(nèi)容： 專(zhuān)屬性專(zhuān)屬性 線(xiàn)性線(xiàn)性 范圍范圍 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度 精密度（重復(fù)性、中間精密度和重

2、現(xiàn)性）、精密度（重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、 檢測(cè)限和定量限檢測(cè)限和定量限 耐用性耐用性 系統(tǒng)適用性系統(tǒng)適用性 中國(guó)藥典2010年版二部附錄 a 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指 導(dǎo)原則 venturepharm pds 5 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 專(zhuān)屬性專(zhuān)屬性方法不受雜質(zhì)、降解物、輔料的影響，可正確鑒定被分析物方法不受雜質(zhì)、降解物、輔料的影響，可正確鑒定被分析物 鑒別反應(yīng)：僅被分析物呈正反應(yīng)，陰性對(duì)照呈負(fù)反應(yīng)，結(jié)構(gòu)相似及組分中 的有關(guān)化合物也呈負(fù)反應(yīng)。 雜質(zhì)檢查：加入的雜質(zhì)可與共存物質(zhì)分離并被檢出 與原理不同的可信方法比較；強(qiáng)制降解 含量測(cè)定：比較加入雜質(zhì)或輔料前后的測(cè)定結(jié)果

3、 與可信方法比較測(cè)定結(jié)果（強(qiáng)制降解樣品） 空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，主成分與各雜質(zhì)峰空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，主成分與各雜質(zhì)峰 （該雜質(zhì)峰與其他峰）（該雜質(zhì)峰與其他峰）r2 venturepharm pds 6 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 專(zhuān)屬性試驗(yàn)中需要注意的問(wèn)題專(zhuān)屬性試驗(yàn)中需要注意的問(wèn)題 波長(zhǎng)的選擇； 每次試驗(yàn)時(shí)必須運(yùn)行空白樣品； 試劑、玻璃容器、流動(dòng)相和過(guò)濾介質(zhì)可能會(huì)影響方法的 專(zhuān)屬性。 venturepharm pds 7 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 線(xiàn)性線(xiàn)性在設(shè)計(jì)的測(cè)定范圍內(nèi)，樣品濃度與響應(yīng)值呈線(xiàn)性關(guān)系在設(shè)計(jì)的測(cè)定范圍內(nèi)，樣品濃度與響應(yīng)值呈線(xiàn)性關(guān)系 線(xiàn)性是定量測(cè)定的基

4、礎(chǔ)，設(shè)計(jì)定量測(cè)定的項(xiàng)目，如 雜質(zhì)定量檢查、含量和溶出方法均需要驗(yàn)證其線(xiàn)性 可用同一貯備液精密稀釋后配制，或分別精密稱(chēng)樣 配制。 venturepharm pds 8 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 線(xiàn)性線(xiàn)性在設(shè)計(jì)的測(cè)定范圍內(nèi)，樣品濃度與響應(yīng)值呈線(xiàn)性關(guān)系在設(shè)計(jì)的測(cè)定范圍內(nèi)，樣品濃度與響應(yīng)值呈線(xiàn)性關(guān)系 含量測(cè)定：在80%-120%濃度范圍內(nèi)配制樣品。（考慮含量濃度、含 量均勻度濃度及溶出的濃度，實(shí)際操作采用20%-200%） 相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù)r0.998，y軸截距在軸截距在100%響應(yīng)值的響應(yīng)值的2%以?xún)?nèi)，以?xún)?nèi)，rsd2.0% 雜質(zhì)定量定量測(cè)定：在定量限至一定濃度范圍內(nèi)配制樣品。（考慮

5、實(shí)測(cè) 該雜質(zhì)的值） 相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù)r0.990，y軸截距在軸截距在100%響應(yīng)值的響應(yīng)值的25%以?xún)?nèi)以?xún)?nèi), rsd10% venturepharm pds 9 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 范圍范圍能達(dá)到一定準(zhǔn)確度、精密度和線(xiàn)性的濃度區(qū)間，為規(guī)定值能達(dá)到一定準(zhǔn)確度、精密度和線(xiàn)性的濃度區(qū)間，為規(guī)定值 涉及到定量測(cè)定的檢測(cè)項(xiàng)目均需要對(duì)范圍進(jìn)行驗(yàn)證，如含量測(cè) 定、含量均勻度、溶出度或釋放度、雜質(zhì)定量試驗(yàn)等。 分析方法的范圍應(yīng)根據(jù)具體分析方法以及對(duì)線(xiàn)性、準(zhǔn)確度、精 密度的結(jié)果和要求確定，無(wú)特殊要求時(shí)，通常采用以下標(biāo)準(zhǔn)： venturepharm pds 10 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方

