專題一基因工程：1.1DNA重組技術(shù)的基本工具ppt課件

1、想象一 能否培育出具有抗蟲性狀的抗蟲棉呢？ 主講教師 郎啟勝 胰島素是治療糖尿病的特效藥,長期以來只能從豬、牛等動物的胰腺中提取，產(chǎn)量低本錢高。 而微生物生長迅速，容易控制。于是科學(xué)家想象，假設(shè)能將人的胰島素基因?qū)胛⑸矬w內(nèi)，并得以表達(dá)，就不僅能處理產(chǎn)量問題，還能大大降低消費(fèi)本錢，使藥品價錢大幅下降。想象二 能否讓微生物產(chǎn)生出人的胰島素等珍貴藥物？回想舊知識回想舊知識 這些定向改造基因的想象能實現(xiàn)嗎？ 重組DNA轉(zhuǎn)移到動物受精卵中。轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒基因的甜椒乳汁中含有人生長乳汁中含有人生長激素的轉(zhuǎn)基因牛激素的轉(zhuǎn)基因牛( (阿阿根廷根廷) ) 抗蟲棉的培育有哪些關(guān)鍵步驟？

2、抗蟲棉的培育有哪些關(guān)鍵步驟？DNA DNA 重組技術(shù)的根本工具重組技術(shù)的根本工具本節(jié)知識內(nèi)容本節(jié)知識內(nèi)容1 DNA1 DNA重組技術(shù)的根本工具重組技術(shù)的根本工具 專題一專題一 基因工程基因工程“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀 限制酶限制酶 “分子縫合針分子縫合針 DNA DNA銜接酶銜接酶 “分子運(yùn)輸車分子運(yùn)輸車 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 思索思索 在自然界中有一些生物的在自然界中有一些生物的DNADNA能夠進(jìn)入另一種能夠進(jìn)入另一種 生物的細(xì)胞中。我們有沒有學(xué)過相關(guān)的實例？生物的細(xì)胞中。我們有沒有學(xué)過相關(guān)的實例？ 那么這類生物為什么沒有在長期的進(jìn)化過程中被外源那么這類生物為什么沒有在

3、長期的進(jìn)化過程中被外源 DNA DNA的入侵而滅絕，它們有何維護(hù)機(jī)制？的入侵而滅絕，它們有何維護(hù)機(jī)制？限制酶切割外源限制酶切割外源DNA,DNA,使之失效，使之失效，從而到達(dá)維護(hù)本身的目的！從而到達(dá)維護(hù)本身的目的！ 黏性末端黏性末端平末端平末端ATGCATGC限制酶切割磷酸二酯鍵限制酶切割磷酸二酯鍵限制性內(nèi)切酶作用過程 大腸桿菌的一種限制酶大腸桿菌的一種限制酶EcoR)EcoR)能識別能識別GAATTCGAATTC序列，并在序列，并在G G和和A A之間之間切開構(gòu)成黏性末端。切開構(gòu)成黏性末端。 Sma Sma能識別能識別CCCGGGCCCGGG序列，并在序列，并在C C和和G G之間切割構(gòu)成平

4、末端之間切割構(gòu)成平末端 。模擬操作 課本6頁基因的針線：基因的針線：DNA銜接酶銜接酶G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同種限制酶切割用同種限制酶切割A(yù)TGCATGC銜接酶銜接磷酸二酯鍵銜接酶銜接磷酸二酯鍵DNADNA銜接酶的作用過程：銜接酶的作用過程：二、分子縫合針二、分子縫合針DNA銜接酶銜接酶 T磷磷酸酸二二酯酯鍵鍵1234512345 A作用部位：作用部位：銜接黏性末端銜接黏性末端銜接黏性末端和

5、平末端銜接黏性末端和平末端分類分類作用作用E.coli DNA銜接酶銜接酶銜接酶種類：銜接酶種類：T4DNA銜接酶銜接酶DNA聚合酶和聚合酶和DNA銜接酶有何銜接酶有何一樣點(diǎn)和不同點(diǎn)？一樣點(diǎn)和不同點(diǎn)？DNA銜接酶銜接酶DNA聚合酶聚合酶銜接銜接DNA鏈鏈銜接部位銜接部位雙鏈雙鏈在兩在兩DNADNA片片斷之間構(gòu)成斷之間構(gòu)成磷酸二脂鍵磷酸二脂鍵單鏈單鏈將單個核苷酸加將單個核苷酸加到已存在的核酸到已存在的核酸片斷片斷3 3末端構(gòu)成末端構(gòu)成磷酸二脂鍵磷酸二脂鍵核苷酸分子的銜接：核苷酸分子的銜接：ATGCATGCDNADNA聚合酶銜接單鏈聚合酶銜接單鏈DNADNA把單個脫氧核苷酸銜接到把單個脫氧核苷酸銜

