風(fēng)濕性疾病自身抗體ppt課件

1、本身抗體檢測的意義診斷與鑒別診斷病情活動性評價和監(jiān)測協(xié)助轉(zhuǎn)歸和預(yù)后的評判預(yù)警本身抗體是指抗本身細胞內(nèi)，細胞外表和外抗原的免疫球蛋白ANA抗體譜本身免疫性肝病抗體譜ANCA磷脂抗體譜RA抗體譜抗核抗體ANA概念：抗核酸和核蛋白抗體的總稱細胞核內(nèi)和細胞漿內(nèi)成分檢測底物 人喉癌上皮細胞(Hep-2) 鼠肝、鼠腎大/小鼠組織不含SSA/RO抗原 熒光顯微鏡下熒光顯微鏡下ANAANA的染色型別的染色型別均質(zhì)型均質(zhì)型HomogeneousHomogeneousH H 抗組蛋白、抗抗組蛋白、抗dsDNAdsDNA、ANuAANuA斑點型斑點型SpeckleSpeckleS S 與抗與抗ENAENA有關(guān)有關(guān)核

2、膜型核膜型MembranousMembranousMM 抗抗dsDNAdsDNA、抗、抗gp210gp210核仁型核仁型NucleolarNucleolarNN 抗抗Scl70Scl70、抗、抗RNARNA聚合酶聚合酶著絲點型著絲點型CentromereCentromereC C ACA ACA胞漿型：胞漿型：AMAAMA、抗、抗Jo-1Jo-1、抗、抗rRNPrRNP、抗、抗SSASSA抗dsDNA抗rRNPAMARNA多聚酶多聚酶/抗抗Scl-70板層素抗體Gp210抗體抗Jo-1抗SSAHMSNIIF法原理免疫印跡法抗RNP抗體抗核內(nèi)的核糖核蛋白高滴度抗RNP抗體是MCTD的特異性抗體2

3、530%SLE出現(xiàn)抗RNP陽性與雙手腫脹,雷諾景象,肌炎和指(趾)端硬化和肺動脈高壓相關(guān)73、32、17.5KD抗Sm抗體抗原：核內(nèi)小核糖核蛋白，其抗原決議簇主要在與U1、U2、U5、U4/6 RNA銜接的B和D蛋白多肽上28/29/13.5三條帶同時出現(xiàn)時有意義,V型LN假設(shè)抗Sm抗體陽性，抗U1RNP往往也陽性抗RNP抗體陽性常出現(xiàn)抗Sm抗體28/29KD SLE中陽性率：30%左右， SLE的標志抗體，幾乎只出現(xiàn)于SLE與疾病活動度不相關(guān)抗SSA、SSB抗體抗SSA多在胞漿中，52KD與SS相關(guān)，60KD與SLE相關(guān)抗SSA在SLE中陽性率40%，抗SSB在SLE中陽性率 10-15%抗

4、SSB陽性，抗SSA往往也陽性母親抗SSA和抗SSB抗體陽性新生兒狼瘡及嬰兒心臟傳導(dǎo)阻滯常與亞急性皮膚型狼瘡環(huán)形紅斑，丘疹鱗屑、平滑肌受累、光過敏、血管炎、皮損、紫癜、淋巴結(jié)腫大、高球/RF、NS損傷、WBC減少有關(guān)抗DNA抗ssDNA抗體：針對嘌呤和嘧啶堿基，在多種疾病中及正常人血清中存在，無特異性抗dsDNA抗體：針對脫氧核糖核酸骨架，對SLE有較高的特異性抗dsDNA陽性者85% 5年內(nèi)開展為SLE抗dsDNA與疾病活動度相關(guān)抗dsDNA與LN相關(guān)抗組蛋白抗體AHA組蛋白是染色質(zhì)的根本構(gòu)造核小體的重要組成部分，包括H1，H2A，H2B，H3，H4在多種本身免疫性結(jié)締組織病如SLE、SS、

5、RA、SSC)中出現(xiàn)藥物性狼瘡中陽性率達95%.不同藥物所致的抗組蛋白的亞單位抗體不同抗Scl-70抗體抗原：DNA拓撲異構(gòu)酶1硬皮病SSc中抗Scl-70陽性率40%左右，為SSc的標志抗體，提示彌漫性SSc與肺間質(zhì)病有關(guān)-抗Scl-70陽性SD病人,發(fā)生肺間質(zhì)病變的危險性較抗Scl-70陰性的SD病人添加10倍，陽性者易出現(xiàn)皮膚硬化快速進展ACA抗著絲點抗體抗原為CENP-A、B、CCREST(軟組織鈣化,雷諾景象,食道功能妨礙,指端硬化,毛細血管擴張)綜合征80%陽性 Calcinosis/Raynauds phenomenon /Esophageal ysmotility /Scler

