USP 維生素A含量翻譯

1、571維生素A含量化學(xué)方法方法1以下方法是用于食品成分或藥物成分中維生素A的測(cè)定。它符合1956年國(guó)際聯(lián)合與應(yīng)用化學(xué)的國(guó)際通用方法?？焖偻瓿珊康臏y(cè)定，且在整個(gè)過程中盡量避免接觸光和空氣及其他的氧化劑，最好是使用低光化玻璃器皿和惰性氣體的氛圍下。對(duì)于含有生育酚的情況下，應(yīng)該選擇合適的色譜方法。樣品溶液：準(zhǔn)確稱重，計(jì)量或測(cè)量預(yù)期的量的試樣，相當(dāng)于不小于0.15 mg的維生素A且含有不多于1 g的脂肪的量。如果是以膠囊、片劑或其他固體形式存在的話，那么它就不能按以下的方式來(lái)有效的皂化，該方法是將其溶于10 ml的水中并水浴回流10 min，不溶解的固體用鈍的玻璃棒將其粉碎并保溫5 min。轉(zhuǎn)移至一

2、個(gè)合適的硼硅酸鹽玻璃燒瓶，加入30 ml乙醇，再加入3 ml KOH溶液（9:10）。在全硼硅玻璃器皿中回流30 min。冷卻，加入30ml的水，并將其轉(zhuǎn)入到錐形分離器中。加入4g細(xì)粉末狀的十水硫酸鈉。用一個(gè)150 ml的乙醚萃取2min，如果是乳液形式，那么用三次25 ml的乙醚萃取。合并乙醚萃取液，如有必要，可以用50 ml的水輕輕地?fù)u動(dòng)洗滌。將洗過的乙醚萃取液轉(zhuǎn)入250 ml容量瓶中，用乙醚定容并混合。將25.0 ml的乙醚萃取液蒸發(fā)至約5 ml。再不加熱的情況下，在惰性氣體或真空條件下繼續(xù)蒸發(fā)至約3 ml。將殘留物溶解于足夠的異丙醇中，得到預(yù)期的濃度為每1 ml的溶液中含有3 g5 g

3、的維生素A或在325nm處溶液的吸光度在0.5-0.8以內(nèi)。儀器條件（參看分光光度計(jì)和光散射 851）儀器：紫外可見分光光度計(jì)分析波長(zhǎng)：310 nm，325 nm，334 nm吸收池：1 cm空白試劑：異丙醇分析溶液：樣品溶液測(cè)定樣品溶液在310 nm、325 nm和334 nm處的吸收度。用下面的其中一個(gè)公式計(jì)算維生素A的含量，以mg計(jì)：含量 = (0.549 A 325 )/(L C )或含量 = (0.549 A 325 )/(L C )L =吸收池的長(zhǎng)度（cm）C =試樣(g/100 mL)或膠囊或片劑的最終異丙醇溶液的濃度（單位/100 ml）A 325 =校正325 nm處的吸收度

4、，計(jì)算如下：結(jié)果= (6.815 A 325 ) (2.555 A 310 ) (4.260 A 334 )每mg的維生素A相當(dāng)于3333USP單位的維生素A當(dāng)325nm處的吸收度在A 325 /1.030和A 325 /0.970范圍內(nèi)的話，用第一個(gè)公式計(jì)算。 當(dāng) A 325 小于A 325 /1.030時(shí)用第二個(gè)公式計(jì)算。（注意-不同實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果期望值在P=0.05，相差在8%。該范圍內(nèi)的波動(dòng)不屬于錯(cuò)誤）方法2該方法用于飲食成分和藥物成分中的含量測(cè)定，該成分以純維生素A酯或者是用純維生素A酯作為原料而合成的形式存在。樣品溶液：精密稱量25-100 mg，用5 ml戊烷溶解，并用異丙醇稀釋到