6、法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 范圍范圍能達(dá)到一定準(zhǔn)確度、精密度和線(xiàn)性的濃度區(qū)間，能達(dá)到一定準(zhǔn)確度、精密度和線(xiàn)性的濃度區(qū)間， 為規(guī)定值為規(guī)定值 半成品或成品含量測(cè)試：80%-100%或更寬 含量均勻度：70%-130%，據(jù)劑型特點(diǎn)有差異 溶出度：限度的20%，或下限的-20%至上限的+20% 定量雜質(zhì)：規(guī)定限度的20%，或采用峰面積歸一化法與 含量同測(cè)時(shí)，為雜質(zhì)限度的-20%至含量上限的+20% venturepharm pds 11 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度方法測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值或參考值的接近程度，用回收率表示方法測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值或參考值的接近程度，用回收率表示 準(zhǔn)確度是定量

7、測(cè)定的必要條件，涉及到定量測(cè)定的檢測(cè)項(xiàng)目均需 要驗(yàn)證其準(zhǔn)確度，如雜質(zhì)定量測(cè)定、含量和溶出方法。 分析方法的準(zhǔn)確度能夠確保： 1. 樣品中的待測(cè)物全部溶解 2.待測(cè)物全部從檢測(cè)器中檢出 venturepharm pds 12 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度方法測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值或參考值的接近程度，用回收率表示方法測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值或參考值的接近程度，用回收率表示 配制三個(gè)濃度下各三個(gè)樣品，共九個(gè)樣品平行兩次測(cè)定 回收率：輔料+對(duì)照品 加樣回收率：樣品+對(duì)照品（扣除本底值） q：制劑中某已知雜質(zhì)的回收率如何測(cè)定？(含已知量被測(cè)物的各組分混合物) 含量測(cè)定：配制80%、100%

8、和120%三個(gè)濃度?；厥章试诨厥章试?8.0%-102.0%之之 間，間，rsd 2.0% 定量雜質(zhì)：配制濃度根據(jù)有關(guān)物質(zhì)定量限和該雜限度?；厥章试诨厥章试?0%- 120%之間（雜質(zhì)濃度為定量限時(shí)放寬至之間（雜質(zhì)濃度為定量限時(shí)放寬至70%-130%），），rsd 10% 能否得到制劑能否得到制劑 的全部組分？的全部組分？ venturepharm pds 13 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度 原料藥： 1. 可用已知純度的對(duì)照品或符合要求的原料藥進(jìn)行測(cè)定； 2.用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果 進(jìn)行比較 venturepharm pds 14 1.

9、方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度 制劑： 1. 用含已知量被測(cè)物的各組分混合物進(jìn)行測(cè)定； 2.如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的 被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定（加樣回收試驗(yàn)法） 3.用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果 進(jìn)行比較 venturepharm pds 15 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度 雜質(zhì) ： 1. 往樣品中加入已知量的雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)定； 2.若不可能得到某種雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可把此方法的分析 結(jié)果與另一已驗(yàn)證的或藥典的分析方法獲得的結(jié)果進(jìn)行 比較 。 venturepharm pds 16 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主

10、要內(nèi)容 精密度精密度多次取樣測(cè)定同一均質(zhì)供試品所得結(jié)果間的接近程度多次取樣測(cè)定同一均質(zhì)供試品所得結(jié)果間的接近程度 使用偏差d、標(biāo)準(zhǔn)偏差sd和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差rsd表示 偏差 d=xi-x 測(cè)量值與平均值之差 標(biāo)準(zhǔn)偏差 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 1 1 2 n x)(x sd n i i %100 x sd rsd venturepharm pds 17 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 精密度精密度多次取樣測(cè)定同一均質(zhì)供試品所得結(jié)果間的接近程度多次取樣測(cè)定同一均質(zhì)供試品所得結(jié)果間的接近程度 使用sd和rsd表示時(shí)取樣測(cè)定次數(shù)應(yīng)至少6次。 重復(fù)性：同一分析人員在相同條件下測(cè)定結(jié)果的精密度； 可采用3樣

