胰腺癌組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的

1、文章來(lái)源 畢業(yè)論文網(wǎng) 胰腺癌組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的文章來(lái)源 畢業(yè)論文網(wǎng) 畢業(yè)論文 【摘要】  目的 研究胰腺癌組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,vegf)表達(dá)和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumourassociated macrophages，tams)計(jì)數(shù)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)染色，在光鏡下對(duì)vegf陽(yáng)性細(xì)胞評(píng)分及tams計(jì)數(shù)進(jìn)行分析。結(jié)果 胰腺癌組織中vegf表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于正常組織(p<0.01)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組vegf的表達(dá)和tams計(jì)數(shù)較未轉(zhuǎn)移組明顯增高(p<

2、0.05)；vegf的表達(dá)與胰腺癌臨床病理分期無(wú)明顯關(guān)系(p>0.05)；tams計(jì)數(shù)與胰腺癌臨床病理分期有明顯關(guān)系(p<0.01)；vegf的表達(dá)與tams計(jì)數(shù)呈正相關(guān)(r=0.663，p<0.01)。結(jié)論 vegf和tams的表達(dá)均與胰腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系。 【關(guān)鍵詞】  胰腺腫瘤； 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子； 腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞； 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移    【abstract】  objective  to investigate relationship of expressions of vascular endothe

3、lial growth factor (vegf) and counting of tumourassociated macrophages (tams) and discuss their correlation with lymphatic metastasis in pancreatic cancer. methods  after immunohistochemical staining, light microscope was employed to determine expressions of vegf and tams. statistical analysis

4、was performed by using spss software. results  the positive rate of vegf in pancreatic cancer was 51% (18/35), which was significantly higher than that of normal tissues (p<0.01).(1) the scores of vegf and the number of tams in metastatic cancer were significantly higher than those in the ca

5、ncer without metastasis (p<0.05). (2) there was no statistically significant correlation between scores of vegf and tumor staging (p>0.05). (3) there was statistically significant relationship between number of tams and tumor staging (p<0.01). (4) the expressions of vegf were positively cor

6、related with number of tams (r=0.663, p<0.01).conclusions  expressions of vegf and number of tams may relate to the lymphatic metastasis of pancreatic cancer.    【key words】  pancreatic cancer;  vascular endothelial growth factor;  tumourassociated macrophages;&

7、nbsp;   lymphatic metastasis    胰腺癌是臨床上較為少見(jiàn)的惡性腫瘤，其晚期常有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。在腫瘤細(xì)胞的惡性增殖和轉(zhuǎn)移的過(guò)程中，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，vegf)被認(rèn)為是最重要的因子之1。有研究發(fā)現(xiàn)在腫瘤中浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumourassociated macrophages， tams)也與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系1。本研究采用免疫組織化學(xué)方法對(duì)兩者與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。    1 

8、; 材料與方法    1.1  臨床資料    收集1999-2004年中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬1院及沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附屬奉天醫(yī)院手術(shù)切除胰腺癌標(biāo)本35例，其中男24例，女11例；平均年齡54.2歲(3476歲)。患者術(shù)前未經(jīng)任何治療。病理分級(jí)：高分化腺癌20例，中分化腺癌10例，低分化腺癌5例。臨床分期：期8例，期12例，期10例，期5例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移15例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移20例。收集正常胰腺組織6例，其中男4例，女2例；平均年齡48.4歲(3955歲)。以上標(biāo)本均經(jīng)過(guò)脫水，福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)切片(厚度4 m)。 &n

9、bsp;  1.2  免疫組織化學(xué)染色    抗原修復(fù)后，常規(guī)免疫組織化學(xué)染色，鼠抗人cd68單克隆抗體(kp1，工作濃度1100)標(biāo)記巨噬細(xì)胞，鼠抗人vegf單克隆抗體(jh121，工作濃度1100)標(biāo)記vegf，2氨基聯(lián)苯胺顯色(以上試劑均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司)。按使用方法操作，嚴(yán)格控制時(shí)間及濕度，每次染色均設(shè)陽(yáng)性及陰性對(duì)照，以福州邁新公司提供的陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照，以0.01 mol/l ph7.4的pbs代替1抗作為陰性對(duì)照，并進(jìn)行常規(guī)蘇木精伊紅染色。    1.3  結(jié)果判定&nbs

10、p;   免疫組織化學(xué)染色切片上tams計(jì)數(shù)按照文獻(xiàn)2-3進(jìn)行計(jì)數(shù)。vegf的表達(dá)結(jié)果以其評(píng)分值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理：將癌組織染色強(qiáng)度評(píng)分(無(wú)：0分；弱：1分；中：2分； 強(qiáng)：3分)和陽(yáng)性細(xì)胞率評(píng)分(<5%：0分；5%10%：1分；11%20%：2分；21%50%：3分；>50%：4分)之和為該病例評(píng)分值， 將評(píng)分值2分定為陰性病例，>2分定為陽(yáng)性病例。    1.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)分析    用spss 12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用s表示，采用t檢驗(yàn)，方差分析(newmankeuls法

