氨中毒在家兔肝性腦病發(fā)病機制中的作用

1、氨中毒在家兔肝性腦病發(fā)病機制中的作用謝方洲 2017臨濱 1 班摘要 【目的】對經(jīng)不同處理的實驗動物輸入 NHC，l 觀察出現(xiàn)相 應(yīng)癥狀所需NHCI用量及時間，以探討氨在肝性腦病發(fā)病機制中的作 用；通過耳緣靜脈注射谷氨酸鈉的治療， 探討其治療的病理生理機理。 【方法】全班分為二大組，其中第一 , 二,三. 四組為手術(shù)組，第五 , 六, 七, 八組為假手術(shù)組?！窘Y(jié)果】當(dāng)家兔出現(xiàn)角弓反張時，復(fù)方氯化 銨使家兔大腦功能受影響， 而肝可解氨中毒， 復(fù)方谷氨酸鈉也可緩解 其作用?！窘Y(jié)論】肝具有解毒作用，肝功能不全在肝性腦病的發(fā)生中 占極大地作用。 關(guān)鍵詞： 氨中毒；肝性腦病；復(fù)方氯化銨；復(fù)方 谷氨酸鈉肝

2、性腦病是繼發(fā)于嚴(yán)重肝臟疾病的一系列精神神經(jīng)綜合癥。 有關(guān)肝 性腦病的發(fā)病機制有多種學(xué)說， 其中氨中毒學(xué)說受到重視。 正常情況 下，血氨的來源與清除保持動態(tài)平衡， 而氨在肝中合成尿素是維持此 平衡的關(guān)鍵。 病理情況下當(dāng)肝功能嚴(yán)重受損時， 或慢性肝硬化等疾病 使腸壁吸收腸道內(nèi)生成的氨過多， 或經(jīng)側(cè)枝循環(huán)進入體循環(huán)， 均可導(dǎo) 致血氨升高。 增高的血氨可通過血腦屏障進入腦組織， 通過干擾腦組 織的能量代謝，使腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)發(fā)生改變等作用， 引起腦的功能障礙， 從而出現(xiàn)相應(yīng)的癥狀和體征。 谷氨酸可與血中過多的氨結(jié)合而成為無 毒的谷氨酰胺，由尿排出， 進而降低血氨。谷氨酸還可參與腦細(xì)胞的 代謝，改善中樞神經(jīng)

3、系統(tǒng)的功能。1. 材料和方法：1.1 實驗動物：家兔1.2實驗儀器：10ml注射器、50ml注射器及針頭，手術(shù)剪，鑷子、 止血鉗、兔手術(shù)臺、棉線若干、嬰兒秤、縫針、導(dǎo)管1.3 實驗藥品和試劑：氨基甲酸乙酯，復(fù)方氯化銨溶液，復(fù)方谷氨 酸鈉溶液，醋酸，生理鹽水。1.4 實驗分組：隨機選取一半數(shù)量的實驗動物作為實驗組動物，另 一半動物作為正常對照組動物。1.5 麻醉：取健康家兔稱重， 自耳緣靜脈注射 200g/L 氨基甲酸乙酯 溶液（ 5ml/kg 體重）后，背位固定于兔臺上。1.6 急性肝功能不全動物模型復(fù)制：從胸骨劍突下沿腹正中線行長約68cm的切口，打開腹腔；暴露肝臟，向下壓肝，剪斷肝與橫膈

4、之間的鐮狀韌帶，再將肝葉上翻，鈍性分離肝胃韌帶，使肝葉完全游 離，辨明肝臟各葉。用粗棉線從肝蒂部結(jié)扎肝左外葉、左中葉、右中 葉和方形葉，以阻斷肝血流。對照組動物不結(jié)扎肝臟。1.7 十二指腸插管：沿胃幽門向下找到十二指腸，提出腹腔，用眼科剪在腸壁上剪一小口，將導(dǎo)管插入腸腔約 4cm，沿插管周圍作荷包 縫合，收縮荷包結(jié)扎固定，將腸管回納腹腔，檢查腹內(nèi)無出血，關(guān)閉 腹腔。 1.8 實驗觀察：1.8.1 觀察家兔一般狀況，呼吸（頻率、幅度） 、角膜反射、瞳孔大 小、對刺激的反應(yīng)、是否出現(xiàn)肌肉痙攣、抽搐及強直。1.8.2 十二指腸插管中注入復(fù)方氯化銨溶液： 每隔 5min 向十二指 腸插管中注入25g/

5、L復(fù)方氯化銨溶液5ml，觀察并記錄各項指標(biāo)的變2 / 7 文檔可編輯化，直至出現(xiàn)全身性抽搐、角弓反張為止，記錄所用的復(fù)方氯化銨溶 液的總量，并計算每公斤體重的用量。183治療：自耳緣靜脈緩慢注入25g/L復(fù)方谷氨酸鈉溶液20ml/kg，并按5ml/kg劑量向十二指腸注入10g/L醋酸，觀察并記錄 治療后癥狀有無緩解。2. 結(jié)果：手術(shù)組組別出現(xiàn)肝性腦病癥狀所需復(fù)方氯化銨的量 /ml出現(xiàn)肝性腦病癥狀所需時間/mi n13027235303302743026假手術(shù)組組別出現(xiàn)肝性腦病癥狀所需復(fù)方氯化銨的量 /ml出現(xiàn)肝性腦病癥狀所需時間/mi n555456403674544850503. 實驗討論:

