心肌酶和心肌蛋白的檢測課件

1、心肌酶和心肌蛋白的檢測1心肌酶和心肌蛋白檢測心肌酶和心肌蛋白的檢測2概 述 心臟是人體最重要的器官之一，它與血管組成人體的血液循環(huán)系統(tǒng)。擔負著氧、二氧化碳、營養(yǎng)物質、中間代謝產物、激素等物質的運輸。 心血管疾病是發(fā)達國家的第一位死因 心肌損傷是指伴心肌細胞壞死的疾病，包括急性心肌梗死（心內膜下心肌梗死，穿透性心肌梗死，非Q波性壞死）、不穩(wěn)定性心絞痛，心肌炎。 急性心肌梗死（AMI）是最常見的疾病之一，且發(fā)病率呈逐年增加的趨勢。因此急性心肌梗死的早期診斷對于治療是非常重要的心肌酶和心肌蛋白的檢測3AHA Supplement 19942004心肌酶和心肌蛋白的檢測4Leading Causes

2、of Death for All Males and Females United States: 2000A Total CVDBCancer CAccidentsD Chronic Lower Respiratory Diseases EDiabetes MellitusFInfluenza and PneumoniaAHA資料資料心肌酶和心肌蛋白的檢測5暫時性腦缺血暫時性腦缺血 (TIA) (TIA) 缺血性中風缺血性中風嚴重腿部缺血嚴重腿部缺血不穩(wěn)定心絞痛不穩(wěn)定心絞痛 (UA)血栓血栓急性心肌梗死急性心肌梗死 (AMI) (AMI)急性冠脈綜合征急性冠脈綜合征 (ACS)腦血管疾病腦血

3、管疾病外周血管疾病外周血管疾病 (PAD)穩(wěn)定性心絞痛穩(wěn)定性心絞痛間歇性跛行間歇性跛行心血管疾病心血管疾病 : Adapted from: Stary H.C. Circulation. 1995;92:1355-1374 Fuster V. Vasc Med. 1998;3:231-239 Ross R. NEJM. 1999;340:115-126心力衰竭心力衰竭心肌損傷心肌損傷斑塊斑塊心肌酶和心肌蛋白的檢測6CK/CK-MB集中在胞核、線粒體；cTn在肌漿中是細絲的一部分；Mb散在分布肌漿中。心肌酶和心肌蛋白的檢測7理想的心肌損傷標志物條件 高敏感性和高特異性；主要或僅存在于心肌組織（特

4、異），在心肌中有較高的含量，在正常血液中不存在，可反映小范圍的損傷（敏感）能檢測早期心肌損傷，且窗口期長； 能估計梗死范圍大小，判斷預后； 能評估溶栓效果；檢測方法簡便快速；其應用價值已由臨床所證實心肌酶和心肌蛋白的檢測8急性心肌損傷生物化學標志物一、傳統(tǒng)的心肌酶譜二、心肌蛋白心肌酶和心肌蛋白的檢測9（一）傳統(tǒng)的心肌酶譜（一）傳統(tǒng)的心肌酶譜 肌酸激酶(CK)-羥丁酸脫氫酶(HBDH)門冬氨酸氨基轉移酶/谷草轉氨酶 (AST/GOT)乳酸脫氫酶(LD)乳酸脫氫酶同功酶肌酸激酶同工酶及其亞型 心肌酶和心肌蛋白的檢測10（1）LD及其同工酶 細胞的胞漿和線粒體中 H4(LD1)，MH3(LD2)，

5、M2H2(LD3)， M3H(LD4)， M4(LD5)； 肝臟和骨骼肌所含LD以LD4和LD5為主 心臟、腎臟和紅細胞所含的LD同工酶以LD1和LD2為主 ； LD的半壽期為57 170h， 1. 1. 分布分布 心肌酶和心肌蛋白的檢測11二：參考值：總LD活性 104-245U/L同工酶 LD1 (32.74.60)% LD2 (45.13.53)% LD3 (18.52.96)% LD4 (2.900.89)% LD5 (0.850.55)% LD1 /LD2 0.450.7；心肌酶和心肌蛋白的檢測12臨床意義 LDH增高主要見于AMI、充血性心衰和心肌炎；還見于病毒性肝炎、肝硬化、原發(fā)

