第十五章螺旋體

1、第十五章 螺旋體 第一節(jié) 概 述 螺旋體(Spirochaeta)是一類菌體細長、柔 軟、呈螺旋狀彎曲、運動活潑的原核細胞微 生物。 螺旋體廣泛存在于水生環(huán)境，也有許多分布 在人和動物體內(nèi)。大部分營腐生生活，無致 病性，只有一小部分可引起人和動物的疾病。 一、形態(tài)與結(jié)構(gòu) 1、形態(tài) 螺旋體呈螺旋狀圓柱形，具有多個完 整的螺旋。其大小相差極為懸殊，長 5250m，寬0.13m，有的甚至 能通過除菌濾器。 螺旋體上螺旋數(shù)目、兩螺旋間的距離 及回旋角度各不相同，在分類上可作 為一項重要指標。 螺 旋 體 螺 旋 體 螺 旋 體 2、結(jié)構(gòu) 中心為原生質(zhì)柱。 外有軸絲纏繞。 最外層是由細胞壁和粘 液層構(gòu)成

2、的外鞘。 含RNA和DNA 2種核酸。 螺旋體通過軸絲運動。 螺旋體結(jié)構(gòu)圖 二、染色特性 革蘭氏染色：呈陰性，但由于著色困難，一般不 用。 姬姆薩染色：可使菌體染成紅色或藍色，染成藍 色者一般多為腐生性螺旋體。 鍍銀染色法：為常用染色法，其特點是使銀鹽沉 淀粘附于螺旋體上，使之變粗而顯 出黑褐色。 印度墨汁或剛果紅負染：染背景，而螺旋體透明 無色，結(jié)果在蘭或紅色的背景上， 襯托透明的螺旋體，反差明顯。 三、培養(yǎng) 多數(shù)螺旋體需厭氧培養(yǎng)，較難培養(yǎng)。但有 些種屬的螺旋體培養(yǎng)并不難，可需氧生長。 短螺旋體、鉤端螺旋體以及個別致病性密 螺旋體與疏螺旋體可采用含血液、腹水或 其他特殊成分的培養(yǎng)基培養(yǎng)。 其

3、余螺旋體迄今尚不能用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)， 但可用易感動物來培養(yǎng)和保種。 四、分類 鉤端螺旋體屬 纖細螺旋體屬 特納螺旋體屬 鉤端螺旋體科 螺旋體屬 脊螺旋體屬 密螺旋體屬 疏螺旋體屬 螺旋體科 短螺旋體屬 短螺旋體科 短螺紋科短螺紋科 螺旋體目 第二節(jié) 疏螺旋體屬 本屬細菌呈螺旋狀，菌體上有310個不 規(guī)則的疏松螺旋。 致人和動物疾病的主要螺旋體 伯氏疏螺旋體 回歸熱疏螺旋體 鵝疏螺旋體 色勒疏螺旋體 鈍緣蜱疏螺旋體 伯氏疏螺旋體 伯氏疏螺旋體是萊姆病的病原體，由蜱 傳播給人類。主要感染人和犬，此外牛 、馬、貓等也可感染。 一、主要特性 菌體細長，2030m，有420個大而 寬松的螺旋。 運動活潑

4、。 吉姆薩染色淡紫色，鍍銀染色棕褐色。 伯氏疏螺旋體伯氏疏螺旋體 二、致病性 本菌經(jīng)蜱傳播，可致人、犬、牛和馬 的關節(jié)炎。 病人出現(xiàn)的第一個癥狀是被蜱叮咬的 部位出現(xiàn)圓形紅斑，隨后紅斑逐漸擴 大，繼而擴展到關節(jié)，導致關節(jié)腫脹 、疼痛。 動物看不到紅斑，臨床可見關節(jié)腫脹 、跛行。 三、微生物學診斷 1、鏡檢 取被蜱叮咬部位附近的皮膚、患病 關節(jié)的關節(jié)液制片，鏡檢。 2、血清學檢查 ELISA可用于檢測抗體。 3、PCR技術 可用于檢測病料中的螺旋體。 第三節(jié) 鉤端螺旋體屬(Leptospira) 又稱細螺旋體屬，成員是一群菌體纖細、 螺旋致密，一端或兩端彎曲呈鉤狀的螺 旋體，故稱鉤端螺旋體，簡稱