11、)。采用pearson相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)vegf評(píng)分與tams計(jì)數(shù)之間的關(guān)系，p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。    2  結(jié)果    2.1  免疫組織化學(xué)染色結(jié)果    正常組中巨噬細(xì)胞分布明顯稀少(圖1)。胰腺癌組中cd68表達(dá)呈黃色或棕黃色顆粒狀，主要位于巨噬細(xì)胞的胞膜和胞質(zhì)。在癌組織及癌周組織廣泛分布，分布不均(圖2，3)。vegf的表達(dá)也呈黃色或棕黃色顆粒，主要位于細(xì)胞的胞質(zhì)中，在癌細(xì)胞中表達(dá)比較明顯，在癌周?chē)罢＝M織中表達(dá)較少(圖4)。   

12、; 2.2  vegf的表達(dá)與各項(xiàng)臨床指標(biāo)的關(guān)系    vegf在胰腺癌組中的表達(dá)陽(yáng)性率為51%(18/35)，評(píng)分值2.711.41，明顯高于正常組的0.500.55(p<0.01)。在胰腺癌高、中、低分化之間雖有差異，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。在不同臨床分期之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的vegf表達(dá)高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。vegf表達(dá)與各指標(biāo)關(guān)系見(jiàn)表1。表1  vegf的表達(dá)與各項(xiàng)臨床指標(biāo)的關(guān)系     2.3  tams

13、計(jì)數(shù)與各項(xiàng)臨床指標(biāo)的關(guān)系    胰腺癌中tams計(jì)數(shù)均值為107.0333.64。胰腺癌中tams計(jì)數(shù)低分化高于中分化，中分化又高于高分化，3者差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中tams計(jì)數(shù)高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，見(jiàn)表2。表2  腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞計(jì)數(shù)與各項(xiàng)臨床指標(biāo)的關(guān)系    2.4  vegf的表達(dá)與tams計(jì)數(shù)之間的關(guān)系    在胰腺癌中vegf的表達(dá)和tams計(jì)數(shù)呈直線(xiàn)正相關(guān)(r=0.663，p<0.01)，即隨腫瘤組織

14、內(nèi)tams計(jì)數(shù)的增加，vegf的表達(dá)也隨之增加。    3  討論    3.1  vegf的表達(dá)與胰腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)    腫瘤血管新生是惡性腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的前提。vegf是作用最強(qiáng)、特異性最高的促血管生長(zhǎng)因子之14。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示vegf主要表達(dá)于胰腺癌組織中，癌周和正常組織表達(dá)較少。這說(shuō)明胰腺癌細(xì)胞有分泌vegf以促進(jìn)腫癌血管形成的功能。各不同臨床分期組及病理分期組中vegf的表達(dá)之間無(wú)明顯差異，而轉(zhuǎn)移組vegf表達(dá)較未轉(zhuǎn)移組明顯增高，表明vegf的表達(dá)與胰腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，

15、提示vegf可能通過(guò)某種機(jī)制促進(jìn)淋巴管的生長(zhǎng)，導(dǎo)致淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生。    3.2  tams與胰腺癌的分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)    巨噬細(xì)胞主要來(lái)源于外周血單核細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示胰腺癌組織中有大量巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)即tams。浸潤(rùn)部分主要位于胰腺癌的間質(zhì)中，說(shuō)明腫瘤細(xì)胞可能分泌1些化學(xué)趨化因子誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞遷移浸潤(rùn)5。胰腺癌高分化組中tams計(jì)數(shù)平均值最低，低分化中tams計(jì)數(shù)平均值最高，高、中、低3者之間有明顯差異，而且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者tams計(jì)數(shù)均值也明顯高于未轉(zhuǎn)移者，說(shuō)明tams與胰腺癌的分化轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系。tams也可能分泌促

16、進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的因子，參與腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移6。tams計(jì)數(shù)越高，可能胰腺癌分化越低，越易發(fā)生轉(zhuǎn)移，預(yù)后越差。    3.3  vegf的分泌與tams的浸潤(rùn)有密切關(guān)系    本研究發(fā)現(xiàn)胰腺癌中vegf的表達(dá)與tams計(jì)數(shù)呈正相關(guān)，提示vegf的分泌與tams的浸潤(rùn)有著密切的關(guān)系，且均與胰腺癌的轉(zhuǎn)移有關(guān)。馮紅超等7研究表明口腔鱗癌中的tams的數(shù)量與vegf的表達(dá)有關(guān)，同時(shí)證實(shí)在tams中有vegf的表達(dá)。schoppman等8在子宮頸癌的研究中也證實(shí)tams表達(dá)vegf并與瘤周的淋巴結(jié)密度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。而且valkov

17、ic等9研究證實(shí)vegf是tams浸潤(rùn)的誘導(dǎo)趨化因子9。這就可能是癌細(xì)胞產(chǎn)生vegf促進(jìn)血管新生，誘導(dǎo)tams浸潤(rùn)，tams也產(chǎn)生vegf促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)，形成“惡性循環(huán)”。但在胰腺癌中tams是否產(chǎn)生vegf尚需進(jìn)1步研究。本研究還發(fā)現(xiàn)vegf的表達(dá)與胰腺癌的分期、分級(jí)無(wú)關(guān)，而tams的表達(dá)與胰腺癌的分期、分級(jí)有關(guān)，表明vegf和tams的表達(dá)還分別與其他不同因子的作用有關(guān)。tams在胰腺癌的分化和轉(zhuǎn)移可能更為重要10。在今后探索胰腺癌的治療時(shí)抑制tams的浸潤(rùn)可能是1個(gè)有意義的方向。【參考文獻(xiàn)】  1 volodko n, reiner a, rudas m, et al. tumo

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