6、odactyly/Telangiectasia 在SS和本身免疫性肝病中也可存在PBC中陽性率53.5%，陽性者易出現(xiàn)門脈高壓和消化道出血ACA陽性的SS更易出現(xiàn)淋巴瘤，高球少，RP多抗rRNP抗體抗原：核糖體60s亞基P0，P1，P2磷酸化蛋白，主要位于胞漿與SLE中樞神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)相關(guān)對SLE高度特異，出現(xiàn)于1015%的SLE抗Jo-1抗體抗原是組氨酰tRNA合成酶PM/DM的標志抗體PM/DM病人中2535%陽性，合并肺間質(zhì)病變的PM/DM病人中高達6070%陽性抗合成酶抗體綜合征：急性發(fā)熱,對稱性關(guān)節(jié)炎,技工手,雷諾景象,肌炎及肺間質(zhì)病變 ANuA抗核小體抗體對SLE的特異性98%可見于

7、藥物性狼瘡早期SLE、非活動期SLE檢出率高于抗dsDNA211907年，先天性梅毒胎兒的肝臟提取物作為抗原檢測梅毒抗體1941年，發(fā)現(xiàn)心磷脂及抗心磷脂抗體ACL“梅毒血清反響生物學(xué)假陽性BFP-STS1950年，慢性BFP人群本身免疫病發(fā)生率高1957年，在BFP+SLE患者血漿中發(fā)現(xiàn)：狼瘡抗凝物L(fēng)A后證明其是一種免疫球蛋白：靶向前凝血酶活性復(fù)合物中磷脂1983年，LA能與其他帶負電荷的磷脂結(jié)合，稱之為抗磷脂抗體APL1986年，Hughes命名：與之有關(guān)的疾病那么稱為抗磷脂綜合征APS1990年，APS患者的ACL識別血漿中的一種磷脂結(jié)合蛋白2-GP在SLE和APS中，2-GPI可顯著添加

8、ACL和心磷脂的結(jié)合強度1999年，第八屆APL國際研討會會后發(fā)表了APS的初步診斷規(guī)范(札幌規(guī)范)2006年，悉尼國際血栓止血學(xué)會ISTH會議修訂了APS分類診斷規(guī)范抗磷脂抗體認識過程22一組針對各種帶負電荷磷脂結(jié)合蛋白的本身抗體，作用于磷脂結(jié)合蛋白如2-糖蛋白1 、凝血酶原、蛋白C、蛋白S、錨定蛋白等而產(chǎn)生病理反響。APL主要包括狼瘡抗凝物L(fēng)A抗心磷脂抗體ACL梅毒血清實驗假陽性RPR+，TPPA確證陰性 抗2-GPI抗體a2-GPI 抗磷脂抗體23最先發(fā)現(xiàn)的抗磷脂本身抗體之一，和血小板減少有明顯相關(guān)性，ACL陽性者，血小板減少3倍于ACL陰性者。習(xí)慣性流產(chǎn)與IgG型ACL關(guān)系親密，并能夠

9、和抗體的滴定度有關(guān)。檢測方法：ELISA 無金規(guī)范以混合磷脂作為抗原進展包被，特異性較好采用半定量方式表示檢測結(jié)果可提高室間質(zhì)控程度兩種類型：ACLIg類型類型與血栓構(gòu)成常見疾病2-GP1依賴高滴度IgG型親密相關(guān)本身免疫病、APS非2-GP1依賴低滴度IgM型不引起血栓梅毒、AIDS等感染性疾病抗心磷脂抗體ACL242-GP1由肝細胞合成，又稱apoH，5個功能區(qū)；經(jīng)過多種途徑參與凝血和纖溶系統(tǒng)的調(diào)理，被以為是一種天然的抗凝劑；但是先天性缺乏2-GP1并不會導(dǎo)致嚴重的血栓或出血性疾??；Yasuda S, etal. Atherosclerosis, 2000, 152(2):337-3462