5、濃度為3-4.5 g/mL的維生素A溶液。儀器條件儀器：紫外可見分光光度計(jì)分析波長(zhǎng)：326 nm吸收池：1 cm空白試劑：異丙醇分析溶液：樣品溶液用下面的公式計(jì)算維生素A的含量，以 mg計(jì)：含量 = (0.570 A 326 )/(L C )A 326 =326 nm處的吸收度 L =吸收池的長(zhǎng)度（cm）C = 樣品溶液的濃度 (g/100 mL) 每mg的維生素A相當(dāng)于3333USP單位的維生素A色譜分析法以下的液相色譜的方法用于維生素A的測(cè)定，當(dāng)它作為一種活性藥物成分、食品添加劑成分、或者是存在于飲食或藥劑中的成分時(shí)。在整個(gè)方法過程中，樣品溶液及參比溶液應(yīng)避免與空氣和光的接觸，最好可以在惰

6、性氣體及低光化玻璃器皿下完成。下面的方法中描述了維生素A酯（維生素A乙酸酯或維生素A棕櫚酸酯）的測(cè)定，以現(xiàn)在的化學(xué)形態(tài)和相關(guān)USP參考標(biāo)準(zhǔn)。USP相對(duì)標(biāo)準(zhǔn) 11USP維生素A乙酸酯 RSUSP 維生素A棕櫚酸酯 RS方法1這是一種方法要么直接用正己烷溶解樣品并用液相色譜進(jìn)樣，要么首先用亞甲基亞砜溶解樣品，再用正己烷液-液萃取維生素A。雖然其色譜系統(tǒng)可以將13-順維生素A和全反式維生素A分離出來(lái)，但是只有全反式維生素A峰用于維生素A的含量測(cè)定。該方法可以用來(lái)測(cè)定原料、油溶性維生素片、油溶性維生素膠囊、油和水溶性維生素片、油和水溶性維生素膠囊、油和水溶性維生素礦物片和油和水溶性維生素礦物膠囊。除了

7、個(gè)別指定的以外，標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品溶液和系統(tǒng)適應(yīng)性溶液的制備如下。流動(dòng)相：正己烷標(biāo)準(zhǔn)溶液1: 以正己烷為溶劑，用USP維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品配制成濃度為約15 g/mL 的溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液2: 以正己烷為溶劑，用USP維生素A棕櫚酸酯標(biāo)準(zhǔn)品配制成濃度為約15 g/mL 的溶液系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：等體積混合標(biāo)準(zhǔn)溶液1和標(biāo)準(zhǔn)溶液2.原料樣的樣品溶液：精密稱取維生素A乙酸酯或維生素A棕櫚酸酯（相當(dāng)于15 mg的維生素A）于100ml容量瓶中,用正己烷溶解并稀釋至刻度，混勻。移取該溶液5.0 ml于50 ml容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，混勻。片劑樣的樣品溶液：不少于20片片劑的細(xì)粉末。將不少于7.5 g的粉末，它

8、相當(dāng)于不少于1 mg的維生素A，轉(zhuǎn)移至離心管中。在每1克粉末中加入約2 ml的二甲基亞砜和約3 ml的正己烷，并在60度水浴中振搖45 min。（注意-振搖是為了溶液能混合充分）。在3000 rpm轉(zhuǎn)速下離心10 min，用移液管的方式將正己烷層轉(zhuǎn)入容量瓶中。每克片劑粉末加入3 ml正己烷于二甲基亞砜層，充分振搖5 min，將正己烷層用移液管轉(zhuǎn)入到同一容量瓶中。通過加入三次正己烷重復(fù)這個(gè)萃取過程。用正己烷將提取物稀釋至刻度。用正己烷稀釋該溶液獲得含有濃度為15 g/mL的維生素A溶液。（注意-有可能不需要稀釋）膠囊樣的樣品溶液：將不少于20粒膠囊放入合適的容器中，混合。稱量，將不多于7.5 g

9、，相當(dāng)于不小于1 mg的維生素A（以維生素A的形式，C20H30O），的混合物轉(zhuǎn)入具有聚四氟乙烯的螺旋蓋的離心管中，（注意-對(duì)于硬明膠膠囊，盡可能地通過切開膠囊外衣，將不少于20粒的膠囊的內(nèi)容物和膠囊外衣轉(zhuǎn)移到合適的容器中，并將其搗碎。將相當(dāng)于不小于1 mg的維生素A（以維生素A的形式，C20H30O）的部分混合物轉(zhuǎn)入具有聚四氟乙烯的螺旋蓋的離心管中）。每克膠囊物質(zhì)加入約2 ml的二甲基亞砜和約3 ml的正己烷，并在60度的水浴條件下用振動(dòng)篩振搖45 min。（注意-設(shè)置振動(dòng)篩是為了確保混合物能充分混合）。在3000 rpm轉(zhuǎn)速下離心10 min，用移液管的方式將正己烷層轉(zhuǎn)入容量瓶中。每克膠囊

