創(chuàng)傷性休克兔復(fù)蘇后腎功能的變化及亞甲藍(lán)的影響通(一)

1、創(chuàng)傷性休克兔復(fù)蘇后腎功能的變化及亞甲藍(lán)的影響通 (一)作者：王鵬，王厚清，程江華，陳曉兵，許鐵【摘要】目的研究亞甲藍(lán) (methyleneblue ，MB)對創(chuàng)傷性休克兔腎臟的 保護(hù)作用及其可能機(jī)制。方法選用健康日本長耳大白兔 18 只，隨機(jī)分 為對照組 (CON組)、生理鹽水復(fù)蘇組 (NS組)、MB 處理組(MB 組)，每組 6 只。NS組及 MB 組觀察休克前 (T1)、休克末(T2)、復(fù)蘇末 (T3)及復(fù)蘇后 2h(T4)、4h(T5)、 6h(T6)、8h(T7)時間點(diǎn)平均動脈壓 (MAP)的動態(tài)變化， 測定各時間點(diǎn)血漿尿素氮 (BUN)、肌酐 (Cr)水平。觀察各組兔腎組織光 鏡下病

2、理形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果 NS組復(fù)蘇末及復(fù)蘇后各時間點(diǎn) MAP 均未 達(dá)到基礎(chǔ)值水平 (P0.05);復(fù)蘇末及復(fù)蘇后各時間點(diǎn) MAP 與 CON 組比較 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P0.05);復(fù)蘇后 2h、6h、8h的 MAP與 MB組比較差 異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P0.05)。MB 組休克末及復(fù)蘇后 2hMAP 與基礎(chǔ)值比較 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P0.05)，與 CON 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P0.05)。 兔創(chuàng)傷性休克復(fù)蘇后各時間點(diǎn) NS組、MB組BUN、Cr水平較 CON組升 高(P0.05)，但 MB 組 BUN、Cr水平較 NS組明顯降低 (P0.05)。光鏡下 NS 組和 MB 組腎臟可見輕

3、微的病理改變，但兩組之間無明顯差異，較 對照組亦無明顯改變。 結(jié)論創(chuàng)傷性休克可致兔腎功能損害， MB 能顯著 改善休克后兔血流動力學(xué)、腎功能，保護(hù)腎臟組織?！娟P(guān)鍵詞】創(chuàng)傷性休克 ;亞甲藍(lán) ;尿素氮 ;肌酐;平均動脈壓Abstract ：ObjectiveTostudytheprotectiveeffectofmethyleneblue(MB)onthekidneysinrabbitswithtraumaticshockandthepotentialmechanism.Methods18Japanese rabbitswererandomizedinto3groups(n=6each):cont

4、rolgroup(CONgroup),re suscitationwithnormalsalinegroup(NSgroup)andmethylenebluegroup(MBg roup).InNSgroupandMBgroup,thedynamicvariationsofmeanarterialpressur e(MAP)atdifferenttimepointswasrecorded,i.e.,beforeshock(T1),attheendof shock(T2),attheendofresuscitation(T3),2h(T4),4h(T5),6h(T6)and8h(T7)after

5、 resuscitation,andthelevelofbloodureanitrogen(BUN)andcreatinine(Cr)inthe plasmaateachtimepointswasdetermined.Tissuesamplesofthekidneyobtaine dfromexperimentswereobservedforpathomorphologicalchangesundertheli ghtmicroscope.ResultsInNSgroup,theMAPlevelattheendofresuscitationand ateachtimepointafterres

6、uscitationdidnotreachthebasalvalue(P0.05);andth eMAPlevelatthesetimepointshadsignificantstatisticaldifferenceascomparet oCONgroup(P0.05);theMAPlevelsatT4,T6andT7hadsignificantstatisticaldiffe rencevs.MPgroup(P0.05).InMBgroup,theMAPlevelatT2andT4hadstatistical differencevs.thebasalvalue(P0.05)andvs.C

7、ONgroup(P0.05).IntheNSandMBg roups,thelevelofplasmaBUNandCrmarkedlyincreased,comparedwiththatin CONgroup(P0.05),whilethelevelofBUNandCrwasobviouslylowerinMBgroup thanthatinNSgroup(P0.05).Lightmicroscopyrevealedslightpathologicalchan gesinkidneytissuesinNSandMBgroups,butthedifferenceswerenotsignifica

8、nt betweenNSandMBgroupsandamongthe3groups.ConclusionThekidneyfunct ionofrabbitscouldbevulnerabletotraumaticshock.MBcannotablyameliorate thehemodynamicsandfunctionofthekidneyinrabbitswithtraumaticshockan dprotecttherenaltissues.Keywords:traumaticshock;methyleneblue;bloodureanitrogen;creatinine;m eana

