微生物控制技術(shù)最新課件

1、微生物控制技術(shù)最新第六章第六章微生物控制技術(shù)微生物控制技術(shù) 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-1 6-1 溫度對微生物的影響溫度對微生物的影響實驗實驗6-2 6-2 紫外線對微生物的影響紫外線對微生物的影響實驗實驗6-3 6-3 滲透壓對微生物的影響滲透壓對微生物的影響實驗實驗6-46-4氫離子濃度對微生物生長的影響氫離子濃度對微生物生長的影響實驗實驗6-5 6-5 化學藥劑對微生物的影響化學藥劑對微生物的影響 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-1 6-1 溫度對微生物的影響溫度對微生物的影響一、實驗目的1.了解溫度對不同類型微生物生長的影響；2.學習測定微生物最適生長溫度的方法。二、實驗原理 溫

2、度能影響微生物的生長、繁殖和新陳代謝，每種微生物都有它的生長溫度范圍，每種微生物只能在一定的溫度范圍內(nèi)生長，低溫微生物最高生長溫度不超過20，中溫微生物的最高生長溫度低于45，而高溫微生物能在45以上的溫度條件下正常生長。微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-1 6-1 溫度對微生物的影響溫度對微生物的影響三、實驗材料1.菌種 培養(yǎng)24小時的枯草桿菌和大腸桿菌，培養(yǎng)了72小時的黑曲霉或青霉。2.培養(yǎng)基 牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面，馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基斜面。3.器材 酒精燈，接種針，冰箱，恒溫箱。四、實驗方法1.接菌按無菌操作方法進行（1）在5支牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上都接種上枯草桿菌，接種時劃直線或曲線。微

3、生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-1 6-1 溫度對微生物的影響溫度對微生物的影響（2）在另5支牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面上都接種上大腸桿菌，接種時劃直線或曲線。（3）在5支馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基斜面上接種曲霉或青霉，接種時用點接法。2.培養(yǎng)與觀察（1）培養(yǎng)將上述接種好的菌種，分別放入0、15、30、37、50五種溫度下培養(yǎng)。（2）觀察48小時后觀察，記錄實驗結(jié)果。五、實驗報告記載實驗結(jié)果，填入表6-1。 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-1 6-1 溫度對微生物的影響溫度對微生物的影響表6-1 不同類型微生物在不同溫度條件下培養(yǎng)的生長情況 菌種015303750枯草桿菌大腸桿菌黑曲霉/青霉注：用“”表示不生

4、長，“+”表示生長一般，“+ +”表示生長良好。微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-2 6-2 紫外線對微生物的影響紫外線對微生物的影響 一、實驗目的1.了解紫外線的殺菌作用原理；2.學習紫外線殺菌試驗方法。二、實驗原理 紫外線對微生物有強烈的致死作用，波長260nm的紫外線殺菌力最強。其殺菌機制是短波的紫外線引起細胞核酸變性導致微生物死亡。微生物對紫外線的吸收與劑量有關(guān)，劑量高低取決于紫外燈的功率、照射距離與照射時間。在本試驗中采用15W紫外燈在距燈30cm處通過改變照射時間來處理微生物。紫外線雖有較強的殺菌力，但其穿透力很弱，普通玻璃、薄紙、水層等均能阻止其透過。微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6

5、-2 6-2 紫外線對微生物的影響紫外線對微生物的影響 三、實驗材料1.菌種 培養(yǎng)2448h的金黃色葡萄球菌，黏質(zhì)沙雷氏菌。2.培養(yǎng)基 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。3.器材 無菌水，無菌平皿，1mL無菌吸管，玻璃刮鏟、滅菌五角星形圖案紙(牛皮紙或黑紙)，紫外燈箱。四、實驗方法1.制平板 取無菌平皿6套，將已熔化并冷卻至50左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基按無菌操作法倒入平皿中，使其冷凝成平板。 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-2 6-2 紫外線對微生物的影響紫外線對微生物的影響 2.菌懸液制備 取試管無菌水2支，以無菌操作法分別取金黃色葡萄球菌和黏質(zhì)沙雷氏菌各2環(huán)，接入無菌水中充分搖勻，制成菌懸液。3.接