11、各測(cè)3次或1樣測(cè)6次 含量測(cè)定含量測(cè)定rsd 2.0%，雜質(zhì)定量，雜質(zhì)定量rsd 15% 中間精密度：同實(shí)驗(yàn)室的不同人員、時(shí)間和設(shè)備測(cè)定結(jié)果的精密度 含量測(cè)定含量測(cè)定rsd 2.0%，雜質(zhì)定量，雜質(zhì)定量rsd 20% 重現(xiàn)性：不同實(shí)驗(yàn)室不同分析人員測(cè)定結(jié)果的精密度 venturepharm pds 18 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 檢測(cè)限和定量限檢測(cè)限和定量限被分析物可被檢測(cè)和被準(zhǔn)確定量的最低值被分析物可被檢測(cè)和被準(zhǔn)確定量的最低值 檢測(cè)限：檢測(cè)限：3s/n ；定量限：；定量限：10s/n s主峰信號(hào) ；n主峰附近1-3min處的噪音 q: 含量、溶出測(cè)定？（lod/loq） 雜

12、質(zhì)定性測(cè)定？定量測(cè)定？ （lod/loq） lodloq 未檢出可檢出可定量 venturepharm pds 19 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 耐用性耐用性測(cè)定條件發(fā)生微小變動(dòng)時(shí)測(cè)定條件發(fā)生微小變動(dòng)時(shí),測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度 變動(dòng)因素： 含量測(cè)定：mp5%; ph0.2%; 柱溫5; v20% 有關(guān)物質(zhì)： mp5%; ph0.2%; 柱溫5; v20%; 5nm; 三根色譜柱 若測(cè)試條件要求苛刻，則建議在方法中予以寫(xiě)明。 可接受標(biāo)準(zhǔn)： 含量（有關(guān)物質(zhì)）測(cè)定含量（有關(guān)物質(zhì)）測(cè)定主峰（各雜質(zhì)峰）的拖尾因子主峰（各雜質(zhì)峰）的拖尾因子2.0；主峰與雜；主

13、峰與雜 質(zhì)峰（雜質(zhì)峰與其它成分峰）達(dá)到基線(xiàn)分離；各條件下測(cè)得結(jié)果（質(zhì)峰（雜質(zhì)峰與其它成分峰）達(dá)到基線(xiàn)分離；各條件下測(cè)得結(jié)果（n=6） 的的rsd 2.0% venturepharm pds 20 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 耐用性耐用性 通過(guò)對(duì)改變條件后與標(biāo)準(zhǔn)條件下結(jié)果的比較來(lái)評(píng)估方法的耐用性，改變條 件后與標(biāo)準(zhǔn)條件下的結(jié)果的差異計(jì)算公式如下： difference% =100-100rm/rs rm為改變條件后的含量結(jié)果；rs為標(biāo)準(zhǔn)條件獲得的含量結(jié)果 可接受標(biāo)準(zhǔn)：原料藥與制劑：主成分含量差異1.5% 雜質(zhì)： 雜質(zhì)水平 接受標(biāo)準(zhǔn) 0.2%絕對(duì)值0.05% 0.2%-1.0%相對(duì)

14、值20% 1.0%相對(duì)值10% venturepharm pds 21 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 系統(tǒng)適用性系統(tǒng)適用性對(duì)整個(gè)系統(tǒng)（分析設(shè)備、電子儀器與實(shí)驗(yàn)操作、測(cè)試樣對(duì)整個(gè)系統(tǒng)（分析設(shè)備、電子儀器與實(shí)驗(yàn)操作、測(cè)試樣 品）進(jìn)行評(píng)估的指標(biāo)品）進(jìn)行評(píng)估的指標(biāo) 含量測(cè)定/雜質(zhì)檢查 配制6份同濃度供試品/雜質(zhì)溶液進(jìn)行分析，結(jié)果可接受的標(biāo)準(zhǔn)如下表所示 rsd峰面積rsd保留時(shí)間拖尾因子t及分離度理論塔板數(shù) 含量測(cè)定 （主峰） 2.0%1.0%t2.0,主峰與雜峰基線(xiàn)分離符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定 雜質(zhì)研究 （雜質(zhì)峰） 2.0%1.0%t2.0符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定 venturepharm pds 22 不同分

