臨床生化標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件（臨床生化檢驗(yàn)SOP文件）

1、 臨床生化標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件（臨床生化檢驗(yàn)sop文件）山東德棉職工醫(yī)院檢驗(yàn)科cs600b全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件單位：山東德棉職工醫(yī)院科室: 檢驗(yàn)科生化室文件編號(hào)：版本：批準(zhǔn)施日期：有校期: 一年復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測(cè)定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂發(fā)放部門(mén)：檢驗(yàn)科生化室編寫(xiě)者： 鞏建剛審批者:保管者:修訂者：cs-600b全自動(dòng)生化分析儀 標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件【儀器運(yùn)行條件】為保證儀器的正常運(yùn)行，儀器必須滿(mǎn)足下列條件：1.灰塵少、通風(fēng)良好的環(huán)境，避免陽(yáng)光直接照射。2.地面水平良好(斜度1/200)，地面強(qiáng)度要能夠承受儀器的重量（850kg）。3.室內(nèi)溫度保持在1532，溫度變化不超過(guò)3/小時(shí)。4

2、.室內(nèi)相對(duì)濕度應(yīng)保持在4585，且不結(jié)露。5.純水供應(yīng)：反滲水或離子交換水。出水量：40升/小時(shí)，水壓：0.53.5kg/cm2。6.電源供應(yīng)：220v10%，5060hz，最大功率4kva。有保護(hù)性接地(接地電阻10下)。7.放置本儀器的房間請(qǐng)不要帶入以下電器：手機(jī)、對(duì)講機(jī)等發(fā)出特定電磁波的小功率電器。【開(kāi)機(jī)程序】）開(kāi)機(jī)前檢查1.供電系統(tǒng)（包括ups）是否正常。2.供水系統(tǒng)是否正常。3.檢查樣品針、試劑針、攪拌針、清洗針是否有彎曲、堵塞、污物、漏水等，如有上述情況發(fā)生，參照儀器維護(hù)、保養(yǎng)說(shuō)明書(shū)處理。4.檢查清洗液（迪瑞原廠(chǎng)供應(yīng)），包括樣品針、攪拌針、去污劑箱及試劑位45（抗菌無(wú)磷）和45位（

3、堿性）各種清洗液，必要時(shí)補(bǔ)足。5.檢查打印機(jī)是否正常、打印紙是否安裝好及是否聯(lián)機(jī)（打印機(jī)上online燈亮）。6.儀器及操作臺(tái)面表面干凈、無(wú)污物，機(jī)房空調(diào)正常開(kāi)啟。2）開(kāi)機(jī)為保證試劑艙的冷藏作用，位于儀器右后下方的總電源（on）可長(zhǎng)期處于開(kāi)啟狀態(tài)，同時(shí)ups長(zhǎng)期處于工作狀態(tài)。1.打開(kāi)儀器右側(cè)電源（on）開(kāi)關(guān)，記錄開(kāi)機(jī)時(shí)間。2.待儀器自檢及程序裝載（15分鐘）結(jié)束，儀器至備用（ready）狀態(tài)，如有錯(cuò)誤（trouble）,根據(jù)錯(cuò)誤代碼查找維護(hù)保養(yǎng)說(shuō)明書(shū)檢查原因，及時(shí)處理。3.自動(dòng)開(kāi)機(jī)在自動(dòng)開(kāi)機(jī)程序中設(shè)置開(kāi)機(jī)時(shí)間：main menu f5：define f6：define optional par

4、ameters f2：for automatic startup condition 3） 執(zhí)行開(kāi)機(jī)程序startup1 或startup2開(kāi)機(jī)程序設(shè)置： main menu f5：define f6：define optional parameters f3：for startup1 或f4：for startup2開(kāi)機(jī)程序至少應(yīng)包括：1.更換儀器內(nèi)水箱純水一次。2.更換孵育槽內(nèi)純水一次。3.清洗管道3次。4.清洗液清洗探針3次。5.純水清洗探針3次。6.清洗比色杯（酸、堿、水）。7.測(cè)定水空白。8.根據(jù)具體試劑空白變化情況設(shè)定試劑空白檢查周期。9.檢查剩余試劑體積。四、根據(jù)檢查剩余試劑體積

5、及當(dāng)日工作量，及時(shí)補(bǔ)足當(dāng)日工作所需試劑量。五、自動(dòng)開(kāi)機(jī)在自動(dòng)開(kāi)機(jī)程序中設(shè)置每日開(kāi)機(jī)條件（同上）： main menu f5：define f6：define optional parameters f2：for automatic startup condition 【校準(zhǔn)程序】1.校準(zhǔn)物的準(zhǔn)備將校準(zhǔn)物從冰箱取出，凍干校準(zhǔn)物按說(shuō)明書(shū)加入蒸餾水復(fù)溶，輕輕顛倒混勻3次，不可用力震搖，室溫放置30分鐘至完全溶解；液體校準(zhǔn)物從冰箱取出，室溫放置15分鐘以平衡至室溫。校準(zhǔn)物的選擇盡可能選擇配套儀器廠(chǎng)家校準(zhǔn)品。2.上機(jī)校準(zhǔn)程序1 main menu f1：worklist f1：enter+右空格鍵 f4

6、：define calibration f1：worklist12 用光標(biāo)鍵選欲校準(zhǔn)項(xiàng)目，用“select”鍵選擇“1”（試劑空白）及“2”（校準(zhǔn)）， f5：enter 。3 將校準(zhǔn)品按屏幕顯示放入綠色校準(zhǔn)架相應(yīng)位置，將校準(zhǔn)架置入進(jìn)樣軌道，打開(kāi)進(jìn)樣架（feed）?！举|(zhì)控程序】1.質(zhì)控物的準(zhǔn)備將質(zhì)控物從冰箱取出，凍干質(zhì)控物按說(shuō)明書(shū)加入蒸餾水復(fù)溶，輕輕顛倒混勻3次，不可用力震搖，室溫放置30分鐘至完全溶解；液體校準(zhǔn)物從冰箱取出，室溫放置15分鐘以平衡至室溫。至少有兩水平質(zhì)控品，8小時(shí)一次。質(zhì)控物的選擇盡可能選擇配套儀器廠(chǎng)家及人血清基質(zhì)質(zhì)控材料。2.上機(jī)質(zhì)控程序1 main menu f1：work

7、list f1：enter+右空格鍵 f4：define control f1：worklist12 用光標(biāo)鍵及select鍵選擇質(zhì)控項(xiàng)目，f5：enter 。3將質(zhì)控品按屏幕顯示放入黃色質(zhì)控架相應(yīng)位置，將質(zhì)控架置入進(jìn)樣軌道，打開(kāi)進(jìn) 樣架（feed）。質(zhì)控在控方可進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)。【標(biāo)本檢測(cè)程序】1.輸入標(biāo)本編號(hào)及測(cè)定項(xiàng)目： main menu f 1：worklist f1：enter f1：tests 1輸入順序號(hào)（request no）及樣本編號(hào)（patient id no）。2輸入檢測(cè)項(xiàng)目通道號(hào)或組合分析（profile）代碼3f5：enter。2.編輯標(biāo)本架號(hào)（compile）：1 ma

