免疫缺陷及免疫應(yīng)用

1、目的要求目的要求 1、掌握：免疫缺陷病、自身免疫性疾病和腫、掌握：免疫缺陷病、自身免疫性疾病和腫 瘤抗原的概念；瘤抗原的概念； 2、熟悉：免疫缺陷病和自身免疫性疾病的基、熟悉：免疫缺陷病和自身免疫性疾病的基 本特征；腫瘤逃避機(jī)體免疫的主要機(jī)制；本特征；腫瘤逃避機(jī)體免疫的主要機(jī)制； 3、了解：常見的免疫缺陷病和自身免疫性疾、了解：常見的免疫缺陷病和自身免疫性疾 ?。幻庖呷毕莶『妥陨砻庖咝约膊〉闹委煵。幻庖呷毕莶『妥陨砻庖咝约膊〉闹委?原則；腫瘤抗原的分類；原則；腫瘤抗原的分類； 一、免疫缺陷病一、免疫缺陷病 二、自身免疫性疾病二、自身免疫性疾病 三、腫瘤免疫三、腫瘤免疫 免疫缺陷病免疫缺陷病 （

2、immunodeficiency disease IDD） 是由于遺傳因素或其他多種原因造成是由于遺傳因素或其他多種原因造成 的，免疫系統(tǒng)先天發(fā)育不全或后天損傷的，免疫系統(tǒng)先天發(fā)育不全或后天損傷 而導(dǎo)致的，免疫成分缺失或功能障礙所而導(dǎo)致的，免疫成分缺失或功能障礙所 引起的臨床綜合征。引起的臨床綜合征。 一、免疫缺陷病一、免疫缺陷病 分類分類 原發(fā)性（先天性）原發(fā)性（先天性）PIDDPIDD 繼發(fā)性（獲得性）繼發(fā)性（獲得性）AIDDAIDD 原發(fā)性原發(fā)性 體液免疫缺陷體液免疫缺陷 細(xì)胞免疫缺陷細(xì)胞免疫缺陷 聯(lián)合免疫缺陷聯(lián)合免疫缺陷 吞噬細(xì)胞缺陷吞噬細(xì)胞缺陷 補(bǔ)體缺陷補(bǔ)體缺陷 （一（一） IDD共

3、同特征：共同特征： 易并發(fā)感染易并發(fā)感染 易發(fā)生惡性腫瘤易發(fā)生惡性腫瘤 易自身免疫性疾病易自身免疫性疾病 多有遺傳傾向多有遺傳傾向 是由于免疫系統(tǒng)先天性（多為遺傳性）是由于免疫系統(tǒng)先天性（多為遺傳性） 發(fā)育缺陷而導(dǎo)致免疫功能不全。發(fā)育缺陷而導(dǎo)致免疫功能不全。 分類：分類： 特異性免疫缺陷（特異性免疫缺陷（T、B細(xì)胞和聯(lián)合缺陷）細(xì)胞和聯(lián)合缺陷） 非特異性免疫缺陷（補(bǔ)體與吞噬細(xì)胞缺陷）非特異性免疫缺陷（補(bǔ)體與吞噬細(xì)胞缺陷） （二）、原發(fā)性免疫缺陷（二）、原發(fā)性免疫缺陷 原發(fā)性原發(fā)性B細(xì)胞缺陷細(xì)胞缺陷 特點(diǎn)：特點(diǎn)：外周血外周血Bcell數(shù)量減少，數(shù)量減少，Ig下降或缺如下降或缺如 發(fā)生機(jī)制：發(fā)生機(jī)制

4、：B細(xì)胞分化、發(fā)育障礙、細(xì)胞分化、發(fā)育障礙、Th功能低下功能低下 1）Bruton病（?。▁-性聯(lián)低丙種球蛋白血癥）性聯(lián)低丙種球蛋白血癥） 2）選擇性）選擇性IgA缺陷癥缺陷癥 3）伴）伴IgM增高的免疫球蛋白缺陷增高的免疫球蛋白缺陷 原發(fā)性原發(fā)性T細(xì)胞缺陷細(xì)胞缺陷 特點(diǎn)：特點(diǎn)：對胞內(nèi)菌易感性增高對胞內(nèi)菌易感性增高;生長發(fā)育延遲生長發(fā)育延遲;惡惡 性腫瘤發(fā)生率高性腫瘤發(fā)生率高;外周血外周血T細(xì)胞下降，細(xì)胞下降，DTH反反 應(yīng)陰性等應(yīng)陰性等 發(fā)生機(jī)制：發(fā)生機(jī)制：T細(xì)胞分化、發(fā)育障礙細(xì)胞分化、發(fā)育障礙 1）DiGeorge綜合癥（先天性胸腺發(fā)育綜合癥（先天性胸腺發(fā)育 不全，不全，III、IV咽囊綜