6、3.1分析谷氨酸鈉和醋酸的作用：本組是假手術(shù)組，主要探討氨中毒對家兔腦功能的影響及其作用機 制和谷氨酸鈉和醋酸對肝性腦病的影響及其機制。 谷氨酸是中樞神經(jīng) 系統(tǒng)的一種遞質(zhì)，含量豐富，它在神經(jīng)元間快速興奮性突觸傳遞 和腦發(fā)育調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮重要作用。 由結(jié)果可知，谷氨酸鈉和醋酸對 肝性腦病有一定的治療作用。復(fù)方谷氨酸鈉溶液為氨基酸類藥。 谷氨 酸與血中過多氨結(jié)合而成為無毒的谷氨酰胺，化學(xué)方程式如下圖:cu.-aCOI規(guī)出 C HIKHj mADP+Pi匕京.BE融古應(yīng)陽*、 j3.1.1谷氨酰胺又是廣泛存在于各組織的耗能解毒反應(yīng)，它主要從 腦、肌肉等組織向肝和腎運氨。在腎臟可被谷氨酰胺酶水解釋放氨

7、， 氨與尿中H+結(jié)合成銨鹽而排出體外；在肝臟則合成尿素后經(jīng)血液運 至腎臟隨尿排出。這樣有利于降低及消除血氨，并可改善中樞神經(jīng)系 統(tǒng)功能，從而改善腦病癥狀。所以推注復(fù)方谷氨酸鈉溶液對治療氨中 毒有一定效果。而現(xiàn)在氨中毒學(xué)說在肝性腦病中的發(fā)病機制中又占有 最重要的地位，所以谷氨酸鈉溶液對肝性腦病的治療和預(yù)防有著不可 小覷的作用。3.1.2醋酸可降低血液pH值，可以中和血液中呈堿性的氨，并有效 阻止氨繼續(xù)通過血腦屏障進入腦內(nèi)。3.2.1隨著實驗的進行家兔的肌緊張加劇，以至于出現(xiàn)嘴角抽搐甚5/7文檔可編輯至角弓反張等表現(xiàn)。3.2.2 說明血氨濃度升高，干擾腦組織的能量代謝，主要是干擾葡 萄糖的生物氮化

8、過程， 而腦組織隨時都要依賴血液中的葡萄糖提供能 量。氨與腦內(nèi)的a -酮戊二酸結(jié)合，生成谷氨酸，影響糖代謝，使ATP 產(chǎn)生不足， 產(chǎn)生谷氨酰胺為抑制神經(jīng)的遞質(zhì)， 并使腦內(nèi)興奮性神經(jīng)遞 質(zhì)減少，并且氨對神經(jīng)細(xì)胞膜也有抑制作用是神經(jīng)細(xì)胞興奮性異常， 并干擾神經(jīng)傳導(dǎo)活動。 其中乙酰膽堿有擴張血管減慢心率的作用， 從 而可見家兔呼吸頻率加快的原因。 而其中肌緊張加劇可能由于腦組織 中氨大量增加使大量谷氨酸轉(zhuǎn)化成谷氨酰胺使氨中毒早期生成丫-氨基丁酸的底物-谷氨酸減少，引起腦內(nèi)抑制性遞質(zhì)丫 -氨基丁酸減少有 關(guān)。3.3 本實驗血氨升高的原因：肝具有生物轉(zhuǎn)化的作用，所以在正常 的情況下氨在肝內(nèi)通過鳥氨酸循環(huán)

9、合成尿素而解毒。 但是，實驗中結(jié) 扎了肝，腹腔注射氯化銨的時候，由于氨大多，而清除太少；并且腸 黏膜淤血、水腫， 腸蠕動減弱以及膽汁分泌減少等，導(dǎo)致腸道細(xì)菌活 躍，一方面可使細(xì)菌釋放的氨基酸氧化酶和尿素酶增多，另一方面， 未經(jīng)消化道吸收的蛋白成分在腸道集聚使腸內(nèi)氨基酸增多； 同時在肝 性腦病時兔子躁動不安、 震顫等也會使肌肉的腺苷酸分解加強， 產(chǎn)氨 增多。3.4 復(fù)方氯化銨中毒引起肝性腦病的發(fā)病機制，肝大部分結(jié)扎在實 驗中的作用：3.4.1 據(jù)氨中毒學(xué)說，正常情況下，血氨的來源于清除保持動態(tài)平 衡，而氨在肝中合成尿素是維持此平衡的關(guān)鍵。 在結(jié)扎大部分肝的基 礎(chǔ)上灌注氯化銨導(dǎo)致血氨增高， 增高的

10、血氨可通過血腦屏障進入腦組 織，通 過干擾腦組織的能量代謝，使腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)發(fā)生改變，引起 腦的功能障礙，出現(xiàn)震顫、抽搐、昏迷等類似 肝性腦病癥狀。3.4.2 肝大部分結(jié)扎術(shù)在實驗性肝性腦病中的作用：采用家兔大部 分肝結(jié)扎， 是為了復(fù)制急性肝功能不全的動物模型， 造成肝解毒功能 急劇降低， 在此基礎(chǔ)上經(jīng)十二指腸灌入復(fù)方氯化銨溶液， 導(dǎo)致腸道中 氨生成增多并吸收入血。4. 實驗結(jié)論： 肝具有解毒作用，肝功能不全在肝性腦病的發(fā)生中占極大地作 用。參考文獻1 張迎雪、魏佑震、洪岸 . 谷氨酸鈉對新生豚鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)的 毒性損傷 ( 英文), 泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報 ,2003(3).2 梁敏銳、馮劭婷. 探討中藥及醋酸灌腸佐以靜脈注射谷氨酸鈉對 肝性腦病的解毒作用 3 張志雄.生理學(xué).第 1 版.上海.科學(xué)技術(shù)出 版社，2009.105 1114 陸源、林國華、楊午鳴 . 機能學(xué)實驗教程 .第 2 版. 北京: 科學(xué)出版社.2010.1