(最新整理)腫瘤分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題范文

1、(完整)腫瘤分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題范文(完整)腫瘤分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題范文 編輯整理：尊敬的讀者朋友們：這里是精品文檔編輯中心，本文檔內(nèi)容是由我和我的同事精心編輯整理后發(fā)布的，發(fā)布之前我們對文中內(nèi)容進(jìn)行仔細(xì)校對，但是難免會有疏漏的地方，但是任然希望（(完整)腫瘤分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題范文）的內(nèi)容能夠給您的工作和學(xué)習(xí)帶來便利。同時也真誠的希望收到您的建議和反饋，這將是我們進(jìn)步的源泉，前進(jìn)的動力。本文可編輯可修改，如果覺得對您有幫助請收藏以便隨時查閱，最后祝您生活愉快 業(yè)績進(jìn)步，以下為(完整)腫瘤分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題范文的全部內(nèi)容。大國外交專題片全景呈現(xiàn)了中國外交的發(fā)展之路，反映了中國獨(dú)具特色的外交智慧，尤其自黨的十

2、九大以來for examination and approval, to return part or all of the loan in advance. 5.8 contract contract specific requirements: first, the borrower and other clients; second, loan person double charge and other parties signed a contract with the borrower and agent signature of contract; third, customer

3、s signed loan contract, contract of natural person, must be checked and fingerprinted by himself, you may not use personal name instead be signed, shall not authorize others to sign; four, the pledgor, mortgagor due to special reasons not to sign the contract, may authorize others to sign the contra

4、ct and retained after the notary notarized power of attorney (parties abroad, outside the territory of china sent or delivered by a power of attorney shall be certified by the notary public of the country, and certified by the embassy or consulate in the country). agent required to audit mandates ar

5、e clear, the content is complete (a power of attorney sample record form five), whether the expiration date within part_store_00102). rule2 2nd set of goods was moved to the 2nd from the left the cage inside the vehicle click on smart properties of oriented window screen to the right of login rule t

6、he period of validity, and audit the original identity card of the authorized person, and keep copies. contracts signed by the authorized person authorized, in the signature bar marked authorized person, and signed by the authorized persons name; five, contract signing and client identity, signature

7、, fingerprint is clear; six, fill in the contract specification subject to change should be stamped with the account manager in charge name and thumbprint signature by the parties to show proof, blank partsettings |, suppresses bed 2 choice, bed to bed and set 1. note 2: no storage of empty pallets

8、out of the library, which had no cargo, even from the 2nd floor of the library, operator could not be unloaded, so be sure to select 1. set of layers using the toolbar in the l1 button and the l2 button, 1-and 2-story model can be displayed. click the layer 2 . start simulation can be seen even with

9、out manual operation after giving out instructions tray will automatically outbound scene. instruction unit: logistics management the management of humanities teaching and research guide book makers: developing period of chen xiao juan guide: 2015-3-15 guide book reviewer: he (a) the monthly interes

10、t payment, due in principal and interest with the qing dynasty; (b) a one-time debt; (c) declining reimbursement, namely, equal monthly repayment, decreasing loan interest; (d) the payments are of equal value, equal installments on a monthly loan payment of principal and interest. second, specific m

11、ethod of repayment in accordance with the relevant operational management procedures. 5.6 roll over loans, according to the relevant business management approach of provisions, some personal loans approved, can apply for renewal; second, within one year (inclusive) of personal loans, extended term t

12、otal may not exceed the term of the loan; more than a one-year personal loan, extended term today added to the original term of the loan shall not exceed the maximum loan under the loan terms. 5.7 apply in prepayment prepayment a borrower shall be in writing and, after it has been accepted一 腫瘤流行病學(xué)腫瘤

13、流行病學(xué)腫瘤流行病學(xué)是研究人群中腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、分布規(guī)律及其影響因素的一門學(xué)科，以闡明腫瘤的流行規(guī)律、擬訂腫瘤的防治對策及檢驗(yàn)?zāi)[瘤防治對策效果.肺癌危險因素1。 吸煙；2。 職業(yè)因素:接觸砷的無機(jī)化合物、石棉、二氯甲醚、鉻及其他化合物,鎳冶煉、芥子體、氯乙烯、煤油、焦油和石油中的多環(huán)芳烴，煙草的加熱產(chǎn)物、硫酸煙霧等；3。 氡：廣泛存在于自然界的土壤、巖石、建筑材料中；4. 空氣污染:城市中每天燃燒的大量化石燃料以及柏油路的鋪設(shè)和機(jī)動車輛的使用,均可導(dǎo)致居民密集區(qū)空氣的污染；5。 飲食營養(yǎng)失衡：（體重下降)在致癌的環(huán)境因素中，飲食和營養(yǎng)是重要構(gòu)成部分，營養(yǎng)狀況能夠通過改變表遺傳來導(dǎo)致癌癥發(fā)生，

