動物細胞工程PPT課件

1、動物細胞工程 如果將奶牛的細胞與植物細胞雜交，得到綠色的小 奶牛，那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶嗎？ 動物細胞也能融合嗎？ 動物細胞工程 細胞融合是正常的生命活動 兩個細胞正在融兩個細胞正在融 合合 受精作用受精作用 動物細胞工程 泰寧第一中學(xué) 高二生物備課組 動物細胞工程 三、動物細胞融合 1、概念：也稱細胞雜交。是指 兩個或多個動物細胞結(jié)合形成 一個細胞的過程。融合后形成的 具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的 單核細胞，稱為雜交細胞。 動物細胞工程 思考題思考題 1.植物體細胞雜交時首先應(yīng)用什么方法去掉細胞壁？ 酶解法，如纖維素酶或果膠酶 2.動物細胞融合時需要進行去壁處理嗎？為什么？

2、無需，因為動物細胞無細胞壁 3.植物體細胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？ 離心、電激等物理方法；PEG等化學(xué)方法 4.動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？ 能 還可以利用滅活的病毒進行誘導(dǎo) 5.植物體細胞雜交應(yīng)先進行原生質(zhì)體的融合再進行組織培養(yǎng)形 成完整的雜種個體，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？ 不能 動物細胞工程 細胞細胞A細胞細胞B 雜種細胞雜種細胞 滅活的病毒滅活的病毒 物理法物理法 化學(xué)法化學(xué)法 仙臺病毒仙臺病毒 皰疹病毒皰疹病毒 新城雞瘟病毒新城雞瘟病毒 動物細胞工程 動物動物 細胞細胞 融合融合 動物細胞工程 滅活病毒誘導(dǎo)細胞融合的原理： n病毒表面含有

3、的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作 用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排 布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。 n滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細菌失去感染能力，但并不 破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。 動物細胞工程 用滅活的病毒誘導(dǎo)動物細胞融合過程用滅活的病毒誘導(dǎo)動物細胞融合過程 細胞核細胞核 病毒顆粒病毒顆粒 細胞核細胞核 動物細胞工程 6.你推測一下動物細胞融合有哪些方面的應(yīng)用嗎？ 思考題思考題 利用動物細胞融合技術(shù)誘導(dǎo)形成雜交瘤細胞 7.在生產(chǎn)實際中雜交瘤細胞有怎樣的應(yīng)用？ 生產(chǎn)單克隆抗體 動物細胞工程 2 2、誘導(dǎo)動物細胞融合的方法、誘導(dǎo)動物細胞融合的方法 3 3

4、、動物細胞融合的用途、動物細胞融合的用途 制備單克隆抗體 ：仙臺病毒：仙臺病毒 紫外線紫外線 喪失感染活性喪失感染活性 （不感染細胞）（不感染細胞） 保留融合活性保留融合活性 （誘導(dǎo)細胞融合）（誘導(dǎo)細胞融合） 物理法物理法 化學(xué)法化學(xué)法 生物法生物法 動物細胞工程 動物細胞融合動物細胞融合 雜種細胞雜種細胞 愈傷組織愈傷組織 雜種植株雜種植株 植物細胞植物細胞A 植物細胞植物細胞B 原生質(zhì)體原生質(zhì)體A 原生質(zhì)體原生質(zhì)體B 植物體細胞雜交植物體細胞雜交 去壁去壁 融合融合 組培組培 物理法物理法 化學(xué)法化學(xué)法 生物法：生物法： 滅活的病毒滅活的病毒 動物細胞動物細胞A動物細胞動物細胞B 雜種細胞