5、合癥）咽囊綜合癥） 2）T細(xì)胞表面分子結(jié)構(gòu)和功能缺陷細(xì)胞表面分子結(jié)構(gòu)和功能缺陷 聯(lián)合性免疫缺陷病聯(lián)合性免疫缺陷病 1）X性連鎖隱性遺傳性連鎖隱性遺傳 2）伴酶缺失的免疫缺陷病）伴酶缺失的免疫缺陷病 3）伴其他嚴(yán)重缺陷的免疫缺陷?。┌槠渌麌?yán)重缺陷的免疫缺陷病 吞噬細(xì)胞功能缺陷吞噬細(xì)胞功能缺陷 特征：特征：吞噬細(xì)胞數(shù)量減少和功能缺陷吞噬細(xì)胞數(shù)量減少和功能缺陷 臨床：臨床：慢性肉芽腫慢性肉芽腫 機(jī)制：機(jī)制：中性粒細(xì)胞缺乏中性粒細(xì)胞缺乏NADH/NADPH氧化氧化 酶，氧依賴殺菌能力減弱酶，氧依賴殺菌能力減弱 補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷 機(jī)制：機(jī)制：補(bǔ)體成分、調(diào)控蛋白遺傳性缺陷補(bǔ)體成分、調(diào)控蛋白遺傳性缺

6、陷 臨床：臨床：遺傳性血管神經(jīng)性水腫遺傳性血管神經(jīng)性水腫-C1INH缺乏，缺乏， 血管擴(kuò)張，毛細(xì)血管通透性增高，皮膚、粘血管擴(kuò)張，毛細(xì)血管通透性增高，皮膚、粘 膜水腫膜水腫 （三）獲得性免疫缺陷綜合征（三）獲得性免疫缺陷綜合征 （AIDS） 機(jī)體感染機(jī)體感染HIV所致的一組臨床綜合征，可所致的一組臨床綜合征，可 出現(xiàn)細(xì)胞免疫嚴(yán)重缺陷，機(jī)會感染、惡性腫出現(xiàn)細(xì)胞免疫嚴(yán)重缺陷，機(jī)會感染、惡性腫 瘤和神經(jīng)系統(tǒng)病變等。瘤和神經(jīng)系統(tǒng)病變等。 特征：特征： u 以以CD4+T細(xì)胞減少為主要特征細(xì)胞減少為主要特征 u 病人多死于腫瘤或感染病人多死于腫瘤或感染 AIDS的的傳染源：傳染源：1.無癥狀攜帶者無癥狀

7、攜帶者 2.AIDS患者患者 AIDS傳播方式傳播方式: 1.性接觸感染性接觸感染 2.血液感染血液感染 3.垂直傳播垂直傳播 病原學(xué)：病原學(xué)： RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒逆轉(zhuǎn)錄病毒 HIV 分分 ： HIV-1和和HIV-2兩型兩型 主要流行主要流行HIV-1 發(fā)病機(jī)制及免疫學(xué)異常發(fā)病機(jī)制及免疫學(xué)異常 感染宿主細(xì)胞導(dǎo)致感染宿主細(xì)胞導(dǎo)致 （1）病毒大量復(fù)制，細(xì)胞死亡）病毒大量復(fù)制，細(xì)胞死亡 （2）細(xì)胞間融合）細(xì)胞間融合 （多核巨細(xì)胞，細(xì)胞死亡）（多核巨細(xì)胞，細(xì)胞死亡） （3）CD4/CD8比例下降、倒置比例下降、倒置 Th數(shù)量下降，功能缺陷數(shù)量下降，功能缺陷 B細(xì)胞多克隆激活細(xì)胞多克隆激活 M ， IL

8、-1，TNF-a升高升高 NK下降，惡性腫瘤、病毒性感染發(fā)生率升下降，惡性腫瘤、病毒性感染發(fā)生率升 高高 （四）（四） 免疫缺陷病的治療原則免疫缺陷病的治療原則 控制感染控制感染 免疫重建免疫重建 基因治療基因治療 免疫制劑免疫制劑 （一）概念和基本特征（一）概念和基本特征 自身免疫性疾?。ㄗ陨砻庖咝约膊。╝utoimmune disease, AID） 是指由于過度而持久的自身免疫應(yīng)答，導(dǎo)是指由于過度而持久的自身免疫應(yīng)答，導(dǎo) 致自身組織損傷和（或）功能障礙而引起的致自身組織損傷和（或）功能障礙而引起的 一類疾病。一類疾病。 二、自身免疫性疾病二、自身免疫性疾病 基本特征：基本特征： 1.患者

9、血液中可測到高效價自身抗體和患者血液中可測到高效價自身抗體和/或自身應(yīng)答或自身應(yīng)答 性性T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 2.自身抗體和自身抗體和/或自身應(yīng)答性或自身應(yīng)答性T淋巴細(xì)胞作用于表達(dá)淋巴細(xì)胞作用于表達(dá) 相應(yīng)抗原的組織細(xì)胞，造成結(jié)構(gòu)損傷或功能障礙相應(yīng)抗原的組織細(xì)胞，造成結(jié)構(gòu)損傷或功能障礙 3.動物實(shí)驗可復(fù)制出與自身免疫病相似的動物模型動物實(shí)驗可復(fù)制出與自身免疫病相似的動物模型 ，用患者血清或致敏淋巴細(xì)胞可使疾病轉(zhuǎn)移，某些自，用患者血清或致敏淋巴細(xì)胞可使疾病轉(zhuǎn)移，某些自 身抗體可通過胎盤引起新生兒自身免疫病身抗體可通過胎盤引起新生兒自身免疫病 4.病情轉(zhuǎn)歸與自身免疫反應(yīng)的強(qiáng)度密切相關(guān)病情轉(zhuǎn)歸與自身免疫