6、接到DNADNA片段上片段上三、分子運(yùn)輸車三、分子運(yùn)輸車基因進(jìn)入受基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體體細(xì)胞的載體 要讓一個從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來的基因在乙生要讓一個從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來的基因在乙生物體內(nèi)進(jìn)展表達(dá)，首先得將這個基因送到乙生物的物體內(nèi)進(jìn)展表達(dá)，首先得將這個基因送到乙生物的細(xì)胞內(nèi)去！能將外源基因送入受體細(xì)胞的工具就是細(xì)胞內(nèi)去！能將外源基因送入受體細(xì)胞的工具就是載體。載體?；蚬こ痰妮d體被喻為：基因工程的載體被喻為：分子運(yùn)輸車分子運(yùn)輸車基因工程的載體來源：基因工程的載體來源：作為基因工程的載體需求怎樣的條件呢？作為基因工程的載體需求怎樣的條件呢？作為載體的必要條件作為載體的必要條件 1. 1.能自我

7、復(fù)制能自我復(fù)制 能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并表達(dá)；細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并表達(dá)； 2.2.有一個至多個限制酶切位點(diǎn)有一個至多個限制酶切位點(diǎn) 能與目的基因結(jié)合能與目的基因結(jié)合 3.3.有遺傳標(biāo)志基因有遺傳標(biāo)志基因 便于察看便于察看 4.4.對受體細(xì)胞無害、易分別對受體細(xì)胞無害、易分別 平安、比較容易得到平安、比較容易得到1 1、能自我復(fù)制、能自我復(fù)制2 2、具有一個或多個限制酶切點(diǎn)、具有一個或多個限制酶切點(diǎn)3 3、具有遺傳標(biāo)志基因、具有遺傳標(biāo)志基因4 4、對受體細(xì)胞無害、易分別、對受體細(xì)胞無害、易分別5 5、大小適宜，便于操作、大小適宜，便于操作質(zhì)粒作為運(yùn)載體的條

8、件？在進(jìn)展基因工程操作中在進(jìn)展基因工程操作中,真正被用作載體的質(zhì)粒都是在真正被用作載體的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的根底上進(jìn)展過人工改造的天然質(zhì)粒的根底上進(jìn)展過人工改造的課本知識回想課本知識回想 基因工程又叫做基因工程又叫做 或或 。通俗地說，就是。通俗地說，就是按照人們的志愿，把一種生物的某種按照人們的志愿，把一種生物的某種 提取出來，加以提取出來，加以 ， 然后放到另一種生物的細(xì)胞里，然后放到另一種生物的細(xì)胞里， 改造生物的遺傳性狀。改造生物的遺傳性狀?；蚱唇蛹夹g(shù)基因拼接技術(shù)DNA重組技術(shù)重組技術(shù)基因基因修飾改造修飾改造定向地定向地DNA 重組技術(shù)的根本工具重組技術(shù)的根本工具“分子手術(shù)刀分子手術(shù)

9、刀 “分子縫合針分子縫合針 “分子運(yùn)輸車分子運(yùn)輸車限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶DNA銜接酶銜接酶基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體原核生物中分別純化出來原核生物中分別純化出來特定的核苷酸序列特定的核苷酸序列磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵粘性末端粘性末端平末端平末端1、種類：、種類：2、作用部位：、作用部位：兩類兩類銜接黏性末端銜接黏性末端Ecoli DNA銜接酶銜接酶T4 DNA銜接酶銜接酶磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵銜接黏性末端和平末端銜接黏性末端和平末端通常有三種通常有三種:作為載體的條件：作為載體的條件： 在進(jìn)展基因工程操作中在進(jìn)展基因工程操作中,真正被用作載體的質(zhì)粒都是真正被用作載體的質(zhì)粒都是在在 質(zhì)粒質(zhì)粒噬菌體衍生物噬菌體衍生物動植物病毒動植物病毒天然質(zhì)粒天然質(zhì)粒人工改造人工改造的的能自我復(fù)制；有切割位點(diǎn)；能自我復(fù)制；有切割位點(diǎn)；有遺傳標(biāo)志基因；