5、雜種細胞 動物細胞工程 主要用于制備 單克隆抗體 獲得雜種植株主要用途 物理、化學(xué)方法 （同左） 滅活的病毒 物理（離心、振 動、電刺激） 化學(xué)（聚乙二醇） 誘導(dǎo)方法 使細胞分散后誘 導(dǎo)細胞融合 去除細胞壁后誘 導(dǎo)原生質(zhì)體融合 細胞融合的方法 細胞膜的流動性 細胞膜的流動性、 植物細胞全能性 細胞融合的原理 動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目 植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較 動物細胞工程 n思考： 1.抗體是由何種細胞產(chǎn)生的？ 效應(yīng)B細胞（漿細胞）。 2.一個淋巴細胞(漿細胞)能分泌多種抗體 嗎？ 每一個淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。 四、單克隆抗體四、單克隆抗體 提出問題：提出問題：長期

6、以來，人們?yōu)榱双@得抗體，采用的是長期以來，人們?yōu)榱双@得抗體，采用的是 把某種抗原反復(fù)注射到動物體內(nèi)，然后從動物血清中把某種抗原反復(fù)注射到動物體內(nèi)，然后從動物血清中 分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體，不分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體，不 僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應(yīng)不夠僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應(yīng)不夠 靈敏。靈敏。 提 問 ？ 動物細胞工程 提 問 ？ 3.一種抗原侵入機體之后，引起機體免疫反應(yīng)產(chǎn)生的抗 體只有一種嗎？ 動物在免疫反應(yīng)過程中，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類 可多達百萬種以上。 4. 簡述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？ 抗原 動物體 抗體 抗原不純

7、 抗體不純 刺激 漿細胞 動物細胞工程 6.如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體 體外培養(yǎng)單個淋巴細胞，提取分泌的抗體 5.這種方法獲得的抗體有什么缺陷？ 產(chǎn)量低，純度低，特異性差 7、體外培養(yǎng)淋巴細胞能無限增殖嗎?怎樣解決這個 問題? 8、請概括單克隆抗體的概念、請概括單克隆抗體的概念 9、根據(jù)阿根廷科學(xué)家米爾斯坦和德國科學(xué)家柯勒設(shè)根據(jù)阿根廷科學(xué)家米爾斯坦和德國科學(xué)家柯勒設(shè) 計的計的 實驗方案，思考實驗過程與原理？實驗方案，思考實驗過程與原理？ 提 問 ？ 動物細胞工程 1.概括單克隆抗體的概念概括單克隆抗體的概念 單：單個細胞單：單個細胞 克隆克隆:無性繁殖無性繁殖 抗體抗體:化學(xué)性質(zhì)單一

8、、特異化學(xué)性質(zhì)單一、特異 性強性強 動物細胞工程 n實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?制備單克隆抗體制備單克隆抗體. n實驗原理：實驗原理： n實驗材料：小白鼠實驗材料：小白鼠 n實驗器材：培養(yǎng)皿、針筒等等。實驗器材：培養(yǎng)皿、針筒等等。 n實驗過程：？實驗過程：？ 2.根據(jù)阿根廷科學(xué)家米爾斯坦和德國科學(xué)家根據(jù)阿根廷科學(xué)家米爾斯坦和德國科學(xué)家 柯勒設(shè)計的柯勒設(shè)計的 實驗方案，回答下列問題：實驗方案，回答下列問題： B淋巴細胞能產(chǎn)生抗體，骨髓瘤細胞能無淋巴細胞能產(chǎn)生抗體，骨髓瘤細胞能無 限增殖，雜交瘤細胞既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖，雜交瘤細胞既能產(chǎn)生抗體又能無 限增殖。限增殖。 動物細胞工程 （1）設(shè)計方案： 一個

9、B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體 小鼠骨髓瘤細胞能夠無限增殖 雜種細胞 （2）制備過程： 動物細胞工程 動物細胞工程 動物細胞工程 （1）為什么用小鼠骨髓瘤細胞與）為什么用小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴淋巴 細胞融合？細胞融合？ 思考思考： （2）單克隆抗體制備過程中應(yīng)）單克隆抗體制備過程中應(yīng) 用哪些細胞用哪些細胞 工程技術(shù)手段？工程技術(shù)手段？ （3）制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選？）制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選？ 動物細胞工程 1、因為B淋巴細胞具有分泌特 異性抗體的能力，而骨髓瘤 細胞具有在體外培養(yǎng)條件下 大量增殖的本領(lǐng)，所以由某 種B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融 合產(chǎn)生的雜交瘤細胞，能夠 在體外大量繁殖，并且

