2020_2021年新教材高中生物第1章發(fā)酵工程2.1微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)學(xué)案+練習(xí)含解析新人教版選擇性必修32021031312

1、微生物的基本培養(yǎng)技術(shù) 必備知識(shí)素養(yǎng)奠基一、培養(yǎng)基的配制1.培養(yǎng)基的概念:人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)培養(yǎng)基,用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。2.培養(yǎng)基的分類:按照物理性質(zhì)不同分為兩類。(1)液體培養(yǎng)基:呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基,不加入凝固劑(如瓊脂)。(2)固體培養(yǎng)基:呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基,加入凝固劑(如瓊脂)。3.營(yíng)養(yǎng)組成:各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽,此外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。4.培養(yǎng)基特殊需求:(1)培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí),在培養(yǎng)基中添加維生素。(2)培養(yǎng)霉菌時(shí),將培養(yǎng)基調(diào)至酸性。(3)培養(yǎng)細(xì)菌時(shí),將培養(yǎng)

2、基調(diào)至中性或弱堿性。(4)培養(yǎng)厭氧微生物時(shí),需要提供無(wú)氧的條件。 有同學(xué)認(rèn)為液體培養(yǎng)基含有水,而固體培養(yǎng)基是沒有水的,這種想法對(duì)嗎?為什么?提示:不對(duì)。液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基都含有水分,它們的區(qū)別為是否添加凝固劑。 二、無(wú)菌技術(shù)1.無(wú)菌技術(shù)關(guān)鍵:防止雜菌污染。2.消毒與滅菌:(1)概念:消毒:使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌:使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。(2)類型與方法:連一連:將無(wú)菌技術(shù)類型、常用方法和適用對(duì)象用線連起來(lái)。 在無(wú)菌技術(shù)中,為什么許多實(shí)驗(yàn)操作都要在酒精燈火焰附近進(jìn)行?提示:酒精燈火焰

3、周圍溫度高,細(xì)菌少,甚至無(wú)菌,這樣可以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。 三、微生物的純培養(yǎng)1.微生物純培養(yǎng)的概念:由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物,獲得純培養(yǎng)物的過(guò)程就是純培養(yǎng)。2.酵母菌的純培養(yǎng):(1)純培養(yǎng)的原理:設(shè)法在培養(yǎng)基上得到由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物(單菌落)。(2)純培養(yǎng)方法:平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)純培養(yǎng)過(guò)程:制備培養(yǎng)基:配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離酵母菌:用平板劃線法在馬鈴薯培養(yǎng)基表面接種酵母菌。下列接種過(guò)程正確的順序是baefcgd 培養(yǎng)酵母菌:待菌液被培養(yǎng)基吸收,將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置,放入28 左右恒溫箱中培養(yǎng)2448h。(4)結(jié)果

4、分析與評(píng)價(jià):結(jié)合酵母菌純培養(yǎng)的過(guò)程,判斷下列分析的正誤:未接種的平板上沒有菌種,此實(shí)驗(yàn)沒有必要培養(yǎng)。()提示:培養(yǎng)未接種的平板起到對(duì)照作用,可以檢驗(yàn)培養(yǎng)基的制備是否合格。在未接種的培養(yǎng)基表面長(zhǎng)出了菌落,說(shuō)明培養(yǎng)基制備不合格。()若無(wú)菌操作合格,在接種酵母菌的培養(yǎng)基上應(yīng)觀察到不同形態(tài)、不同顏色的酵母菌菌落。()提示:應(yīng)該是觀察到形態(tài)、顏色一致的酵母菌單菌落。 如果將酵母菌放置在35 恒溫箱中培養(yǎng),相同時(shí)間后觀察,菌落會(huì)比28 條件下的大,數(shù)量多。() 提示:酵母菌適宜生長(zhǎng)溫度為28 ,35 條件下由于溫度較高,酵母菌生長(zhǎng)慢。某同學(xué)使用平板劃線法純化酵母菌,培養(yǎng)48 h后,只在培養(yǎng)基的第一劃線區(qū)域

5、長(zhǎng)出密集的菌落,其他區(qū)域未長(zhǎng)出菌落,可能是這位同學(xué)第二次灼燒接種環(huán)未冷卻就直接劃線導(dǎo)致的。() 將接種后的平板放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)有必要嗎?為什么?提示:有必要。恒溫培養(yǎng)箱可以提供微生物生長(zhǎng)的適宜溫度。關(guān)鍵能力素養(yǎng)形成知識(shí)點(diǎn)一培養(yǎng)基的配制1.培養(yǎng)基的成分及功能:營(yíng)養(yǎng)要素來(lái)源功能碳源(提供碳元素的物質(zhì))無(wú)機(jī)碳源NaHCO3等含碳無(wú)機(jī)物構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物;有機(jī)碳既是碳源又是能源有機(jī)碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油等氮源(提供氮元素的物質(zhì))無(wú)機(jī)氮源銨鹽、硝酸鹽等將無(wú)機(jī)氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物生長(zhǎng)因子(生長(zhǎng)必不可少的微量有機(jī)

6、物)維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的組成成分;參與代謝過(guò)程中的酶促反應(yīng)水外界攝入良好的溶劑維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)物為微生物提供除碳、氮以外的各種重要元素【特別提醒】有關(guān)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的三點(diǎn)提醒(1)培養(yǎng)不同的微生物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可能不同。自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基主要以無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基主要以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。(2)微生物需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子,是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。(3)微生物需要量最大的是碳源。能合成含碳有機(jī)物的是自養(yǎng)型,反之則為異養(yǎng)型。2.培養(yǎng)基的種類:分類標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基特點(diǎn) 作用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基加凝固劑,如瓊脂微生物的分離與鑒定、活菌計(jì)數(shù)、