6、種 將已倒入培養(yǎng)基的平皿分為2組，每組3個，一組接金黃色葡萄球菌，一組接沙雷氏菌，用無菌吸管吸取已制好的菌懸液各0.1mL，分別接種于二組平板上，用無菌玻璃刮鏟均勻涂布，隨即用無菌鑷子夾取無菌圖案紙一張，小心放在接種好的平皿中央(圖6-1)。 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-2 6-2 紫外線對微生物的影響紫外線對微生物的影響 圖6-1 檢查紫外線對微生物生長的影響試驗方法 1.圖案紙 2.細菌生長圈 3.無菌生長區(qū) 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-2 6-2 紫外線對微生物的影響紫外線對微生物的影響 4.分組 將接種的六個平皿分為三組，每組一個金黃色葡萄球菌，一個黏質(zhì)沙雷氏菌。5.紫外線處理

7、 將紫外燈先開燈預熱23min。再將上述平皿置于紫外燈下，打開皿蓋，在30cm距離處照射。一組照1min，1組照5min，l組照l0min，小心地取下圖案紙，蓋上皿蓋。用黑布或厚紙遮蓋，送入培養(yǎng)室內(nèi)。6.培養(yǎng) 將平皿于2830溫度下培養(yǎng)48h。五、實驗報告 取出平皿觀察分析平板上細菌生長的狀況，并繪圖表示。微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-3 6-3 滲透壓對微生物的影響滲透壓對微生物的影響 一、實驗目的了解滲透壓對微生物生長的影響。二、實驗原理 在等滲溶液中，微生物正常生長繁殖；在高滲溶液中，細胞失水收縮，而水分為微生物生理生化反應所必需，失水會抑制其生長繁殖；在低滲溶液中，細胞吸水膨脹，大多

8、數(shù)微生物具有較為堅韌的細胞壁，而且個體較小，因而在低滲溶液中一般不會像無細胞壁的細胞那樣容易發(fā)生裂解，具有細胞壁的微生物受低滲透壓的影響不大。微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-3 6-3 滲透壓對微生物的影響滲透壓對微生物的影響 三、實驗材料1.菌種 金黃色葡萄球菌，大腸桿菌，鹽沼鹽桿菌。2.培養(yǎng)基 分別含0.85、5、10、15及25NaCl的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。3.儀器或 無菌平皿，接種環(huán)等。四、實驗方法1.將含不同濃度NaCl的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基溶化、倒平板。2.在已凝固的平板皿底用記號筆劃成三部分，分別標記上述三種菌名。微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-3 6-3 滲透壓對微生物的

9、影響滲透壓對微生物的影響 3.將上述平板置于28溫室中，4 d后觀察并記錄含不同濃度NaCl的平板上三種菌的生長狀況。五、實驗報告1.結(jié)果分析將實驗結(jié)果填入表6-2。 2.舉例幾個在日常生活中人們利用滲透壓來抑制微生物生長的例子。 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-3 6-3 滲透壓對微生物的影響滲透壓對微生物的影響 表6-2 不同類型微生物在不同NaCl濃度中的生長情況 菌名NaCl濃度%0.855101525金黃色葡萄球菌大腸桿菌鹽沼鹽桿菌注：用“”表示不生長，“+”表示生長一般，“”表示生長良好。微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-46-4氫離子濃度對微生物生長的影響氫離子濃度對微生物生長的影

10、響 一、實驗目的1.了解氫離子濃度對微生物生長發(fā)育的影響。2. 學習測定微生物生長最適pH的方法二、實驗原理 微生物生長繁殖需要一定的酸堿度即pH環(huán)境，H濃度影響微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和生化反應。一般細菌適于中性環(huán)境，放線菌適于偏堿性環(huán)境，酵母菌和霉菌則適于在微酸性環(huán)境中生長，若超出其適應的范圍，微生物生長將受到抑制或不能生長。 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-46-4氫離子濃度對微生物生長的影響氫離子濃度對微生物生長的影響 三、實驗材料1. 菌種 培養(yǎng)24h大腸桿菌斜面菌種，培養(yǎng)5d的吸水鏈霉菌5102斜面菌種，培養(yǎng)3d的黑曲霉斜面菌種。2.培養(yǎng)基和試劑 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)液，4.14% K2