6、性肝癌、梗阻性黃疸、肌肉損傷、肌萎縮、某些惡性腫瘤（白血病，結腸癌）等。AMI在常測酶中，LDH升高最慢（810h），但升高時間最長（510d），峰值可達10倍正常上限。在LDH同工酶 中LDH1LDH2，并可持續(xù)到兩周（部分病例總LDH正常）。心肌酶和心肌蛋白的檢測13（2）CK及其同工酶 細胞胞質 由 M和B兩種亞單位組成的二聚體 CKBB(CK1)存在于腦組織中， CKMB(CK2) 和CKMM(CK3)存在各種肌肉組織中 ； CKMB可分為MB1和MB2（為主）兩種異型 CK-MB占心肌總CK的l5%25%（骨骼肌中為12%）。 CK半壽期：1012h 1. 1. 分布分布 心肌酶和心

7、肌蛋白的檢測14CKMB的質量檢測：的質量檢測：1985年，單克隆抗體年，單克隆抗體法，其診斷法，其診斷AMI較酶法更敏感、更穩(wěn)定、更較酶法更敏感、更穩(wěn)定、更快（快（10 40min），且可以自動化。），且可以自動化。 CK同工酶亞型：同工酶亞型：常用高壓電泳分離（快速、常用高壓電泳分離（快速、敏感）敏感）2. 2. 檢測檢測 心肌酶和心肌蛋白的檢測153.臨床意義（CK及其同工酶）（1 1）CK-MBCK-MB：CK-MB/CK-MB/總總CKCK（測酶活性）（測酶活性） 總總CK100UL，CK-MB15UL， CKMB6，多考慮肌肉疾病，多考慮肌肉疾病， CKMB在在625%，AMI診斷

8、可成立診斷可成立 CKMB25，有，有CKBB或巨型或巨型CK存在。存在。 較早期診斷較早期診斷AMIAMI、估計梗死范圍大小或再梗死。、估計梗死范圍大小或再梗死。 （2 2）觀察再灌注的效果：）觀察再灌注的效果：溶栓后幾小時內，溶栓后幾小時內， CK-MBCK-MB繼續(xù)升高，然后下降（沖洗現(xiàn)象）。繼續(xù)升高，然后下降（沖洗現(xiàn)象）。 心肌酶和心肌蛋白的檢測16u CK-MB CK-MB2 21.0U/L1.0U/L且且CK-MBCK-MB2 2/CK-MB/CK-MB1 11.51.5。u CK-MMCK-MM3 3/CK-MM/CK-MM1 10.50.5也可作為也可作為AMIAMI的診斷標的

9、診斷標準之一。準之一。（3 3）MBMB2 2/MB/MB1 1和和MMMM3 3/MM/MM2 2的比值升高的比值升高( (正常人正常人1)1)均可作為診斷均可作為診斷AMIAMI的標準之一。的標準之一。心肌酶和心肌蛋白的檢測17 急性心肌梗死后心肌酶的時相變化急性心肌梗死后心肌酶的時相變化對單純性急性對單純性急性心肌梗死病人心肌梗死病人 心肌酶和心肌蛋白的檢測18 心肌酶的生理變異心肌酶的生理變異在應用心肌酶對在應用心肌酶對AMIAMI進行診斷時，需考慮生理因素對檢測結果的影響。進行診斷時，需考慮生理因素對檢測結果的影響。1 1性別：性別：LDHLDH在出生時為成人兩倍，隨著年齡增長逐漸下

10、降，到在出生時為成人兩倍，隨著年齡增長逐漸下降，到1414歲時達成人水平。歲時達成人水平。2 2年齡：年齡：3 3運動：運動：血清血清CKCK在男性明顯高于女性，在男性明顯高于女性， 升高程度和運動量及持續(xù)時間有關，也與運動者是否經常鍛煉有關，訓練升高程度和運動量及持續(xù)時間有關，也與運動者是否經常鍛煉有關，訓練有素的運動員，其心肌酶升高幅度小。有素的運動員，其心肌酶升高幅度小。 心肌酶和心肌蛋白的檢測19 3 3 血清心肌酶的測定對急性心肌梗死的診斷存在的不足之處血清心肌酶的測定對急性心肌梗死的診斷存在的不足之處： 特異性較差特異性較差酶活性升高出現(xiàn)較晚酶活性升高出現(xiàn)較晚持續(xù)時間短持續(xù)時間短心