10、產(chǎn)生 特定的單克隆抗體。 動物細胞工程 3、拓展：聚乙二醇、拓展：聚乙二醇 處理后，培養(yǎng)液中處理后，培養(yǎng)液中 存在哪幾種細胞？存在哪幾種細胞？ 脾脾-脾脾 脾脾-瘤瘤 瘤瘤-瘤瘤 未融合的脾細胞未融合的脾細胞 未融合的瘤細胞未融合的瘤細胞 2、動物細胞融合、細胞培養(yǎng)動物細胞融合、細胞培養(yǎng) 動物細胞工程 已知細胞合成已知細胞合成DNA有有D和和S兩條途徑，其中兩條途徑，其中D 途徑能被氨基嘌呤阻斷，人淋巴細胞中有這兩途徑能被氨基嘌呤阻斷，人淋巴細胞中有這兩 種種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠 骨髓瘤細胞盡管沒有骨髓瘤細胞盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增途徑，

11、但能不斷分裂增 殖，將這兩種細胞在試管中混合，加聚乙二醇殖，將這兩種細胞在試管中混合，加聚乙二醇 促融，獲得雜交瘤細胞，請回答：促融，獲得雜交瘤細胞，請回答： （1）試管中除融合的雜交瘤細胞外，還有）試管中除融合的雜交瘤細胞外，還有 _種融合細胞。（考慮兩兩融合）種融合細胞。（考慮兩兩融合） （2）設(shè)計一方法（不考慮機械方法），從培）設(shè)計一方法（不考慮機械方法），從培 養(yǎng)液中分離出雜交瘤細胞，并說明原理。養(yǎng)液中分離出雜交瘤細胞，并說明原理。 方法：方法： 原理：原理： 試試身手試試身手 動物細胞工程 解析：解析： （1）試管中有人的淋巴細胞和小鼠骨髓）試管中有人的淋巴細胞和小鼠骨髓 瘤細胞，在

12、促溶劑的作用下，可能出現(xiàn)以下瘤細胞，在促溶劑的作用下，可能出現(xiàn)以下3 種細胞的融合情況，人的淋巴細胞和淋巴細胞種細胞的融合情況，人的淋巴細胞和淋巴細胞 融合，小鼠的骨髓瘤細胞和骨髓瘤細胞融合，融合，小鼠的骨髓瘤細胞和骨髓瘤細胞融合， 人的淋巴細胞和小鼠的骨髓瘤細胞融合，實驗人的淋巴細胞和小鼠的骨髓瘤細胞融合，實驗 需要的是第需要的是第3種細胞，即雜交瘤細胞；種細胞，即雜交瘤細胞； （2）要將雜交瘤細胞分離出來，可以在）要將雜交瘤細胞分離出來，可以在 培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細胞；加培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細胞；加 入氨基嘌呤后，使入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有合成途徑阻斷

13、，僅有D合成合成 途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞就不能途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞就不能 增殖，但人淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜增殖，但人淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜 種細胞中可以利用淋巴細胞中的種細胞中可以利用淋巴細胞中的S途徑合成途徑合成 DNA而增殖。而增殖。 動物細胞工程 某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的 方法，設(shè)計了一個生產(chǎn)破方法，設(shè)計了一個生產(chǎn)破 傷風(fēng)桿菌抗體的實驗方案。傷風(fēng)桿菌抗體的實驗方案。 據(jù)圖回答：據(jù)圖回答： （）該方案能達到預(yù)期（）該方案能達到預(yù)期 效果嗎？效果嗎？ （）圖中（）圖中為為 過程，常用過程，常用 作為誘導(dǎo)劑。作為誘導(dǎo)劑。 該細胞繼承

