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文檔簡介
1、獸醫(yī)藥理學(xué)實驗獸醫(yī)藥理學(xué)實驗 河南科技大學(xué)動物科技學(xué)院 主講:趙振升 白東英 王國永 動物醫(yī)學(xué)、動植檢專業(yè)動物醫(yī)學(xué)、動植檢專業(yè) 實驗一實驗一 藥理實驗基礎(chǔ)知識藥理實驗基礎(chǔ)知識 目的 掌握基本操作,鍛煉動手、動腦能力; 更好地掌握藥理學(xué)基本理論知識; 培養(yǎng)科學(xué)思維 基本要求 實驗前:預(yù)習(xí)實驗內(nèi)容并復(fù)習(xí)相關(guān)理論知識; 實驗時 實驗器材要妥善保管; 實驗操作按步驟進行,仔細(xì)觀察實驗中出現(xiàn)的現(xiàn)象, 實事求是地做好記錄; 注意節(jié)約實驗藥品; 維持良好的課堂紀(jì)律。 實驗后 各組同學(xué)將實驗動物處死,實驗臺擦干凈,將實驗方盤 送回準(zhǔn)備室; 值日生搞好實驗室衛(wèi)生,將死亡動物送至指定場所; 書寫實驗報告。 實驗報
2、告的書寫 題目 目的 原理 材料:實驗動物,器材,藥品 方法:用自己的語言簡單扼要描述出來; 結(jié)果:要求真實、清楚; 討論:將實驗結(jié)果進行比較、分析;實驗中有哪些不足 之處;結(jié)果異?;蚴〉脑?; 結(jié)論:將實驗結(jié)果進行歸納總結(jié),應(yīng)帶有提示性質(zhì)。 實驗設(shè)計基本原則 隨機原則 使每一實驗對象都有同等的機會抽到實驗組或?qū)φ?組中,除處理因素外其他因素盡可能均衡一致,從 而抵消非實驗因素的影響。 對照原則 組間對照:陰性對照,陽性對照,同因素不同水平 對照; 自身前后對照 重復(fù)原則 實驗動物 動物的選擇 小白鼠:適用于需大量動物的實驗,如某些 藥物的篩選,半數(shù)致死量的測定。也較適用于 避孕藥實驗、抗炎
3、鎮(zhèn)痛藥實驗、中樞神經(jīng)系統(tǒng) 藥實驗、抗腫瘤藥及抗衰老藥實驗等。 大白鼠:比較適用于抗炎藥物實驗,血壓測 定、利膽、利尿藥實驗,也可用于進行亞急性 和慢性毒性實驗。 實驗動物 動物的選擇 豚鼠:因其對組胺敏感,并易于致敏,故常被選用于 抗過敏藥、平喘藥和抗組胺藥的實驗。也常用于離體心 臟、心房、腸管實驗。又因它對結(jié)核敏感,常用于抗結(jié) 核病藥的實驗。 家兔:常用于觀察研究腦電生理作用,藥物對小腸的 作用。由于家兔體溫變化敏感,也常用于體溫實驗,用 于熱原檢查。 狗:狗是記錄血壓,呼吸最常用的大動物。還可利用 狗做成胃瘺、腸瘺,以觀察藥物對胃腸蠕動和分泌的影 響。在進行慢性毒性實驗時,也常采用狗。 動
4、物捉拿及固定方法 小白鼠 右手提起鼠尾, 左手拇指和食指捏住雙耳及頭部皮膚,無名 指、小指和掌心夾其背部皮膚及尾部,便可將小鼠完全固定。如 圖1。 單手捉持,用拇指和食指抓住小鼠尾巴,用小指、無名指和 手掌壓住尾根部,再用騰出的拇指、食指及中指抓住鼠雙耳及頭 部皮膚而固定。如圖2。 圖2圖1 動物捉拿及固定方法 豚鼠 豚鼠性情溫和不咬人,用手握住軀干即可。 家兔 可用一手抓住家兔頸背部皮膚,將兔提起,另一手托 其臀部,使兔呈坐位姿勢。在進行仰位手術(shù)操作時,可用 繩帶將其四肢仰位捆綁在兔手術(shù)臺上。頭部用兔頭固定夾 固定。 動物的給藥方法 小白鼠 灌胃法(灌胃法(i.g.i.g.):以左手固定小鼠
5、后,使其腹部朝 上,頸部伸直。右手持配有灌胃針頭的注射器,自口角 插入口腔,再從舌面沿上腭進入食道。小鼠灌胃容量一 般為0.1-0.3m110g。 動物的給藥方法 小白鼠 腹腔注射腹腔注射(i.p.)(i.p.):以左手固定小鼠,方法同灌胃,右手持注 射器,取30度角將針頭從下腹部向頭端刺入腹腔。進針部位不宜 過高,刺入不宜太深,以免傷及內(nèi)臟。小鼠腹腔注射量一般為 0.1-0.3mll0g。 肌肉注射(肌肉注射(i.m.i.m.):小鼠因肌肉較少,很少采用肌肉注射, 若有需要可注射于股部肌肉,多選后腿上部外側(cè),一處注射量不 超過0.1mL 。 動物的給藥方法 小白鼠 皮下注射皮下注射(s.c.