10、反應(yīng)的強(qiáng)度密切相關(guān) 5.反復(fù)發(fā)作、慢性遷延反復(fù)發(fā)作、慢性遷延 6.有遺傳傾向，易發(fā)生于女性有遺傳傾向，易發(fā)生于女性 器官特異性自身免疫?。ㄆ鞴偬禺愋宰陨砻庖卟。╫rganspecific autoimmunedisease）：病變常局限于某）：病變常局限于某 一特定的器官，由對器官特異性抗原的免疫一特定的器官，由對器官特異性抗原的免疫 應(yīng)答引起；應(yīng)答引起； 器官非特異性自身免疫病（器官非特異性自身免疫?。╪on-organ specificautoimmunedisease）：又稱全）：又稱全 身性身性/系統(tǒng)性自身免疫病系統(tǒng)性自身免疫病/結(jié)締組織病結(jié)締組織病/膠原病，膠原病， 病變可見于多種器

11、官和結(jié)締組織；病變可見于多種器官和結(jié)締組織； （二）、自身免疫病的分類（二）、自身免疫病的分類 機(jī)制：機(jī)制： 自身抗體和（或）自身反應(yīng)性自身抗體和（或）自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞介淋巴細(xì)胞介 導(dǎo)的自身細(xì)胞或自身成分發(fā)生的免疫應(yīng)答導(dǎo)的自身細(xì)胞或自身成分發(fā)生的免疫應(yīng)答 與某些超敏反應(yīng)發(fā)病機(jī)制相同與某些超敏反應(yīng)發(fā)病機(jī)制相同 典型疾病：典型疾?。?自身免疫性溶血性貧血自身免疫性溶血性貧血 自身免疫性血小板減少性紫癜自身免疫性血小板減少性紫癜 自身免疫性中性粒細(xì)胞減少癥自身免疫性中性粒細(xì)胞減少癥 毒性彌漫性甲狀腺腫（毒性彌漫性甲狀腺腫（Gravesdisease） （三）、損傷機(jī)制及典型疾病（三）、損傷機(jī)制及

12、典型疾病 確切原因目前仍不很清楚確切原因目前仍不很清楚 1、抗原方面的因素、抗原方面的因素 免疫隔離部位抗原的釋放免疫隔離部位抗原的釋放 自身抗原的改變自身抗原的改變 分子模擬分子模擬 2、免疫系統(tǒng)方面的因素、免疫系統(tǒng)方面的因素 免疫忽視的打破免疫忽視的打破 表位擴(kuò)展表位擴(kuò)展 3、遺傳因素、遺傳因素 （四）、發(fā)病相關(guān)因素（四）、發(fā)病相關(guān)因素 1、預(yù)防和控制微生物、預(yù)防和控制微生物 2、應(yīng)用免疫抑制劑、應(yīng)用免疫抑制劑 3、應(yīng)用細(xì)胞因子及其受體的阻斷劑、應(yīng)用細(xì)胞因子及其受體的阻斷劑 4、重建對自身抗原的特異性免疫耐受、重建對自身抗原的特異性免疫耐受 （五）、治療原則（五）、治療原則 腫瘤免疫是研究

13、腫瘤免疫原性、機(jī)體腫瘤免疫是研究腫瘤免疫原性、機(jī)體 對腫瘤的免疫監(jiān)視和免疫應(yīng)答、腫瘤的對腫瘤的免疫監(jiān)視和免疫應(yīng)答、腫瘤的 免疫逃逸機(jī)制以及腫瘤的免疫診斷與免免疫逃逸機(jī)制以及腫瘤的免疫診斷與免 疫防治疫防治 三、腫瘤免疫三、腫瘤免疫 1、化學(xué)或物理的因素誘發(fā)的腫瘤抗原、化學(xué)或物理的因素誘發(fā)的腫瘤抗原 2、病毒誘發(fā)的腫瘤抗原、病毒誘發(fā)的腫瘤抗原 3、自發(fā)性腫瘤抗原、自發(fā)性腫瘤抗原 4、胚胎抗原或分化抗原、胚胎抗原或分化抗原 （一）、腫瘤抗原（一）、腫瘤抗原 免疫原性強(qiáng)的腫瘤，主要通過適應(yīng)性免疫應(yīng)答發(fā)免疫原性強(qiáng)的腫瘤，主要通過適應(yīng)性免疫應(yīng)答發(fā) 揮作用；揮作用； 免疫原性弱的腫瘤主要通過固有性免疫應(yīng)答