11、肌酶和心肌蛋白的檢測20二二 心肌蛋白檢測心肌蛋白檢測 肌紅蛋白 心肌肌鈣蛋白 脂肪酸結合蛋白心肌酶和心肌蛋白的檢測21（1）肌紅蛋白（myoglobin，Mb） 生物化學特性 Mb是一種氧結合蛋白，廣泛存在于各種肌肉中（特異性不高） ，約占肌肉中所有蛋白的2。 Mb分子量小，僅17.8kD，位于胞質中，故AMI發(fā)生后出現(xiàn)較早釋放入血。 CK-MB（84kD） LD（134kD） 當AMI病人發(fā)作后 0.5 2h即升高。512h達高峰，18 30h恢復至正常水平。心肌酶和心肌蛋白的檢測22臨床應用與評價 在急性心肌梗死發(fā)作12h內診斷敏感性很高，有利于早期診斷，是至今出現(xiàn)最早的急性心肌梗死標志

12、物。 能用于判斷再灌注是否成功。 是判斷再梗死的良好指標：Mb消除很快 在胸痛發(fā)作212h內，Mb陰性可排除急性心肌梗死（ Mb的陰性預測價值為100）。心肌酶和心肌蛋白的檢測23 Mb與碳酸酐酶聯(lián)用可提高早期診斷AMI的特異性。心肌酶和心肌蛋白的檢測24肌鈣蛋白肌鈣蛋白TnC：與鈣離子結合部分：與鈣離子結合部分TnI：含抑制：含抑制(ATP酶酶)因子部分因子部分TnT：與原肌球蛋白結合部分：與原肌球蛋白結合部分Tn (troponin) cTn(cardiac troponin)：為心肌細胞所特有。為心肌細胞所特有。（2） 心肌肌鈣蛋白檢測1. 肌鈣蛋白肌鈣蛋白(Tn)的特性的特性 心肌酶和

13、心肌蛋白的檢測25 Troponin T (39.7 kD) 連接肌鈣蛋白復合物至原肌球蛋白細絲連接肌鈣蛋白復合物至原肌球蛋白細絲 Troponin C (18 kD) 結合鈣離子使肌肉收縮結合鈣離子使肌肉收縮 Troponin I (22.5 kD) 在靜止狀態(tài)抑制收縮在靜止狀態(tài)抑制收縮 肌鈣蛋白肌鈣蛋白 ( (Troponin，Tn) 心肌酶和心肌蛋白的檢測262. 檢測方法 通過cTn的特異性單克隆抗體利用化學發(fā)光及電化學發(fā)光的方法進行定量檢測 利用單克隆抗體制備的免疫層析法進行定性檢測心肌酶和心肌蛋白的檢測27（2）cTnT的臨床意義 用于用于AMI的診斷，的診斷，發(fā)生發(fā)生6h后，敏感

14、性達后，敏感性達90以上以上（可達（可達5天以上）；天以上）； 應用應用cTnT對不穩(wěn)定心絞痛病人監(jiān)測對不穩(wěn)定心絞痛病人監(jiān)測可以發(fā)現(xiàn)一些可以發(fā)現(xiàn)一些輕度和小范圍心肌損傷；輕度和小范圍心肌損傷；cTnT還可用于評估溶栓療法的還可用于評估溶栓療法的成功成功與否與否，觀察冠，觀察冠狀動脈是否復通；狀動脈是否復通； （雙峰的出現(xiàn)）（雙峰的出現(xiàn)）cTnT與與CK-MB均常用于判斷均常用于判斷急性心肌梗死大小急性心肌梗死大?。粚τ谛募⊙?、不穩(wěn)定性心絞痛診斷，對于心肌炎、不穩(wěn)定性心絞痛診斷，cTnT是比是比CK-MB敏感。敏感。評估腎功能衰竭透析者的預后評估腎功能衰竭透析者的預后 升高者預后差升高者預后差心