15、析方法對(duì)驗(yàn)證項(xiàng)目的要求：不同分析方法對(duì)驗(yàn)證項(xiàng)目的要求： 驗(yàn)證項(xiàng)目鑒別雜質(zhì)定性測(cè)定雜質(zhì)定量測(cè)定含量及溶出度等 準(zhǔn)確度-+ 精密度重復(fù)性-+ 精密度中間精密度-+ 專(zhuān)屬性+ 檢測(cè)限-+- 定量限-+- 線(xiàn)性-+ 范圍-+ 耐用性+ venturepharm pds 23 方法再驗(yàn)證方法再驗(yàn)證 某些情況下，需要對(duì)分析方法再次進(jìn)行全面或部分驗(yàn)證，以保證分析某些情況下，需要對(duì)分析方法再次進(jìn)行全面或部分驗(yàn)證，以保證分析 方法可靠。驗(yàn)證內(nèi)容由改變程度決定。方法可靠。驗(yàn)證內(nèi)容由改變程度決定。 原料藥合成工藝改變?cè)纤幒铣晒に嚫淖兛赡芤胄码s質(zhì)，驗(yàn)證雜質(zhì)檢查法和含量測(cè)可能引入新雜質(zhì)，驗(yàn)證雜質(zhì)檢查法和含量測(cè) 定方

16、法的專(zhuān)屬性；定方法的專(zhuān)屬性； 原料藥來(lái)源變更原料藥來(lái)源變更可能影響雜質(zhì)及含量測(cè)定的專(zhuān)屬性和準(zhǔn)確度，需可能影響雜質(zhì)及含量測(cè)定的專(zhuān)屬性和準(zhǔn)確度，需 對(duì)雜質(zhì)檢查法和含量測(cè)定進(jìn)行再驗(yàn)證；對(duì)雜質(zhì)檢查法和含量測(cè)定進(jìn)行再驗(yàn)證； 制劑處方組成改變、輔料變更制劑處方組成改變、輔料變更可能影響鑒別專(zhuān)屬性及含量測(cè)定的可能影響鑒別專(zhuān)屬性及含量測(cè)定的 準(zhǔn)確度，需驗(yàn)證鑒別和含量測(cè)定方法；準(zhǔn)確度，需驗(yàn)證鑒別和含量測(cè)定方法； 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中部分內(nèi)容變化，如質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中部分內(nèi)容變化，如lc測(cè)含量的波長(zhǎng)改變測(cè)含量的波長(zhǎng)改變重新進(jìn)行檢測(cè)重新進(jìn)行檢測(cè) 限、專(zhuān)屬性、準(zhǔn)確度、精密度、線(xiàn)性等內(nèi)容的驗(yàn)證。限、專(zhuān)屬性、準(zhǔn)確度、精密度、線(xiàn)性等內(nèi)容的驗(yàn)

17、證。 venturepharm pds 24 質(zhì)控分析方法驗(yàn)證質(zhì)控分析方法驗(yàn)證 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 2. 含量方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn) 3. 有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證 4. 溶出方法驗(yàn)證 venturepharm pds 25 2. 含量方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn)含量方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn) 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度配制配制80%、100%、120%供試品各三份，分別測(cè)定其含量；各濃度供試品各三份，分別測(cè)定其含量；各濃度 下測(cè)得的平均回收率在下測(cè)得的平均回收率在98.0%-102.0%之間，之間，9個(gè)回收率數(shù)據(jù)的個(gè)回收率數(shù)據(jù)的 rsd2.0% 線(xiàn)性線(xiàn)性取取80%-120%（或（或50%-150%）濃度范圍內(nèi)的）濃度范圍內(nèi)的6份

18、供試液；測(cè)得回歸線(xiàn)份供試液；測(cè)得回歸線(xiàn) 的相關(guān)系數(shù)的相關(guān)系數(shù)r0.998，y軸截距在軸截距在100%響應(yīng)值的響應(yīng)值的2%以?xún)?nèi)，以?xún)?nèi)，響應(yīng)因子的響應(yīng)因子的 rsd2.0%。 重復(fù)性重復(fù)性6份相同濃度供試液，份相同濃度供試液，1人在盡可能相同的條件下測(cè)定，測(cè)得人在盡可能相同的條件下測(cè)定，測(cè)得6份供份供 試液含量結(jié)果的試液含量結(jié)果的rsd 2.0% 中間精密度中間精密度6份相同濃度供試液，分別由份相同濃度供試液，分別由2人用不同儀器測(cè)定，測(cè)得人用不同儀器測(cè)定，測(cè)得12個(gè)含個(gè)含 量結(jié)果量結(jié)果rsd 2.0% 專(zhuān)屬性專(zhuān)屬性空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，主成分與各有關(guān)物質(zhì)峰分離度空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，主成分與各有關(guān)物質(zhì)峰

