病理學技士專業(yè)實踐能力考試大綱知識點

1、專業(yè)實踐能力一、病理解剖技術(shù)1. 病理尸體解剖的方法和步驟（1）病理尸體解剖的準備（2）體表檢查（一） 體表檢查 稱體重，量體長，觀察發(fā)育、營養(yǎng)狀況，檢查體表有無黃疸，發(fā)疳，出血點，疤痕，創(chuàng) 口等，及其部位，大小；眼、耳、鼻、口腔等有無潰瘍、分泌物或液體流出，外生殖器有病變，淺表淋巴 結(jié)腫大否；有無尸冷、僵、腐敗現(xiàn)象。（3）胸腹腔檢查（二） 體腔檢查 1. 胸、腹壁皮膚切開及剝離：根據(jù)情況，選擇丫形、T形或直線切口切開皮膚。切開腹膜時，先切一小 孔，插入兩指，再從兩指之間剪開，以免劃破內(nèi)臟。剝離胸壁皮膚時，應(yīng)注意將胸肌一并剝離，但勿 損及肋間肌。2， 腹腔檢查：檢查腹腔內(nèi)有無積液和積氣，腹膜情

2、況，各器官的位置。與關(guān)系，有無粘連，肝脾腫大否， 其邊緣在鎖骨中線肋緣下及劍突下幾厘米，檢查左右橫膈的高度。（三） 胸腔檢查 1 、必要時在胸腔未切開前檢查有無氣胸?？捎凶⑸淦魑螅诘谝焕唛g處自胸壁刺入，觀察有無氣體 自水面下上升。2. 在肋骨軟骨聯(lián)接線內(nèi)側(cè)約 0.5cm 處，將第二肋骨到肋弓的軟骨切斷，緊沿胸骨后壁將橫及縱隔割離，注 意勿損及心包及大血管，然后檢查胸腔有無積液，其量及性質(zhì)，必要時涂片檢查與細菌培養(yǎng)。3. 切斷第一肋骨，分離胸鎖關(guān)節(jié)，將胸骨及肋骨取下，觀察各器官的位置，兩肺表面情況，胸腺是否已經(jīng) 脂肪化。鋸開胸骨，看骨髓造血情況。4. 自心尖部向上，作人形剪開心包，檢查腔內(nèi)

3、液量，心包膜內(nèi)壁情況，必要時取心血作細菌培養(yǎng)。5. 疑有空氣體栓塞時，將心包剪開一小口，用鑷子拉緊切口兩側(cè)心包膜，心包腔內(nèi)注滿水，然后，在水上 剪開右心房及肺動脈，觀察有無氣泡逸出，或者先結(jié)扎進出心臟的大血管，取出心臟，淹沒于水下剪開右 心，觀察有無氣泡逸出。（4）內(nèi)臟器官的取出及檢查（四） 各臟器的取出 各器官取出前，應(yīng)仔細檢查周圍情況及與其他器官的關(guān)系，檢查有困難時，一時不能明確者，可與其它器官一并取出，然后再仔細檢查。檢查各器官前，應(yīng)稱其重量，量大小。1. 心臟的取出與檢查，在體內(nèi)剖開右心，檢查肺動脈有無栓塞后，將心臟提起，從根部或心包膜內(nèi)壁分別剪斷上、下腔靜脈，（于距瓣膜 2cm處）肺

4、靜脈和主動脈（于距瓣膜5cm處），取出心臟，（若有心、血管畸形，則應(yīng)將心臟連同肺臟一并取出）。檢查心臟增大否，外膜光滑度，有無滲出物等，心臟按血流方 向剖開，測量各瓣膜的周徑及左右心室的厚度。A ：右心剖開法：第一步，用刀或剪將右心從上、下靜脈入口處直線剖開，如欲避免破壞竇房結(jié)，從下腔靜脈向上，剖至房室間溝上1cm處，向右心耳剪開，保持上腔靜脈口完整，上腔靜脈至少保留1cm。第二步，從此線中點沿心臟右緣剖至心尖部，檢查三尖瓣，并用手指檢查動脈有無血栓或狹窄。 第三步，從心尖部沿心室中隔剖至肺動脈，檢查肺動脈瓣。B ：左心剖開法：第一步，用刀或剪將左心房從左、右靜脈入口之間作直線剖開，以手指檢查