8、in menu f 1：worklist f2：compile f1：by patients2 輸入起始順序號(hào)（request no，from），終止順序號(hào)（request no，to）， routine（1），開(kāi)始架號(hào)（starting rack no）。3 f5：enter。3.將分離好的血清或血漿標(biāo)本置入設(shè)置好的灰色樣品架上，注意樣本不可有凝塊，樣本量不可少于0.2ml 。4.打開(kāi)進(jìn)樣架（feed）。5.測(cè)試完畢，執(zhí)行關(guān)機(jī)程序（shut down）或設(shè)置自動(dòng)關(guān)機(jī)?！娟P(guān)機(jī)程序】1.作好各種工作記錄登記：當(dāng)日工作量登記表，當(dāng)日校準(zhǔn)登記表，室內(nèi)質(zhì)控登記表，儀器維護(hù)保養(yǎng)登記表。2.執(zhí)行關(guān)機(jī)程序s

9、hut-down關(guān)機(jī)程序設(shè)置：main menu f5：define f6：define optional parameters f5：for shutdown關(guān)機(jī)程序至少應(yīng)包括：1 清洗管道3次。2 清洗液清洗探針3次。3 純水清洗探針3次。4 清洗比色杯（酸、堿、水）。5 測(cè)定水空白。6 檢查剩余試劑體積。3.自動(dòng)關(guān)機(jī)在自動(dòng)關(guān)機(jī)程序中設(shè)置每日關(guān)機(jī)條件（同上）：main menu f5：define f6：define optional parameters f2：for automatic startup condition4.關(guān)機(jī)后維護(hù)1清擦樣品針、試劑針、攪拌針、清洗針。2檢查清洗液（

10、shimadzu原廠(chǎng)供應(yīng)），包括樣品針、攪拌針、去污劑箱及試劑位31（acid）和32位（alkli）各種清洗液，必要時(shí)補(bǔ)足。3關(guān)閉水處理電源。4記錄關(guān)機(jī)時(shí)間。5及時(shí)補(bǔ)足次日工作所需試劑量。6清潔儀器及操作臺(tái)面。7關(guān)閉機(jī)房空調(diào)?！揪S護(hù)保養(yǎng)程序】1.日保養(yǎng)1檢查去污劑箱清洗液（new clean，8%）液面，及時(shí)更換。2更換樣品針清洗液（new alkli，5%）。3更換攪拌針清洗液（new alkli，5%）。4更換去離子水箱純水。5更換孵育槽純水。標(biāo)本的接收與拒收標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件單位：山東德棉職工醫(yī)院科室: 檢驗(yàn)科生化室文件編號(hào)：版本：批準(zhǔn)施日期：有校期: 一年復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測(cè)定系統(tǒng)

11、變化時(shí)需進(jìn)行修訂發(fā)放部門(mén)：檢驗(yàn)科生化室編寫(xiě)者： 鞏建剛審批者:保管者:修訂者： 標(biāo)本的接收與拒收 1 病人的準(zhǔn)備做血液檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)的病人，一般要求采血前禁食1214小時(shí)，采血的前一天避免吃高脂肪、高蛋白類(lèi)食物，避免飲酒。否則，會(huì)引 起血脂及某些血清酶結(jié)果升高，甚至血清出現(xiàn)混濁，影響整個(gè)檢驗(yàn)結(jié)果；進(jìn)行葡萄糖耐量試驗(yàn)的病人，在試驗(yàn)前3天給予適量的碳水化學(xué) 物飲食，有利于取得正確的結(jié)果；做碘131吸收試驗(yàn)者，在試驗(yàn)前一個(gè)月停服一切含碘的藥物和含碘豐富的食物，如海產(chǎn)品類(lèi)。 2 采血時(shí)間血液生化檢驗(yàn)一般要求早晨空腹安靜時(shí)采血。因?yàn)轶w內(nèi)的各種化學(xué)成份受許多因素調(diào)節(jié)：如飲食后大量葡萄糖及脂類(lèi)物質(zhì)吸收入血，使

12、血 糖和血脂上升，游離脂肪酸及無(wú)機(jī)磷降低；運(yùn)動(dòng)后會(huì)使乳酸、丙酮酸、乳酸脫氫酶、轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶等升高，血糖降低；晝夜變化大的 成份有皮質(zhì)醇、血清鐵、膽紅素等；日間變化大的主要是代謝廢物成份如尿素、尿酸等；大量飲水可致血液稀釋等等。所以，做血液生化 檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)掌握好采血時(shí)間。但是，對(duì)重癥昏迷或急癥病例，可隨時(shí)采血送檢糖、鉀、鈉、鈣、血?dú)夥治?、淀粉酶等?xiàng)目。但在輸液時(shí)采血 應(yīng)避免送檢項(xiàng)目受輸液成份的影響，如輸液中補(bǔ)鉀、補(bǔ)糖、補(bǔ)鹼時(shí)送檢，對(duì)血鉀、血糖、二氧化碳結(jié)合力等項(xiàng)目均有影響。 3 采血部位成人一般取肘部靜脈，肥胖者可用腕背靜脈；嬰兒常用頸部靜脈、股動(dòng)脈或前囟靜脈竇；剛出生的嬰兒可收集臍帶血；尸體

13、解剖者取心臟 血；血?dú)夥治鲆话悴蓜?dòng)脈血；檢驗(yàn)只需微量全血時(shí)，成人從耳垂或指尖取血，嬰兒從大腳趾或腳跟取血；輸液病人采血應(yīng)避免在輸液的同 一側(cè)上肢或下肢采血，燒傷患者采血應(yīng)避免穿剌炎癥或水腫部，以免影響結(jié)果。 4 采血操作及送檢的注意事項(xiàng) 41 采血器械：采血用的注射器、試管必須干燥清潔。注射器及針頭不宜用酒精消毒。目前多用一次性注射器及試管。 42 采血操作：必須按無(wú)菌操作，采血部位皮膚必須干燥，止血帶不可縛扎過(guò)久，抽血時(shí)速度不可過(guò)快，以免血細(xì)胞破裂，采血后應(yīng)卸下針頭 再將血液沿管壁徐徐注入試管內(nèi)。 43 防止氣體逸散：采集血?dú)夥治鰳颖?，抽血時(shí)注射器內(nèi)不能有空泡，抽出后立即用小橡皮密封針頭，隔