19、分離度r2，主峰純度，主峰純度 因子因子980 venturepharm pds 26 2. 含量方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn)含量方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn) 檢測(cè)限檢測(cè)限主峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比主峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比s/n3 定量限定量限主峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比主峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比s/n10，6份定量限濃度溶液份定量限濃度溶液 測(cè)得主峰保留時(shí)間的測(cè)得主峰保留時(shí)間的rsd 2.0% 耐用性耐用性考察考察mp5%; ph0.2; 柱溫柱溫5; v20%時(shí)色譜行為時(shí)色譜行為 變化，各測(cè)變化，各測(cè)2次；主峰的拖尾因子次；主峰的拖尾因子2.0；主峰與雜質(zhì)峰達(dá)到基線(xiàn)分離；主峰與雜質(zhì)峰達(dá)到基線(xiàn)分離； 各條件下測(cè)得結(jié)果（

20、各條件下測(cè)得結(jié)果（n=6）的）的rsd 2.0% 系統(tǒng)適用性系統(tǒng)適用性配制配制6份同濃度供試品份同濃度供試品溶液；主峰峰面積溶液；主峰峰面積rsd 2.0%， 保留時(shí)間保留時(shí)間rsd 1.0%, 拖尾因子拖尾因子2.0，理論塔板數(shù)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，理論塔板數(shù)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定， 主峰與雜質(zhì)峰達(dá)到基線(xiàn)分離。主峰與雜質(zhì)峰達(dá)到基線(xiàn)分離。 venturepharm pds 27 質(zhì)控分析方法驗(yàn)證質(zhì)控分析方法驗(yàn)證 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 2. 含量方法驗(yàn)證 3. 有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn) 4. 溶出方法驗(yàn)證 venturepharm pds 28 3. 有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證可接受

21、標(biāo)準(zhǔn) 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度根據(jù)根據(jù)有關(guān)物質(zhì)定量限和該雜限度有關(guān)物質(zhì)定量限和該雜限度，配制三個(gè)濃度的溶液各，配制三個(gè)濃度的溶液各 三份三份。各濃度下的平均各濃度下的平均回收率在回收率在80%-120%之間（雜質(zhì)濃度為定量限之間（雜質(zhì)濃度為定量限 時(shí)放寬至?xí)r放寬至70%-130%），），rsd 10% 線(xiàn)性線(xiàn)性在定量限至一定濃度范圍在定量限至一定濃度范圍（考慮實(shí)測(cè)該雜的值）（考慮實(shí)測(cè)該雜的值）內(nèi)配制內(nèi)配制6份樣份樣 品；測(cè)得回歸線(xiàn)的相關(guān)系數(shù)品；測(cè)得回歸線(xiàn)的相關(guān)系數(shù)r0.990，y軸截距在軸截距在100%響應(yīng)值的響應(yīng)值的25%以以 內(nèi)，響應(yīng)因子的內(nèi)，響應(yīng)因子的rsd 10%。 重復(fù)性重復(fù)性6份雜質(zhì)濃度相同的

22、供試液（一般為份雜質(zhì)濃度相同的供試液（一般為0.1%），），1人測(cè)定，測(cè)人測(cè)定，測(cè) 得含量結(jié)果得含量結(jié)果rsd 15% 中間精密度中間精密度6份雜質(zhì)濃度相同供試液（一般為份雜質(zhì)濃度相同供試液（一般為0.1%），分別），分別2人用人用 不同儀器測(cè)定，測(cè)得不同儀器測(cè)定，測(cè)得12個(gè)含量結(jié)果個(gè)含量結(jié)果rsd 20% venturepharm pds 29 3. 有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn) 專(zhuān)屬性專(zhuān)屬性空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，該雜質(zhì)峰與其它峰分離度空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，該雜質(zhì)峰與其它峰分離度r2 檢測(cè)限檢測(cè)限s/n3 定量限定量限s/n10，6份定量限濃度溶液測(cè)得雜質(zhì)峰保留時(shí)間的份定量限