14、尤其是維生素和必需氨基酸；6。 人乳頭瘤病毒感染；7。 機(jī)體免疫力低下，內(nèi)分泌失調(diào)，及家庭遺傳對肺癌的發(fā)生/可能起到一定作用.二 癌基因與抑癌基因癌基因基因組中存在的一類能促進(jìn)細(xì)胞分裂并有潛在致癌作用的基因。癌基因活化的機(jī)制逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)；病毒插入，進(jìn)入或靠近宿主細(xì)胞原癌基因而增強(qiáng)后者的表達(dá);點(diǎn)突變，在ras癌基因中特別重要；染色體移位，不同染色體的一部分合并,造成基因重排，表達(dá)增加，如cml患者9號和22號染色體移位；基因擴(kuò)增。抑癌基因是一類可以抑制細(xì)胞分裂，并有抑制癌變作用的基因，突變或缺失而功能失活后能使正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞。抑癌基因的失活機(jī)制knudson氏的兩次打擊論：二個等位基

15、因中的一個缺失;另一個等位基因突變;基因5,端cpg島胞嘧啶(c-5）高度甲基化，抑制抑癌基因的轉(zhuǎn)錄。p53基因的功能阻滯細(xì)胞周期；促進(jìn)細(xì)胞調(diào)亡;參與dna損傷修復(fù)，維持基因組穩(wěn)定；抑制腫瘤血管生成三 細(xì)胞信號傳導(dǎo)g proteing蛋白，由、三個不同亞基組成的gtp結(jié)合蛋白，具有g(shù)tp酶活性和七個跨膜結(jié)構(gòu)域，在細(xì)胞信號通路中起信號轉(zhuǎn)換器或分子開關(guān)的作用。second messenger第二信使，受細(xì)胞外信號的作用,在胞質(zhì)溶膠內(nèi)形成或向胞質(zhì)溶膠釋放的細(xì)胞內(nèi)小分子。通過作用于靶酶或胞內(nèi)受體,將信號傳遞到級聯(lián)反應(yīng)下游，如camp、cgmp、ca2+、ip3和dag等。receptor tyrosi

16、ne kinase （rtk)受體酪氨酸激酶，細(xì)胞表面一類具有細(xì)胞外受體結(jié)構(gòu)域、可使酪氨酸磷酸化的跨膜受體蛋白，在細(xì)胞信號的跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用.map kinase cascademap激酶級聯(lián)式反應(yīng)，是多種生長因子及其他信號分子與rtk作用后信號傳導(dǎo)的下游通路,級聯(lián)式反應(yīng)中的最后一個蛋白激酶mapk進(jìn)入細(xì)胞核，將特異的轉(zhuǎn)錄因子磷酸化,并與特定的dna序列結(jié)合，最終可啟動dna的合成，導(dǎo)致細(xì)胞分裂。focal adhesion kinase (fak)局部粘附性激酶,是一種酪氨酸蛋白激酶，在局部粘附區(qū)域內(nèi)濃度集中，特別是在細(xì)胞接觸位點(diǎn)的質(zhì)膜內(nèi)表面，在由整合素介導(dǎo)的細(xì)胞骨架重組反應(yīng)中,起著效

17、應(yīng)分子的作用。receptorlike protein tyrosine phosphatase (rptps)受體樣蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶，一類橫跨質(zhì)膜，行使著細(xì)胞表面受體的作用，并參與細(xì)胞信號傳導(dǎo)和細(xì)胞粘附作用的分子。簡述細(xì)胞信號傳導(dǎo)的基本概念、過程和特征細(xì)胞信號傳導(dǎo)是細(xì)胞通過將信號傳遞至細(xì)胞內(nèi)部來完成細(xì)胞對外界環(huán)境刺激所產(chǎn)生的相應(yīng)反應(yīng)的過程。在信號傳導(dǎo)過程中，通過加上或移去磷酸基團(tuán)從而改變下游一系列蛋白質(zhì)的活性是信號傳導(dǎo)過程中一個最顯著的特征。以gtp結(jié)合蛋白作為“開關(guān)”的某種細(xì)胞活動與另外一些同樣需要gtp結(jié)合蛋白參與調(diào)控的細(xì)胞活動過程相偶聯(lián)。信號傳導(dǎo)是一個復(fù)雜的過程，包括一個沿著信號傳導(dǎo)

18、途徑的信號通道,通常由一系列性質(zhì)獨(dú)特的蛋白質(zhì)組成.蛋白質(zhì)是通過改變其構(gòu)象才成為有活性或者無活性的形式。通道中的每一個組份被其上游的組份所調(diào)控；反過來，該組份又被其下游的組份實(shí)施著調(diào)控。主要有兩種信號傳導(dǎo)過程，一種是配體與細(xì)胞膜表面上的受體結(jié)合后通過激活gtp結(jié)合蛋白而傳導(dǎo)細(xì)胞信號；另一種則是配體與受體結(jié)合后直接激活與受體相關(guān)的酶活性而傳導(dǎo)細(xì)胞信號。簡述磷脂酰肌醇(pi）衍生的幾種主要的第二信使及其在細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑中的作用(1) 甘油二酯(dag）：甘油二酯激活的效應(yīng)器分子式蛋白激酶(pkc),pkc是一種多功能的絲氨酸/蘇氨酸激酶,可將許多不同的蛋白底物磷酸化。pkc在細(xì)胞生長與分化、細(xì)胞