7、保藏菌種半固體培養(yǎng)基容器放倒不致流出,劇烈震動(dòng)則破散觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類鑒定液體培養(yǎng)基不加凝固劑常用于工業(yè)生產(chǎn)功能選擇培養(yǎng)基根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求配制選擇、分離鑒別培養(yǎng)基加入能與目的菌的代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑鑒定成分來(lái)源天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基用已知的化學(xué)物質(zhì)配制分類鑒定 微生物種類繁多,培養(yǎng)條件也各不相同。下列關(guān)于微生物培養(yǎng)基的描述正確的是()A.同一物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量,氮源有些也能提供能量C.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是培養(yǎng)細(xì)菌、病毒等常用的培養(yǎng)基D.培養(yǎng)硝化細(xì)菌,可用無(wú)機(jī)碳源的培養(yǎng)基【解題導(dǎo)引】 【解析】選D。對(duì)異養(yǎng)微生

8、物來(lái)說(shuō),含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源,如牛肉膏,A錯(cuò)誤;有機(jī)碳源能提供能量,無(wú)機(jī)碳源不能提供能量,有些氮源也能提供能量,B錯(cuò)誤;病毒必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)才能生活,不能用普通培養(yǎng)基培養(yǎng),必須先培養(yǎng)細(xì)胞再培養(yǎng)病毒,C錯(cuò)誤;硝化細(xì)菌是自養(yǎng)微生物,可以通過(guò)化能合成作用合成含碳有機(jī)物,D正確?！菊`區(qū)警示】微生物的碳源、氮源和能源物質(zhì)的兩個(gè)認(rèn)識(shí)“誤區(qū)”(1)誤認(rèn)為所有碳源和氮源都可提供能量:有機(jī)碳源和有機(jī)氮源是異養(yǎng)微生物的能源物質(zhì)。(2)誤認(rèn)為所有微生物的能源都是有機(jī)碳源:自養(yǎng)微生物的碳源一般是CO2,光能自養(yǎng)微生物的能源是光能,例如藍(lán)細(xì)菌等;化能自養(yǎng)微生物的能源是化學(xué)物質(zhì),例如硝化細(xì)菌的能源

9、物質(zhì)是NH3?！舅仞B(yǎng)探究母題追問(wèn)】(1)科學(xué)思維分析與推理結(jié)合病毒的特點(diǎn),試分析如何培養(yǎng)病毒,寫出簡(jiǎn)要思路。提示:可以先在特定培養(yǎng)基上培養(yǎng)病毒的宿主細(xì)胞,然后讓病毒侵染宿主細(xì)胞,從而達(dá)到培養(yǎng)病毒的目的。(2)科學(xué)思維演繹與推理結(jié)合相關(guān)知識(shí),判斷下面培養(yǎng)基的各種成分能提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類別:成分蔗糖(NH4)2SO4FeSO4維生素提供的營(yíng)養(yǎng)_提示:碳源氮源(無(wú)機(jī)鹽)無(wú)機(jī)鹽生長(zhǎng)因子【素養(yǎng)遷移】下表是某微生物培養(yǎng)基成分,請(qǐng)據(jù)此回答:編號(hào)成分含量粉狀硫10 g(NH4)2SO40.4 gK2HPO44.0 gMgSO49.25 gFeSO40.5 gCaCl20.5 gH2O100 mL(1)上表培養(yǎng)基

10、可培養(yǎng)的微生物類型是_。(2)若除去成分,加入(CH2O),該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)_。(3)表中營(yíng)養(yǎng)成分共有_類。(4)不論何種培養(yǎng)基,在各種成分都溶化后分裝前,要進(jìn)行的是_。(5)若上表培養(yǎng)基用于菌種鑒定,應(yīng)該增加的成分是_?！窘馕觥?1)由題表可知,該培養(yǎng)基中沒有碳源,說(shuō)明培養(yǎng)的微生物是從外界環(huán)境中獲取碳源的,因此培養(yǎng)的微生物是自養(yǎng)型微生物。(2)該培養(yǎng)基若加入(CH2O),培養(yǎng)基中就有了碳源,但除去成分,培養(yǎng)基中就沒有了氮源,該培養(yǎng)基就只能用于培養(yǎng)固氮微生物。(3)題表中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有水、無(wú)機(jī)鹽、無(wú)機(jī)氮源三類,缺乏碳源和特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(4)微生物生長(zhǎng)需要一定的pH,所以培養(yǎng)基裝瓶前需要調(diào)節(jié)pH

11、。(5)該培養(yǎng)基中無(wú)凝固劑,為液體培養(yǎng)基。菌種的純化和鑒定通常利用固體平板培養(yǎng)基以獲得單細(xì)胞菌落,因此需要加入凝固劑,如瓊脂,將液體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)變成固體培養(yǎng)基。答案:(1)自養(yǎng)型微生物(2)固氮微生物(3)3(4)調(diào)節(jié)pH(5)瓊脂(或凝固劑)【補(bǔ)償訓(xùn)練】下列關(guān)于培養(yǎng)基的敘述,錯(cuò)誤的是()A.氮源、無(wú)機(jī)鹽、水等是微生物生長(zhǎng)不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.根據(jù)微生物自身的特點(diǎn),使用不同碳源的培養(yǎng)基C.可在培養(yǎng)基中加入磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀,用于維持pH的相對(duì)穩(wěn)定D.若要將微生物擴(kuò)大培養(yǎng),應(yīng)使用固體培養(yǎng)基【解析】選D。微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水和生長(zhǎng)因子,A正確;根據(jù)微生物自身的特點(diǎn),使用含不

12、同碳源的培養(yǎng)基,例如培養(yǎng)自養(yǎng)型的細(xì)菌,在培養(yǎng)基中不需加入碳源,B正確;微生物培養(yǎng)基調(diào)節(jié)pH時(shí)可以用磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀,C正確;若要將微生物擴(kuò)大培養(yǎng),一般用液體培養(yǎng)基,D錯(cuò)誤。知識(shí)點(diǎn)二無(wú)菌技術(shù)1.無(wú)菌技術(shù)的概念:防止外來(lái)雜菌的入侵,并保持已滅菌物品及無(wú)菌區(qū)域不再被污染的方法,稱為無(wú)菌技術(shù)。2.無(wú)菌技術(shù)的目的:(1)可防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他微生物污染。(2)有效避免操作者自身被微生物感染。3.無(wú)菌技術(shù)的選擇原則:(1)考慮效果:滅菌的效果比消毒要好。(2)考慮操作對(duì)象的承受能力:活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒的方法,而不能采用滅菌的方法。4.無(wú)菌技術(shù)的方法消毒與滅菌:方法條件應(yīng)用范圍