14、絕空氣。因空氣中的氧分壓高于動(dòng)脈 血，二氧化碳分壓低于動(dòng)脈血；作二氧化碳結(jié)力測(cè)定時(shí)，盛血標(biāo)本的容器亦應(yīng)加塞蓋緊，避免血液與空氣接觸過(guò)久，影響檢驗(yàn)結(jié)果。 44 防止分解及自身變化：采血后應(yīng)盡快送檢。因血液中有些化學(xué)成份于離體后極易分解，使其含量改變，如血糖及酶類(lèi)測(cè)定，時(shí)間過(guò)久，血 細(xì)胞酵解可使血糖下降，酶活力變化等。有些化學(xué)成份在細(xì)胞內(nèi)外相差懸株，離體時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞內(nèi)外濃度會(huì)發(fā)生變化，影響測(cè)定結(jié)果。 如肌酸激酶、乳酸脫氫酶、電解質(zhì)等。 45 防止污染：有些檢查項(xiàng)目要求極嚴(yán)格，其采血器具及標(biāo)本容器必須經(jīng)過(guò)化學(xué)清潔。如血氨、銅、鋅、鐵等項(xiàng)目，因其含量極低，稍有污染 即影響結(jié)果。作淀粉酶測(cè)定時(shí)，要防止

15、唾液污染，因唾液中含有大量的淀粉酶，污染后會(huì)引起假性淀粉酶升高。 46 防止溶血：作各類(lèi)生化檢驗(yàn)，要防止血細(xì)胞破裂溶血，因溶血引起細(xì)胞內(nèi)外濃度改變，可使鉀、膽紅素、氯化物、無(wú)機(jī)磷、alt、as t、ldh等升高，鈉、鈣、akp等降低，溶血對(duì)某些實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)過(guò)程干擾：如血紅蛋白可直接抑制脂肪酶的活性，使脂肪酶降低。溶 血可影響呈色反應(yīng)終點(diǎn)為紅色的實(shí)驗(yàn)，如酶法測(cè)定血糖、膽固醇、甘油三酯、膽紅素的重氮反應(yīng)、尿素的二乙酰肟法等。 5 抗凝劑的選擇生化檢驗(yàn)大部份項(xiàng)目都采用血清，但有些項(xiàng)目需用血漿或全血，采集的血液必須加入抗凝劑?？鼓齽┑姆N類(lèi)較多，如選擇不當(dāng)，亦會(huì)影響 檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。下面介紹幾種生化檢驗(yàn)

16、常用的抗凝劑及其用途： 51 草酸鉀：常用于尿素、肌酐、纖維蛋白原等測(cè)定，不能用鉀、鈣等測(cè)定，對(duì)ldh、丙酮酸激酶、akp和淀粉酶有抑制作用。 52 肝素：常用于電解質(zhì)、血?dú)夥治?、血氨等測(cè)定。其鈉鹽可使淀粉酶升高。 53 氟化鈉：常用氟化鈉草酸鈉混合抗凝劑作血糖測(cè)定的抗凝劑，它可抑制血細(xì)胞葡萄糖酵解酶的作用，延長(zhǎng)標(biāo)本的保存時(shí)間。 54 二乙胺四乙酸鈉鹽（edta-na2）：生化常用的抗凝劑，但不能用于鈣、鈉、及含氮物質(zhì)的測(cè)定，對(duì)淀粉酶、肌酸激酶、akp、 acp、5-核苷酸酶等可抑制，對(duì)丙酮酸激酶有明顯升高的作用。 正確的血液收集方法采集步驟：查看檢驗(yàn)單，詢(xún)問(wèn)病史，查對(duì)檢驗(yàn)單上病人姓名、性別、

17、年齡等項(xiàng)目與病人是否吻合，耐心檢查需要空腹血檢驗(yàn)項(xiàng)目要詢(xún)問(wèn)病人是否8小 時(shí)以?xún)?nèi)沒(méi)有能量攝入，詢(xún)問(wèn)病人在檢驗(yàn)前是否有足夠的休息；需要增添項(xiàng)目時(shí)先與出具檢驗(yàn)申請(qǐng)單的醫(yī)生聯(lián)系。 請(qǐng)患者準(zhǔn)備。（“請(qǐng)將左手衣袖挽起，手伸直平放，拳頭握緊。”）對(duì)孩子應(yīng)多哄勸，避免劇烈躁動(dòng)、哭鬧。對(duì)于緊張或有暈血史的病人 要進(jìn)行安慰（“您可以側(cè)過(guò)身去，不看很快會(huì)好”）。采血器材準(zhǔn)備，選擇相應(yīng)的真空采血管；并記錄采集時(shí)間。選擇穿刺血管：扎好壓脈帶，觀(guān)察血管走向，選擇穿刺點(diǎn)，松開(kāi)壓脈帶（壓脈帶壓迫時(shí)間不能超過(guò)1分鐘），正在輸液的病人絕對(duì)不可同 側(cè)采血，更不可以利用原有的輸液針頭采血。消毒：以穿刺點(diǎn)為圓心，用蘸有碘伏的棉簽由內(nèi)到

18、外螺旋型涂抹，消毒范圍為直徑大約3厘米，注意消毒過(guò)的地方不能重復(fù)涂抹，在涂 抹的過(guò)程中棉簽必須也要同時(shí)旋轉(zhuǎn)。采樣及混勻：等待碘伏干了以后（必須等到干了以后，否則達(dá)不到消毒效果），再次扎好壓脈帶，將針頭平面朝上與手臂成15穿刺， 最好一針見(jiàn)血。拔出采血管后立即進(jìn)行顛倒8次混勻。在抽血時(shí)要詢(xún)問(wèn)病人感受（如有無(wú)心慌，頭暈等情況），當(dāng)出現(xiàn)異常時(shí)如：?病人 出汗、面色蒼白、暈倒時(shí)立即拔出針并急救?操作失敗，取得病人諒解，再次進(jìn)行操作（“對(duì)不起，由于的原因需要再取一次血，請(qǐng) 原諒”）。采樣盡量在1分鐘內(nèi)完成。止血：采血結(jié)束后，解開(kāi)壓脈帶，退針后請(qǐng)病人“手指壓住棉球，手伸直抬高于心臟，保持兩分鐘”（如果是有

19、出血傾向患者如紫癜，itp，血液病等要壓迫510分鐘直到無(wú)血滲出）。標(biāo)本前處理：將采血管與相應(yīng)的檢驗(yàn)單裹好，分類(lèi)，盡快送檢驗(yàn)項(xiàng)目所對(duì)應(yīng)的采血管：1.生化檢驗(yàn) 黃頭管2.凝血試驗(yàn) 藍(lán)頭管3.血常規(guī) 紫頭管采血順序：紅頭管藍(lán)頭管紫頭管黃頭管，注：除紅頭管外，其他各種采血管均須顛倒混勻8次。 以下檢驗(yàn)項(xiàng)目須特別注意1.所有生化項(xiàng)目、微量元素、血沉必須用空腹血；乙肝三對(duì)最好用空腹血。2.糖耐量試驗(yàn)：（方法一）空腹抽血吃飯（3分鐘內(nèi)進(jìn)食75克葡萄糖或二兩饅頭一個(gè)）飯后30分鐘抽血飯后60分鐘抽血飯后 120分鐘抽血（方法二）空腹抽血吃飯（3分鐘內(nèi)進(jìn)食50克葡萄糖）飯后60分鐘抽血注：血糖正常的人吃葡萄糖