19、代謝和轉(zhuǎn)錄激活等細(xì)胞生命活動中起著非常重要的作用.(2） 肌醇1，4,5三磷酸(ip3)：ip3是水溶性小分子，能夠迅速擴(kuò)散進(jìn)胞漿，與光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)表面ip3特異受體結(jié)合。ip3受體不僅僅是受體，還是四聚體的ca2+通道,ip3與受體結(jié)合后通道打開，ca2+擴(kuò)散至胞漿，與各種靶分子結(jié)合，觸發(fā)特異性反應(yīng)的發(fā)生。四 細(xì)胞周期末端分化細(xì)胞細(xì)胞具有末端分化結(jié)構(gòu)，例如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞、紅細(xì)胞等，它們失去了分裂能力,一旦分化形成即維持其分化狀態(tài)直至死亡。靜息細(xì)胞在正常情況下不分裂，但適宜的刺激物可誘導(dǎo)其開始dna的合成并進(jìn)入細(xì)胞周期的細(xì)胞.例如肝細(xì)胞，部分肝切除手術(shù)可誘導(dǎo)其增殖.死亡受體傳遞細(xì)胞凋亡信號的受

20、體,屬于腫瘤壞死因子受體超家族。與其配體結(jié)合而接受死亡信號，并激活誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的信號通路.tunel即末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(tdt）介導(dǎo)的dutp標(biāo)記技術(shù)。凋亡細(xì)胞會激活一系列的dna內(nèi)切酶,切斷基因組dna，產(chǎn)生一系列3oh末端，在tdt作用下，將脫氧核糖核苷酸和生物素所形成的衍生物標(biāo)記到dna的3末端，從而進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測。什么是細(xì)胞周期的驅(qū)動機(jī)制？cdk在細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用，各種cdk在細(xì)胞周期的各個特定時間被激活，通過磷酸化底物，驅(qū)使細(xì)胞完成細(xì)胞周期,這就是細(xì)胞周期的驅(qū)動機(jī)制.如在關(guān)鍵的g1期的啟動中，cdk起著核心的作用，當(dāng)細(xì)胞受到生長因子的刺激，從g0期進(jìn)入早g1期，

21、并在cdk-cyclin復(fù)合物的作用下，通過r點(diǎn),生成有活性的e2f，e2f作為轉(zhuǎn)錄激活因子促進(jìn)dna復(fù)制相關(guān)基因的表達(dá)，使細(xì)胞進(jìn)入s期。細(xì)胞凋亡和壞死有哪些主要區(qū)別？在（上）35頁表格舉例說明細(xì)胞凋亡主要有哪些誘發(fā)因素？在(上）35頁表格五 腫瘤免疫調(diào)節(jié)免疫編輯免疫編輯是腫瘤細(xì)胞和免疫系統(tǒng)相互作用的一個動態(tài)過程。惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展,受到免疫系統(tǒng)的編輯作用，其主要包括三個階段：消除、靜態(tài)平衡和逃逸。免疫消除和免疫監(jiān)視理論相似，即免疫系統(tǒng)能夠識別和消除不斷出現(xiàn)的、新生的轉(zhuǎn)化惡性細(xì)胞，對機(jī)體起著重要的保護(hù)作用.但某些腫瘤細(xì)胞在免疫系統(tǒng)的作用下,經(jīng)選擇得以幸存，并進(jìn)入一種靜止、休眠狀態(tài)，即所謂靜態(tài)

22、平衡。在免疫系統(tǒng)發(fā)生波動和弱化時，潛伏的腫瘤細(xì)胞便得以逃逸控制而進(jìn)入腫瘤生長的快車道，病情而隨之惡化。免疫監(jiān)視免疫系統(tǒng)發(fā)揮著“哨兵的功能，能夠識別和消除不斷出現(xiàn)的、新生的轉(zhuǎn)化惡性細(xì)胞,抑制腫瘤形成，保證組織的穩(wěn)態(tài)，對機(jī)體起著重要的保護(hù)作用。免疫調(diào)節(jié)性細(xì)胞的種類及其在腫瘤中的作用1） 調(diào)節(jié)性t細(xì)胞(t regulatory cell, treg)：treg細(xì)胞是機(jī)體維持外周免疫耐受的最為重要的細(xì)胞亞群,這一只占cd4+t細(xì)胞5-10的特定亞群的缺失，將導(dǎo)致致命性的自身免疫綜合征。根據(jù)其來源主要分為自然treg（nature treg， ntreg)和誘導(dǎo)性treg細(xì)胞（induced treg,