13、消毒煮沸消毒法在100 下煮沸56min一般物品,如家庭餐具等生活用品巴氏消毒法6265 消毒30 min或8090 處理30 s1 min一些不耐高溫的液體,如牛奶、啤酒、果酒和醬油等化學(xué)藥物消毒法70%75%的酒精、碘酒、氯氣、石炭酸、煤酚皂溶液等用于雙手、皮膚、傷口、動(dòng)植物組織表面消毒和空氣、水源、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿等消毒紫外線消毒法30 W紫外燈照射30 min接種室、接種箱、超凈工作臺(tái)滅菌灼燒滅菌在酒精燈火焰充分燃燒層灼燒涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等;接種過(guò)程中的試管口或瓶口滅菌干熱滅菌干熱滅菌箱內(nèi)160170 下滅菌23 h玻璃器皿、金屬用具等不適宜用其他方法滅菌需

14、要保持干燥和能耐高溫的物品濕熱滅菌高壓蒸汽滅菌鍋:100 kPa、121 條件下1530 min滅菌培養(yǎng)基及容器的滅菌【特別提醒】消毒和滅菌的兩點(diǎn)提醒(1)作用原理是借助理化因素,通過(guò)使蛋白質(zhì)變性來(lái)抑制微生物生命活動(dòng)或殺死微生物。(2)最根本區(qū)別是芽孢和孢子是否滅活,滅菌能殺死芽孢和孢子,因而滅菌更徹底。 防止雜菌入侵,獲得純凈的培養(yǎng)物,是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.實(shí)驗(yàn)室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒B.在實(shí)驗(yàn)室中,不可吃東西、喝水,離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)一定要洗手,以防止被微生物感染C.接種環(huán)、接種針等金屬用具,直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌D.使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)

15、行滅菌處理,以免污染環(huán)境【解題導(dǎo)引】明確以下三個(gè)關(guān)鍵點(diǎn):(1)對(duì)操作空間消毒的方法:紫外線消毒、化學(xué)藥物消毒。(2)適于灼燒滅菌的物品:接種環(huán)、接種針等金屬用具。(3)防止微生物感染:做好自身防護(hù),對(duì)使用后的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。【解析】選C。為防止雜菌污染,研究和應(yīng)用微生物時(shí)應(yīng)進(jìn)行消毒和滅菌,實(shí)驗(yàn)室可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒,A正確;在實(shí)驗(yàn)室中,不可吃東西、喝水,離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)一定要洗手,以防止被微生物感染,B正確;接種環(huán)、接種針等金屬用具,直接在酒精燈火焰的充分燃燒層即外焰部位灼燒滅菌,C錯(cuò)誤;使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理,以免污染環(huán)境,D正確?！痉椒ㄒ?guī)律】灼燒滅菌的適用范圍和方法(

16、1)灼燒滅菌適用于接種工具和試管口、瓶口的滅菌。(2)接種工具灼燒滅菌:用酒精燈外焰按順序充分燃燒;試管口、瓶口滅菌:迅速通過(guò)酒精燈外焰。 【素養(yǎng)探究母題追問(wèn)】 (1)科學(xué)思維分析與綜合某同學(xué)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不小心將滅菌的培養(yǎng)皿和未滅菌的培養(yǎng)皿混合了,那么這些培養(yǎng)皿還能用于實(shí)驗(yàn)嗎?為什么?提示:不能。已滅菌的材料物品不能與周圍物品接觸,以防止污染。所以這位同學(xué)應(yīng)將培養(yǎng)皿再次滅菌后才能用于實(shí)驗(yàn)。(2)科學(xué)思維演繹與推理題中A項(xiàng)的化學(xué)藥物消毒時(shí),某同學(xué)想酒精濃度越高,消毒效果可能越好,于是他就用了95%的酒精進(jìn)行消毒,他的這種做法對(duì)嗎?解釋原因。提示:不對(duì)。用酒精消毒時(shí),體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒效果

17、最好,原因是濃度過(guò)高,菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護(hù)膜,酒精不能滲入其中。 【素養(yǎng)遷移】在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,經(jīng)常通過(guò)消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)在實(shí)驗(yàn)室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是_。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能_。在照射前,適量噴灑_,可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)_(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),若壓力達(dá)到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有

18、達(dá)到相應(yīng)溫度,最可能的原因是_?！窘馕觥?1)玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具可以通過(guò)干熱滅菌的方法來(lái)滅菌。(2)巴氏消毒法是在7075 煮30 min或在80 下煮15 min,可以殺死牛奶中的微生物,并使牛奶的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞;高溫瞬時(shí)消毒是在較短的時(shí)間內(nèi)利用高溫殺死微生物,由于時(shí)間較短,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少。(3)紫外線有消毒、滅菌的作用,在照射前,適量噴灑消毒液,可以強(qiáng)化消毒效果。(4)自來(lái)水消毒通常采用“氯氣”或“紫外線”等方法。(5)使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),若壓力達(dá)到設(shè)定要求,但沒有達(dá)到相應(yīng)溫度,最可能的原因是鍋內(nèi)冷空氣沒有排盡。答案:(1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)

