米非司酮對子宮肌瘤組織中雌、孕激素受體及表皮生長因子受體的影響

1、米非司酮對子宮肌瘤組織中雌、孕激素受體及表皮生長因子受體的影響米非司酮對子宮肌瘤組織中雌、孕激素受體及表皮生長因子受體的影響作者：蔡云朗，沈揚，任慕蘭，趙維英，姚青，何杰 ，李嘉，翟衛(wèi)中【摘要】 目的 探討米非司酮對子宮肌瘤組織中雌、孕激素受體（er、pr）及表皮生長因子受體（egfr）的影響，進一步 了解米非司酮治療子宮肌瘤的機制。方法 將70例臨床診斷為子宮肌瘤、有手術指征、無內科合并癥的患者隨機分為3組。對照組:確診后立即手術，共30例;5 d服藥組（a組）:口服米非司酮100 mg d-1，連服5 d后手術，共20例;90 d服藥 組（b組）:月經第1天起口服米非司酮.5 mg d-1

2、，連服90 d后手術，共20例。免疫組織化學法檢測子宮肌瘤組織中 er、pr及egfr水平，同時于服藥前后分別測定血中促卵泡生成素（fsh）、促黃體生成素（lh）、雌激素（e）、孕激素（p）及表皮生長因子（egf）水平。 結果 （1）服藥后肌瘤體積a組平均縮小22.51%，b組平均縮小61.77%，兩組服藥前后肌瘤 體積比較差異均有統(tǒng)計學意義（ p 0.05）;兩服藥組間肌瘤體積縮小率比較差異有統(tǒng)計學意義（ p 0.01）。（2）兩服藥組服藥前后fsh、lh、e、p變化比較差異無統(tǒng)計學意義（ p 0.05），其中fsh呈下降趨勢，e維持在卵泡期水平。兩服藥組間比較，服藥后egf水平有顯著性差異

3、（ p 0.05）。（3）對照組肌瘤組織中er、pr、egfr均呈高表達，a組肌瘤組織中 pr仍呈高表達，er、egfr表達下降，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（ p 0.05）;b組肌瘤組織中pr呈高表達，er表達 下降，egfr表達明顯下降，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（ p 0.05）。結論（1）短期大劑量及長期小劑量米非司酮均可使子宮肌瘤明顯縮小，但長期小劑量效果更明顯。（2）米非司酮可能系通過抑制下丘腦 垂體性腺軸影響血清中egf水平，從而影響子宮肌瘤生長。（3）直接降低肌瘤組織中egfr表達是米非司酮治療子宮肌瘤的另一重要機制。 【關鍵詞】 米非司酮;子宮肌瘤;孕激素受體;雌激素受體

4、;表皮生長因子受體子宮肌瘤是一種激素依賴性腫瘤，近年來研究證實，子宮肌瘤組織中雌、孕激素受體（er、pr）增多及過度表達是肌瘤生長的主要原因1，孕激素（p）在子宮肌瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。rein等2的研究證實p是促使子宮肌瘤發(fā)生的因素之一，這使抗孕激素治 療成為治療子宮肌瘤的理論基礎。國內外研究報道，pr拮抗劑米非司酮治療子宮肌瘤可使肌瘤體積縮小， 癥狀改善，但其具體作用機制尚不清楚3-4。衛(wèi)愛民等5的研究證實，當米非司酮的劑量達到一定濃度時再增加劑量并不能增加其抑制作用。本研究旨在探討不同劑量和不同時限應用米非司酮對子宮肌瘤組織中er、pr、表皮生長因子受體（egfr）的影響，以及對血

5、清中促卵泡生成素（fsh）、促黃體生成素（lh）、雌激 素（e）、p、表皮生長因子（egf）的影響，以進一步探討米非司酮治療子宮肌瘤的可能機制以及適宜方案。1 對象與方法 1.1 對象1.1.1 服藥組2004年8月至2006年月在本院經婦科和b超檢查診斷為子宮肌瘤的患者40例，平均年齡42.95歲，肝腎功能正常，3個月內未服用任何藥物，隨機分為2組。5 d服藥組（a組）于手術前5 d服 用米非司酮100 mgd-1 ，連服5 d后手術，其中全子宮切除術14例，肌瘤剜除術6例;90 d服藥組（b組）自月經來潮第1天開始服用米非司酮.5 mg d -1，連服90 d后手術，其中子宮切除術16例，

6、肌瘤剜除術4例; 2組所服米非司酮均為上海華聯(lián)制藥廠生產，均于服藥前后抽血查fsh、lh、e、p和egf。試驗開始前患 者知情并同意。1.1.2 對照組與服藥組同期于本院婦科因子宮肌瘤行子宮切除術或肌瘤剜除術患者30例，術前未使用任何藥物，平均年齡43.76歲，術后病理證實為子宮肌瘤，其中全子宮切除術27例，肌瘤剜除術3例。標本采集患者或家屬知情并得到同意。 1.2 方法1.2.1 米非司酮治療前后子宮肌瘤體積測定患者于服藥前后分別行盆腔婦科檢查和b超（專人同時經 腹部和陰道超聲）測子宮和子宮肌瘤的三維徑線，然后按公式v=abc/6（a、b、c為長、寬、高）計算子宮肌瘤體積，多發(fā)性肌瘤以最大肌