23、 itreg）.業(yè)已證實(shí)，腫瘤微環(huán)境中存在的treg細(xì)胞，可以顯著抑制針對腫瘤細(xì)胞的天然和適應(yīng)性免疫反應(yīng)。在腫瘤組織中,treg細(xì)胞占cd4亞群的比例一般不超過50%，但可以保持這一水平至腫瘤的晚期階段。另外，在胃腸道、卵巢腫瘤發(fā)生的最初階段，treg的比例就顯著增高。目前已采用諸如靶向抗體、抑制itreg的誘導(dǎo)分子、抑制treg功能等多種策略抑制treg在腫瘤組織的免疫調(diào)節(jié)功能，對于腫瘤的治療，具有十分重要的意義.2) 腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associated macrophage， tam)：腫瘤微環(huán)境中，巨噬細(xì)胞的出現(xiàn)往往與某些腫瘤加速進(jìn)展關(guān)聯(lián)，包括能直接促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移

24、,血管新生和免疫抑制。我們將能夠殺死微生物和攻擊腫瘤細(xì)胞并釋放多種炎性介質(zhì)的巨噬細(xì)胞，稱為經(jīng)典的巨噬細(xì)胞，m1細(xì)胞；能抑制免疫反應(yīng),誘導(dǎo)th2反應(yīng),啟動血管新生和組織重建修復(fù)的巨噬細(xì)胞稱為m2細(xì)胞，即tam。決定巨噬細(xì)胞極化的因素主要是腫瘤微環(huán)境中的多種蛋白.3) 髓性來源的抑制性細(xì)胞（myeloid-derived suppressor cell, mdsc）：mdsc在腫瘤免疫逃逸中發(fā)揮著重要作用。在腫瘤組織中,浸潤的mdsc主要是通過產(chǎn)生no和高水平的精氨酸酶抑制t細(xì)胞的功能。同時，高水平的精氨酸酶和no可直接誘導(dǎo)t細(xì)胞的凋亡.4） cd8調(diào)節(jié)性t細(xì)胞：目前認(rèn)為,cd8+t細(xì)胞亞群含有t

25、reg細(xì)胞,這些細(xì)胞可識別不同的抗原，功能上與cd4+treg相似。5) nkt調(diào)節(jié)性細(xì)胞：雖然nkt細(xì)胞在機(jī)體抗腫瘤中起著十分重要的作用，但近來研究表明，nkt細(xì)胞具有免疫抑制作用。六、腫瘤轉(zhuǎn)移腫瘤轉(zhuǎn)移是指惡性腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)腫瘤,通過各種轉(zhuǎn)移方式，到達(dá)繼發(fā)組織和器官后得以繼續(xù)增殖生長，形成與原發(fā)腫瘤相同性質(zhì)的繼發(fā)腫瘤的全過程。腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的基本生物學(xué)特征，是臨床上絕大多數(shù)腫瘤患者的致死因素。腫瘤轉(zhuǎn)移的基本過程腫瘤轉(zhuǎn)移包括多個步驟，可被形象的稱為多階梯瀑布過程。各種腫瘤轉(zhuǎn)移的基本過程是相似的，它們一般包括以下步驟：早期原發(fā)癌生長;腫瘤血管生成；腫瘤細(xì)胞脫離并侵入基質(zhì);進(jìn)入脈管系統(tǒng)；癌栓

26、形成；繼發(fā)組織器官定位生長；轉(zhuǎn)移癌繼續(xù)擴(kuò)散。概括的說，主要是兩大步,首先,腫瘤侵襲-腫瘤細(xì)胞從原發(fā)瘤進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)。腫瘤細(xì)胞不斷增殖，并從瘤母體分離，然后侵犯和破壞周圍正常組織，腫瘤細(xì)胞移動進(jìn)入基質(zhì),同時新生毛細(xì)血管的形成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)。其次,腫瘤轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞從循環(huán)系統(tǒng)進(jìn)入繼發(fā)器官。腫瘤細(xì)胞隨循環(huán)系統(tǒng)到達(dá)繼發(fā)臟器，牢固的粘附在脈管的內(nèi)皮層，并通過分泌多種蛋白溶解酶，降解脈管的基底膜，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞逸出循環(huán)系統(tǒng)進(jìn)入繼發(fā)器官,反應(yīng)性的通過自分泌、旁分泌或內(nèi)分泌方式產(chǎn)生多種信號因子，單獨(dú)或聯(lián)合調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖生長.七、腫瘤微環(huán)境腫瘤微環(huán)境指腫瘤在生長過程中，由腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)

27、、免疫細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等相互作用形成的腫瘤細(xì)胞生長的特殊環(huán)境，這一環(huán)境具有腫瘤組織血供不足、間質(zhì)壓力高、營養(yǎng)相對缺乏等特點(diǎn).腫瘤微環(huán)境的異質(zhì)性是其最顯著的特征，主要表現(xiàn)在：不同病人具有不同的微環(huán)境；同一病人的腫瘤發(fā)展不同階段微環(huán)境不同；同一病人、同一發(fā)展階段不同部位的腫瘤微環(huán)境不同。腫瘤相關(guān)的基質(zhì)細(xì)胞1) 腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(tafs）:是腫瘤微環(huán)境中數(shù)量最多、分布較廣的表型改變了的成纖維細(xì)胞。tafs的來源可能有以下幾個途徑：腫瘤周圍間質(zhì)中的成纖維細(xì)胞；血管周圍細(xì)胞;骨髓來源的間充值干細(xì)胞；經(jīng)過“上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化”的上皮腫瘤細(xì)胞;經(jīng)過“內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化”的血管內(nèi)皮細(xì)胞。tafs能夠誘發(fā)腫瘤形成，在腫