19、破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡【補(bǔ)償訓(xùn)練】高溫滅菌的原理是()A.每種微生物生長(zhǎng)的最適溫度是一定的B.微生物對(duì)高溫環(huán)境不適應(yīng)C.高溫破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸,影響其生命活動(dòng)D.高溫降低了環(huán)境中氧的濃度【解析】選C。高溫滅菌的目的是利用高溫殺死包括芽孢和孢子在內(nèi)的一切微生物。原理是高溫能使細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性,同時(shí)破壞核酸的結(jié)構(gòu),從而影響其正常的生命活動(dòng)。知識(shí)點(diǎn)三酵母菌的純培養(yǎng)1.制備馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基:(1)配制培養(yǎng)基: (2)滅菌:培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至錐形瓶,加棉塞,包上牛皮紙,如圖所示,然后放入高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌,培養(yǎng)皿包扎后放入干熱滅菌箱內(nèi)滅菌。 (3)倒平板:待培養(yǎng)基冷卻

20、到50 左右時(shí),在酒精燈火焰附近進(jìn)行。具體操作過(guò)程: 【特別提醒】關(guān)于制備培養(yǎng)基的四點(diǎn)提醒(1)如果需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,應(yīng)該在定容完成后,滅菌之前進(jìn)行操作。(2)滅菌之后,倒平板時(shí)培養(yǎng)基的溫度是50 左右。因?yàn)槟虅┉傊?8 以上熔化,在44 以下凝固,倒平板時(shí)高于50 則會(huì)燙手,低于50 時(shí)若不能及時(shí)操作,瓊脂會(huì)凝固。(3)倒平板的整個(gè)操作在酒精燈火焰旁進(jìn)行,避免雜菌的污染。(4)倒平板時(shí)不要將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間,否則此培養(yǎng)基不能用來(lái)培養(yǎng)微生物,因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。2.平板劃線法接種和分離酵母菌:(1)平板劃線法:通過(guò)接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線

21、操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。(2)平板劃線法結(jié)果:平板劃線示意圖(A)及培養(yǎng)后菌落分布示意圖(B)如下圖所示。 (3)幾次灼燒的目的:灼燒時(shí)期目的第一次操作(取菌種前)殺死接種環(huán)上原有的微生物,避免污染培養(yǎng)物每次劃線之前殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種,使下次劃線的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端,使每次劃線菌種數(shù)目減少劃線結(jié)束殺死接種環(huán)上殘存的菌種,避免微生物污染環(huán)境和感染操作者【特別提醒】(1)灼燒接種環(huán)后,要冷卻后才能進(jìn)行操作,以免溫度太高殺死菌種。(2)第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始,能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少,最終得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)

22、的菌落。(3)劃線用力大小要適當(dāng),防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。(4)最后一次的劃線不要與第一次的劃線相連。3.培養(yǎng)酵母菌:接種和未接種的平板在溫度適宜的恒溫箱中培養(yǎng)。4.結(jié)果分析與評(píng)價(jià):(1)培養(yǎng)未接種的培養(yǎng)基的目的是檢查培養(yǎng)基制備是否合格。未接種的培養(yǎng)基表面若有菌落生長(zhǎng),則說(shuō)明培養(yǎng)基被污染,應(yīng)該重新制備;若無(wú)菌落生長(zhǎng),則說(shuō)明未被污染。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到獨(dú)立的菌落,這些菌落在顏色、形狀和大小上相似,酵母菌菌落一般表面光滑,多呈乳白色。(3)若在培養(yǎng)基中觀察到不同形態(tài)的菌落,原因可能是菌液不純,混入其他雜菌,或在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中被雜菌污染。 如圖表示酵母菌純培養(yǎng)的部分操作步驟,下列

23、有關(guān)敘述正確的是() A.步驟操作時(shí),待倒入的培養(yǎng)基冷卻凝固后,蓋上培養(yǎng)皿蓋,將其倒置B.步驟接種環(huán)和試管口應(yīng)先在火焰上灼燒消毒,接種環(huán)冷卻后再放入試管中蘸取菌液C.步驟沿多個(gè)方向劃線,使接種物逐漸稀釋,最后一次的劃線不能與第一次的相連D.步驟是將培養(yǎng)皿放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng),也需倒置,一段時(shí)間后所得到的都是酵母菌的菌落【解題導(dǎo)引】本題的解題思路是: 【解析】選C。分析步驟,倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿蓋,冷卻凝固后將平板倒過(guò)來(lái)放置,A錯(cuò)誤;分析步驟,接種環(huán)和試管口需要先在火焰上灼燒滅菌,待冷卻后才可以蘸取菌液進(jìn)行平板劃線,B錯(cuò)誤;分析步驟,沿多個(gè)方向劃線,使接種物逐漸稀釋,最后一次的劃線不能與第一次的

24、相連,培養(yǎng)后可出現(xiàn)單個(gè)的菌落,C正確;步驟是將培養(yǎng)皿放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng),也需倒置,如果操作過(guò)程受到污染,一段時(shí)間后所得到的不一定都是酵母菌的菌落,D錯(cuò)誤。【誤區(qū)警示】本題常見誤區(qū)有以下兩種(1)誤認(rèn)為需將培養(yǎng)基冷卻后再蓋上培養(yǎng)皿蓋:倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿,而不是等培養(yǎng)基冷卻凝固后蓋上培養(yǎng)皿蓋。(2)誤認(rèn)為只要有菌落,就是純培養(yǎng)物:培養(yǎng)結(jié)果不一定是純培養(yǎng)物,只有無(wú)菌操作合格時(shí)培養(yǎng)的微生物才是純培養(yǎng)物。 【素養(yǎng)探究母題追問(wèn)】 (1)科學(xué)思維分析與綜合若要按照如圖的區(qū)域進(jìn)行劃線,那么在接種劃線的操作過(guò)程中,共灼燒了幾次接種環(huán)?提示:圖中共劃了5個(gè)區(qū)域,在每次劃線前后均需要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌,因此共需要