23、濃度溶液測(cè)得雜質(zhì)峰保留時(shí)間的rsd 2.0%，峰面積，峰面積rsd 5.0% 耐用性耐用性考察考察mp5%; ph0.2; 柱溫柱溫5; v20%；5nm及及 使用三根不同批號(hào)色譜柱時(shí)色譜行為變化，各測(cè)使用三根不同批號(hào)色譜柱時(shí)色譜行為變化，各測(cè)2次；各雜質(zhì)峰的拖次；各雜質(zhì)峰的拖 尾因子尾因子2.0；雜質(zhì)峰與其他峰達(dá)到基線(xiàn)分離；雜質(zhì)峰與其他峰達(dá)到基線(xiàn)分離；各條件下測(cè)得結(jié)果（各條件下測(cè)得結(jié)果（n=6） 的的rsd 2.0%，雜質(zhì)含量絕對(duì)值在，雜質(zhì)含量絕對(duì)值在0.1%以?xún)?nèi)。以?xún)?nèi)。 venturepharm pds 30 3. 有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn) 系統(tǒng)適用性系統(tǒng)適用性

24、配制配制6份同濃度供試品份同濃度供試品溶液；主峰峰面積溶液；主峰峰面積rsd 2.0%， 保留時(shí)間保留時(shí)間rsd 1.0%, 拖尾因子拖尾因子2.0，理論塔板數(shù)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，理論塔板數(shù)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定， 主峰與雜質(zhì)峰達(dá)到基線(xiàn)分離。主峰與雜質(zhì)峰達(dá)到基線(xiàn)分離。 溶液穩(wěn)定性溶液穩(wěn)定性配制對(duì)照品溶液和供試品溶液，平行測(cè)定兩次主成配制對(duì)照品溶液和供試品溶液，平行測(cè)定兩次主成 分與雜質(zhì)的含量，室溫與冰箱冷藏室（分與雜質(zhì)的含量，室溫與冰箱冷藏室（4）中，在）中，在1、2、3、5和和7 天時(shí)分別平行測(cè)定兩次主成分和雜質(zhì)的含量，主成分含量變化絕對(duì)天時(shí)分別平行測(cè)定兩次主成分和雜質(zhì)的含量，主成分含量變化絕對(duì) 值

25、值2.0%，雜質(zhì)含量絕對(duì)值在，雜質(zhì)含量絕對(duì)值在0.1%以?xún)?nèi)，不得出現(xiàn)新的大于報(bào)告以?xún)?nèi)，不得出現(xiàn)新的大于報(bào)告 限度的雜質(zhì)。限度的雜質(zhì)。 venturepharm pds 31 質(zhì)控分析方法驗(yàn)證質(zhì)控分析方法驗(yàn)證 1. 方法驗(yàn)證的主要內(nèi)容 2. 含量方法驗(yàn)證 3. 有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證 4. 溶出方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn) venturepharm pds 32 4. 溶出方法驗(yàn)證溶出方法驗(yàn)證 v完整驗(yàn)證內(nèi)容：完整驗(yàn)證內(nèi)容： 溶出介質(zhì)的選擇溶出介質(zhì)的選擇 溶出介質(zhì)體積的選擇溶出介質(zhì)體積的選擇 溶出方法（轉(zhuǎn)籃法與槳法）的選擇溶出方法（轉(zhuǎn)籃法與槳法）的選擇 轉(zhuǎn)速的選擇轉(zhuǎn)速的選擇 溶出量測(cè)定方法驗(yàn)證溶出量測(cè)定方法驗(yàn)證

26、 溶出度均一性試驗(yàn)（批內(nèi)）溶出度均一性試驗(yàn)（批內(nèi)） 溶出重復(fù)性試驗(yàn)（批間）溶出重復(fù)性試驗(yàn)（批間） 溶出度測(cè)定溶出度測(cè)定 方法選擇方法選擇 venturepharm pds 33 溶出介質(zhì)： 通常采用：水、0.1mol/l鹽酸、緩沖液（ph38為主）；在上述介質(zhì) 均不能完全溶解的難溶藥物可加入適量表面活性劑。 不能簡(jiǎn)單通過(guò)主藥在各溶劑中的溶解度確定終介質(zhì)，因工藝的選擇、 輔料的加入會(huì)改變主藥在不同溶劑中的溶解行為。 仿制藥須與對(duì)照制劑進(jìn)行溶出曲線(xiàn)對(duì)比，采用f2因子評(píng)價(jià)，介質(zhì)除終介 質(zhì)外，還應(yīng)選擇水、 0.1mol/l鹽酸、ph3.8醋酸鹽緩沖液、ph6.8磷酸 鹽緩沖液及ph7.27.4磷酸鹽緩