14、機(jī)制免疫原性弱的腫瘤主要通過固有性免疫應(yīng)答機(jī)制 發(fā)揮作用；發(fā)揮作用； CD8+CTL介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答起重要的作用；介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答起重要的作用； CD4+Th細(xì)胞通過分泌各種細(xì)胞因子以及輔助誘導(dǎo)細(xì)胞通過分泌各種細(xì)胞因子以及輔助誘導(dǎo) 和激活和激活CD8+CTL （二）、機(jī)體抗腫瘤的免疫效應(yīng)機(jī)制（二）、機(jī)體抗腫瘤的免疫效應(yīng)機(jī)制 腫瘤細(xì)胞的抗原缺失；腫瘤細(xì)胞的抗原缺失； 腫瘤細(xì)胞漏逸；腫瘤細(xì)胞漏逸； 腫瘤細(xì)胞腫瘤細(xì)胞MHC-I類分子表達(dá)低下；類分子表達(dá)低下； 腫瘤細(xì)胞分泌的免疫抑制因子；腫瘤細(xì)胞分泌的免疫抑制因子； 腫瘤細(xì)胞共刺激信號異常；腫瘤細(xì)胞共刺激信號異常； 腫瘤細(xì)胞抗凋亡作用腫瘤細(xì)胞抗凋

15、亡作用 （三）、腫瘤的免疫逃逸機(jī)制（三）、腫瘤的免疫逃逸機(jī)制 1、腫瘤的免疫診斷、腫瘤的免疫診斷 檢測腫瘤抗原是目前最常用的腫瘤免疫診斷方法；檢測腫瘤抗原是目前最常用的腫瘤免疫診斷方法； 2、腫瘤的免疫治療、腫瘤的免疫治療 主動免疫治療主動免疫治療 被動免疫治療被動免疫治療 （四）、腫瘤的免疫診斷和治療（四）、腫瘤的免疫診斷和治療 免疫學(xué)應(yīng)用 掌握：抗原或抗體檢測的基本原理；凝集反應(yīng)、掌握：抗原或抗體檢測的基本原理；凝集反應(yīng)、 沉淀反應(yīng)的概念及方法。人工主動免疫和人工被沉淀反應(yīng)的概念及方法。人工主動免疫和人工被 動免疫的概念和特點(diǎn)。動免疫的概念和特點(diǎn)。 熟悉：免疫標(biāo)記技術(shù)的常見方法；免疫預(yù)防和

16、免熟悉：免疫標(biāo)記技術(shù)的常見方法；免疫預(yù)防和免 疫治療的基本概念和種類。疫治療的基本概念和種類。 了解：細(xì)胞因子的檢測。免疫重建的概念；常用了解：細(xì)胞因子的檢測。免疫重建的概念；常用 免疫增強(qiáng)劑、免疫抑制劑及新型疫苗的發(fā)展。免疫增強(qiáng)劑、免疫抑制劑及新型疫苗的發(fā)展。 目的要求目的要求 免疫學(xué)檢測免疫學(xué)檢測 免疫預(yù)防免疫預(yù)防 免疫治療免疫治療 免疫學(xué)檢測免疫學(xué)檢測 利用免疫學(xué)原理建立的免疫學(xué)檢測技術(shù)利用免疫學(xué)原理建立的免疫學(xué)檢測技術(shù) 主要應(yīng)用于對多種免疫性疾?。ǜ腥拘约仓饕獞?yīng)用于對多種免疫性疾病（感染性疾 病、免疫缺陷病、超敏反應(yīng)、自身免疫病、病、免疫缺陷病、超敏反應(yīng)、自身免疫病、 移植排斥反應(yīng)和腫

17、瘤等）的診斷、療效評移植排斥反應(yīng)和腫瘤等）的診斷、療效評 估、發(fā)病機(jī)制探討、以及對抗原性物質(zhì)或估、發(fā)病機(jī)制探討、以及對抗原性物質(zhì)或 免疫細(xì)胞的定性、定量，對細(xì)胞因子、粘免疫細(xì)胞的定性、定量，對細(xì)胞因子、粘 附分子及細(xì)胞受體的檢測等。附分子及細(xì)胞受體的檢測等。 一、基于抗原一、基于抗原-抗體反應(yīng)的檢測抗體反應(yīng)的檢測 二、免疫細(xì)胞檢測二、免疫細(xì)胞檢測 三、免疫分子檢測三、免疫分子檢測 四、免疫學(xué)診斷與監(jiān)測四、免疫學(xué)診斷與監(jiān)測 一、基于抗原一、基于抗原-抗體反應(yīng)的檢測抗體反應(yīng)的檢測 抗原抗原-抗體反應(yīng)抗體反應(yīng) 指抗原與相應(yīng)抗體在體內(nèi)、外發(fā)生的高指抗原與相應(yīng)抗體在體內(nèi)、外發(fā)生的高 度特異性結(jié)合反應(yīng)。度

18、特異性結(jié)合反應(yīng)。 又稱血清學(xué)反應(yīng)又稱血清學(xué)反應(yīng) 抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ)抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ) 抗原決定基與互補(bǔ)決定區(qū)之間的結(jié)構(gòu)互抗原決定基與互補(bǔ)決定區(qū)之間的結(jié)構(gòu)互 補(bǔ)，結(jié)合力涉及氫鍵、靜電引力、疏水鍵補(bǔ)，結(jié)合力涉及氫鍵、靜電引力、疏水鍵 和范德華力等。和范德華力等。 反應(yīng)分為兩個階段：反應(yīng)分為兩個階段： 特異性結(jié)合階段特異性結(jié)合階段 可見反應(yīng)階段可見反應(yīng)階段 1 電解質(zhì)電解質(zhì)：抗原：抗原-抗體反應(yīng)通常應(yīng)用抗體反應(yīng)通常應(yīng)用0.85%的的 氯化鈉作為稀釋液，以供給適應(yīng)濃度的電氯化鈉作為稀釋液，以供給適應(yīng)濃度的電 解質(zhì)。解質(zhì)。 2 溫度溫度：一般常使用反應(yīng)在：一般常使用反應(yīng)在37度水浴或