28、瘤形成的階段起了重要作用。tafs可以通過與腫瘤細(xì)胞之間的相互作用促進(jìn)腫瘤的血管生成，進(jìn)而提高腫瘤的惡性程度。2） 腫瘤相關(guān)內(nèi)皮細(xì)胞：內(nèi)皮細(xì)胞是腫瘤血管生成的基礎(chǔ)，血管形成必須依賴于內(nèi)皮細(xì)胞的激活,遷移并最終形成血管腔.處于腫瘤微環(huán)境中的血管內(nèi)皮細(xì)胞呈不夠成熟及快速分裂狀態(tài)，并且表達(dá)腫瘤內(nèi)皮標(biāo)志物以及與血管發(fā)生密切相關(guān)的整合素、cd15、血管內(nèi)皮生長因子受體等，促進(jìn)腫瘤血管的生成。3） 腫瘤相關(guān)免疫細(xì)胞：腫瘤微環(huán)境在促進(jìn)腫瘤惡變的同時也改變著募集而來的免疫細(xì)胞，包括巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞等，這些細(xì)胞通過釋放趨化因子、血管生長因子、基質(zhì)降解酶等促進(jìn)腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移.同時，腫瘤微環(huán)境

29、也能調(diào)控周圍各種免疫細(xì)胞的代謝機(jī)能，為加速腫瘤組織的生長與轉(zhuǎn)移服務(wù).八名詞解釋腫瘤干細(xì)胞（cancer stem cells，csc）是惡性腫瘤中能夠自我更新及分化形成腫瘤中多種癌細(xì)胞類型的原始癌細(xì)胞。csc源自組織中成體干細(xì)胞或祖細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化，其生物學(xué)功能是作為惡性腫瘤的起始細(xì)胞,具有高度致瘤性。csc還具有高轉(zhuǎn)移性和耐藥性，被認(rèn)為是惡性腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的根源。問答題簡述腫瘤干細(xì)胞的鑒定目前常用的鑒定方法主要有以下幾種：（1） 致瘤試驗(yàn)（tumorigenic assay)：這項(xiàng)試驗(yàn)的依據(jù)是假定,癌細(xì)胞群中只有csc具有無限增殖能力,而絕大多數(shù)分化的癌細(xì)胞致瘤能力有限,因而將少量癌細(xì)胞植入no

30、dscid免疫缺陷小鼠后,只有csc能夠形成腫瘤，而分化的癌細(xì)胞不能致瘤。通常的評估標(biāo)準(zhǔn)是干細(xì)胞植入2000個或以下細(xì)胞能形成腫瘤，而非干細(xì)胞在相同實(shí)驗(yàn)條件下需增加100倍或以上細(xì)胞數(shù)量才具有致瘤能力.（2） 球體形成試驗(yàn)(sphere assay）：成體干細(xì)胞的一個重要特性是可以在含細(xì)胞因子的無血清培養(yǎng)基中形成懸浮生長的細(xì)胞團(tuán)，稱為球體。csc也具有球體形成能力,如腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤、乳腺癌、胰腺癌和肺癌的csc均能在合適條件下形成細(xì)胞球體。（3) 標(biāo)記滯留試驗(yàn)(label-retention assay)：干細(xì)胞分裂后其中一個子代細(xì)胞不再分裂、停留在干細(xì)胞階段，而令一個子代細(xì)胞則進(jìn)入活躍增殖期并

31、發(fā)生分化，此類活躍增殖細(xì)胞又稱為短暫放大細(xì)胞或祖細(xì)胞,干細(xì)胞的這種分裂方式稱為不對稱分裂。根據(jù)這一特性，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中加入核苷酸前體如溴脫氧尿嘧啶(brdu)，使其摻入到分裂細(xì)胞的dna中，然后去除標(biāo)記物繼續(xù)培養(yǎng)一段時間，用抗brdu熒光抗體進(jìn)行染色，干細(xì)胞表現(xiàn)為高熒光強(qiáng)度，因而又稱標(biāo)記滯留細(xì)胞。(4) 集落形成試驗(yàn)(colony-forming assay):csc具有無限增殖能力，因而在瓊脂糖凝膠或matrigel生物膠上培養(yǎng)時具有顯著的集落形成率，而分化的癌細(xì)胞增殖能力有限，通常不能形成集落。（5) 侵襲試驗(yàn)（invasion assay)：通常采用體外matrigel生物膠侵襲試驗(yàn)進(jìn)