10、樣加入3 ml正己烷于二甲基亞砜層，充分振搖5 min，將正己烷層用移液管轉(zhuǎn)入到同一容量瓶中。通過加入三次正己烷重復(fù)這個(gè)萃取過程。用正己烷將提取物稀釋至刻度。用正己烷稀釋該溶液獲得含有濃度為15 g/mL的維生素A溶液。（注意-有可能不需要稀釋）色譜系統(tǒng)（參照色譜法621，系統(tǒng)適應(yīng)性）儀器：液相色譜儀檢測(cè)器：紫外325 nm色譜柱：4.6 mm 15 cm；3 m粒徑，填充物L(fēng)8流速：1 ml/min進(jìn)樣量：40 L系統(tǒng)適應(yīng)性樣品溶液：系統(tǒng)適應(yīng)性溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液1和標(biāo)準(zhǔn)溶液2適應(yīng)性要求分離度：系統(tǒng)適應(yīng)性溶液中全反式維生素A乙酸酯峰和全反式維生素A棕櫚酸酯峰的分離度不小于10相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差：標(biāo)準(zhǔn)溶液

11、1或標(biāo)準(zhǔn)溶液2，不大于3.0%分析樣品溶液：標(biāo)準(zhǔn)溶液1和標(biāo)準(zhǔn)溶液2及相接近濃度的樣品溶液以維生素A（C20H30O）形式，計(jì)算維生素A標(biāo)示量的百分比含量 = (r U /r S ) (C S /C U ) 100r U =樣品溶液中全反式維生素A乙酸酯峰面積r S =標(biāo)準(zhǔn)溶液1或標(biāo)準(zhǔn)溶液2中全反式維生素A乙酸酯峰面積C S =標(biāo)準(zhǔn)溶液1或標(biāo)準(zhǔn)溶液2中維生素A濃度(g/mL)C U =樣品溶液中維生素A（維生素A，C20H30O）濃度(g/mL)方法2該方法涉及到用甲醇硫酸處理樣品，再用2,2,4-三甲基戊烷萃取。該樣品的制備可用于包含有維生素A,D和E的配方。應(yīng)用于油溶性維生素膠囊、油和水溶性

12、維生素礦物片、有和水溶性維生素礦物膠囊。除了個(gè)別指定的以外，標(biāo)準(zhǔn)溶液，樣品溶液，系統(tǒng)適應(yīng)性溶液，和試劑溶液均按下面的方法配制。流動(dòng)相：正己烷：乙酸乙酯（99.7:0.3）3N甲醇硫酸溶液：將9 ml硫酸小心地加入到100 ml容量瓶中的80 ml甲醇中，冷卻，用甲醇稀釋并定容。抗壞血酸鈉-鄰苯三酚溶液：稱取10 g抗壞血酸鈉和5 g鄰苯三酚于100 ml容量瓶中，加水溶解。加1.7 ml硫酸，用水稀釋至刻度。卵磷脂溶液：用2,2,4-三甲基戊烷配制成5 mg/ml的卵磷脂溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液1：USP維生素A乙酸酯對(duì)照品溶解于2,2,4-三甲基戊烷中，濃度為15 g/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液2：USP維生素A棕櫚

13、酸酯對(duì)照品溶解于2,2,4-三甲基戊烷中，濃度為15 g/mL系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：等體積混合標(biāo)準(zhǔn)溶液1和標(biāo)準(zhǔn)溶液2片劑樣的樣品溶液：（注意-該制備方法適用于配方中維生素A,維生素D，維生素E的測(cè)定。可以根據(jù)相似的維生素存在與否來(lái)調(diào)節(jié)樣品的量。）準(zhǔn)備不少于20片的細(xì)粉末。將部分粉末，其中維生素A的量在0.4 mg到2.5 mg的這個(gè)范圍內(nèi)，0.5 g的抗壞血酸鈉，1.5 ml的卵磷脂溶液和12.5 ml的2,2,4-三甲基戊烷加入到一渦旋混合器中。加入6 ml的抗壞血酸鈉-鄰苯三酚溶液，緩慢振搖，并讓溶液脫氣。持續(xù)振搖直到氣體不再產(chǎn)生，再接著振搖12 min。加入6 ml的二甲基亞砜到渦旋混合器中，