14、了該細胞繼承了 因此不僅能分因此不僅能分 泌泌，還，還 有有 的本領(lǐng)。的本領(lǐng)。 不能不能 細胞融合細胞融合 特異性抗體特異性抗體 在體外培養(yǎng)條件下大量增殖在體外培養(yǎng)條件下大量增殖 滅活的病毒滅活的病毒 （或聚乙二醇）（或聚乙二醇） 試一試試一試 雙親細胞的雙親細胞的 遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì) 動物細胞工程 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合淋巴細胞誘導(dǎo)融合 后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。在這種培養(yǎng)基上不后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。在這種培養(yǎng)基上不 能存活、增殖的細胞是能存活、增殖的細胞是 （ ） B淋巴細胞淋巴細胞 小鼠骨髓瘤細胞小鼠骨

15、髓瘤細胞 B 淋巴細胞自身融合細胞淋巴細胞自身融合細胞 小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞雜交瘤細雜交瘤細 胞胞 A B C D A 動物細胞工程 3.單克隆抗體的應(yīng)用： 在基礎(chǔ)理論研究中具有重要意義 在疾病診斷、治療和預(yù)防方面，具有 生物導(dǎo)彈 特異性強、靈敏度高 等優(yōu)越性。 動物細胞工程 用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”，靈敏度 很高，在妊娠第8天就可以做出診斷，比原來的診斷方法提前了10天左右， 可以避免孕婦在不知道妊娠的情況下因服用藥物而對胎兒造成不利影響。該 方法檢測的準(zhǔn)確率在90以上。 動物細胞工程 動物細胞工程 總結(jié) 兩個過程 動物細胞培

16、養(yǎng)過程 單克隆抗體制備過程 三個“一” 一個誘導(dǎo)細胞融合的新方法 滅活的病毒 一個新細胞雜交瘤細胞 一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性 強、靈敏度高的優(yōu)勢 動物細胞工程 教學(xué)反饋 1.動物細胞融合技術(shù)最重要的用途是 （ ） A.克服遠源雜交不親和 B.制備單克隆抗體 C.培育新物種 D.生產(chǎn)雜種細胞 B 2.單克隆抗體是由下列哪種細胞產(chǎn)生的（ ） A.B淋巴細胞 B.T淋巴細胞 C.骨髓瘤細胞 D.雜交瘤細胞 D 3.（多選）1975年米爾斯坦和柯勒成功地獲得了單克隆抗體。下列細胞中與單 克隆抗體的制備有關(guān)的是（ ） A.效應(yīng)B細胞 BT淋巴細胞 C.骨髓瘤細胞 D雜交瘤細胞 A B C D 動物細胞工

17、程 B B 體外培養(yǎng)體外培養(yǎng) 骨髓瘤細胞 雜交瘤細胞 足夠數(shù)量的細胞群足夠數(shù)量的細胞群 注射到注射到 小鼠腹腔小鼠腹腔 A A C C 4.下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計的生產(chǎn)破 傷風(fēng)桿菌的實驗方案 制備單克隆抗體 不能，沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn) 生單一抗體的B淋巴細胞。 (1).該實驗方案的目的是：_ (2).該方案能達到預(yù)期效果嗎？為什么？ (3).A是從小鼠的脾臟中取得_ 該細胞能 夠產(chǎn)生_ 。 (4).圖中B為_過程，常用 _作為誘導(dǎo)劑，該細胞繼承 _的遺傳特性，既能_,又能 _。 (5).C過程指細胞培養(yǎng)，該過程包括_培養(yǎng)和 _培養(yǎng)兩個階段，其中_代以內(nèi)的的細胞屬于