11、HP04，1.22%硼酸，0.8% NaOH，1.92%檸檬酸，見附錄。3.其他材料 無菌水，無菌吸管(1mL)，接種環(huán)。 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-46-4氫離子濃度對微生物生長的影響氫離子濃度對微生物生長的影響 四、實驗方法1.培養(yǎng)基制備 分組按表6-3配方配制不同pH的培養(yǎng)基，并用pH計校正pH，然后分裝入試管中，每管裝量56mL，0.1Mpa滅菌30min備用。 2.接種培養(yǎng) 取pH不同的培養(yǎng)基三組用接種環(huán)按無菌操作法于試管中分別接入大腸桿菌、吸水鏈霉菌、黑曲霉，在37下培養(yǎng)48h。3.檢查結(jié)果 取出培養(yǎng)物，觀察并記錄實驗結(jié)果。 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-46-4氫離子濃度

12、對微生物生長的影響氫離子濃度對微生物生長的影響 表6-3 不同pH培養(yǎng)基配制表 試管序號K2HP04(mL)檸檬酸(mL)NaOH(mL)硼酸(mL)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)液(mL)總量(mL)PH(近似值)10.31.78102.820.91.18104.431.10.98105.241.30.78106.051.50.58106.861.90.18107.670.31.78108.480.71.38109.291.01.081010.0微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-46-4氫離子濃度對微生物生長的影響氫離子濃度對微生物生長的影響 表6-4 不同類型微生物在不同pH中的生長情況 pH2.84.4

13、5.26.06.87.68.49.210吸水鏈霉素黑曲霉大腸桿菌注：用“”表示不生長，“+”表示生長一般，“”表示生長良好。五、實驗報告 將實驗結(jié)果填入表6-4中。 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-5 6-5 化學藥劑對微生物的影響化學藥劑對微生物的影響 一、實驗目的 了解化學藥劑的殺菌和消毒作用，掌握常用消毒劑的濃度和使用方法。二、實驗原理 一些化學藥劑對微生物的生長有抑制或殺死作用。因此，在實驗室內(nèi)和生產(chǎn)上常利用某些化學藥劑進行殺菌或消毒。不同的藥劑或同一藥劑對不同微生物的殺菌能力不同。此外，藥劑濃度、作用時間及環(huán)境條件不同，其效果也不一樣。使用前需進行試驗，靈活選擇。 微生物控制技術(shù)最新

14、 實驗實驗6-5 6-5 化學藥劑對微生物的影響化學藥劑對微生物的影響 三、實驗材料1.菌種 培養(yǎng)2448h的大腸桿菌，金黃色葡萄球菌，枯草桿菌斜面菌種。2.培養(yǎng)基和試劑 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，1g/L HgCl2，200g/L鏈霉素，200g/L青霉素，50g/L石炭酸。3.器材 無菌平皿，無菌水，無菌吸管(1mL)，直徑0.6cm的無菌圓形濾紙片。 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-5 6-5 化學藥劑對微生物的影響化學藥劑對微生物的影響 四、實驗方法1.制平板：取無菌平皿三套，將已熔化并冷卻至50左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基按無菌操作法倒入平皿中，使冷凝成平板。2.制備菌懸液：取無菌水3支，用接種環(huán)分別取大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草桿菌各12環(huán)接入無菌水中，充分混勻，制成菌懸液。3.接種：用無菌吸管分別吸取已制好的菌懸液0.1 mL接種于平板上，用無菌玻璃刮鏟涂勻。注意做好標記。4.浸藥：將滅菌濾紙片分別浸入四種供試藥劑中。 微生物控制技術(shù)最新 實驗實驗6-5 6-5 化學藥劑對微生物的影響化學藥劑對微生物的影響 5.加藥劑：用無菌鑷子夾取浸藥濾紙片(注意把藥液瀝干)，分別平鋪于同一含菌平板上，注意藥劑之間勿互相沾染(圖6-2)。并在平皿背面做好標記。 6.培養(yǎng)：將平皿置于28下培養(yǎng)