20、，高血糖的人吃饅頭.3. 激素檢查：病人必須空腹且在抽血前要靜坐30分鐘，激素全套要抽血5ml。臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的采集和處理 臨床檢驗(yàn)的目的是為臨床提供準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)診斷依據(jù)。為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性，在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中必須堅(jiān)持全面質(zhì)量控制 （total quality control,tqc。即指對(duì)影響臨床檢驗(yàn)結(jié)果可靠性的各方面因素及各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行質(zhì)量控制）和全過(guò)程質(zhì)量控制（即指對(duì)實(shí)驗(yàn)工作 的全過(guò)程進(jìn)行質(zhì)量控制和質(zhì)量管理）。全過(guò)程質(zhì)量控制包括實(shí)驗(yàn)前（分析前）、實(shí)驗(yàn)中（分析中）和實(shí)驗(yàn)后（分析后）三個(gè)階段的質(zhì)量控 制。在實(shí)驗(yàn)誤差中實(shí)驗(yàn)前誤差占70%，因而實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量保證對(duì)減少實(shí)驗(yàn)誤差顯得尤其重要。 實(shí)

21、驗(yàn)前質(zhì)量保證包括病人準(zhǔn)備、 標(biāo)本收集、處理、貯存和運(yùn)輸?shù)龋?因而能否正確地、規(guī)范化地采集和處理標(biāo)本，是能否做到實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量保證的重要內(nèi)容。在臨床化學(xué)檢驗(yàn)中，血液標(biāo)本是最多應(yīng)用的生物體液，血液標(biāo)本因素是影響臨床化學(xué)分析準(zhǔn)確性和可靠性的最重要、最直接的因素。我國(guó)從我們的國(guó)情出發(fā)，參考了美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化 委員會(huì)（nccls）的有關(guān)規(guī)定，對(duì)臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的有關(guān)問(wèn)題也提出了相應(yīng)的要求。 我國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)委員會(huì)臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)（cccls）已對(duì)“臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理”提出了“中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)”，旨在通過(guò)標(biāo)本方面的質(zhì)量控制達(dá)到臨床化學(xué)分析的質(zhì)量保證。目前該“標(biāo)準(zhǔn)”文件正在

22、待批中。 一、臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的定義 臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本是指為完成某項(xiàng)或多項(xiàng)臨床化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目而采集的一定量的血液，包括抗凝及非抗凝血。 二、血液標(biāo)本的采取 （一） 采取部位 靜脈采血：應(yīng)用最多的采血方式。常用的靜脈為肘前靜脈、腕背靜脈，小兒和新生兒有時(shí)用頸靜脈和前囟靜脈。 動(dòng)脈采血：主要用于血?dú)夥治鰰r(shí)。常用的動(dòng)脈為股動(dòng)脈、肱動(dòng)脈、橈動(dòng)脈和臍動(dòng)脈。 毛細(xì)血管采血：適用于僅需微量血液的試驗(yàn)或嬰幼兒。 常用部位為耳垂、指端，小兒有時(shí)為大趾和足跟。采血針刺入皮膚深度應(yīng)為2mm (2.5mm), 采血局部應(yīng)無(wú)炎癥、水腫等。 （二）標(biāo)本類(lèi)型 臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本分為血清、血漿和全血3種。血清和血漿為

23、臨床常用， 除前者不含纖維蛋白原外，其余多數(shù)化學(xué)成分無(wú)差異；全血只有在紅細(xì)胞內(nèi)成分與血漿成分相似時(shí)才用； 血?dú)夥治?、血紅蛋白電泳等時(shí)用全血， 一般臨床化學(xué)分析多不用全血。 三、全血處理為血清或血漿 血液標(biāo)本采取后應(yīng)盡可能早地自然地使血清（漿）從與血細(xì)胞接觸的全血中分離出來(lái)。一般應(yīng)于采血后2h內(nèi)分離出血清或血漿。全血處 理為血清或血漿分為離心前、離心中和離心后三個(gè)階段，對(duì)各不同階段均有具體要求。 （一）離心前階段 即指標(biāo)本采集到離心處理前的一段時(shí)間。 血清：標(biāo)本離心前一般應(yīng)令其自行凝集，不可用木棍等剝離凝血塊。通常于室溫（2225oc）放置3060 min 血標(biāo)本可自發(fā)完全凝集；冷藏標(biāo)本凝集緩慢

24、；加促凝劑時(shí)凝集加快（標(biāo)本采集后應(yīng)輕輕顛倒混合510次，以確保促凝劑作用）。 血漿：需用血漿標(biāo)本時(shí)，必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，而且采血后必須立即輕輕顛倒采血管混合510次（以確?？鼓齽?發(fā)揮作用），510 min 后即可分離出血漿。 冷藏標(biāo)本：標(biāo)本冷藏可抑制細(xì)胞代謝，穩(wěn)定某些溫度依賴(lài)性成分但全血標(biāo)本一般不能冷藏；血鉀測(cè)定標(biāo)本冷藏不得超過(guò)2h。 血液中兒茶酚胺、ph 血?dú)?、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲狀腺激素等檢測(cè)時(shí)需用制冷的標(biāo)本。 標(biāo)本需要冷藏（28oc）時(shí)，標(biāo)本采取后應(yīng)立即將標(biāo)本置于冰屑或冰水混合物（不可用大冰塊），并且必須保證標(biāo)本與制 冷物充分接觸，保證制冷物達(dá)到標(biāo)本的高度。 代謝

25、抑制劑和防腐劑：某些添加劑加入血液標(biāo)本中能抑制細(xì)胞代謝，可以防止血液標(biāo)本貯存時(shí)分析物濃度的變化。血液葡萄糖測(cè)定時(shí) ，如在血液中加入氟化鈉，在血細(xì)胞未分離的情況下，葡萄糖在2225oc時(shí)可穩(wěn)定24h，28oc 時(shí)可以穩(wěn)定48h；但在新生兒和兒童標(biāo)本，由于紅細(xì)胞壓積高，用氟化鈉難以控制細(xì)胞的糖酵解作用；甲醛草酸鉀抗凝保存劑不適合 血糖測(cè)定；氟化鈉麝香草酚混合劑因能抑制酶活性，不適用于酶學(xué)測(cè)定。 標(biāo)本采集現(xiàn)場(chǎng)：(1)標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送往實(shí)驗(yàn)室，尤其當(dāng)收集區(qū)溫度超過(guò)22oc時(shí)此點(diǎn)更為重要；(2)血液標(biāo)本 采集后血管必須加塞、管口向上、垂直放置，以減少管中內(nèi)容物振動(dòng)，促進(jìn)凝血完全，防止標(biāo)本蒸發(fā)、污染和外