27、沖液進(jìn)行比對(duì) 溶出介質(zhì)體積： 需使藥物符合漏槽條件，大杯法常用500-1000ml，小杯法常用100- 250ml。 4. 溶出方法驗(yàn)證溶出方法驗(yàn)證溶出度測(cè)定方法選擇溶出度測(cè)定方法選擇 venturepharm pds 34 轉(zhuǎn)速： 通常轉(zhuǎn)籃法選擇50rpm-100rpm，槳法選擇50rpm-75rpm。轉(zhuǎn)速低于 25rpm和超出150rpm通常是不被接受的 介質(zhì)、方法和轉(zhuǎn)速的選擇由溶出曲線(xiàn)的測(cè)定結(jié)果確定。單點(diǎn)測(cè)定不能 很好區(qū)分不同處方和工藝的溶出情況，亦影響溶出拐點(diǎn)的確定。 溶出度取樣時(shí)間常選擇溶出曲線(xiàn)拐點(diǎn)后推1020min，如果時(shí)間太長(zhǎng)或 較短，可通過(guò)適當(dāng)提高或減低轉(zhuǎn)速等手段等重新測(cè)定溶出

28、曲線(xiàn)。 不建議采用高轉(zhuǎn)速或延長(zhǎng)取樣時(shí)間，若取樣時(shí)間與拐點(diǎn)相距較遠(yuǎn)，易 導(dǎo)致溶出度測(cè)定區(qū)分能力不明顯。 批間均一性是考察制劑工藝穩(wěn)定性及溶出方法重復(fù)性的重要指標(biāo)，建議采 用三批樣品進(jìn)行均一性考察 4. 溶出方法驗(yàn)證溶出方法驗(yàn)證溶出度測(cè)定方法選擇溶出度測(cè)定方法選擇 venturepharm pds 35 溶出方法驗(yàn)證包括： 準(zhǔn)確度（回收率）、精密度、專(zhuān)屬性（輔料、膠囊殼等的干擾試驗(yàn)）、準(zhǔn)確度（回收率）、精密度、專(zhuān)屬性（輔料、膠囊殼等的干擾試驗(yàn)）、 線(xiàn)性和耐用性等。線(xiàn)性和耐用性等。 溶出量測(cè)定所用介質(zhì)與含量測(cè)定溶劑不一致； 溶出量測(cè)定濃度與含量測(cè)定濃度不一致； 溶出度測(cè)定為膠囊劑，或需除去包衣、薄膜

29、衣后測(cè)定含量的片劑 均需重新進(jìn)行溶出量測(cè)定方法驗(yàn)證。 需要注意： 范圍為限度的20%，回收率高、中、低常設(shè)為50%、限度濃度、100%； 測(cè)定干擾2%以下可以忽略，25%可考慮在限度上適當(dāng)提高，超過(guò)5%以上測(cè) 定方法不可取。膠囊殼產(chǎn)生干擾需進(jìn)行囊殼消除試驗(yàn)，干擾較大時(shí)建議采用 hplc法 4. 溶出方法驗(yàn)證溶出方法驗(yàn)證溶出量測(cè)定方法驗(yàn)證溶出量測(cè)定方法驗(yàn)證 常常為常常為“見(jiàn)見(jiàn) 含量測(cè)定含量測(cè)定 項(xiàng)項(xiàng) 下下” venturepharm pds 36 吸附驗(yàn)證方法（濾膜濾孔應(yīng)0.8m）： 取溶出液過(guò)濾，舍去不同體積的初濾液后測(cè)定，觀察響應(yīng)值的變化。 取樣后，一部分不過(guò)濾，直接采用高速離心，取上清液測(cè)定；另一部 分采用過(guò)濾法，取所得續(xù)濾液測(cè)定；考察兩結(jié)果差異。 取對(duì)照品溶液，經(jīng)濾膜過(guò)濾后，與原溶液進(jìn)行比較，觀察結(jié)果變化。 發(fā)生吸附的品種往往是主藥難溶主藥難溶于水，需要進(jìn)行微粉化