25、灼燒接種環(huán)6次。(2)科學(xué)思維演繹與推理在劃線操作時(shí),如果接種環(huán)不慎劃破培養(yǎng)基,可以繼續(xù)正常進(jìn)行操作嗎?為什么?提示:不能繼續(xù)使用。因?yàn)閯澠婆囵B(yǎng)基會(huì)造成劃線不均勻,難以分離單菌落,可能導(dǎo)致微生物的無(wú)氧呼吸或雜菌污染等。 【素養(yǎng)遷移】微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié)。如圖甲、乙、丙是酵母菌分離和培養(yǎng)過(guò)程中部分操作和實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題: (1)上圖甲所示的是制備固體培養(yǎng)基時(shí)的實(shí)驗(yàn)操作步驟之一,它稱為_,若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌,除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外,還要考慮_、_和滲透壓等條件。(2)培養(yǎng)酵母菌時(shí),在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_。(

26、3)上圖乙是平板劃線法接種操作示意圖,正確的操作順序是AB_(用字母和箭頭表示);找出圖乙中兩處錯(cuò)誤的操作(用字母表示):_、_。(4)上圖丙是某同學(xué)用平板劃線法接種后的培養(yǎng)基培養(yǎng)12 h后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,如果培養(yǎng)基上_,則說(shuō)明無(wú)菌操作基本符合要求?！窘馕觥?1)圖甲所示操作為倒平板,需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作。培養(yǎng)基中除營(yíng)養(yǎng)成分外,還應(yīng)考慮pH、氧氣、無(wú)菌、溫度、滲透壓等條件。(2)檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染的方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生,如有菌落,說(shuō)明該培養(yǎng)基已被污染。(3)平板劃線法的操作順序?yàn)樽茻臃N環(huán),冷卻,挑取菌種,劃線,灼燒接種環(huán),劃線,灼

27、燒接種環(huán),平板倒置培養(yǎng),即ABGFECDH。圖乙中C操作應(yīng)在酒精燈附近進(jìn)行,D中劃線的首尾不應(yīng)該相連。(4)同一菌種的菌落顏色、形狀、大小基本一致,如有雜菌污染,會(huì)有異常菌落出現(xiàn),可根據(jù)菌落的特征確定該菌落是否為酵母菌。答案:(1)倒平板溫度(氧氣)pH(無(wú)菌)(2)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(3)GFECDHCD(4)生長(zhǎng)的菌落顏色、形狀、大小基本一致,并符合酵母菌菌落的特點(diǎn)【補(bǔ)償訓(xùn)練】在酵母菌的純培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,劃線接種(甲)、培養(yǎng)結(jié)果(乙)如圖所示,且甲、乙的對(duì)應(yīng)位置不變。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是() A.配制培養(yǎng)基時(shí)需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.甲中a區(qū)域

28、為劃線的起始位置C.連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落D.圖示實(shí)驗(yàn)過(guò)程中接種環(huán)灼燒了5次【解析】選B。為了能徹底滅菌,配制的培養(yǎng)基需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,A正確;起始劃線的區(qū)域長(zhǎng)出的菌落多且密,根據(jù)甲、乙對(duì)應(yīng)區(qū)域?qū)Ρ?甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的結(jié)束位置,B錯(cuò)誤;連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落,C正確;由于每次使用接種環(huán)前后都要灼燒滅菌,從圖示甲中4次劃線接種就可推出,接種過(guò)程中接種環(huán)灼燒了5次,D正確?！菊n堂回眸】 課堂檢測(cè)素養(yǎng)達(dá)標(biāo) 【概念診斷】1.防止雜菌入侵,獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是研究和應(yīng)用微生物的前提。請(qǐng)分析下列關(guān)于微生物的純培養(yǎng)操作,錯(cuò)誤的是_。無(wú)菌技術(shù)的關(guān)鍵是殺滅實(shí)驗(yàn)室中所有的微生

29、物干熱滅菌可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅,所以不能在常溫下長(zhǎng)期保存培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌將接種環(huán)直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,可以迅速?gòu)氐椎販缇鸁o(wú)菌技術(shù)中,若處理對(duì)象為液體,則只能消毒,不能滅菌為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落【解析】選。無(wú)菌技術(shù)的關(guān)鍵是防止雜菌的污染,錯(cuò)誤;滅菌能殺滅環(huán)境中一切微生物,包括孢子和芽孢,錯(cuò)誤;經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅,所以不能在常溫下長(zhǎng)期保存,正確;培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌,正確;將接種環(huán)直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,可以迅速?gòu)氐椎販缇?正確;無(wú)菌技術(shù)中,若處理對(duì)象為液體,可

30、以用高壓蒸汽滅菌法滅菌,錯(cuò)誤。接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后冷卻后才能挑取菌落,錯(cuò)誤。2.培養(yǎng)下列微生物,培養(yǎng)基中不用添加有機(jī)碳源的是()A.藍(lán)細(xì)菌B.酵母菌C.醋酸菌D.乳酸菌【解析】選A。酵母菌、醋酸菌、乳酸菌是異養(yǎng)微生物,藍(lán)細(xì)菌是自養(yǎng)微生物,培養(yǎng)基不需要添加有機(jī)碳源。3.下列有關(guān)常見無(wú)菌操作的敘述,錯(cuò)誤的是()A.用酒精擦拭雙手B.用氯氣對(duì)水源消毒C.實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行D.玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)可用酒精擦拭【解析】選D。用酒精擦拭雙手屬于使用化學(xué)藥劑消毒;用氯氣消毒水源也屬于使用化學(xué)藥劑消毒;實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行,因?yàn)楦邷乜煞乐闺s菌污染;玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)等應(yīng)用干熱滅菌