26、濺等；(3)已收集的血 液標(biāo)本應(yīng)溫和地處理，要防止標(biāo)本管振蕩所造成的溶血；溶血可影響測(cè)定結(jié)果。有嚴(yán)重影響（使結(jié)果升高）的項(xiàng)目有：乳酸脫氫酶、血清 門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清鉀和血紅蛋白；引起值得注意的影響的項(xiàng)目有：血清鐵（）、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（）和血清甲狀腺素 （）；輕度受影響（增加）的有： 總蛋白、白蛋白、血清磷、血清鎂、血清鈣和酸性磷酸酶； (4)應(yīng)避免對(duì)光線(xiàn)敏感的分析物暴露在人造光或太陽(yáng)光（紫外線(xiàn)）照射下。如 va 、vb6 、 胡蘿卜素、卟啉、膽紅素等測(cè)定時(shí)，標(biāo)本管應(yīng)該用鋁箔或類(lèi)似物質(zhì)包裹保護(hù)起來(lái)。 標(biāo)本運(yùn)送：全血標(biāo)本應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場(chǎng)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，如果運(yùn)送距離較遠(yuǎn)，特別是因分析物穩(wěn)定

27、性有影響，必要時(shí)可于采血現(xiàn)場(chǎng)分離 出血清或血漿后，再送往實(shí)驗(yàn)室；標(biāo)本運(yùn)送過(guò)程中要注意標(biāo)本的包裝、溫度要求、處理方法等，要確保分析成分的穩(wěn)定性；標(biāo)本管在運(yùn)送 過(guò)程中要保持管口封閉、向上垂直放置。 實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本及離心標(biāo)本準(zhǔn)備：(1)要有標(biāo)本收取記錄（應(yīng)認(rèn)真核對(duì)檢驗(yàn)中清單，對(duì)有關(guān)情況要認(rèn)真記錄，標(biāo)本接收及處理應(yīng)簽字登 記）； (2)對(duì)接受的標(biāo)本要予以分類(lèi)準(zhǔn)備離心；(3)實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本后應(yīng)仍保持標(biāo)本管于密閉封口、 管口向上，垂直位放置。管塞移去后血中co2丟失，會(huì)造成ph增加，離子鈣和酸性磷酸酶減少， 尤其變化會(huì)影響某些檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性；(4)標(biāo)本凝集時(shí)間要充分 ；加抗凝劑的血液標(biāo)本可以立即離心；加

28、促凝劑的標(biāo)本可于采血后515 min 盡早離心；抗凝的全血標(biāo)本（鋅、鋰、原卟啉等測(cè)定時(shí)）可以不離心；(5)冷藏（28oc）標(biāo)本應(yīng)保持這個(gè)溫度直到準(zhǔn) 備離心。推薦用溫度控制離心機(jī)； (6)離心標(biāo)本前不主張用小木棒或類(lèi)似器材去剝離附著于試管壁和管塞上的凝塊，人為剝離會(huì)誘導(dǎo)溶血。如果必須露出試管壁或取下管 塞時(shí)，一定要十分注意，動(dòng)作一定要輕柔。 （二）離心階段 即指標(biāo)本處于離心機(jī)里的一段時(shí)間。 離心時(shí)間和相對(duì)離心力(rcf)：臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時(shí)，rcf(10001200) ，離心時(shí)間為510 min。 溫度控制離心： 離心時(shí)產(chǎn)熱不利于分析物穩(wěn)定，臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時(shí)必須采用溫度控制離心

29、機(jī)。 一些溫度依賴(lài)性分析物 （如促腎上腺皮質(zhì)激素、環(huán)腺苷酸、 兒茶酚胺等）應(yīng)在4oc分離； 無(wú)特殊溫度要求的分析物，離心溫度應(yīng)設(shè)定在20oc 22oc；溫度低于15oc可以人為地使血鉀測(cè)定值增高；冷藏運(yùn)送的標(biāo)本必須在要求的溫度下離心。 關(guān)于再離心：標(biāo)本離心最好一次完成，若需再次離心，應(yīng)距上次離心相隔時(shí)間很短；對(duì)于含有分離物質(zhì)的血標(biāo)本絕不可以再離心。 （三）離心后階段 指標(biāo)本離心后和用于檢測(cè)的血清或血漿被取出一定量之前的一段時(shí)間。 血清或血漿與接觸的血細(xì)胞和凝塊的分離應(yīng)在采血后盡快（2h內(nèi)）完成。 分離的血清或血漿的貯存：實(shí)驗(yàn)室的室溫和血清或血漿的貯存溫度、時(shí)間，是分析物穩(wěn)定性和測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性的

30、重要參數(shù)。(1)于22 oc25oc血清或血漿的保存不超過(guò)8h；(2)實(shí)驗(yàn)于8h內(nèi)不能完成時(shí)，血清或血漿應(yīng)置2o c8oc保存；(3)48h內(nèi)不能完成的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，或分離的血清或血漿需貯存48h以上時(shí)，應(yīng)于-20o c保存； (4)標(biāo)本不可反復(fù)凍融（只能凍融一次）， 且不可貯存于無(wú)霜冰箱（可造成樣品溫度變化）；(5)離心后分離凝膠（凝膠屏障）上面的血清可保存25天，但必須保證凝膠的完整性；但應(yīng)用非凝膠分離物質(zhì)時(shí)，離心后必須立即將血清或血漿移出。(6)血清或血漿必須保存于密閉的試管中 。 四、血清或血漿分離物質(zhì) 是指將血清或血漿從全血中分離出來(lái)的物質(zhì)，包括凝膠物質(zhì)與非凝膠物質(zhì)。 （一）凝膠物質(zhì) 為

31、一類(lèi)具有特定粘度和特殊比重（介于血清或血漿與凝塊之間的比重）的惰性凝膠物質(zhì)，用（10001100） rcf離心10 min， 能在血清或血漿與凝塊之間形成不可穿透的凝膠屏障，從而將血清或血漿與其接觸的血細(xì)胞、凝塊分開(kāi)。 （二）非凝膠物質(zhì) 是由惰性物質(zhì)（玻璃、塑料、纖維、毛氈等）構(gòu)成的小珠、盤(pán)、濾器、纖維塞等組成。具有介于血清或血漿與凝塊之間的比重，將其輕輕 加入血管中，用(1000 1100) rcf 離心10 min時(shí)， 可透過(guò)血液移動(dòng)至血清或血漿與血細(xì)胞、凝塊之間，形成一個(gè)界面，使血清或血漿被分離出來(lái)。 （三）完整的凝膠管系統(tǒng) 該系統(tǒng)是由一個(gè)真空采血管（硅化塑料管）、內(nèi)含惰性凝膠物質(zhì)、促凝