32、行鑒定，其原理是將生物膠涂鋪在8m孔徑transwell網(wǎng)上模擬基底膜,然后將待測細(xì)胞置于上層小室內(nèi)，下層孔內(nèi)放置10%血清的培養(yǎng)基及細(xì)胞因子，具有轉(zhuǎn)移潛能的細(xì)胞在血清或細(xì)胞因子的刺激下穿越生物膠，此類細(xì)胞可以計數(shù)定量分析。(6） 耐藥試驗(yàn)（drug resistant assay)：csc具有耐藥性，其機(jī)理尚未完全闡明。一些腫瘤的csc表達(dá)abc膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,尤其是采用sp分選技術(shù)獲得的csc，通常都進(jìn)行耐藥測試?？刹捎胢tt比色法、核素標(biāo)記的核苷酸摻入法、集落培養(yǎng)法等.九名詞解釋腫瘤標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞的基因表達(dá)而合成分泌的或是由機(jī)體對腫瘤反應(yīng)而異常產(chǎn)生/

33、或升高的，反應(yīng)腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)。包括腫瘤胚胎性抗原、異位激素、酶和同工酶、血漿蛋白、腫瘤抗原及癌基因和抑癌基因蛋白產(chǎn)物等.存在于病人的血液、體液、細(xì)胞和組織中，可用生物化學(xué)、免疫學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行測定，對腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、療效觀測、預(yù)后評估有一定的臨床價值。問答題1。 簡述腫瘤分子診斷中的新技術(shù)?1) 比較基因組雜交技術(shù)（comparative genomic hybridization， cgh)：cgh是kalioniemi等于1992年首次報道，主要用于腫瘤分子遺傳學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)研究的一種新方法。cgh是在熒光原位雜交的基礎(chǔ)上演變而來，其實(shí)質(zhì)是雙色熒光原位雜交。其基本

34、原理是將待測樣本基因組dna和正常對照基因組分別用兩種不同顏色的熒光標(biāo)記,與正常中期染色體進(jìn)行原位抑制雜交,通過檢測基因組各個位點(diǎn)兩種標(biāo)記熒光素的強(qiáng)度，進(jìn)行定量對比分析，即可探明待測樣本基因組dna拷貝數(shù)的變化。通過cgh，可以在全基因組范圍內(nèi)了解腫瘤基因組dna拷貝數(shù)的變化，包括缺失、擴(kuò)增、復(fù)制等,并在染色體上定位這些改變，充分了解腫瘤細(xì)胞遺傳學(xué)異常與其分化、生長、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)等因素之間的關(guān)系，為腫瘤的臨床病理診斷提供強(qiáng)有力的依據(jù)，為腫瘤的基因診斷和基因克隆提供線索,該方法已成為研究腫瘤基因組遺傳不穩(wěn)定性的重要方法。2） mrna差異展示技術(shù):是1992年由liang等首先報道的。其原理主要依

35、據(jù)rna末端為polya結(jié)構(gòu),而與polya相鄰的堿基組合只有12種。于此對應(yīng)合成12種引物，即在oligodt后面加上兩個相鄰堿基，形成與polya的3端結(jié)合的錨引物，每種可以錨定mrna總數(shù)的1/12。每種引物可以覆蓋1/12的mrna群體,用每種引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，將獲得1/12的cdna亞群體。然后用一個5端的任意引物對每個cdna亞群體進(jìn)行pcr擴(kuò)增，來自不同mrna的擴(kuò)增產(chǎn)物大小是不同的,將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離，可將500bp以內(nèi)的分子明顯分辨出來。在pcr反應(yīng)時加入熒光素、地高辛等標(biāo)記，電泳后進(jìn)行顯色反應(yīng)，就能發(fā)現(xiàn)有差異的dna片段，即差異表達(dá)基因的cdna。從電泳膠上切下這些片段，

36、擴(kuò)增后進(jìn)行測序,并與genbank中已知序列進(jìn)行同源性比對，即可獲得該片段的基因類型或發(fā)現(xiàn)新的全長基因。3) 基因表達(dá)系列分析技術(shù)(sage）：sage是由velcu-lescu等1995年首先報道,近幾年逐步發(fā)展起來的一項(xiàng)快速分析基因表達(dá)信息的技術(shù)。它通過快速和詳盡分析成千上萬個表達(dá)序列標(biāo)簽來尋找出表達(dá)豐度不同的基因序列,從而較完整的獲得基因組表達(dá)信息。sage的原理主要有以下三點(diǎn)：（1) 從轉(zhuǎn)錄本的3端特定位置分離出的該轉(zhuǎn)錄本特異的標(biāo)簽包含有足夠的能代表該轉(zhuǎn)錄本所需之信息，能夠唯一確認(rèn)一種轉(zhuǎn)錄物;（2)分離自不同轉(zhuǎn)錄本的標(biāo)簽可以被串聯(lián)成一定長度后克隆進(jìn)載體、并以連續(xù)的形式輸入計算機(jī)進(jìn)行處理