5、鉤體。 大多數(shù)鉤體無致病性，部分為致病性螺 旋體，可引起人和動物的鉤體?。毬?旋體?。?。 一、主要生物學特性 （一）形態(tài)與染色 菌體纖細，一端或兩端彎曲呈鉤狀。長 620m，螺旋細密而規(guī)則，至少有18 個。能活潑運動，由于運動常使菌體呈 8字、丁字或網(wǎng)球拍等形狀或C、S、O等 字母形，且此種形狀可隨時消失。 鍍銀染色法染色，只能看到棕色或黑色 的彎曲鉤狀體，看不到螺旋。 鉤端螺旋體 （二）生長要求與培養(yǎng)特性 需氧，營養(yǎng)要求不高，在含動物血清 和蛋白胨的柯氏(Korthof)培養(yǎng)基生長 良好。該培養(yǎng)基含有10%新鮮滅活兔血 清。兔血清能促進鉤體生長。 鉤體生長緩慢,接種后34天開始生長， 接種

6、后714天生長的最好。 生長特性 液體培養(yǎng)基 于靠近液面1處生長最旺盛，呈半透 明、云霧狀渾濁，以后液體漸變成透 明，管底出現(xiàn)沉淀。 固體培養(yǎng)基 形成無色、透明、邊緣整齊或不整齊、 平貼于瓊脂表面的菲薄菌落，大者4 5mm，小者0.51.0mm。 （三）抵抗力 鉤體對環(huán)境因素的抵抗力較強，濕土和 水中可存活數(shù)月之久。故該病主要經(jīng)污 水傳播。 對熱、酸或堿敏感，5610min，60 10s即可將其致死。 常用濃度的各種消毒劑在1030min內(nèi) 可將其滅活。 對青霉素、金霉素、四環(huán)素等抗生素敏 感，但對砷制劑有抗性。 （四）抗原 1、型特異性抗原 成分為蛋白質(zhì)多糖復合物，具有型特異 性，是鉤體分型

7、的物質(zhì)基礎。 2、群特異性抗原 系類脂多糖復合物，可刺激機體產(chǎn)生補 體結(jié)合抗體，具有群特異性，可作為分 群的依據(jù)及補體結(jié)合反應抗原，用于檢 測動物血清中相應的抗體。 （五）分類 本屬有2個種 問號鉤端螺旋體（L.interrogans） 雙曲鉤端螺旋體(L.biflera) 前者包括所有寄生性和致病性血清型， 后者包括所有腐生性非致病性血清型。 抗原分類法 根據(jù)鉤體群特異性抗原應用顯微凝集溶 解試驗，可將其分為若干血清群，各群 內(nèi)可根據(jù)其表面抗原的不同，再用型因 子血清作顯微凝集試驗，將每群分為若 干血清型。 目前全世界已發(fā)現(xiàn)的致病性鉤體有25個 血清群，至少200個不同的血清型。 對動物致病