31、法滅菌,利用酒精擦拭不能將所有微生物殺滅。4.2020年,疫情中的最美逆行者,在給患者治療時(shí),要充分消毒并防護(hù),以下說(shuō)法中正確的是()A.醫(yī)務(wù)人員進(jìn)入工作區(qū)要全身滅菌B.接種疫苗前要對(duì)注射區(qū)域進(jìn)行消毒C.消毒與滅菌的含義本質(zhì)是相同的D.常用的消毒方法有灼燒法和高壓蒸汽法【解析】選B。醫(yī)務(wù)人員進(jìn)入工作區(qū)要全身消毒,A錯(cuò)誤;接種疫苗前要對(duì)注射區(qū)域進(jìn)行消毒,B正確;滅菌是將處理物體中的一切生物全部殺滅,在經(jīng)過(guò)滅菌后的物體中,不再存在任何活著的生命;消毒是僅殺死物體表面或內(nèi)部的一部分微生物,C錯(cuò)誤;常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等,D錯(cuò)誤。5.(2020江蘇高考)為純化

32、菌種,在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌,培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是() A.倒平板后需間歇晃動(dòng),以保證表面平整B.圖中、區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多,應(yīng)從區(qū)挑取單菌落C.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多,不能達(dá)到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后,可被剛果紅染成紅色【解析】選B。本題主要考查平板劃線法的相關(guān)使用技巧。倒平板后不需要晃動(dòng),A錯(cuò)誤;區(qū)、區(qū)沒有出現(xiàn)單菌落,說(shuō)明細(xì)菌數(shù)量太多,故應(yīng)從區(qū)挑取單菌落,B正確;出現(xiàn)單菌落即達(dá)到了菌種純化的目的,C錯(cuò)誤;剛果紅是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng),D錯(cuò)誤。 【思維躍遷】6.生長(zhǎng)圖形

33、法是一種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所需生長(zhǎng)因子的種類,研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板,然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū),將甲、乙、丙三種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域,培養(yǎng)結(jié)果如圖所示,下列說(shuō)法正確的是() A.倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無(wú)污染B.倒成平板后需要進(jìn)行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌需要生長(zhǎng)因子乙或丙D.生長(zhǎng)圖形法不能用于某些菌種的篩選【解析】選A。倒成平板后直接培養(yǎng)若有雜菌生長(zhǎng)說(shuō)明已被污染,若無(wú)雜菌生長(zhǎng)說(shuō)明沒有污染,A正確;滅菌應(yīng)在倒平板之前,B錯(cuò)誤;圖示結(jié)果表明需要兩種生長(zhǎng)因子乙和丙,C錯(cuò)誤;根據(jù)某些菌種需要特殊的生長(zhǎng)因子,

34、可用生長(zhǎng)圖形法進(jìn)行篩選,D錯(cuò)誤。7.無(wú)菌操作是微生物接種技術(shù)的關(guān)鍵。傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和微生物分離、純化、應(yīng)用過(guò)程均要無(wú)菌操作。回答下列相關(guān)問(wèn)題:(1)消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念,下列哪些事物適用于消毒處理_。皮膚飲用水牛奶注射器培養(yǎng)皿接種環(huán)培養(yǎng)基果汁醬油手術(shù)刀A.B.C.D.(2)如下圖所示,利用_法進(jìn)行酵母菌接種。 如圖A、B、C、D所示的四種劃線方法,正確的是_。 (3)培養(yǎng)酵母菌常用的培養(yǎng)基是_,此培養(yǎng)基的氮源是_。氮源進(jìn)入酵母菌細(xì)胞后,可參與合成的生物大分子有_、_等。在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)培養(yǎng)基的檢測(cè)方法是_,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生?！窘馕觥?1)皮膚可用70%酒精消毒

35、,飲用水用氯氣消毒,牛奶、果汁、醬油用巴氏消毒法進(jìn)行消毒,注射器、培養(yǎng)基可用高壓蒸汽滅菌,培養(yǎng)皿、手術(shù)刀用干熱滅菌或高壓蒸汽滅菌,接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌,應(yīng)采用消毒,應(yīng)采用滅菌。(2)題圖是采用平板劃線法接種,需要注意的是連續(xù)劃線時(shí),每次劃線前后要灼燒接種環(huán),同時(shí)最后一次劃線不能與第一次相連。A圖很難得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落,A錯(cuò)誤;B圖劃線從上次劃線末端開始,容易得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落,B正確;C圖劃線沒有從上次劃線的末端開始,接種環(huán)上沒有菌種,不能得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落,C錯(cuò)誤;D圖劃線不是從上次劃線末端開始,不容易得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落,D錯(cuò)誤。(3)培養(yǎng)酵母菌常用的培

36、養(yǎng)基是馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基,提供氮源的是馬鈴薯,細(xì)胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白質(zhì)、核酸等,氮源可參與以上物質(zhì)的合成。檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染,方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當(dāng)時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。答案:(1)A(2)平板劃線B(3)馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯蛋白質(zhì)核酸將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當(dāng)時(shí)間【拓展探究】8.我國(guó)中科院的科研人員從污水處理廠的活性污泥中分離了一種獨(dú)特的微生物“惠芳中科微菌”,它是全世界科學(xué)家“最想要”的28個(gè)活性污泥核心微生物類群之一。微生物是活性污泥有效清除各種污染物的“主力軍”,每克活性污泥中有1012個(gè)微生物細(xì)胞。這些復(fù)雜的微生物與廢水中的

37、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物形成了復(fù)雜的“生態(tài)網(wǎng)”?！盎莘季背朔纸飧鞣N有機(jī)污染物(如碳水化合物、芳香族化合物和短鏈脂肪酸)外,還具有還原硝酸鹽和積累磷的能力,所以它的脫氮除磷效果遠(yuǎn)高于其他微生物。(1)下列關(guān)于分離和培養(yǎng)“惠芳中科微菌”的過(guò)程,描述不正確的是_。A.分離和培養(yǎng)過(guò)程的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵B.培養(yǎng)“惠芳菌”的培養(yǎng)基應(yīng)滅菌后才能使用C.接種過(guò)程要將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)的金屬絲燒紅D.用平板劃線法接種后,一定會(huì)得到“惠芳菌”的單菌落(2)“惠芳菌”在生態(tài)系統(tǒng)中屬于_,培養(yǎng)“惠芳菌”的培養(yǎng)基中應(yīng)含有_等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(3)“惠芳菌”還有哪些方面的應(yīng)用?試舉例說(shuō)明?！窘馕觥?1)分離和培養(yǎng)微