9、rterialpressure 創(chuàng)傷性休克是臨床上常見的休克類型，是導(dǎo)致多器官功能障礙綜合征 (MODS)的重要原因之一。低血壓休克致腎臟血管收縮，血流減少，持 續(xù)的低血壓會使細(xì)胞能量減少，尿液不能濃縮，導(dǎo)致腎小管上皮壞死 和腎功能衰竭 1。本實(shí)驗(yàn)采用 Lamsons 法建立創(chuàng)傷性休克動物模型， 觀察創(chuàng)傷性休克兔復(fù)蘇后及亞甲藍(lán) (methyleneblue,MB)干預(yù)后血流動力 學(xué)、血漿尿素氮 (BUN)及肌酐(Cr)水平的變化，探討 MB 對創(chuàng)傷性休克腎 損傷的保護(hù)作用，為臨床應(yīng)用 MB 治療創(chuàng)傷性休克腎損傷提供動物實(shí) 驗(yàn)依據(jù)。1 材料和方法1.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組健康日本長耳大白兔 18 只

10、，由徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動 物中心提供，許可證號： SCXK蘇( )2007-0037，5 7 月齡，雌雄各半， 體重(2.70 0.22)。kg將實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分成 3 組：對照組 (CON組)，創(chuàng)傷 性休克生理鹽水復(fù)蘇組 (NS組)，創(chuàng)傷性休克 MB 處理組(MB 組)，每組 6 只。動物在實(shí)驗(yàn)前禁食 12h，禁水 8h。實(shí)驗(yàn)方案經(jīng)徐州醫(yī)學(xué)院動物倫 理委員會批準(zhǔn)。1.2 主要試劑和儀器亞甲藍(lán) (江蘇濟(jì)川制藥有限公司 ) ，低溫離心機(jī) (TGL-16G型，日本 SANYO公司 )，BL420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) (成都泰能 儀器有限公司 )，BUN、Cr試劑盒 (南京建成生物工程研究所 )。1.3

11、模型制作及復(fù)蘇方法采用 Lamson s 法建立創(chuàng)傷性休克動物模型。 3%戊巴比妥鈉溶液 30mg/kg 經(jīng)耳緣靜脈注射麻醉后，將兔仰臥并固定 于兔臺，行右側(cè)頸動脈、 股動脈插管術(shù)，經(jīng)耳緣靜脈注射肝素 (6mg/kg) 將兔全身肝素化， 股動脈導(dǎo)管接換能器與 BL420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)連 接，監(jiān)測平均動脈壓 (MAP);頸動脈插管用于放血和采取血液標(biāo)本。 上述 手術(shù)完成后，用 3kg鐵錘在 0.5m 高處垂直下落，擊打兔股骨中段，致 粉碎性骨折 ;再經(jīng)右頸動脈快速放血 (約 10min) 使 MAP 降至 35 45mmHg(1mmHg=0.133kPa，) 并維持 90min。然后， N

12、S 組經(jīng)耳緣靜脈 回輸全部失血及等量生理鹽水 ;MB 組回輸全部失血及等量生理鹽水， 并加 MB(3mg/kg)進(jìn)行復(fù)蘇，復(fù)蘇時間約需 30min。 CON組動物僅做頸 動脈、股動脈插管及全身肝素化，未行擊打及放血。1.4觀察指標(biāo) NS組及MB組分別在休克前 (T1)、休克末(T2)、復(fù)蘇末(T3) 及復(fù)蘇后 2h(T4)、 4h(T5)、6h(T6)和 8h(T7)等時間點(diǎn)測定 MAP，并采集 血液標(biāo)本備測血漿 BUN、Cr 濃度。 CON 組在各對應(yīng)時間點(diǎn)同步測定 MAP 并采血。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，放血處死動物，開腹取右腎， 4%多聚甲醛 溶液固定，石蠟包埋，切片，脫蠟， H-E染色，光鏡觀察形

13、態(tài)學(xué)變化。1.5 血漿 BUN、Cr 水平的測定經(jīng)頸動脈于各時間點(diǎn)采血 2ml，4低溫 3000r/min 離心 15min，取上清液置于 -80冰箱冷藏。血漿 BUN、 Cr 水平的測定嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)以 s表示，采用 SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，多組間兩兩比較采用單因素方差分析， Levene 方差齊性檢驗(yàn)，方差不 齊采用秩和檢驗(yàn)。 P0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 結(jié)果2.1血流動力學(xué)變化 3 組動物 MAP 基礎(chǔ)值無明顯差異 ;CON組各時間點(diǎn) MAP 較基礎(chǔ)值無明顯變化。 NS組復(fù)蘇末及復(fù)蘇后各時間點(diǎn) MAP 均未 達(dá)到基礎(chǔ)值水平 (P0.05);復(fù)蘇末及復(fù)蘇后各時間點(diǎn) MAP與 CON組比較， 差異有