5、二尖瓣 是否狹窄。第二步，從此線的左端沿心臟左緣剖開至心尖剖。第三步，從心尖部沿心室中隔，避開肺 動脈剖開肺動脈剖開主動脈，檢查二尖瓣與主動脈瓣。剖開有瓣膜病變的心臟時，應(yīng)注意避免破壞有病變的瓣膜。 心臟剖開后，檢查心肌厚度、硬度、色澤、心內(nèi)膜光滑度，瓣膜周圍有無增厚，及贅生物，有無 狹窄或關(guān)閉不全，檢查冠狀動脈開口情況。2. 肺臟的取出：可由肺根部將主支氣管和血管切斷取出，或與頸部器官一并取出。如兩層胸膜間有粘連，需細心分離，勿損及肺，如粘連牢固，可連同胸膜壁層一并剝離，取出肺臟。取出后檢查其表面 情況。切開檢查肺切面的改變，有無病灶、氣腫、萎陷等，肺門淋巴結(jié)腫大否，切面情況。3. 頸部器官

6、的取出：A,充分分離頸部皮膚與軟組織，用長刀刺入割斷舌下系帶，緊沿下頜骨內(nèi)面向左、右盡量地將下頜與舌間的軟組織分離。B,將舌拉下，自硬腭后緣割離軟腭，注意應(yīng)將兩側(cè)扁桃體完全取下。C,將舌、咽、喉頭、氣管、食管、肺拉下于橫膈上將食管、下腔靜脈及主動脈切斷，連同胸腔 器官一并取出。4. 腹腔及盆腔器官的取出： 一般先將脾臟摘出，繼之取出小腸、腎上腺、肝、膽囊、胃、十二指腸、胰，最后取出腎及盆腔器官。 將脾臟提至腹腔前方，割斷脾門部血管，取出脾臟。檢查其大小，重量，硬度，表面色澤。切面有無 外翻；有無糊狀物刮下，脾門血管及脾小體、脾小梁的情況等。 小腸與大腸的取出前， 應(yīng)檢查腸系膜 淋巴結(jié)及血管，找

7、出空腸的起端，切斷，自腸系膜附著處將腸 割下，直至直腸處將其切斷取出，腸的斷端應(yīng)鉗緊或結(jié)扎，以免糞便污染腹腔。待其他器官檢查完畢后再 檢查腸。先量其長度，在腸系膜附著處沿縱軸剪開腸腔，檢查粘膜有無病變，腔內(nèi)有無寄生蟲等，必要時 可保持腸與腸系膜的關(guān)系，并將其一并取出。 十二指腸在原位從前面剪開，用手擠壓膽囊：看膽道通暢否。沿胃大彎剪開胃，檢查粘膜病變，將胃 及十二指腸從后壁分離，與胰臟一并取出，在檢查胰臟前，注意觀察脾靜脈有何變化。檢察胰臟重量，大 小，硬度，作多橫切面，檢查切面情況。 小心分離腎上腺周圍組織，取出腎上腺，分離右側(cè)腎上腺時，將肝向上方推，注意分離與皮膚上腺相連 的肝組織，腎上腺

8、取出后，作多人橫切面，檢察皮質(zhì)與髓質(zhì)的特征，有無出血等。 取出肝與膽囊前，應(yīng)仔細檢查膽管、門靜脈、肝靜脈，然后剪斷肝門的膽管及血管，分離鐮狀韌帶，將 門靜脈及肝背部部一段下腔靜脈與肝一并取出。檢查肝的大小，重量，硬度，色澤，注意檢查肝靜脈及腔 靜脈，切面外翻否，小葉結(jié)構(gòu)清楚否及有無其它病變。 分離腎周圍脂肪結(jié)締組織，將腎提出，凸面向上剖開，注意包膜剝離要難否，檢查表面的性狀，切面皮 質(zhì)及髓質(zhì)紋理是否清楚，腎盂粘膜有無病變。然后連輸尿管一起取出腎臟。 盆腔內(nèi)器官的取出：先分離腹膜及周圍組織，再取盆腔器官，男性可將直腸、膀胱一并取出，結(jié)腸斷端 應(yīng)結(jié)扎或縫合。（5）尸檢后的修復尸檢時應(yīng)盡少破壞尸體的

9、外形， 檢查完畢后， 應(yīng)吸去體腔內(nèi)的血水， 凡不需保留的器官， 均應(yīng)放回體腔內(nèi)， 并應(yīng)以木屑或其它吸水物質(zhì)填塞，逢合切口?？p合時要盡量注意整副尸體外形，將體表洗凈擦干，包裹或 穿著妥善后放入尸箱內(nèi)。（6）微生物和寄生蟲檢查 采取細菌培養(yǎng)的方法 1. 心血培養(yǎng)標本： 用無菌鑷子提起右心耳，在下腔靜脈入口處的上方進行燒灼消毒，（用一有柄銅片在酒精燈上燒紅，燒灼 器官表面，面積約 2*2cm） .用無菌吸管或注射器從消毒部位插入，順下腔靜脈入口推進，取血液2-3ml在無菌操作下，將吸取之血液立即注入無菌的肉湯培養(yǎng)基，或有玻璃珠的培養(yǎng)瓶內(nèi)，立即洗凈吸管或注射 器，以免凝固，若在右心取不到血液，可從下腔