37、，能對數(shù)以千記的轉(zhuǎn)錄本進(jìn)行分析;（3） 同一標(biāo)簽的重復(fù)次數(shù)代表該轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)水平.目前已廣泛應(yīng)用在腫瘤生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域，極大的推動了差異表達(dá)基因的研究發(fā)展，促進(jìn)了腫瘤分子診斷預(yù)測水平的提高。4） 基因芯片技術(shù):是1995年斯坦福大學(xué)的schena等首先報道的一種能對全基因組基因的表達(dá)水平進(jìn)行同步分析的新方法。這一技術(shù)將大量探針有序固定在固相支持物的表面，與待測樣品中的靶基因按堿基配對原理進(jìn)行雜交,再通過激光共聚焦顯微鏡、電子計算機(jī)系統(tǒng)分析，迅速得出待測樣本表達(dá)信息的分子生物學(xué)和遺傳學(xué)方法?；蛐酒夹g(shù)快速、平行、高效、高通量的分析生物信息的特點(diǎn)，徹底改變了傳統(tǒng)的單基因模式，為在全基因組

38、范圍內(nèi)研究疾病特別是腫瘤發(fā)生、發(fā)展相關(guān)的基因改變提供了一個強(qiáng)有力的工具，對全面、精確、深入的探索腫瘤的發(fā)病機(jī)制具有十分重要的意義。5) 蛋白質(zhì)芯片技術(shù)：該技術(shù)是將純化的多肽、蛋白或其他分子作為探針高密度的排列固定于固相支持介質(zhì)表面而構(gòu)成微陣列，根據(jù)探針物理、化學(xué)或生物學(xué)特性的不同，選擇性的從待測生物樣品中捕獲蛋白.經(jīng)原位清洗除去未與探針結(jié)合的分子，再利用各種檢測技術(shù)定性、定量分析芯片上結(jié)合的蛋白。蛋白芯片高通量、平行分析、簡便迅速的優(yōu)點(diǎn)使其在腫瘤分子預(yù)測診斷等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。6) 熒光定量pcr技術(shù)：是指在常規(guī)pcr反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記的探針,通過熒光信號積累對pc

39、r的全程進(jìn)行檢測，實(shí)現(xiàn)其定量功能。該技術(shù)在腫瘤分子診斷中目前主要用于循環(huán)腫瘤細(xì)胞或微轉(zhuǎn)移灶中微量腫瘤dna或rna的檢測、snp的檢測、基因表達(dá)及甲基化研究等。舉例說明如何應(yīng)用分子生物學(xué)新技術(shù)篩選腫瘤標(biāo)志物以蛋白質(zhì)芯片技術(shù)為例，該技術(shù)是將純化的多肽、蛋白或其他分子作為探針高密度的排列固定于固相支持介質(zhì)表面而構(gòu)成微陣列，根據(jù)探針物理、化學(xué)或生物學(xué)特性的不同，選擇性的從待測生物樣品中捕獲蛋白。經(jīng)原位清洗除去未與探針結(jié)合的分子，再利用各種檢測技術(shù)定性、定量分析芯片上結(jié)合的蛋白。利用該技術(shù)快速、簡便、高通量平行分析的特點(diǎn)，對正常人和腫瘤患者的血液、尿液、腦脊液等樣品進(jìn)行分析鑒定，通過比較不同疾病狀態(tài)下

40、的差異表達(dá)蛋白發(fā)現(xiàn)具有診斷或預(yù)測價值的生物標(biāo)記,實(shí)現(xiàn)對腫瘤的早期診斷和預(yù)測.十名詞解釋基因診斷與基因治療基因診斷是采用分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的相關(guān)技術(shù)，如核酸分子雜交、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（pcr）、單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析以及dna序列測定等，直接檢測機(jī)體遺傳物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)水平和表達(dá)水平的異常，從而對疾病做出判斷?；蛑委熤傅氖且揽繉?dǎo)入人體或外源的遺傳物質(zhì)來治病的一種治療手段。包括糾正人自身基因結(jié)構(gòu)或功能上的錯亂;或依靠外源遺傳物質(zhì)殺滅病變的細(xì)胞；或抑制外源病原體遺傳物質(zhì)的復(fù)制等。ex vivo：指將外源基因的載體在體外導(dǎo)入自體或異體細(xì)胞，經(jīng)體外細(xì)胞擴(kuò)增后,回輸患者體內(nèi)，讓外源基因表達(dá)以改善癥狀。in v

41、ivo：不需要細(xì)胞抑制，直接將外源遺傳物質(zhì)注射入機(jī)體內(nèi),如dna可通過載體與導(dǎo)入系統(tǒng)注入體內(nèi)，在體內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)而發(fā)揮治療作用。病毒載體與非病毒載體：病毒載體是指利用病毒能夠感染細(xì)胞的特性將外源基因?qū)氚屑?xì)胞基因治療載體,由于對野生型病毒的生物學(xué)認(rèn)識尚不足,目前為止只有少數(shù)幾種病毒(如逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒、腺相關(guān)病毒、皰疹病毒和痘苗病毒等）被成功改造為基因轉(zhuǎn)移載體。非病毒載體是指除病毒載體外被用于基因治療的轉(zhuǎn)移載體，目前常用的主要包括裸dna/質(zhì)粒dna，脂質(zhì)體載體及陽離子多聚物載體等。問答題基因治療面臨的關(guān)鍵是什么？目前在這些方面有什么發(fā)展？基因治療關(guān)鍵中的首要問題,是能使治療基因在特定的靶細(xì)胞