18、細 胞株。 B淋巴細胞 抗體 細胞融合 滅活的病毒 雙親細胞分泌抗體 無限增殖 原代 傳代50 動物細胞工程 課后習(xí)題課后習(xí)題 1. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞 誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞， 在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是 （ ） 淋巴細胞 小鼠骨髓瘤細胞 B淋巴細胞自身融合細胞 小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞 雜交瘤細胞 A. B. C. D. C 2.動物細胞融合和植物原生質(zhì)融合決定于 ( ) A.細胞膜的流動性 B細胞膜的選擇透過性 C.細胞質(zhì)的流動性D細胞質(zhì)酶的活性 A 一.選擇題 動物細胞工程 3.“生物導(dǎo)彈”是指 （ ） A.單克隆抗體 B.雜交瘤

19、細胞 C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞 D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物 D 4.只能使動物細胞融合的常用誘導(dǎo)方法是 （ ） APEG B滅活的病毒 C電刺激 D離心 A 二.簡答題 1.淋巴細胞是由動物體-中的-細胞分化發(fā)育而 來的。 2.雜交瘤細胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是- 骨髓造血干 主動運輸 動物細胞工程 三.思考與探究 1.植物體細胞雜交技術(shù)與動物細胞融合技術(shù)有什么不同？ 2.制備單克隆抗體時，為什么要選用B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜 交瘤細胞？ 提示：植物體細胞雜交技術(shù)與動物細胞融合技術(shù)基本相同，不同的是植物 體細胞融合前需去掉細胞壁，然后再融合；動物細胞融合是兩個體

20、細胞直 接融合。 提示：哺乳動物感染抗原后，其體內(nèi)會形成相應(yīng)的B淋巴細胞，B淋巴細胞 能分泌相應(yīng)的抗體凝聚或殺死這些抗原。動物在免疫反應(yīng)的過程中，每一種 B淋巴細胞能分泌一種特異性抗體，要想獲得大量的特異性抗體，必須使能 分泌該單一抗體的B淋巴細胞大量增殖。B淋巴細胞具有產(chǎn)生單一抗體的能力， 但不能在體外增殖；骨髓瘤細胞是一種癌細胞，它能在體外培養(yǎng)條件下無限 增殖，但不能產(chǎn)生抗體。因此，把一種B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行細胞融 合，產(chǎn)生雜交瘤細胞，它會兼有兩個親本細胞的特性在體外培養(yǎng)條件下能 不斷增殖，同時能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。 動物細胞工程 教學(xué)參考教學(xué)參考 1.已成功的動物細胞融合實例還

21、有哪些？ 生物種類 細胞來源 成功年代 酵母菌雞 原生質(zhì)體血紅細胞 1975年 人胡蘿卜 腹水癌細胞原生質(zhì)體 1976年 人小鼠 纖維肉瘤細胞畸胎瘤細胞 1978年 要知道更多的實例，需經(jīng)常查閱更多科研報道。 動物細胞工程 2.為什么不用兩個而要用多個細胞進行動物細胞間的融合？ 就目前常用的細胞融合方法來看，不管是用物理的、化學(xué)的方法，還 是生物的方法，其融合率都不可能是100%。僅用兩個細胞融合，其效率太 低，不一定能得到融合細胞。更重要的是，即使兩個細胞已發(fā)生融合，但 并不一定是研究者期望得到的細胞類型。目前動物細胞融合技術(shù)最有價值 的應(yīng)用就是單克隆抗體的制備。我們以制備單克隆抗體為例來說

22、明這一問 題。我們知道，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達百萬種以上，但是每一 個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體，如果僅取一個脾細胞（含B淋巴細胞） 和一個瘤細胞雜交，我們不能確定該脾細胞分泌的抗體是否正是我們所需 要的；若用大量的脾細胞和瘤細胞進行融合，就可以從融合細胞中篩選出 能分泌所需抗體的雜交瘤細胞。 動物細胞工程 3.如何進行雜交瘤細胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？ 融合后的細胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細胞就是雜交瘤細 胞。但這些雜交瘤細胞并非都是能分泌所需抗體的細胞，通常用“有限 稀釋法”來選擇。將雜交瘤細胞稀釋，用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔 細胞不超過一個，通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測