14、混合后形成懸浮液，振搖12 min。加入6 ml的3N甲醇硫酸溶液到渦旋混合器中，混合后形成懸浮液，振搖12 min。加入12.5 ml的2,2,4-三甲基戊烷到渦旋混合器中，混合后形成懸浮液，振搖10 min。離心10 min來(lái)破壞乳液從而澄清上清液。如有必要，用2,2,4-三甲基戊烷定量稀釋上清液獲得與標(biāo)準(zhǔn)溶液相接近的濃度。膠囊的樣品溶液：（注意-該制備方法適用于配方中維生素A,維生素D，維生素E的測(cè)定?？梢愿鶕?jù)相似的維生素存在與否來(lái)調(diào)節(jié)樣品的量。）在一恒重的瓶子中稱量不少于20粒的膠囊。如有必要可以用鋒利的刀片，在對(duì)外殼無(wú)損失的條件下小心地打開膠囊，并將其轉(zhuǎn)入到100 ml的燒杯中。用乙

15、醚將粘在空外殼上的樣品除去。將清洗液棄去，并用干燥的空氣流將膠囊外殼吹干。用恒重瓶稱量膠囊外殼，并計(jì)算膠囊內(nèi)容物的凈重。將相當(dāng)于維生素A標(biāo)示量的2.5 mg的部分膠囊內(nèi)容物轉(zhuǎn)移。加入0.5 g的碳酸氫鈉、1.5 ml的卵磷脂溶液，和12.5ml的2,2,4-四甲基戊烷，在渦旋混合器中混合。加入6 ml的抗壞血酸鈉-鄰苯三酚溶液，緩慢振搖，并讓溶液放氣。持續(xù)振搖直到氣體不再產(chǎn)生，之后再接著振搖12 min。加入6 ml的二甲基亞砜，在渦旋混合器中混合后形成懸浮液，振搖12 min。加入6 ml的3N甲醇硫酸溶液到渦旋混合器中，在渦旋混合器中混合后形成懸浮液，振搖12 min。加入12.5 ml的

16、2,2,4-三甲基戊烷，在渦旋混合器中混合后形成懸浮液，振搖10 min。離心10 min來(lái)破壞乳液從而澄清上清液。如有必要，用2,2,4-三甲基戊烷定量稀釋上清液獲得與標(biāo)準(zhǔn)溶液相接近的濃度。色譜系統(tǒng)（參照色譜法621，系統(tǒng)適應(yīng)性）儀器：液相色譜儀檢測(cè)器：紫外325 nm色譜柱：4.6 mm 25 cm；5 m粒徑，填充物L(fēng)24流速：1.5 ml/min進(jìn)樣量：40 L系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：系統(tǒng)適應(yīng)性溶液系統(tǒng)適應(yīng)性要求分離度：全反式維生素A乙酸酯峰和全反式維生素A棕櫚酸酯峰的分離度不小于8.0相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差：不大于3.0%分析溶液：標(biāo)準(zhǔn)溶液1和標(biāo)準(zhǔn)溶液2及樣品溶液以維生素A（C20H30O）形式，計(jì)算

17、維生素A標(biāo)示量的百分比含量 = (r U /r S ) (C S /C U ) 100r U =樣品溶液中全反式維生素A乙酸酯峰面積r S =標(biāo)準(zhǔn)溶液1或標(biāo)準(zhǔn)溶液2中全反式維生素A乙酸酯峰面積C S =標(biāo)準(zhǔn)溶液1或標(biāo)準(zhǔn)溶液2中維生素A濃度(g/mL)CU =樣品溶液中維生素A（維生素A，C20H30O）的濃度(g/mL)。（注意-最后用26.5 ml體積的樣品溶液來(lái)計(jì)算預(yù)定的濃度）方法3該方法涉及到了標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的皂化處理，接著用正己烷和二氯甲烷的混合溶劑（3:1）來(lái)對(duì)樣品中的維生素A進(jìn)行液-液萃取的過程。13-順維生素A峰和全反式維生素A峰可以被定性和定量。該方法可用于油溶性的維生素片劑、油