7、瘤徑線計算，以肌瘤體積縮小達到或超過25%者為治療有效。1.2.2 性激素測定方法用elisa方法測定服藥組用藥前、后和對照組手術前、后空腹血fsh、lh、e、p和egf水平。1.2.3 子宮肌瘤組織er、pr、egfr測定采用免疫組化ip二步法（一抗購自美國dako公司，二抗購自 福州邁新生物技術開發(fā)有限公司）測定。所有切除子宮或肌瘤標本經10%福爾馬林固定，石蠟包埋，厚4 m連續(xù)切片，分別常規(guī)he及免疫組化染色。結果判定:免疫組化反應呈棕黃色顆粒為受體陽性。隨機選取10個高倍視野，計算受體陽性細胞占細胞總數的百分比并進行強度分級。er、pr陽性定位于細胞核，egfr陽性定位于細胞漿。陽性細

8、胞數25%，表達強度記為1;25%75%記為2;75%記為3。1.3 統(tǒng)計學方法結果以 x-s 表示，數據處理采用spss 11.5統(tǒng)計軟件，兩組間比較采用 t 檢驗。p 0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。2 結 果 2.1 米非司酮治療前、后子宮肌瘤體積變化見表1。a組服藥5 d后，9例肌瘤體積縮小 25%，11 例 25%或無縮小，縮小有效率45%，其中縮小50% 2例，縮小最大為89.7%，最小為0.03%，肌 瘤體積平均縮?。?2.5126.23）%，用藥前后肌瘤體積縮小差異無統(tǒng)計學意義（ p0.05）。b組20例服藥90 d后，17例肌瘤體積縮小25%，3例25%或無縮小，縮小有效率85

9、%，其中縮小50%有15例，縮小最大為84.62%，最小15.8%，肌瘤體積平均縮?。?1.77 14.）%，用藥前后肌瘤體積縮小差異有統(tǒng)計學意義（p 0.05）。兩用藥組之間比較肌瘤體積縮小差異有顯著統(tǒng)計學意義（p0.01）。表1 米非司酮治療前、后肌瘤體積變化（略）2.2 不良反應a組15例服藥2 d后出現陰道流血伴下腹墜痛，發(fā)生率為75%;b組無一例出現上述反應，但均出現閉經，有4例出現潮熱、出汗多的癥狀。 2.3 體內性激素及egf水平變化見表2。兩用藥組服藥前后fsh、lh、e、p變化無顯著性差異（ p 0.05），其中fsh用藥后呈下降趨 勢，e維持在卵泡期水平。a組與對照組比較f

10、sh下降差異有統(tǒng)計學意義（ p 0.05）。b組與對照組比較egf下降差異有統(tǒng)計學意義（ p 0.05）。兩服藥組間 比較，服藥后egf下降差異也有統(tǒng)計學意義（p 0.05）。表2 各組治療前后激素水平變化（略） 2.3 米非司酮對肌瘤組織中er、pr和egfr的影響見表3、圖18。由表3可見，對照組30例患者 肌瘤組織中er、pr、egfr均呈高表達。a組患者肌瘤組織中pr仍呈高表達，er、egfr表達下降， 但與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義（p 0.05）。b組患者 肌瘤組織中pr高表達，er表達下降，egfr表達幾乎為 陰性，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（ p 0.05）。 表3 米非司酮

11、治療后肌瘤組織中er、pr、egfr的表達（略）注:括號內為百分率 與對照組比較，* p 0.053 討 論 3.1 米非司酮的作用機制米非司酮是p受體拮抗劑，其與p受體的親和力 是p的5倍，與p受體結合后發(fā)生構型變化，使p受體與熱休克蛋白結合增強，覆蓋于p受體結構上的dna 結合區(qū)，影響受體與p效應因子結合，不發(fā)生轉錄激活，不合成蛋白質，從而競爭性抑制p的作用2 -3。3.2 米非司酮對子宮肌瘤的影響米非司酮治療的劑量、時限不同對子宮肌瘤的影 響也不同。自1993年murphy等3報道服用米非司酮可以使子宮肌瘤縮小以來，國內外許多研究證實小劑量米非司酮可以明顯縮小子宮肌瘤體積4，6。研究表明

12、子宮肌瘤生長不僅僅依賴于e、p激素水平，還與肌瘤組織中e、p、egf受體及其它細胞因子有關7-8。本研究中a組大劑量短療程應用，肌瘤縮小有效率 45%，肌瘤體積平均縮小（22.5126.23）%，但用藥前后肌瘤體積變化差異無統(tǒng)計學意義（ p 0.05）。b組小劑量長療程應用，臨床肌瘤縮小有效率85%，肌瘤體積平均縮?。?1.7714.）%，用藥前后肌瘤體積差異有統(tǒng)計學意義（p0.05）。本研究表明，兩用藥組之間比較肌瘤體積縮小差異有顯著統(tǒng)計學意義（p0.01），說明不同劑量及在不同時間應用米非司酮對子宮肌瘤的影響是不同的，大劑量短時間應用米非司酮并不能使子宮肌瘤明顯縮小，而小劑量長時間應用可以使子宮肌瘤明顯縮小，說明米非司酮治療子宮肌瘤的機制不僅僅是影響pr水平，還可能影響其它細胞因子對肌瘤的作用，這種影響時限意義大于劑量意義。米非司酮是p受體拮抗劑，但其對子宮內膜的影響根據體內e、p激素狀態(tài)的不同以及米非司酮劑量而呈現不同的作用。當體內e、p同時存在時表現為p 的拮抗作用9-，體內僅有e而缺乏p時表現為弱p激動劑作用13，實驗表明大劑量米非司酮表現出e拮抗劑作用14，抑制子宮內膜的增生和分泌，而小劑量時引起子宮內膜呈分泌期改變15，這可以解釋本實驗中服用大劑量米非司酮后患者出現陰道流血的現象。現代分子生物學研究顯示，子宮肌瘤是由單克隆平滑肌細胞增殖而成，多發(fā)性肌瘤是由