42、高效表達(dá)。首先，嘗試建立靶向性的基因?qū)胂到y(tǒng)，應(yīng)用靶細(xì)胞表明的受體和它相應(yīng)的配體，與多聚陽離子連接,通過后者與基因的質(zhì)粒dna形成復(fù)合物，攜帶基因到達(dá)靶細(xì)胞。其次,嘗試靶向轉(zhuǎn)錄.真核生物有著復(fù)雜的機(jī)理來調(diào)控特定細(xì)胞群體特定基因的表達(dá)，可以利用這些調(diào)控元件來使目的基因相對特異的在腫瘤組織中表達(dá)，目前已經(jīng)有多種腫瘤選擇性的啟動子用于基因治療。基因治療所用的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)各有何優(yōu)缺點(diǎn)？你認(rèn)為那種基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)的發(fā)展前景好？病毒載體系統(tǒng)基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高，表達(dá)持久，但其最大的缺點(diǎn)是具有較強(qiáng)的免疫原性，并可在整合過程中誘發(fā)突變，且導(dǎo)入的治療基因長度有限。非病毒載體系統(tǒng)較為安全，轉(zhuǎn)基因大小無限制，但其轉(zhuǎn)導(dǎo)效率偏低

43、。十一名詞解釋emt：上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)型。指腫瘤侵襲階段,具有極性的上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)換成具有活動能力、能夠在細(xì)胞基質(zhì)間自由移動的間質(zhì)細(xì)胞的現(xiàn)象,可促使腫瘤細(xì)胞發(fā)生遷移和侵襲。它以上皮細(xì)胞極性的喪失及間質(zhì)特性的獲得為重要特征。emt是一系列特定的細(xì)胞外刺激下發(fā)生的蛋白質(zhì)變性和轉(zhuǎn)錄改變的集合過程,從而使細(xì)胞發(fā)生長期的、可逆性改變。移植性腫瘤動物模型：指把動物或人的腫瘤移植到同系、同種或異種動物體內(nèi)，經(jīng)傳代后，它的組織學(xué)類型明確，移植成活率、生長速度、自發(fā)消退率、宿主荷瘤壽命、侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)特性穩(wěn)定，并能在受體動物中繼續(xù)傳代.主要分為同種移植和異種移植兩大類。問答題簡述腫瘤轉(zhuǎn)移動物模型的比較醫(yī)學(xué)腫瘤動物

44、模型及應(yīng)用24頁十二名詞解釋targeted vectors (carriers):靶向載體。是可將藥物通過局部給藥、胃腸道或全身血液循環(huán)而選擇的濃集于靶組織、靶器官、靶細(xì)胞或細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的載體制劑。一般具備以下特點(diǎn)：顆粒小，能在循環(huán)中通過毛細(xì)血管到達(dá)靶部位;載體能夠較好地負(fù)載藥物，載藥量足夠高，以滿足在靶區(qū)的治療濃度；經(jīng)過外包裝的藥物在靶位點(diǎn)釋放，仍應(yīng)具有足夠的生物學(xué)活性；有足夠的循環(huán)半衰期以確保到達(dá)靶部位；載體的生物相容性好，其降解產(chǎn)物能被機(jī)體清除或?qū)C(jī)體無害；抗原性小,熱源性小，不易形成血栓。 enhanced permeability and retention effect (epr）

45、：通透性增強(qiáng)與滯留效應(yīng)。腫瘤組織由于快速生長的需求,血管生成很快，導(dǎo)致新生血管外膜細(xì)胞缺乏、基底膜變形,因而納米級的嵌段共聚物膠束能穿透腫瘤的毛細(xì)血管壁的“縫隙”進(jìn)入腫瘤組織,而腫瘤組織的淋巴系統(tǒng)回流不完善，造成粒子在腫瘤部位蓄積，這就是所謂的epr效應(yīng),在實(shí)體瘤中是一種非常典型的現(xiàn)象。問答題簡述抗癌藥物(基因）靶向給藥的主要策略1) 利用或逃避網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)攝取的被動靶向腫瘤：具有疏水性表面的顆粒易優(yōu)先被肝臟攝取，其次是脾和肺.而親水性的納米粒不易被肝脾攝取,是一種長循環(huán)的給藥系統(tǒng).通過接枝或嵌段共聚物的親水區(qū)和疏水區(qū)形成的核-殼型膠束納米粒，直徑在100nm或更小，并具有親水的表面，可避開肝脾的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的攝取而在血液中長期循環(huán)，最終被動靶向腫瘤部位