10、-GP1抗體與APS的血栓構(gòu)成親密相關(guān)，詳細機制：可與2-GP1、氧化型LDL結(jié)合，抑制其抗凝作用可誘導(dǎo)2-GP1二聚體化，引起細胞外表膜聯(lián)蛋白II交聯(lián)，促進2-GP1與細胞膜外表磷脂的穩(wěn)定結(jié)合，進一步活化內(nèi)皮細胞二聚化后的2-GP1可與血小板結(jié)合，活化血小板2GP1與磷脂結(jié)合，改動外表構(gòu)造，暴露抗原決議簇，介導(dǎo)抗磷脂抗體結(jié)合到膜磷脂。2GP1是必需的輔助因子，檢測抗2GP1能夠比ACL更有意義?？?-糖蛋白1抗體a2-GP1 25檢測方法：ELISA，靈敏度5ng/ml在APS患者中，同一亞型IgG、M、Aa2-GP1與ACL程度顯著相關(guān)對APS診斷而言， a2-GP1特異性最高：敏感性：A

11、CL a2-GP1特異性： a2-GP1 ACL和LA亞型研討顯示無論是a2-GP1，還是ACL，都是IgG亞型占有主導(dǎo)位置。 Sarmarco M, etal. J Lab Clin Med. 2004,144(3):141-14720SLE患者LA和ACL陰性，而a2-GP1陽性Bruce IN,et al. J Rheumatol. 2000,27:2833-7.約10APS患者僅a2-GP1陽性Pierangeli SS, Harris ENClin Chim Acta, 2005,357: l7-33.抗2-糖蛋白1抗體a2-GP1 26一種IgG/IgM型免疫球蛋白，作用于凝血酶原

12、復(fù)合物，影響凝血反響，阻斷活化的凝血因子V與凝血酶原作用，抑制纖維蛋白的構(gòu)成，致使凝血時間延伸?！翱鼓冈贵w更為適宜。挑選實驗：證明有磷脂依賴的凝血時間延伸活化部分凝血酶原時間(APTT) 白陶土凝血時間(KCT)稀釋蛇毒凝血時間(dRVVT) 稀釋凝血酶原時間(dPT)經(jīng)過糾正實驗確診：假設(shè)有LA，缺乏血小板正常血清不能糾正凝血時間，只需參與過量磷脂或血小板溶解物后，延伸的APTT可被糾正。這里要排除其他緣由引起的凝血異常，如肝素、因子復(fù)合物等。狼瘡抗凝物L(fēng)AANCAANCA以中性粒細胞和單核細胞胞漿成分為靶抗原靶抗原：PR3，MPO、乳鐵蛋白酶、彈性蛋白酶、組織蛋白酶、殺菌/通透性蛋白

13、C-ANCA胞漿型：主要抗原PR3 P-ANCA核周型：主要抗原MPOP-ANCAC-ANCApANCApANCA核周型核周型pANCA MPO ANCA可見于MPA60%-80%，GPA，EGPA，IBD，PSC、PAN、SLE、RA、SS與壞死性新月體腎小球腎炎NGGN相關(guān)，且與疾病活動度相關(guān)cANCAcANCA胞漿型胞漿型cANCAPR3 ANCA GPA中特異性高，與疾病活動性平行少數(shù)MPA、EGPA、PAN等也可陽性類風(fēng)濕因子類風(fēng)濕因子Rheumatoid FactorRheumatoid Factor靶抗原為IgG的FC片段，是抗IgG的抗體與疾病活動性有關(guān)陽性缺乏以診斷RA，陰性

14、不能除外RA多種結(jié)締組織病SLE，SD，SS，PM/DM、感染疾病TB，hepatitis、肝硬化 、結(jié)節(jié)病、淋巴瘤等均可陽性，正常人2%陽性，老年人可達5%陽性冷球蛋白血癥、SS可出現(xiàn)RF高滴度陽性病后半年才產(chǎn)生，有關(guān)節(jié)外表現(xiàn)者滴度高。繼續(xù)高滴度RF預(yù)示疾病嚴重，骨侵蝕發(fā)生率高，預(yù)后差抗核周因子抗核周因子-(APF)-(APF)對RA診斷的敏感性35%，特異性高達91%RF陰性者40%陽性APF與疾病嚴重程度、關(guān)節(jié)外表現(xiàn)及放射學(xué)進展相關(guān)，提示預(yù)后欠佳抗角蛋白抗體抗角蛋白抗體- -AKAAKA對RA診斷的敏感性32-44.13%、特異性89-90%RF陰性者34%陽性與RA的病情嚴重程度相關(guān),提示預(yù)后不良抗環(huán)瓜氨酸多肽抗環(huán)瓜氨酸多肽(CCP)(CCP)抗體抗體 對RA診斷具有高度敏感性46.6%和特異性96.6%可以在關(guān)節(jié)炎早期出現(xiàn), 與嚴重的骨關(guān)節(jié)破壞相關(guān)與APF、AKA 以及HLA-DR4