10、靜脈吸取。腔（胸腔、腹腔）內(nèi)滲出液，心包腔內(nèi)積液，必要時作細菌培養(yǎng)，采取液體時應(yīng)盡量避免污染。采取腦脊 液培養(yǎng)時，于尸檢前用無菌手術(shù)，在第二及第三腰椎間隙作穿刺，取腦脊液2-3ml, 置于無菌試管內(nèi)送檢。腸內(nèi)容物培養(yǎng)：在回腸末端及乙狀結(jié)腸下端，或病變明顯處的漿膜面經(jīng)燒灼滅菌后剪開，用棉花拭子插入 腸腔內(nèi)，在粘膜面擦取粘液、滲出物粘膜，放入無菌試管或培養(yǎng)基內(nèi)送檢。臟器細菌培養(yǎng)：臟器表面灼燒滅菌，切取不小于 2*2*1.5cm 的組織塊，裝無菌容器內(nèi)送檢。 腦組織作病毒分離：用無菌手術(shù)取大腦皮質(zhì)，中腦，海馬，腦橋組織塊，每塊不小于2*2*1.5cm ，以冰瓶保藏迅速送檢。路途遙遠者，可將檢材放入無

11、菌甘油瓶內(nèi)，在低溫下送檢。（7）化學和毒物檢查（8）尸檢記錄 尸體檢時所見由尸檢室技術(shù)人員或指定工作人員，按剖檢者口述填寫臨時記錄單，必要時攝影記錄，做為 書寫尸檢記錄的基礎(chǔ)二、病理大標本制作技術(shù)收集 （ 尸體解剖和活體組織檢查、其次是動物實驗的模型收集標本 取材（越新鮮越好，標本應(yīng)仔細處理，盡可能的修掉多余的組織） 固定（甲醛氣飽和于水的甲醛液，濃度40%；體積 10%，濃度 4%的甲醛固定， 10%福爾馬林）保存（含血多的標本用凱氏法；膽色素用柯氏法；虐色素、脂肪等標本用甲醛）: 修整標本、適當標本缸、標本支架、拴好1. 大體標本的收集、取材、固定和保存（1）（2）（3）（ 4）4. 大體

12、標本的裝缸與封存法（封存在玻璃或有機玻璃標本缸） 的標本略加沖洗、封口（松香蜂蠟、502 膠、玻璃膠封口法）三、組織的取材、固定方法和切片技術(shù)2. 組織固定（1）固定的方法單純固定液（甲醛、重鉻酸鉀、苦味酸、升汞、醋酸、鉻酸、餓酸、丙酮、三氯醋酸、 乙醇）和混合固定液（B-5液淋巴組織、Bouin液結(jié)締組織三色染色、 Carnoy液染色體、Muller液媒染和硬化組織、Orth液胚胎神經(jīng)脂肪、PFG液肽類抗原、PL併口 PLPD夜糖類組織、Rossman夜糖原、Zenker液細胞 核細胞質(zhì)三色染色、 4%多聚甲醛免疫組化、甲醛鈣液脂肪組織組織化學、乙醇甲醛皮下組織肥大細胞、乙 醚乙醇細胞涂片、

13、中性緩沖甲醛液免疫組化、中性甲醛液常用)2用含乙醇固定液(2) 固定后洗滌：一般沖洗 24h小組織210h ( 1用水配制的固定液固定的組織洗滌法、 固定的組織洗滌法、 3特殊固定液固定的組織洗滌法)3. 組織的脫水 ( 1)脫水的方法：( 2)注意事項乙醇(純乙醇不宜過長否則組織過度硬化)丙酮(收縮比乙醇更嚴重)異丙醇、過氧己環(huán)、四氫呋喃、環(huán) 己酮、松脂醇4. 組織的透明 ( 1 )透明的方法( 2)注意事項二甲苯(易使組織變硬變脆)氯仿(易揮發(fā)和吸收水分)香柏油(透明時間長)松油醇、丁香油、冬青油浸蠟的方法石蠟的應(yīng)用 自動組織處理機的應(yīng)用 組織處理程序5. 組織的浸蠟及組織處理程序(1)(