23、各孔上清液中細胞分泌 的抗體（常用酶聯(lián)免疫吸附試驗法），那些上清液可與特定抗原結(jié)合的 培養(yǎng)孔為陽性孔。陽性孔中的細胞還不能保證是來自單個細胞，挑選陽 性孔的細胞繼續(xù)進行有限稀釋，一般需進行34次，直至確信每個孔中 增殖的細胞為單克隆細胞。該過程即為雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)。 動物細胞工程 動物細胞工程 動物細胞工程 單克隆抗體是指單克隆抗體是指 （ ） A單個骨髓瘤細胞增殖產(chǎn)生的抗體單個骨髓瘤細胞增殖產(chǎn)生的抗體 B單個單個B淋巴細胞增殖產(chǎn)生的抗體淋巴細胞增殖產(chǎn)生的抗體 C單個雜交瘤細胞增殖產(chǎn)生的抗體單個雜交瘤細胞增殖產(chǎn)生的抗體 D單個抗體通過克隆化，產(chǎn)生大量抗體單個抗體通過克隆化，產(chǎn)生大量抗體

24、C 動物細胞工程 （江蘇高考題，（江蘇高考題，2003）將小鼠骨髓瘤細胞與一種）將小鼠骨髓瘤細胞與一種B淋巴細胞淋巴細胞 融合，可使融合的細胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體，其依據(jù)是融合，可使融合的細胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體，其依據(jù)是 （多選）（多選） （ ） AB淋巴細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖淋巴細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖 BB淋巴細胞只有與骨髓瘤細胞融合后才能產(chǎn)生抗體淋巴細胞只有與骨髓瘤細胞融合后才能產(chǎn)生抗體 C骨髓瘤細胞可以無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體骨髓瘤細胞可以無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體 D骨髓瘤細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖骨髓瘤細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖 AC 動物細胞工程 （

25、2004年高考理綜生物部分（全國新課程卷年高考理綜生物部分（全國新課程卷）（河南、湖）（河南、湖 北、湖南等）第北、湖南等）第5題）用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，題）用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體， 下列實驗步驟中錯誤的是下列實驗步驟中錯誤的是 （ ） A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞淋巴細胞 B用纖維素酶處理用纖維素酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞 C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小淋巴細胞與小 鼠骨髓資金積累細胞融合鼠骨髓資金積累細胞融合 D篩選雜交資金積

26、累細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細篩選雜交資金積累細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細 胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 B 動物細胞工程 上圖是單克隆抗體制備過程示意圖。據(jù)圖回答：上圖是單克隆抗體制備過程示意圖。據(jù)圖回答： （1）通過）通過過程得到的過程得到的B淋巴細胞從小鼠體內(nèi)分離出之前，應(yīng)淋巴細胞從小鼠體內(nèi)分離出之前，應(yīng) 對小鼠進行的處理是對小鼠進行的處理是_，該處理的實質(zhì)是在小，該處理的實質(zhì)是在小 鼠體內(nèi)發(fā)生鼠體內(nèi)發(fā)生_反應(yīng)。反應(yīng)。 （2）骨髓瘤細胞與進行原代培養(yǎng)的細胞相比較，核內(nèi)的結(jié)構(gòu)）骨髓瘤細胞與進行原代培養(yǎng)的細胞相比較，核內(nèi)的結(jié)構(gòu) 發(fā)生的主要變化是發(fā)生的主要變