38、生物過(guò)程的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵,A正確;培養(yǎng)基應(yīng)滅菌后才能使用,B正確;接種環(huán)放在火焰上灼燒,為了滅菌充分,應(yīng)該將接種環(huán)的金屬絲燒紅,C正確;用平板劃線法接種,由于操作過(guò)程和劃線次數(shù)等原因,不一定會(huì)得到單菌落,D錯(cuò)誤。(2)由材料可知“惠芳菌”是分解者。培養(yǎng)基中一般含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(3)從題干中可分析出“惠芳菌”具有還原硝酸鹽和積累磷的能力,脫氮除磷效果遠(yuǎn)高于其他微生物,所以可以用于吸收環(huán)境中的氮和磷。答案:(1)D(2)分解者水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源(3)“惠芳菌”脫氮除磷效果好,還可以應(yīng)用于治理水體富營(yíng)養(yǎng)化等(合理即可)。二微生物的基本培養(yǎng)技術(shù) (20分鐘70分)一

39、、選擇題(共8小題,每小題5分,共40分)1.下表為某培養(yǎng)基的配方,下列敘述正確的是()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1 000 mLA.從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基B.該培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C.該培養(yǎng)基缺少提供生長(zhǎng)因子的物質(zhì)D.該培養(yǎng)基不能培養(yǎng)異養(yǎng)微生物【解析】選B。分析表中成分可知,該培養(yǎng)基中沒有凝固劑,為液體培養(yǎng)基,A錯(cuò)誤;該培養(yǎng)基中的蛋白胨既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄糖是絕大多數(shù)生物最常利用的碳源,B正確;該培養(yǎng)基中存在的蛋白胨中的某些物質(zhì)可以看作是生長(zhǎng)因子,C錯(cuò)誤;該培養(yǎng)基中

40、含有有機(jī)碳源,能用于培養(yǎng)異養(yǎng)微生物,D錯(cuò)誤?！狙a(bǔ)償訓(xùn)練】將相同的大腸桿菌樣液分別接種于成分不同的三種培養(yǎng)基中,36小時(shí)后統(tǒng)計(jì)菌落數(shù),結(jié)果如下表。下列敘述不正確的是()培養(yǎng)皿培養(yǎng)基成分菌落數(shù)瓊脂、葡萄糖35瓊脂、葡萄糖、生長(zhǎng)因子250瓊脂、生長(zhǎng)因子0A.葡萄糖是培養(yǎng)基中的碳源也是能源B.配制培養(yǎng)基過(guò)程中應(yīng)先滅菌后倒平板C.和對(duì)照,說(shuō)明生長(zhǎng)因子不利于大腸桿菌的生長(zhǎng)D.和對(duì)照,說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)需要葡萄糖【解析】選C。葡萄糖是培養(yǎng)基中的碳源也是能源,A正確;配制培養(yǎng)基過(guò)程中應(yīng)先滅菌后倒平板,B正確;和對(duì)照,說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)需要生長(zhǎng)因子,C錯(cuò)誤;和對(duì)照,說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)需要葡萄糖,D正確。2.(2

41、020徐州高二檢測(cè))不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。一種自養(yǎng)微生物在以CO2為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng),下列說(shuō)法不正確的是()A.氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素B.碳源物質(zhì)也為該微生物提供能量C.無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)D.水是該微生物的營(yíng)養(yǎng)要素之一【解析】選B。培養(yǎng)基中的氮源物質(zhì)可以為該微生物提供必要的氮素,A正確;該微生物只能以二氧化碳作為唯一碳源,二氧化碳不能為該微生物提供能量,B錯(cuò)誤;無(wú)機(jī)鹽可以為微生物提供碳、氮以外的重要元素,是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),C正確;水是生物體新陳代謝不可缺少的物質(zhì),是該微生物的營(yíng)養(yǎng)要素之一,D正確。3.金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力,常引

42、起骨髓炎等,還可能引起食物中毒。下列實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的做法錯(cuò)誤的是()A.對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理B.帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉C.做完實(shí)驗(yàn)后,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可以飲水D.接種后雙手必須經(jīng)肥皂洗凈,再用70%的酒精棉球擦拭【解析】選C。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)將金黃色葡萄球菌殺死,以免使人致病,接種環(huán)應(yīng)用灼燒滅菌,A正確;帶菌的培養(yǎng)基要經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能倒掉,以免污染環(huán)境,B正確;在微生物培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室中,不能吃東西、飲水等,C錯(cuò)誤;接種后雙手必須用肥皂洗凈,再用70%的酒精棉球擦拭,D正確。4.關(guān)于酵母菌的純培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作,下列說(shuō)法正確的是()A.配制培養(yǎng)基、倒平板、接種需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B.倒平板

43、時(shí),倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋C.劃線接種時(shí),灼燒接種環(huán)后立即進(jìn)行再次劃線D.劃線接種結(jié)束后,需將平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)【解析】選D。配制培養(yǎng)基不需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,A錯(cuò)誤。倒平板時(shí),應(yīng)立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,B錯(cuò)誤。劃線接種時(shí),灼燒接種環(huán)冷卻后進(jìn)行再次劃線,C錯(cuò)誤。劃線接種結(jié)束后,需將平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),D正確。5.下列依次表示倒平板、接種的位置,以及平板劃線法接種的路徑示意圖,其中錯(cuò)誤的是() 【解析】選D。倒平板時(shí),用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,防止空氣中的雜菌污染,A正確;左手將培養(yǎng)