19、孵育度水浴或孵育 箱中進(jìn)行。箱中進(jìn)行。 3 酸堿度酸堿度：抗原：抗原-抗體反應(yīng)適應(yīng)的酸堿度一般抗體反應(yīng)適應(yīng)的酸堿度一般 為為PH68。 4 抗原和抗體性質(zhì)抗原和抗體性質(zhì) 抗原抗原-抗體反應(yīng)的影響因素抗體反應(yīng)的影響因素 抗原抗原-抗體反應(yīng)的檢測方法抗體反應(yīng)的檢測方法 凝集反應(yīng)凝集反應(yīng) 沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng) 補(bǔ)體參與的反應(yīng)補(bǔ)體參與的反應(yīng) 免疫標(biāo)記技術(shù)免疫標(biāo)記技術(shù) 凝集反應(yīng)（凝集反應(yīng)（agglutination） 細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體 結(jié)合后形成凝集結(jié)合后形成凝集 現(xiàn)象，稱為現(xiàn)象，稱為凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)。 直接凝集：將細(xì)菌或紅細(xì)胞與相應(yīng)的抗直接凝集：將細(xì)菌或

20、紅細(xì)胞與相應(yīng)的抗 體直接反應(yīng)，出現(xiàn)細(xì)菌凝集或紅細(xì)胞凝集體直接反應(yīng)，出現(xiàn)細(xì)菌凝集或紅細(xì)胞凝集 現(xiàn)象。又分為玻片法和試管法?，F(xiàn)象。又分為玻片法和試管法。 間接凝集：將可溶性抗原包被在紅細(xì)胞間接凝集：將可溶性抗原包被在紅細(xì)胞 或乳膠顆粒表面，與相應(yīng)抗體反應(yīng)出現(xiàn)顆或乳膠顆粒表面，與相應(yīng)抗體反應(yīng)出現(xiàn)顆 粒凝集現(xiàn)象。粒凝集現(xiàn)象。 沉淀反應(yīng)（沉淀反應(yīng)（ precipitation ） 可溶性抗原（血清蛋白質(zhì)、細(xì)胞裂解液可溶性抗原（血清蛋白質(zhì)、細(xì)胞裂解液 或組織浸液等）與相應(yīng)抗體結(jié)合后，在一定或組織浸液等）與相應(yīng)抗體結(jié)合后，在一定 條件下，出現(xiàn)肉眼可見的沉淀。條件下，出現(xiàn)肉眼可見的沉淀。 補(bǔ)體參與的反應(yīng)補(bǔ)體參

21、與的反應(yīng) 補(bǔ)體結(jié)合試驗是一種有補(bǔ)體參與，并補(bǔ)體結(jié)合試驗是一種有補(bǔ)體參與，并 以綿羊紅細(xì)胞和溶血素（紅細(xì)胞的特異抗以綿羊紅細(xì)胞和溶血素（紅細(xì)胞的特異抗 體）是否發(fā)生溶血反應(yīng)作指示的一種高靈體）是否發(fā)生溶血反應(yīng)作指示的一種高靈 敏度的抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)。敏度的抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)。 免疫標(biāo)記技術(shù)免疫標(biāo)記技術(shù) 用用熒光素、酶或放射性核素?zé)晒馑?、酶或放射性核素等?biāo)等標(biāo) 記抗體或抗原，進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，記抗體或抗原，進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)， 具有高靈敏性、快速、定性、定量具有高靈敏性、快速、定性、定量 等優(yōu)點(diǎn)。等優(yōu)點(diǎn)。 免疫熒光法：常用免疫熒光法：常用FITC、PE等等 酶免疫測定：常用酶免疫測定：常用HRP、

22、AP等等 放射免疫測定：常用放射免疫測定：常用125I 和和131I 化學(xué)發(fā)光免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫分析 免疫印跡免疫印跡(Western Blot) 檢測各群體淋巴細(xì)胞的數(shù)量與功能是檢測各群體淋巴細(xì)胞的數(shù)量與功能是 觀察機(jī)體免疫狀態(tài)的重要手段。外周血是觀察機(jī)體免疫狀態(tài)的重要手段。外周血是 病人主要的檢測標(biāo)本，但僅代表再循環(huán)的病人主要的檢測標(biāo)本，但僅代表再循環(huán)的 淋巴細(xì)胞。實(shí)驗動物還可取胸腺、脾、淋淋巴細(xì)胞。實(shí)驗動物還可取胸腺、脾、淋 巴結(jié)等作為標(biāo)本進(jìn)行檢查。巴結(jié)等作為標(biāo)本進(jìn)行檢查。 二、免疫細(xì)胞的檢測二、免疫細(xì)胞的檢測 PBMC 多形核白細(xì)胞多形核白細(xì)胞 紅細(xì)胞紅細(xì)胞 血漿血漿 分離液分離液