27、化是_，從而違背了，從而違背了“程序程序 性細胞死亡性細胞死亡”規(guī)則，打破了細胞產(chǎn)生與死亡的動態(tài)平衡。規(guī)則，打破了細胞產(chǎn)生與死亡的動態(tài)平衡。 （3）培養(yǎng)瓶中的雜交瘤細胞在有絲分裂中期，核內(nèi)）培養(yǎng)瓶中的雜交瘤細胞在有絲分裂中期，核內(nèi)DNA分子分子 數(shù)：染色體數(shù)數(shù)：染色體數(shù)=_ _。 （4）試設(shè)想運用生物工程其它領(lǐng)域的技術(shù)制備單克隆抗體的）試設(shè)想運用生物工程其它領(lǐng)域的技術(shù)制備單克隆抗體的 一條途徑：一條途徑：_ 。 動物細胞工程 （1）注射相應(yīng)抗原 體液免疫 （2）遺傳物質(zhì)（原癌基因）發(fā)生了改變 （3） 2：1 （4）運用基因工程方法制造含有某種抗體的 基因的工程菌進行發(fā)酵生產(chǎn)。 動物細胞工程 下

28、圖表示細胞融合技術(shù)的一些過程，請回答：下圖表示細胞融合技術(shù)的一些過程，請回答： (1)由由A、B兩種細胞人工融合成兩種細胞人工融合成C細胞的過程中，常用細胞的過程中，常用 作為誘導(dǎo)劑。融合過程包括作為誘導(dǎo)劑。融合過程包括和和 兩方面，兩方面，D細胞稱為細胞稱為 細胞。細胞。 (2)若由若由D細胞培育成植株，可用細胞培育成植株，可用技術(shù)，這一培養(yǎng)過程技術(shù)，這一培養(yǎng)過程 要經(jīng)過要經(jīng)過和和兩個階段。目前，植兩個階段。目前，植 物體細胞雜交還有許多理論和技術(shù)問題沒有解決，如雜種物體細胞雜交還有許多理論和技術(shù)問題沒有解決，如雜種 植物還不能按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性狀，從遺植物還不能按照人們的需要

29、表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性狀，從遺 傳學(xué)角度分析，其內(nèi)在因素很可能是傳學(xué)角度分析，其內(nèi)在因素很可能是 。 (3)如需制備單克隆抗體，則如需制備單克隆抗體，則D細胞應(yīng)具有細胞應(yīng)具有 和和 的能力。的能力。 動物細胞工程 (1) PEG(聚乙二醇聚乙二醇)(或滅活的病毒或滅活的病毒) 膜融合膜融合 核融合核融合 雜種雜種 (2)植物細胞培養(yǎng)脫分化再分化控制優(yōu)良性狀的植物細胞培養(yǎng)脫分化再分化控制優(yōu)良性狀的 基因還不能表達基因還不能表達 (3)分泌特異性抗體大量增殖分泌特異性抗體大量增殖 動物細胞工程 （廣東卷）（廣東卷）5、關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不、關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不 正確的是（正確的是（ ） A

30、、可以制成診斷盒用于疾病的珍斷、可以制成診斷盒用于疾病的珍斷 B、可以與藥物結(jié)合，用于病變細胞的定向治、可以與藥物結(jié)合，用于病變細胞的定向治 療療 C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn) D 動物細胞工程 變式訓(xùn)練變式訓(xùn)練 生產(chǎn)單克隆抗體時，要在培養(yǎng)液中加入某種試生產(chǎn)單克隆抗體時，要在培養(yǎng)液中加入某種試 劑才能篩選出雜交瘤細胞，因為該試劑劑才能篩選出雜交瘤細胞，因為該試劑 A能抑制淋巴細胞和雜交瘤細胞的能抑制淋巴細胞和雜交瘤細胞的DNA復(fù)制復(fù)制 B能阻止淋巴細胞的原癌基因被激活能阻止淋巴細胞的原癌基因被激活 C選擇性抑制骨髓瘤細胞的選擇性抑制骨髓瘤細胞的DNA復(fù)制復(fù)制 D能阻止雜交瘤細胞核糖體上所有蛋白質(zhì)的合能阻止雜交瘤細胞核糖體上所有蛋白質(zhì)的合 成成 動物細胞工程 （3）將分離出的雜種細胞在不同的）將分離出的雜種細胞在不同的 條件下繼續(xù)培養(yǎng)，獲得條件下