14、 2)( 3)( 4)人工操作程序 自動組織處理機程序6. 骨和含鈣組織脫鈣方法( 1)脫鈣的方法 硝酸脫鈣法：10%1肖酸水溶液、硝酸10ml和10%甲醛90ml的混合液。 鹽酸脫鈣法：鹽酸，甲酸 5ml，氯化鋁7g,蒸餾水100ml;鹽酸和甲酸各20ml，蒸餾水100ml。8. 石蠟切片法( 1)切片前準備和黏附劑：固定后標本經(jīng)脫水、透明、浸蠟和包埋后，制成蠟塊。鋒利的刀片;充足的 經(jīng)處理的載玻片和恒溫烤箱，毛筆和鉛筆。( 2)切片制作方法：組織經(jīng)石蠟包埋制成蠟塊，用切片機制成切片的過程。( 3)切片的注意事項：組織的固定和取材;組織的脫水、透明和浸蠟;切片;切片刀和切片機;特殊切 片的制

15、作。9. 冰凍切片方法 (1)直接冰凍切片法：恒冷箱切片;半導體制冷冷凍切片法;甲醇制冷器;二氧化碳冷凍法。( 2)冰凍切片粘片法：蛋白甘油粘片法;Lille 明膠粘片法;乙醇明膠粘片法四、蘇木精-伊紅染色方法(HE染色) 染色的方法( 1 )人工操作程序( 2)自動染色機程序( 3)冰凍切片染色方法 染色試劑的配制(1)蘇木精染液配制Harris蘇木精的配制：蘇木精1g;硫酸鋁鉀15g;氧化汞0.5g ;乙醇10ml，蒸餾水200ml;先用蒸餾水加熱 溶解硫酸鋁鉀，用無水乙醇溶解蘇木精再倒入已溶解的硫酸鋁鉀的蒸餾水中，煮沸1分鐘，稍冷卻，慢慢加入紅色氧化汞0.5g，繼續(xù)加熱至染液變?yōu)樽霞t色，

16、用紗布蓋住瓶口，用前濾紙過濾后每100mI加冰醋酸5ml。( 2)伊紅染液的配制水溶性伊紅：伊紅1g;蒸餾水100ml。先將水溶性伊紅加入蒸餾水中，再用玻璃棒將伊紅攪溶解后過濾， 每100ml加冰醋酸1滴。100ml加冰醋乙醇性伊紅液：伊紅1g; 90%醇100ml。先將伊紅溶于乙醇中，用玻璃棒研碎溶解后，每 酸1滴。直接用 85%乙醇脫水。(3) 分化液配制(濃鹽酸1ml; 75%乙醇99ml)(4) 返藍液的配制 (1%的氨水 ) ( 5)注意事項 ( 脫蠟、染色、脫水、透明與封膠 )五、常用的特殊染色技術(shù)1. 結(jié)締組織染色法(2) Masson三色染色法2. 膠原纖維染色法(1) VG染

17、色法( 2) Sirius red 苦味酸法3. 網(wǎng)狀纖維染色法(1) Gomori法(2) Janes法4. 彈力纖維染色法維多利亞藍醛復紅法地衣紅weigert s染色法彈力和膠原纖維雙重染色法(1)( 2)( 3)( 4)( 5)5. 肌肉染色法( 1 )橫紋肌染色法( PTAH)6. 糖原染色法PASt7. 粘多糖染色法(1) Mowry阿爾辛蘭-過碘酸雪夫(ABPAS法(2) Singh阿爾辛蘭地衣紅法8. 黑色素染色法( 1 )黑色素染色法( Masson Fontana )( 2) Lillie 硫酸亞鐵染色法9. 含鐵血黃素染色法 普魯士藍染色法10. 膽色素染色法 Hall

18、膽紅素反應(yīng)染色法11. 脫色素法( 1 )脫甲醛色素法( 2)脫黑色素法13. 淀粉樣物質(zhì)染色法( 1 )剛果紅染色法15. 細菌染色法(1) Grams染色法( 2) Ziehl-Neelson 抗酸桿菌染色法( 3)胃幽門螺桿菌染色法16. 螺旋體染色法( 1 )硝酸銀染色法(2) Giemsa染色法18. 乙型肝炎表面抗原染色法( 1 ) Shikata 地衣紅染色法( 3)維多利亞蘭染色法神經(jīng)細胞尼氏小體染色法神經(jīng)纖維染色法 神經(jīng)髓鞘染色法 神經(jīng)膠質(zhì)細胞染色法19. 神經(jīng)組織染色法(1)(2)(3)(4)20. 神經(jīng)內(nèi)分泌細胞染色( 1 )親銀反應(yīng)法 (2)嗜銀反應(yīng)法21. 嗜鉻細胞染