23、玻璃平皿玻璃平皿 單核細(xì)胞吸附單核細(xì)胞吸附, 未吸附的為未吸附的為淋淋 巴細(xì)胞巴細(xì)胞. 根據(jù)比重的不同將血液離心分層根據(jù)比重的不同將血液離心分層 取取PBMC 一一 免疫細(xì)胞的分離免疫細(xì)胞的分離 1.外周血單個核細(xì)胞的分離外周血單個核細(xì)胞的分離 常用密度梯度離心法常用密度梯度離心法 2.亞群的分離亞群的分離 尼龍棉柱分離尼龍棉柱分離-B細(xì)胞細(xì)胞 E花環(huán)分離花環(huán)分離-T細(xì)胞細(xì)胞 流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù) 免疫磁珠免疫磁珠 T E花環(huán)花環(huán) 流式細(xì)胞儀工作原理流式細(xì)胞儀工作原理 3、淋巴細(xì)胞亞群的計數(shù)、淋巴細(xì)胞亞群的計數(shù) 根據(jù)表面標(biāo)志不同，分類計數(shù)根據(jù)表面標(biāo)志不同，分類計數(shù) 免疫熒光免疫熒光 酶免疫組化

24、酶免疫組化 流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù) 二、免疫細(xì)胞功能測定二、免疫細(xì)胞功能測定 1、T細(xì)胞功能試驗：細(xì)胞功能試驗： T細(xì)胞增殖試驗細(xì)胞增殖試驗 3H-TdR摻入法 摻入法 MTT法法 細(xì)胞毒試驗細(xì)胞毒試驗 2、B細(xì)胞功能測定：溶血空斑試驗細(xì)胞功能測定：溶血空斑試驗 3、皮膚實(shí)驗：、皮膚實(shí)驗： 檢測細(xì)胞免疫功能檢測細(xì)胞免疫功能 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗（形態(tài)學(xué)示意圖）淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗（形態(tài)學(xué)示意圖） 原理：原理：人人T細(xì)胞表面有細(xì)胞表面有PHA或或ConA受體，受體， T細(xì)胞在體外受細(xì)胞在體外受PHA或或ConA的刺激后能轉(zhuǎn)的刺激后能轉(zhuǎn) 化為體積較大、代謝旺盛、且能進(jìn)行分裂化為體積較大、代謝旺盛、且能進(jìn)行分

25、裂 的淋巴細(xì)胞，以此測定的淋巴細(xì)胞，以此測定T細(xì)胞的功能。細(xì)胞的功能。 PHA刺激刺激 4872小時小時 三、免疫分子檢測三、免疫分子檢測 四、免疫學(xué)診斷與監(jiān)測四、免疫學(xué)診斷與監(jiān)測 免疫預(yù)防免疫預(yù)防 應(yīng)用生物制品接種，使機(jī)體產(chǎn)生對相應(yīng)疾應(yīng)用生物制品接種，使機(jī)體產(chǎn)生對相應(yīng)疾 病免疫力的方法。病免疫力的方法。 中國古代種人痘中國古代種人痘 Boywithsmallpox 1979年年WHO宣布在全球范圍內(nèi)消滅了天花病毒。宣布在全球范圍內(nèi)消滅了天花病毒。 機(jī)體獲得特異性免疫通過兩種方式：機(jī)體獲得特異性免疫通過兩種方式： 自然免疫自然免疫 人工免疫人工免疫 人工免疫概念及種類人工免疫概念及種類 人工免

26、疫：人工免疫：指有計劃、有目的地給機(jī)體輸入指有計劃、有目的地給機(jī)體輸入 抗原、特異性抗體或免疫細(xì)胞等制品，使抗原、特異性抗體或免疫細(xì)胞等制品，使 機(jī)體獲得對某種疾病的特異性抵抗力，從機(jī)體獲得對某種疾病的特異性抵抗力，從 而達(dá)到預(yù)防或治療某些疾病的方法。而達(dá)到預(yù)防或治療某些疾病的方法。 人工主動免疫人工主動免疫 人工被動免疫人工被動免疫 人工主動免疫：人工主動免疫： 是給機(jī)體輸入疫苗或類毒素等抗原物是給機(jī)體輸入疫苗或類毒素等抗原物 質(zhì)，剌激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫力。質(zhì)，剌激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫力。 1、滅活疫苗：用物理或化學(xué)的方法將病原、滅活疫苗：用物理或化學(xué)的方法將病原 微生物殺死制備而成的制劑。又

27、稱死疫苗。微生物殺死制備而成的制劑。又稱死疫苗。 2、減毒活疫苗：用人工變異或從自然界篩、減毒活疫苗：用人工變異或從自然界篩 選獲得的減毒或無毒的活的病原微生物制選獲得的減毒或無毒的活的病原微生物制 成的制劑。又稱活疫苗。成的制劑。又稱活疫苗。 3、類毒素：用、類毒素：用0.3-0.4%甲醛處理外毒素，甲醛處理外毒素， 使其失去毒性，保留抗原性的物質(zhì)。使其失去毒性，保留抗原性的物質(zhì)。 4、新型疫苗：亞單位疫苗、合成疫苗、基、新型疫苗：亞單位疫苗、合成疫苗、基 因工程疫苗因工程疫苗 減毒活疫苗減毒活疫苗 Attenuated Vaccines 卡介苗卡介苗 Bacillus Calmette-G