44、皿打開一條縫隙,右手將蘸有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),B正確;不同區(qū)域內(nèi)劃線,而且每次轉(zhuǎn)換劃線角度后再進(jìn)行劃線,讓菌種來(lái)源于上一次劃線末端,C正確;下一次劃線沒有從上一次劃線末端開始,D錯(cuò)誤。6.產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)菌落的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A.同種少數(shù)細(xì)菌,液體培養(yǎng)基B.許多細(xì)菌,液體培養(yǎng)基C.同種少數(shù)細(xì)菌,固體培養(yǎng)基D.許多細(xì)菌, 固體培養(yǎng)基【解析】選C。菌落是一個(gè)細(xì)菌或幾個(gè)細(xì)菌的子細(xì)胞群體,形成于固體培養(yǎng)基上,有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu),所以肉眼可見。同種細(xì)菌形成的菌落,形態(tài)結(jié)構(gòu)是相同的;如果有許多細(xì)菌形成的菌落, 就不可能有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài),所以C項(xiàng)正確。7.(2020鄭州高二檢測(cè))下列有關(guān)微生物培養(yǎng)及

45、培養(yǎng)基的描述錯(cuò)誤的是()A.培養(yǎng)基必須包含的成分有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子及瓊脂B.根據(jù)物理性質(zhì)不同,培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基C.培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要把培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或微堿性D.平板劃線法接種時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作【解析】選A。各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽,此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求,A錯(cuò)誤;根據(jù)物理性質(zhì)不同,培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基,B正確;培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要把培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或微堿性,C正確;平板劃線法接種時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作,防止雜菌污染,D正確。8.接種是微生物培養(yǎng)和分離等過(guò)程的必要步驟之一。下列關(guān)于

46、接種的敘述不正確的是()A.接種通常指無(wú)菌條件下將微生物接入培養(yǎng)基的操作B.接種前需要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌,接種后則無(wú)須滅菌C.接種通常在酒精燈火焰附近進(jìn)行D.接種環(huán)不能將培養(yǎng)基的表面劃破【解析】選B。無(wú)菌條件下將微生物接入培養(yǎng)基的操作過(guò)程稱為接種,A正確;接種前需要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌,接種后也需滅菌,防止污染環(huán)境和感染操作者,B錯(cuò)誤;為避免雜菌污染,接種通常在酒精燈火焰附近進(jìn)行,C正確;接種時(shí)接種環(huán)不能將培養(yǎng)基的表面劃破,D正確。二、非選擇題(共2小題,共30分)9.(12分)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸至馬鈴薯軟爛,過(guò)濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量葡萄糖和瓊脂,用蒸餾水定容后滅菌,

47、得到馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長(zhǎng)提供了多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有_(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參與合成的生物大分子有_(答出兩點(diǎn)即可)。(2)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基在進(jìn)行接種前要進(jìn)行_。將酵母菌菌種劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到菌落,菌落的含義是_。(3)該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)劃分屬于_培養(yǎng)基,若要對(duì)酵母菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),此培養(yǎng)基中不應(yīng)加入的物質(zhì)是_?！窘馕觥?1)馬鈴薯浸出液中含有淀粉、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、水等多種物質(zhì),因此,除氮源外其中還有微生物生長(zhǎng)所需要的碳源、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)要素。進(jìn)入

48、細(xì)胞的氮源可參與合成蛋白質(zhì)、核酸(DNA、RNA)等含氮的生物大分子。(2)培養(yǎng)基在使用前常用高壓蒸汽滅菌法滅菌;菌落概念見答案。(3)該培養(yǎng)基中有凝固劑,屬于固體培養(yǎng)基,對(duì)微生物進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),一般用液體培養(yǎng)基。答案:(1)碳源、無(wú)機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(2)(高壓蒸汽)滅菌分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成的肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體(3)固體瓊脂10.(18分)自然界中有多種微生物,將其進(jìn)行合理篩選、培養(yǎng)和應(yīng)用,能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領(lǐng)域帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)效益。回答下列問(wèn)題。(1)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí),多采取_法,即將培養(yǎng)基置于_條件下維持1530分鐘,目的是殺死培養(yǎng)基中的_

49、。對(duì)接種環(huán)滅菌時(shí)則用_法。(2)若要將微生物采用平板劃線法進(jìn)行分離操作,在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進(jìn)行了4次劃線,則需要對(duì)接種環(huán)灼燒_次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時(shí),要從上次劃線的_開始劃線,最后一次劃的線不能與第一次劃的線_。(3)將接種后的固體培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中_培養(yǎng),以減少培養(yǎng)基中的水分揮發(fā)。其中,培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了_?！窘馕觥?1)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí),多采取高壓蒸汽滅菌法,即將培養(yǎng)基置于壓力100 kPa、溫度121 條件下維持1530分鐘,目的是殺死培養(yǎng)基中的所有微生物(微生物和芽孢、孢子)。對(duì)接種環(huán)滅菌用灼燒滅菌法。(2)接種環(huán)在每次接種前都要

50、灼燒滅菌,最后一次接種完也要滅菌,所以在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進(jìn)行了4次劃線,則需要對(duì)接種環(huán)灼燒5次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時(shí),要從上次劃線的末端開始劃線,使菌體的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少,最終獲得由單個(gè)菌體形成的單個(gè)菌落。最后一次劃的線不能與第一次劃的線相連。(3)將接種后的固體培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中倒置培養(yǎng),以減少培養(yǎng)基中的水分揮發(fā)。培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了作為對(duì)照組,排除培養(yǎng)基被雜菌污染。答案:(1)高壓蒸汽滅菌壓力100 kPa、溫度121 所有微生物(微生物和芽孢、孢子) 灼燒滅菌(2)5末端相連(或相接、相交等意思正確即可)(3)倒置作為對(duì)照組,排除培養(yǎng)基被雜菌污染 【互動(dòng)探究】在平板劃線法操作過(guò)程中,為什么在第二次及以后劃線時(shí),總是從上一次劃線的末端開始?提示:目的是將聚集的菌種逐步稀釋,以便得到單菌落。 (10分鐘30分)1.(5分)下表、 是用來(lái)培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在中正常生長(zhǎng)繁殖;甲能在中正常生長(zhǎng)繁殖,而乙和丙都不能