8、的主要鉤端螺旋體 血清型 宿主及相關疾病 凱氏鉤端螺旋體 馬流產(chǎn) 布拉迪斯發(fā)鉤端螺旋體 馬流產(chǎn)、豬流產(chǎn)、不育 波摩納鉤端螺旋體 豬、牛、馬流產(chǎn) 犬鉤端螺旋體 犬腎及全身疾病，豬全身疾病、流產(chǎn) 黃疸出血鉤端螺旋體 犬敗血癥，牛、豬流產(chǎn) 哈德佳鉤端螺旋體 牛流產(chǎn)、不育 流感傷寒鉤端螺旋體 犬腎及全身疾病， 二、致病性 （一）毒力因子 1、黏附物質(zhì) 為細胞外基質(zhì)成分，如纖連蛋白和膠原等。 2、溶血素 是一種鞘磷脂酶C ，能溶解動物紅細胞。使動物發(fā)生 貧血、肝腫大、壞死、出血，伴有黃疽和血尿等病征。 3、內(nèi)毒素樣物質(zhì) 為脂多糖樣物質(zhì)(LLS)，可致動物發(fā)熱，引起炎癥和壞 死。 4、細胞毒性因子 為蛋白

9、毒素，存在于感染動物血漿內(nèi)，它在血液中循 環(huán)和蔓延時能造成組織損傷，對小鼠有致死作用。 （二）感染途徑及所致疾病 致病性鉤體可感染50多種動物和人類， 其中鼠類和豬是鉤體的主要貯存宿主 和傳染來源。家畜中牛、羊?qū)︺^體最 易感，其次為馬、豬、犬、水牛和驢 等，家禽的易感性較低。 感染途徑 鉤體在家畜大多數(shù)呈隱性感染，在腎臟 內(nèi)長期繁殖，并隨尿不斷排出，污染土 壤和水源等環(huán)境。人和家畜則通過直接 或間接地接觸這些污染源，通過損傷的 皮膚、眼鼻粘膜、消化道粘膜而被感染 。也可通過動物間相互咬傷、吸血昆蟲 的叮咬、交配或人工授精而感染。 鉤體病的臨床表現(xiàn) 急性病例 主要癥狀為發(fā)熱、貧血、出血、黃疽、

10、血紅素尿及粘膜和皮膚壞死。 亞急性病例 表現(xiàn)為腎炎、肝炎、腦膜炎及產(chǎn)后泌乳 缺乏癥 慢性病例 表現(xiàn)虹膜睫狀體炎、流產(chǎn)、死產(chǎn)及不孕。 鉤體病通常經(jīng)歷二個階段 菌血癥(前期發(fā)熱)階段 約持續(xù)78d 菌尿期(后期無熱)階段 持續(xù)23月或更久 在前期階段，鉤體大量出現(xiàn)于血、肝、腎和腦 脊髓液中，而后期主要定位于腎內(nèi)，并經(jīng)尿排 出體外。故檢驗鉤體的病料必須根據(jù)病程適時 采集。 三、微生物學診斷 （一）細菌學診斷 1、病料 發(fā)病78d內(nèi)（發(fā)熱期）可采集血、腦 脊髓液、肝和腎；發(fā)病78d后（退熱） 可采集尿液，死后為腎。 2、鏡檢 肝、腎直接涂片；血、尿先離心，用 沉淀物涂片。經(jīng)改良鍍銀法染色后鏡 檢，鉤體

11、呈深黑色或灰色。 3、分離培養(yǎng) 接種柯氏培養(yǎng)基分離。病料中含鉤體， 常在培養(yǎng)710d后見培養(yǎng)基略呈混濁。 對光輕搖試管時，便見上13的培養(yǎng) 基內(nèi)有云霧狀生長物。此時挑取培養(yǎng) 物作暗視野檢查，可見多量的典型鉤 體。 4、動物試驗 病料經(jīng)腹腔或皮下接種幼齡豚鼠、地鼠 或仔兔。強毒株常在35d引起發(fā)熱、 貧血、黃疸、血紅素尿等癥狀。 （二）血清學檢查 常用凝集溶解試驗。 此外，也可用補體結(jié)合試驗、ELISA以 及PCR技術等。 四、免疫 康復動物可獲得較堅實的免疫力。 注射疫苗，有良好的免疫預防效果。初次免疫 2d后，應進行再次接種，以后可每年接種1次。 所用疫苗應與引起發(fā)病的菌株同型，或使用多 價疫苗。 母牛