32、劑或抗凝劑組成。使用時(shí)要注意該產(chǎn)品必須具有相應(yīng)性能證書(shū)和有 效期，并且必須在其有效期內(nèi)正確使用。 隨著檢驗(yàn)方法日益完善，高精檔次的自動(dòng)化儀器的大量應(yīng)用，以及檢驗(yàn)的科學(xué)管理和檢驗(yàn)工作人員技術(shù)水平不斷提高，明顯 降低檢測(cè)過(guò)程中的影響因素和干擾，而分析檢測(cè)前的各類(lèi)影響或干擾因素相對(duì)增多?，F(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)對(duì)檢測(cè)標(biāo)本的留取與收集提出較高的要 求，而廣大就診患者也必需了解留取標(biāo)本的基本知識(shí)，遵照囑托，配合檢驗(yàn)人員，以使檢驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確準(zhǔn)確可靠。 門(mén)診檢驗(yàn)常見(jiàn)的標(biāo)本一般包括血液(指血，靜脈血)、尿、糞便、腦脊液、胸水、腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等，這些標(biāo)本收集 的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。標(biāo)本采集注意

33、事項(xiàng) 一、血液標(biāo)本 盡量避免生理因素的影響，有些生理因素，如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)、情緒波動(dòng)、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化，有些甚至還 有晝夜變化。采集血液標(biāo)本的條件應(yīng)盡量 一致為宜，如無(wú)法避免，應(yīng)說(shuō)明在標(biāo)本上注明該因素。 1外周血 一般選取左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)采血，該部位應(yīng)無(wú)凍瘡，炎癥，水腫，破損。如該部位不符合要求，以其他手指部位代替。對(duì)燒傷病人，可選擇 皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(cè)(如白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類(lèi)等)受生理因素影響波動(dòng)過(guò)大，比較時(shí)宜便條件盡量一致。出、凝血功能 的檢測(cè)項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù)，出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢測(cè)，不宜服用抗凝、促凝藥物，以免影響測(cè)定結(jié)果。 2.靜脈血 除涉

34、及各種止血和血栓檢測(cè)等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外，目前絕大多 數(shù)檢測(cè)項(xiàng)目的分析檢測(cè)可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測(cè)項(xiàng)目中，有些(如 血糖，血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大，一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜，有些在血中衰變較快(血清酶活性測(cè)定如acp活性等)，0 4貯存活性減弱也不一，這些項(xiàng)目的檢測(cè)必須及時(shí)而快速，有些(如肌酸激酶等)受運(yùn)動(dòng)等因素影響較大。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也 十分重要，尤其涉及血鉀，ldh等的測(cè)定。切忌在輸液的同側(cè)靜脈抽血做各項(xiàng)檢驗(yàn)。 二、尿液標(biāo)本同血標(biāo)本一樣，尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物量等因素的影響也較大，特別是飲食的影響，故一般來(lái)說(shuō)晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起 床后的第一次尿

35、標(biāo)本，較濃縮和酸化，有形成分(如血細(xì)胞，上皮細(xì)胞，管形)相對(duì)集中便于觀(guān)察。隨機(jī)尿即隨意一次尿，留取方便，但 受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚，易于出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果，如飲食性蛋白尿，飲食性糖尿，維生素c干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐 后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖，尿蛋白和尿膽原的檢查，此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性，檢出較輕微的病變。12小時(shí)尿細(xì)胞 計(jì)數(shù)，即addis (前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日8時(shí)的所有尿液)，因時(shí)間較長(zhǎng)，細(xì)菌易繁殖，須加入防腐劑甲醛。 24小時(shí)尿(第一天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量，包括蛋白，糖，ca2十等，檢測(cè)不同的物質(zhì) ，選擇不同的防

36、腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng)，要求無(wú)菌，沖洗外明后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量，最少12m1 ，最好50ml，定時(shí)尿須全部收集，對(duì)女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。 三、糞便標(biāo)本 糞便標(biāo)本的檢測(cè)對(duì)判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值。采集時(shí)要求用干凈的件簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便 ，對(duì)外觀(guān)無(wú)異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲(chóng)蟲(chóng)體及作蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便 后立即檢查，從有膿血和稀軟處取材，保溫送檢。 查日本血吸蟲(chóng)蟲(chóng)卵時(shí)應(yīng)取粘液、膿血部分，孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便，且需盡快處理。檢查蟯蟲(chóng)卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或

37、 清晨排便前自肛門(mén)周?chē)櫶幪幨萌〔⒘⒓寸R檢。隱血試驗(yàn)(化學(xué)法)，試驗(yàn)前3日禁食肉類(lèi)及含動(dòng)物血食物并禁服鐵劑，維生素c等。所 有糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢，以防止有形成分受消化酶及ph的破壞。 四、腦脊液標(biāo)本腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢，放置過(guò)久將影響檢驗(yàn)結(jié)果：如細(xì)胞變性，破壞，導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類(lèi)不被：有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量 減少：細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無(wú)菌管，第一管作細(xì)菌培養(yǎng)，第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查，第三 管作一般性狀及顯微鏡檢查，三管順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難，全部送檢和檢測(cè)過(guò)程應(yīng)注意安全。 五、胸腹水標(biāo)本與腦脊液標(biāo)本一樣，采集后的標(biāo)本注意安全

38、，及時(shí)送檢。一般也分裝三管，一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查，一管生化檢查，一管細(xì)菌培養(yǎng)，順序 以與腦脊液相同為宜。 六、前列腺液標(biāo)本 前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集，液量少時(shí)直接滴在載玻片上及時(shí)送檢，須注意防止標(biāo)本蒸干，量多時(shí)收集在潔凈干燥的 試管中。若按摩不出前列腺液，可檢查按摩后的尿液沉渣。 七、陰道分秘物標(biāo)本陰道標(biāo)本采集前24小時(shí)應(yīng)禁止房事、盆浴、明道檢查、明道灌洗及局部上藥等取材所用器械需要清潔。一般用鹽水浸濕棉拭子自陰道 或陰道彎后部、宮頸管口取材，制生理鹽水涂片后觀(guān)察分泌物標(biāo)本，經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本。天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（速率法）標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件單位：山東德棉職工醫(yī)院科室:

39、檢驗(yàn)科生化室文件編號(hào)：版本：批準(zhǔn)施日期：有校期: 一年復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測(cè)定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂發(fā)放部門(mén)：檢驗(yàn)科生化室編寫(xiě)者： 鞏建剛審批者:保管者:修訂者：天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（速率法）1 概述ast廣泛分布于人體，在心，肝，骨骼肌，腎和紅細(xì)胞內(nèi)有較高的濃度，這些組織的損傷或疾病，如心肌梗死，病毒性肝炎，肝壞死，肝硬化，和肌營(yíng)養(yǎng)不良等癥均會(huì)引起血清或血漿ast水平的升高。2 樣本收集新鮮無(wú)溶血標(biāo)本，血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或edta抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時(shí)，采集靜脈3ml,待凝固后（最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘）通常為加抗凝劑的血液在

40、30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘，分離出血清備用。不建議采用血漿標(biāo)本。3 方法原理l-天冬氨酸+a-酮戊二酸-草酰乙酸+l-古氨酸草酰乙酸+nadh+h+-l-蘋(píng)果酸+nad+4劑來(lái)源，配置及儲(chǔ)存 試劑來(lái)源：迪瑞 試劑配置：試劑一和試劑二均為液體試劑，可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。若試劑混濁，或以蒸餾水為空白在340nm處的光吸收值低于1.1a,應(yīng)予丟棄。 試劑儲(chǔ)存：試劑避光儲(chǔ)存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標(biāo)簽所示失效期。5分析儀器 cs-600b全自動(dòng)生化分析儀分析參數(shù)：樣品量15 u/l 試劑量：第一試劑240 u/l（r1）；第二試劑60 u/l 測(cè)光點(diǎn)

41、2338 測(cè)定模式：速率法 負(fù)反應(yīng)分析波長(zhǎng)：340nm/405nm(主波長(zhǎng)/副波長(zhǎng))6計(jì)算方法 樣本濃度（u/l）=樣本管吸光度的變化校準(zhǔn)液濃度（u/l） 校正管吸光度的變化7線(xiàn)性范圍 3-1000u/l8 參考范圍：040u/新生兒和嬰兒的ast大約是成人的二倍，六個(gè)月以后降至成人水平。9 失控控理 1：立即重測(cè)同一質(zhì)控品，如重測(cè)后結(jié)果仍不再允許范圍，請(qǐng)進(jìn)行下一步。 2：新開(kāi)一瓶質(zhì)控品，重測(cè)失控項(xiàng)目，如新開(kāi)的質(zhì)控血清結(jié)果正常，那么原來(lái)質(zhì)控血清可能過(guò)期或在室溫防止時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而變質(zhì)，如結(jié)果仍不再允許范圍，則進(jìn)行下一步。 3：進(jìn)行儀器維護(hù)，重測(cè)失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否更換，比色杯是否需要

42、清洗或更換？對(duì)儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)可更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi)，則進(jìn)行下一步。 4：重新校準(zhǔn)。重測(cè)失控項(xiàng)目。用新的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因。 5：請(qǐng)專(zhuān)家?guī)椭?。如果前五步都為能得到在控結(jié)果，那可能是儀器或試劑已查明原因，只有和儀器或試劑廠(chǎng)家聯(lián)系請(qǐng)求他們的技術(shù)支援。10 注意事項(xiàng) 1:試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。 2：如測(cè)試結(jié)果超出線(xiàn)性范圍，樣本應(yīng)稀釋后測(cè)試，調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。 3：結(jié)果的準(zhǔn)確性?xún)x器校正和測(cè)定溫度，時(shí)間的控制。 4：高血脂或黃疸樣本在340nm處有較高的吸光度值。這類(lèi)樣本的高值ast耗盡底物后，在340n

43、m處仍維持較高的吸光度值，此時(shí)樣本應(yīng)稀釋后在進(jìn)行測(cè)定。 5：nadh在334nm和365nm處的毫摩爾消光系數(shù)分別為6.18和3.4.6：若試劑混濁，或以水為空白在340nm處吸光度值低于1.1時(shí)，則不能使用。7：由醫(yī)生根據(jù)臨床癥狀和其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出臨床診斷8：樣本與廢液等有潛在生物傳染性危險(xiǎn)，操作者穎遵守實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)定并按當(dāng)?shù)蒯t(yī)療廢棄物，感染性廢棄物，產(chǎn)業(yè)廢棄物等規(guī)定處理廢液。11:臨床意義 ast在心肌細(xì)胞內(nèi)含量較多，當(dāng)心肌梗死時(shí)，血清中ast活力增高，在發(fā)病后6-12小時(shí)之內(nèi)顯著升高，在48小時(shí)達(dá)到高峰，約在3-5天恢復(fù)正常。血清中ast也可來(lái)源于肝細(xì)胞，各種肝病可引起血清ast升高

44、，有時(shí)可達(dá)1200單位，中毒性肝炎還可更高。肌炎，胸膜炎，腎炎及肺炎等也可引起血清ast升高。臨床上還可通過(guò)計(jì)算ast/alt對(duì)肝病進(jìn)行診斷和鑒別診斷酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alt)測(cè)定（速率丙氨法）標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件單位：山東德棉職工醫(yī)院科室: 檢驗(yàn)科生化室文件編號(hào)：版本：批準(zhǔn)施日期：有校期: 一年復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測(cè)定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂發(fā)放部門(mén)：檢驗(yàn)科生化室編寫(xiě)者： 鞏建剛審批者:保管者:修訂者：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alt)測(cè)定（速率法）1概述肝臟內(nèi)含有豐富的酶系統(tǒng)，以維持機(jī)體的正常生理代謝過(guò)程。不少酶是由肝臟合成并由肝膽系統(tǒng)排泄，當(dāng)肝臟有病時(shí)，可由于酶生成亢進(jìn)或釋出異常，引起血清內(nèi)酶的活性改變。

45、這些改變?cè)谝欢ǔ潭葍?nèi)反映了肝臟的功能狀況。人體轉(zhuǎn)氨酶的種類(lèi)甚多，而以血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，血清天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)換酶活性最強(qiáng)。此兩種酶廣泛在于機(jī)體組織細(xì)胞內(nèi)，以肝臟，心臟，腎臟及骨骼肌中較多。在肝臟中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alt)的含量最多，ast以心肌含量最多，此兩種轉(zhuǎn)氨酶較多地釋放在血液中，使血清中兩種酶活性增高。2 樣本收集新鮮無(wú)溶血標(biāo)本，血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或edta抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時(shí)，采集靜脈3ml,待凝固后（最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘）通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘，分

46、離出血清備用。不建議采用血漿標(biāo)本。3 方法原理l-丙氨酸+-酮戊二酸丙酮酸+l-谷氨酸丙酮酸+nadhl-乳酸+nad4劑來(lái)源，配置及儲(chǔ)存 試劑來(lái)源：迪瑞 試劑配置：試劑一和試劑二均為液體試劑，可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。若試劑混濁，或以蒸餾水為空白在340nm處的光吸收值低于1.0a,應(yīng)予丟棄。 試劑儲(chǔ)存：試劑避光儲(chǔ)存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標(biāo)簽所示失效期。5分析儀器 cs-600b全自動(dòng)生化分析儀分析參數(shù)：樣品量15 u/l 試劑量：第一試劑240 u/l（r1）；第二試劑60 u/l 測(cè)光點(diǎn)2338 測(cè)定模式：速率法 負(fù)反應(yīng)分析波長(zhǎng)：340nm/405nm(主波長(zhǎng)/副波長(zhǎng))6計(jì)