28、uerinBacillus Calmette-Guerin（BCGBCG） 風(fēng)疹風(fēng)疹 RubellaRubella水痘水痘 VaricellaVaricella 麻疹麻疹 MeaselesMeaseles 腮腺炎腮腺炎 MumpsMumps 脊髓灰質(zhì)炎脊髓灰質(zhì)炎 PolioPolio 輪狀病毒輪狀病毒 RotavirusRotavirus 甲肝甲肝 Hepatitis AHepatitis A 黃熱病黃熱病 Yellow feverYellow fever 滅活疫苗滅活疫苗 Inactivated Vaccines 狂犬病狂犬病 RabiesRabies 傷寒傷寒 typhoidtyphoid

29、 霍亂霍亂 choleracholera 流行性感冒流行性感冒 InfluenzaInfluenza 百日咳百日咳 pertussispertussis Comparison of attenuated and inactivated vaccines 特點(diǎn)特點(diǎn) 制劑特點(diǎn)制劑特點(diǎn) 接種劑量及次數(shù)接種劑量及次數(shù) 恢復(fù)傾向恢復(fù)傾向 無毒或減毒的活微生物無毒或減毒的活微生物 量較小量較小 一般僅需要一次一般僅需要一次 相對穩(wěn)定性相對穩(wěn)定性不穩(wěn)定不穩(wěn)定 可以回復(fù)為毒株可以回復(fù)為毒株 強(qiáng)毒死微生物強(qiáng)毒死微生物 量較大量較大 需要多次接種需要多次接種 較穩(wěn)定較穩(wěn)定 不回復(fù)為毒株不回復(fù)為毒株 免疫效果免疫效

30、果較好較好 維持維持3-53-5年甚至更長年甚至更長 較差較差 維持半年至一年維持半年至一年 活疫苗活疫苗死疫苗死疫苗 誘導(dǎo)的免疫類型誘導(dǎo)的免疫類型 體液免疫和細(xì)胞免疫體液免疫和細(xì)胞免疫體液免疫為主體液免疫為主 人工被動免疫：人工被動免疫： 指應(yīng)用人工的方法直接給機(jī)體輸入免指應(yīng)用人工的方法直接給機(jī)體輸入免 疫效應(yīng)分子，使其獲得特異性免疫力，到疫效應(yīng)分子，使其獲得特異性免疫力，到 達(dá)緊急預(yù)防和治療的目的。達(dá)緊急預(yù)防和治療的目的。 1、抗毒素：是抗細(xì)菌外毒素的抗體。、抗毒素：是抗細(xì)菌外毒素的抗體。 多為馬血清制劑，具有抗體性和免疫原性。多為馬血清制劑，具有抗體性和免疫原性。 2、人丙種球蛋白：從正

31、常人血漿或健、人丙種球蛋白：從正常人血漿或健 康產(chǎn)婦胎盤中提取制成?？诞a(chǎn)婦胎盤中提取制成。 3、人特異性免疫球蛋白：來源于恢復(fù)、人特異性免疫球蛋白：來源于恢復(fù) 期病人及含高價特異性抗體供血者血漿，期病人及含高價特異性抗體供血者血漿， 或接受類毒素和疫苗免疫者的血漿?；蚪邮茴惗舅睾鸵呙缑庖哒叩难獫{。 項項 目目 人工主動免疫人工主動免疫人工被動免疫人工被動免疫 輸入物質(zhì)輸入物質(zhì) 抗原抗原 抗體抗體 產(chǎn)生免疫力時間產(chǎn)生免疫力時間 慢（慢（2-3周）周） 快（輸注即生效）快（輸注即生效） 免疫力維持時間免疫力維持時間 數(shù)月至數(shù)年數(shù)月至數(shù)年 2-3周周 主要用途主要用途 預(yù)防預(yù)防 治療或緊急預(yù)防治療或

32、緊急預(yù)防 人工主動免疫和人工被動免疫的特點(diǎn)人工主動免疫和人工被動免疫的特點(diǎn) 免疫預(yù)防主要方式是通過接種疫苗實(shí)現(xiàn)免疫預(yù)防主要方式是通過接種疫苗實(shí)現(xiàn) 理想疫苗：理想疫苗： 安全安全 有效有效 實(shí)用實(shí)用 新疫苗新疫苗 類型：類型： 亞單位疫苗亞單位疫苗 合成肽疫苗合成肽疫苗 基因工程疫苗基因工程疫苗 結(jié)合疫苗結(jié)合疫苗載體載體 載體載體 氨基酸氨基酸 載體載體 計劃免疫計劃免疫 概念概念: 根據(jù)疫情監(jiān)測和人群免疫狀況分根據(jù)疫情監(jiān)測和人群免疫狀況分 析，按照規(guī)定的免疫程序析，按照規(guī)定的免疫程序, ,有計劃進(jìn)有計劃進(jìn) 行，人群預(yù)防接種。行，人群預(yù)防接種。 我國推薦的兒童免疫程序我國推薦的兒童免疫程序 年年