19、色法(1) Giemsa改 良法 八、免疫細胞化學技術(shù)2. 熒光顯微鏡檢查方法( 1)顯微鏡觀察(2) 標本制作要求(載玻片厚度1.2mm；蓋玻片0.17mm,光潔；標本不易太厚；封裱劑常用甘油，無自 發(fā)熒光，無色透明)(3) 注意事項(嚴格要求經(jīng)行操作；暗室中進行檢查；防止紫外線對眼睛的損害；檢查時間每次12h為宜；標本應(yīng)集中檢查,節(jié)省時間保護光源；標本染色后立即檢查；熒光亮度判斷標準(四級：“-”無或可見微弱自發(fā)熒光；“ +”僅能見明確可見的熒光；“ +”可見明亮的熒光；“ +”可見耀眼的熒光)3. 免疫酶化學的組織固定和切片(1) 固定(AME法，同新鮮組織冷凍切片同樣的抗原保持性和石蠟

20、切片保存的良好組織結(jié)構(gòu)； 機制：組織在丙酮中固定(脫水),組織細胞內(nèi)水分逐漸被丙酮取代；繼之,用苯甲酸酯取代組織內(nèi)的丙 酮,經(jīng)二甲苯置換后,石蠟包埋。ICC以及免疫電鏡等)微波固定 ,保持良好的組織結(jié)構(gòu)和抗原性；適用切片的酶組化、(2) 切片：冰凍切片(ICC研究首選)和石蠟切片4. 酶的標記和染色方法( 1)酶標抗體法：通過共價鍵將酶連接在抗體上,制成酶標抗體,再借酶對底物的特異催化作用,生成 有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,在光鏡或電鏡下進行細胞表面及細胞內(nèi)各種抗原成分的定 位。5. 生物素 -抗生物素免疫細胞化學技術(shù)(1) 目前廣泛使用的生物素 -抗生物素方法(生物素-抗生物素

21、-過氧化物酶復合物技術(shù) AB(技術(shù)、橋抗生 物素 - 生物素技術(shù)、標記生物素 - 抗生物素技術(shù))(2) 其他生物素-抗生物素染色法(快速 ABC法二步AB(法、PAF法與AB(法連續(xù)應(yīng)用) 十四、腎活檢標本制作技術(shù)1. 標本的處理(標本分三部分,分兩半,一半行光鏡檢查；另一半大部做免疫病理,小部做電鏡檢查。免疫熒光標本應(yīng)放于滴有生理鹽水的小紗布上,一同置入小瓶中送檢；光鏡標本即放進10%甲醛固定液中,電鏡標本立即放入 %戊二醛內(nèi)于 4度冰箱內(nèi)固定。)2. 免疫病理標本的制作0C包埋劑，于冷室內(nèi)-20度冷凍切片,( 1)冰凍制片方法：將標本置于恒冷切片機的冷凍頭上,加少許厚度要求34um,附貼于

22、載玻片上，需十片以上備用。3. 光學顯微鏡的標本制作(1) 石蠟包埋制片：1.腎組織的固定(緩沖甲醛、磷酸氫二鈉和復合固定FAA固定液；室溫固定45分鐘)2. 脫水( 70-80-90-95-100 ,每梯度兩缸,每缸 20分鐘)、透明(氯仿或二甲苯,兩缸每缸10分鐘)、浸蠟( 58-62 度石蠟,兩缸每缸 30分鐘)、包埋3. 切片( 2-3um) 4. 染色(2) 常用的染色方法(HE染色、PAS染色、P ASM染色、PASM-Masso復合染色法、纖維蛋白染色法) 十五、診斷細胞學技術(shù)1. 細胞涂片、組織印片和壓片的制備( 1)涂片質(zhì)量的基本要求( 2)涂片方法(涂抹法、拉片法、推片法)( 3)痰涂片的制作(選擇有效成分用棉簽等均勻涂抹于載玻片上。)4. 固定(1)常用固定液(95%乙醇、乙醚乙醇固定液、Carnoy液、甲醇、丙酮)( 2)固定方法(浸入法、滴加法)5. 涂片的染色方法(巴氏染色、HE染色、瑞氏染色、邁格姬染色)(1) HE染色法(質(zhì)量穩(wěn)定，細胞透明度好，核質(zhì)對比鮮明