15、肌酶和心肌蛋白的檢測28（3）cTnI的臨床意義 cTnI是一個十分敏感和特異的是一個十分敏感和特異的AMI標志物標志物，心肌損傷后，心肌損傷后46h釋放入血；釋放入血； 和和cTnT一樣，一樣，cTnI可用于溶栓后再灌注的可用于溶栓后再灌注的判斷，判斷， cTnI可敏感地測出小灶性可逆性心肌損傷可敏感地測出小灶性可逆性心肌損傷存在：不穩(wěn)定心絞痛和非存在：不穩(wěn)定心絞痛和非Q 波波MI。 目前檢測的目前檢測的cTnI多以復合物形式存在：多以復合物形式存在：在在AMI中中90是是 cTnIcTnC復合物，復合物，5的的cTnIcTnT。 比比cTnT具有更高的心肌特異性具有更高的心肌特異性心肌酶和

16、心肌蛋白的檢測29心梗發(fā)作后心梗發(fā)作后cTn、CK、Mb的診斷敏感度的診斷敏感度 敏敏感感性性cTnCKMb癥狀發(fā)作后時間癥狀發(fā)作后時間(小時小時)心肌酶和心肌蛋白的檢測30心梗后灌注成功與未再灌注病例心梗后灌注成功與未再灌注病例cTnT的變化的變化 未再灌注未再灌注灌注成功灌注成功心肌酶和心肌蛋白的檢測31（4）心肌肌鈣蛋白的評價（優(yōu)點） cTn的敏感度及檢測特異性均高于CK，而且能檢測微小損傷（如UA、心肌炎）； 有較長的窗口期，有利于診斷遲到的AMI、UA和心肌炎的一過性損傷（ cTnT長達7天，cTnI長達10天，甚至14天）； 雙峰的出現(xiàn)，易于判斷再灌注成功與否； 與心肌損傷范圍大小

17、相關，可用于判斷病情輕重，指導正確治療； 胸痛發(fā)作6h后，血cTn濃度正?？膳懦鼳MI。 符合理想的心肌損傷的標志物條件符合理想的心肌損傷的標志物條件心肌酶和心肌蛋白的檢測3232（3）脂肪酸結合蛋白（FABP） FABP是小分子量是小分子量(14 l5kD)胞漿蛋白，胞漿蛋白，心肌內心肌內FABP含量（含量（0.46mg/g心肌心肌,）比骨）比骨骼肌組織內豐富許多。骼肌組織內豐富許多。 FABP診斷早期診斷早期AMI的敏感性和特異性和的敏感性和特異性和Mb相近，比相近，比CK-MB高。高。 心肌酶和心肌蛋白的檢測33糖原磷酸化酶 （GP） 三種同工酶：腦和心臟的三種同工酶：腦和心臟的GPBB

18、，骨骼肌的，骨骼肌的GPMM和肝臟的和肝臟的GPLL。 心肌缺氧、缺血時，處于糖原糖酵解狀態(tài)，心肌缺氧、缺血時，處于糖原糖酵解狀態(tài)，GPBB隨糖原降解加速進入胞漿，透過胞膜進隨糖原降解加速進入胞漿，透過胞膜進入循環(huán)。入循環(huán)。 GPBB被認為是診斷心肌缺血的最為敏感指標被認為是診斷心肌缺血的最為敏感指標之一。之一。 在急性心肌梗死時，在急性心肌梗死時，GPBB在胸痛在胸痛24h開始升開始升高，它的特異性與高，它的特異性與CK-MB相似。相似。 心肌酶和心肌蛋白的檢測34小小 結結心肌酶和心肌蛋白的檢測35心肌損傷標志物心肌損傷標志物心肌標志物心肌標志物分子量分子量(KD)半壽期半壽期(h)醫(yī)學決醫(yī)學決定水平定水平開始升高開始升高時間時間(h)峰時間峰時間(h)恢復時間恢復時間增加倍數(shù)