33、 齡齡疫疫 苗苗 出生時出生時卡介苗卡介苗 2個月個月三價脊髓灰質(zhì)炎疫苗三價脊髓灰質(zhì)炎疫苗1 三價脊髓灰質(zhì)炎疫苗三價脊髓灰質(zhì)炎疫苗2,百白破百白破13個月個月 三價脊髓灰質(zhì)炎疫苗三價脊髓灰質(zhì)炎疫苗3,百白破百白破24個月個月 5個月個月百白破百白破3 8個月個月 麻疹疫苗麻疹疫苗 1.52歲歲百白破百白破4 4歲歲三價脊髓灰質(zhì)炎疫苗三價脊髓灰質(zhì)炎疫苗4 7歲歲卡介苗麻疹疫苗白喉破傷風(fēng)二聯(lián)疫苗卡介苗麻疹疫苗白喉破傷風(fēng)二聯(lián)疫苗 12歲歲卡介苗卡介苗(農(nóng)村農(nóng)村) 免疫治療免疫治療 概念：概念： 指針對機(jī)體指針對機(jī)體低下低下或者或者亢進(jìn)亢進(jìn)的的 免疫狀態(tài)，人為地免疫狀態(tài)，人為地增強(qiáng)增強(qiáng)或或抑制抑制機(jī)機(jī)

34、 體的免疫功能的治療方法體的免疫功能的治療方法 1.1.特異性免疫治療特異性免疫治療 主動免疫治療：主動免疫治療：人為提供具免疫原性的人為提供具免疫原性的 制劑，使機(jī)體主動產(chǎn)生特異免疫力制劑，使機(jī)體主動產(chǎn)生特異免疫力 被動免疫治療：被動免疫治療：人為提供現(xiàn)成免疫物質(zhì)，人為提供現(xiàn)成免疫物質(zhì)， 直接發(fā)揮免疫效應(yīng)。直接發(fā)揮免疫效應(yīng)。 免疫治療的分類免疫治療的分類 免疫增強(qiáng)療法：感染、腫瘤、免疫增強(qiáng)療法：感染、腫瘤、 免疫缺陷病的治療免疫缺陷病的治療 2.2.非特異性免疫治療非特異性免疫治療 免疫抑制療法：移植排斥、自身免疫病、免疫抑制療法：移植排斥、自身免疫病、 超敏反應(yīng)病超敏反應(yīng)病 常用的免疫增強(qiáng)

35、劑常用的免疫增強(qiáng)劑 免疫因子免疫因子：有轉(zhuǎn)移因子和免疫核糖核酸：有轉(zhuǎn)移因子和免疫核糖核酸 化學(xué)合成藥物化學(xué)合成藥物：如左旋咪唑和西咪替?。喝缱笮溥蚝臀鬟涮娑?微生物制劑微生物制劑：有卡介苗和短小棒狀桿菌：有卡介苗和短小棒狀桿菌 中藥制劑中藥制劑：如香菇、靈芝、黃芪等：如香菇、靈芝、黃芪等 采用免疫抑制劑進(jìn)行的免疫治療采用免疫抑制劑進(jìn)行的免疫治療 化學(xué)合成藥物化學(xué)合成藥物：如激素和某些抗腫瘤藥物：如激素和某些抗腫瘤藥物 真菌代謝產(chǎn)物真菌代謝產(chǎn)物：如環(huán)孢素、：如環(huán)孢素、FK-506FK-506等等 傳統(tǒng)中藥傳統(tǒng)中藥： 如雷公藤多甙如雷公藤多甙 免疫抑制劑主要用于抗器官移植排斥反應(yīng)及免疫抑制劑主要

36、用于抗器官移植排斥反應(yīng)及 自身免疫性疾病。自身免疫性疾病。 3.3.免疫重建與免疫替代療法免疫重建與免疫替代療法 前者指針對免疫缺陷病人輸入造血干前者指針對免疫缺陷病人輸入造血干 細(xì)胞而重建免疫系統(tǒng)；細(xì)胞而重建免疫系統(tǒng)； 后者指輸入機(jī)體缺乏的免疫活性物質(zhì)，后者指輸入機(jī)體缺乏的免疫活性物質(zhì)， 以暫時維持免疫功能。以暫時維持免疫功能。 （三）獲得性免疫缺陷綜合征（三）獲得性免疫缺陷綜合征 （AIDS） 機(jī)體感染機(jī)體感染HIV所致的一組臨床綜合征，可所致的一組臨床綜合征，可 出現(xiàn)細(xì)胞免疫嚴(yán)重缺陷，機(jī)會感染、惡性腫出現(xiàn)細(xì)胞免疫嚴(yán)重缺陷，機(jī)會感染、惡性腫 瘤和神經(jīng)系統(tǒng)病變等。瘤和神經(jīng)系統(tǒng)病變等。 特征：特征： u 以以CD4+T細(xì)胞減少為主要特征細(xì)胞減少為主要特征 u 病人多死于腫瘤或感染病人多死于腫瘤或感染 （一）概念和基本特征（一）概念和基本特征 自身免疫性疾病（自身免疫性疾