6、)(s.c.):用左手固定小鼠后,右手持注射器于拇指 和食指捏起的皮膚處進針即可。 靜脈注射靜脈注射(i.v.)(i.v.):將小鼠置于特制的固定筒內(nèi)或倒置的大漏 斗下,讓其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部,或?qū)⑹笪苍?50C熱水中浸泡半分鐘使血管擴張。左手拉尾端,右手持注射器 將針頭刺入尾靜脈,推入藥液。 動物的給藥方法 家兔 灌胃:灌胃:需兩人合作進行。一人取坐位用兩腿夾持兔身,左手握 家兔雙耳,右手抓住兩前肢。另一人將木制開口器橫插家兔口內(nèi), 壓住舌頭并固定之。取8號導(dǎo)尿管從開口器中部小孔插入食道。插 管時如誤入氣管會出現(xiàn)動物的掙扎和呼吸困難。也可將導(dǎo)尿管的 外端浸入水中,如有氣泡吹出,
7、表示插在氣管內(nèi),此時應(yīng)拔管重 插。當(dāng)判明導(dǎo)尿管在食道以內(nèi)后,用注射器接通導(dǎo)尿管將藥液推 入。 動物的給藥方法 家兔 皮下、肌肉、腹腔注射皮下、肌肉、腹腔注射:給藥方法基本上同小鼠,唯針頭可 稍大,給藥量可稍多。皮下與肌內(nèi)為0.5-1.0/mg,腹腔為1.0- 5.0ml/mg 靜脈注射:靜脈注射:將家兔置固定箱內(nèi),撥去耳殼外緣的毛,選擇一條 比較明顯的耳緣靜脈(兔耳外緣的血管為靜脈,中央的血管為動 脈,如圖) ,用酒精棉球涂擦皮膚,使血管顯露。用左手拇指和 中指捏住兔的耳尖部,食指墊在兔耳注射處的下面,右手持注射 器,將針頭從近耳尖處刺入,當(dāng)確認(rèn)針頭在血管中后,將藥液推 入。 實驗二實驗二 藥
8、物的劑量與劑型對藥物效應(yīng)的影響藥物的劑量與劑型對藥物效應(yīng)的影響 實驗?zāi)康?觀察不同劑型與劑量對藥物效應(yīng)的影響。 實驗材料 l.0ml注射器、針頭、小鼠灌胃針頭、燒杯、普 通天平、3.5硫酸鎂溶液(注射液和口服溶液) 觀察指標(biāo) 動物活動增加情況、呼吸急促、反射亢進、震顫、驚厥 及死亡時間、炭末推進率等。 實驗方法 取禁食12h的昆明種小鼠3只,稱重,分別標(biāo)為對照組、 灌胃組和腹腔注射組按以下給藥: A:對照組:灌胃給生理鹽水0.2ml/10g; B:灌胃組:灌胃給3.5硫酸鎂溶液0.2ml/10g; C:腹腔注射組:腹腔注射給3.5硫酸鎂溶液0.2ml/10g。 給藥后注意觀察動物的活動情況,是
9、否有肌肉松 弛的表現(xiàn)。 15min后每只小鼠均灌胃給予5%炭末阿拉伯膠混 懸液0.2ml。 炭末灌胃后15min,將小鼠脫臼處死,剖開腹腔, 取出胃腸道。剪去附著在腸管上的腸系膜,將腸管 不加牽引地輕輕地平鋪在玻璃板上(玻璃板上滴少 許鹽水)。以幽門為起點,測量炭末在腸管內(nèi)的移動 距離和小腸(自幽門至回盲部)的全長,計算每只小 鼠炭末的移動距離占小腸全長百分率,比較3組動 物的活動狀況和胃腸炭末推進率有何不同。 實驗結(jié)果 實驗結(jié)果填入下表中 鼠號鼠號 體重體重(g) (g) 藥物及劑量藥物及劑量 給藥途徑給藥途徑 動物反應(yīng)動物反應(yīng) 炭末推進率(炭末推進率(% %) A B C 不同劑型對藥物效
10、應(yīng)的影響 思考討論題 灌胃和腹腔注射給硫酸鎂的效應(yīng)有哪些不同?為什么? 本次實驗結(jié)果對臨床用藥有何提示? 實驗三 毛果蕓香堿與阿托品對瞳孔 及對光反射的影響 目的 了解毛果蕓香堿的副交感神經(jīng)節(jié)后擬膽堿作用 和阿托品的對抗作用。 材料 兔子只,0.05%硫酸阿托品注射液,0.1%鹽酸 腎上腺素注液,0.2%硝酸毛果蕓香堿注射液 方法 取兔放于兔固定箱內(nèi)固定,避免陽光直射眼睛,用毛剪剪 去兔兩眼睫毛,然后用瞳孔量尺測量瞳孔大小,連續(xù)三次, 取平均值。 在兔左眼滴入.2%毛果蕓香堿3滴,滴藥時用姆指和食指 將下眼瞼提起,使成囊狀,再用中指壓住鼻淚管開口處,防止 藥液流入鼻淚管而不起作用,再用右手滴入
11、藥液。15分鐘后 再測量瞳孔大小,連續(xù)三次,取平均值,并進行比較。 滴入毛果蕓香堿20分鐘后,分別在兩眼滴入0.1%腎上腺素 3滴,15分鐘后測量兩瞳孔大小,連續(xù)3次,取平均值并進行 比較。 滴入腎上腺素15分鐘后,分別于兩眼滴入0.05%硫酸阿托 品注射液3滴,15分鐘后觀察兩眼瞳孔變化,并測量其大小, 連續(xù)3次,并取平均值 項目 正 常 毛 果 蕓 香堿 腎 上 腺 素 阿托品 瞳 孔 大 小 左 眼 右 眼 記錄記錄 討論題 從實驗結(jié)果中如何說明藥物的協(xié)同作用和拮抗 作用? 1N D n r D M r0.7 1 50 log (0.5) m LDxip 5 0 lo g / L D Sip qn 2 1 50 log (1.96) 1 i pp FLxx n 注意事項 “麻醉開始時間“為小鼠從腹腔注射硫噴妥鈉溶液后至翻正反射消失時間; “麻醉消
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