47、算方法 樣本濃度（u/l）=樣本管吸光度的變化校準(zhǔn)液濃度（u/l） 校正管吸光度的變化7 線(xiàn)性范圍：本實(shí)驗(yàn)的線(xiàn)性范圍：4-1000u/l8 參考范圍：男性；：540u/l 女性：5-35 u/l9 失控控理 1：立即重測(cè)同一質(zhì)控品，如重測(cè)后結(jié)果仍不再允許范圍，請(qǐng)進(jìn)行下一步。 2：新開(kāi)一瓶質(zhì)控品，重測(cè)失控項(xiàng)目，如新開(kāi)的質(zhì)控血清結(jié)果正常，那么原來(lái)質(zhì)控血清可能過(guò)期或在室溫防止時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而變質(zhì)，如結(jié)果仍不再允許范圍，則進(jìn)行下一步。 3：進(jìn)行儀器維護(hù)，重測(cè)失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否更換，比色杯是否需要清洗或更換？對(duì)儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)可更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許

48、范圍內(nèi)，則進(jìn)行下一步。 4：重新校準(zhǔn)。重測(cè)失控項(xiàng)目。用新的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因。 5：請(qǐng)專(zhuān)家?guī)椭Ｈ绻拔宀蕉紴槟艿玫皆诳亟Y(jié)果，那可能是儀器或試劑已查明原因，只有和儀器或試劑廠(chǎng)家聯(lián)系請(qǐng)求他們的技術(shù)支援。10 注意事項(xiàng) 1:試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。 2：如測(cè)試結(jié)果超出線(xiàn)性范圍，樣本應(yīng)稀釋后測(cè)試，調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。 3：結(jié)果的準(zhǔn)確性?xún)x器校正和測(cè)定溫度，時(shí)間的控制。 4：高血脂或黃疸樣本在340nm處有較高的吸光度值。這類(lèi)樣本的高值alt耗盡底物后，在340nm處仍維持較高的吸光度值，此時(shí)樣本應(yīng)稀釋后在進(jìn)行測(cè)定。 5：由醫(yī)生根據(jù)臨床癥狀和其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出

49、臨床診斷。11 臨床意義 alt活性高1) 肝膽疾病 傳染性肝炎、中毒性肝炎、脂肪肝和膽管炎等。2) 心血管疾病 心肌梗死、心肌炎、心力衰竭時(shí)肝淤血和腦出血等。3) 藥物和毒物 氯丙嗪，異 肼、奎寧、水楊酸制劑及乙醇，鉛、alt活性降低 磷酸吡多醛缺乏癥。y-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（速率法）標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件單位：山東德棉職工醫(yī)院科室: 檢驗(yàn)科生化室文件編號(hào)：版本：批準(zhǔn)施日期：有校期: 一年復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測(cè)定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂發(fā)放部門(mén)：檢驗(yàn)科生化室編寫(xiě)者： 鞏建剛審批者:保管者:修訂者：y-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（速率法）1：概述健康人血清gt水平甚低（40單位），主要來(lái)自肝臟，少許由腎、胰、小腸產(chǎn)生。

50、gt在反映肝細(xì)胞壞死損害方面不及alt，但在黃疸鑒別方面有一定意義，肝臟內(nèi)排泄不暢（肝內(nèi)梗阻）和肝外梗阻（如膽道系統(tǒng)阻塞）以及肝硬化、肝腫瘤中毒性肝病、酒精性肝病、脂肪肝等均可升高。? 谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（gt）在人體細(xì)胞的微粒體中合成。某些藥物和酒精可使其合成增加。它的主要功能是參與體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝，且廣泛存在于人體各組織及器官中，以腎臟最為豐富，其次是胰肝等處。在肝臟主要存在于肝細(xì)胞漿和膽管上皮細(xì)胞中。正常成年人血清中g(shù)t活性很低，主要來(lái)源于肝臟。2 樣本收集新鮮無(wú)溶血標(biāo)本，血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或edta抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時(shí)，采集靜脈3m

51、l,待凝固后（最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘）通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘，分離出血清備用。不建議采用血漿標(biāo)本。3 方法原理試劑中l(wèi)-谷氨酰-3羥基-4硝基苯胺和甘氨酸在樣品中谷氨酰轉(zhuǎn)移酶的催化作用下，生成色產(chǎn)物5-氨基-2硝基苯甲酸鹽，引起405nm處的吸光值升高，通過(guò)監(jiān)測(cè)405nm處光吸收值上升的速率，可以測(cè)定谷氨酰轉(zhuǎn)移酶的活力。4劑來(lái)源，配置及儲(chǔ)存 試劑來(lái)源：迪瑞 試劑配置：試劑一和試劑二均為液體試劑，可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。若試劑混濁，或以蒸餾水為空白在405nm處的光吸收值低于0.8a,應(yīng)予丟棄。 試劑儲(chǔ)存

52、：試劑避光儲(chǔ)存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標(biāo)簽所示失效期。5分析儀器 cs-600b全自動(dòng)生化分析儀分析參數(shù)：樣品量50 u/l 試劑量：第一試劑200 u/l（r1）；第二試劑50 u/l 測(cè)光點(diǎn)2338 測(cè)定模式：速率法 正反應(yīng)分析波長(zhǎng)：405nm/505nm(主波長(zhǎng)/副波長(zhǎng))6計(jì)算方法 gt (u/l)=( a/min*tv*1000)(9.5*sv*p) 式中 tv=總反應(yīng)體積 sv=樣本體積 9.5=nadh在340nm處的毫摩爾消光系數(shù) p=比色杯光徑（cm）7線(xiàn)性范圍 0450u/l8 參考范圍：040u/l新生兒和嬰兒的ast大約是成人的二倍，六個(gè)月以后降至成人水平。9 失控控理 1：立即重測(cè)同一質(zhì)控品，如重測(cè)后結(jié)果仍不再允許范圍，請(qǐng)進(jìn)行下一步。 2：新開(kāi)一瓶質(zhì)控品，重測(cè)失控項(xiàng)目，如新開(kāi)的質(zhì)控血清結(jié)果正常，那么原來(lái)質(zhì)控血清可能過(guò)期或在室溫防止時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而變質(zhì)，如結(jié)果仍不再允許范圍，則進(jìn)行下一步。 3：進(jìn)行儀器維護(hù)，重測(cè)失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否更換，比色杯是否需要清洗或更換？對(duì)儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)可更換試劑已查明原因。如