18、溶性維生素膠囊、油和水溶性的維生素片劑、油和水溶性的維生素膠囊、油和水溶性的維生素礦物片劑和油和水溶性的維生素礦物膠囊。除去個(gè)別指定的以外，標(biāo)準(zhǔn)溶液，樣品溶液，和試劑溶液都按以下方法配制。流動(dòng)相：正己烷：異丙醇（92：8）萃取劑：正己烷：二氯甲烷（3:1）氫氧化鉀溶液：氫氧化鉀用水溶解，濃度為800 mg/ml。（注意-在將氫氧化鉀加入水中時(shí)要小心。并混合均勻，冷卻）稀釋劑：用乙醇溶解連苯三酚，濃度為10 mg/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液：用稀釋劑將USP維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品或USP維生素A棕櫚酸酯標(biāo)準(zhǔn)品配制成維生素A（C20H30O）的濃度為8.5 g/mL的溶液。移取該溶液10.0 ml到帶塞的125

19、ml燒瓶中，加入5 ml的水，5 ml的稀釋劑和3 ml的氫氧化鉀溶液。將塞子擰緊，在60 5度的水浴上振搖15 min以上，冷卻至室溫。加入7 ml的水和25.0 ml的萃取劑。將塞子擰緊，劇烈振搖60 s。 用60 ml的水沖洗燒瓶的邊緣，靜置10 min直到液面分層。將有機(jī)層的溶液直接注入到色譜儀上。該標(biāo)準(zhǔn)溶液含3.4 g/mL的維生素A。膠囊的樣品溶液：用恒重瓶稱量不少于20粒的膠囊。在不損失外殼的條件下打開膠囊，并將其轉(zhuǎn)入到100 ml的燒杯中。用乙醚將粘在空外殼上的樣品除去。將清洗液棄去，并用干燥的空氣流將膠囊外殼吹干。用恒重瓶稱量膠囊外殼，并計(jì)算膠囊內(nèi)容物的凈重。稱取相當(dāng)于1.3

20、mg的維生素A的膠囊內(nèi)容物，轉(zhuǎn)移到125 ml的具塞燒瓶張。加入5 ml的水，15 ml的稀釋劑和3 ml的氫氧化鉀溶液。將塞子擰緊，在60 5度的水浴上振搖15 min以上，冷卻至室溫。加入7 ml的水和25.0 ml的萃取劑。將塞子擰緊，如有必要，劇烈振搖60 s或更久使之萃取完全。 用60 ml的水沖洗燒瓶的邊緣，靜置10 min直到液面分層。（注意-不要振搖，因?yàn)橛锌赡苌扇闋钜海⒂袡C(jī)層的溶液，如有必要定量稀釋后得到溶液的濃度為3.4 g/mL的維生素A。片劑的樣品溶液：準(zhǔn)備一定數(shù)量的片劑的粉末。稱取相當(dāng)于1.3 mg的維生素A的粉末，轉(zhuǎn)移至125 ml具塞燒瓶中。加入5 ml的水

21、，15 ml的稀釋劑，和3 ml的氫氧化鉀溶液。將塞子擰緊，在60 5度的水浴上振搖15 min以上，冷卻至室溫。加入7 ml的水和25.0 ml的萃取劑。將塞子擰緊，如有必要，劇烈振搖60 s或更久使之萃取完全。 用6 0ml的水沖洗燒瓶的邊緣，靜置10 min直到液面分層。（注意-不要振搖，因?yàn)橛锌赡苌扇闋钜海?。將有機(jī)層的溶液，如有必要定量稀釋后得到溶液的濃度為3.4 g/mL的維生素A。色譜系統(tǒng)（參照色譜法621，系統(tǒng)適應(yīng)性）儀器：液相色譜儀檢測(cè)器：紫外335 nm色譜柱：6.2 mm 8 cm；填充物L(fēng)3柱溫：40度流速：4 ml/min進(jìn)樣量：5 0 L系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：標(biāo)準(zhǔn)溶液系統(tǒng)

22、適應(yīng)性要求相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差：不大于3.0%分析溶液：標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品溶液以維生素A（C20H30O）形式，計(jì)算維生素A標(biāo)示量的百分比含量 =(r T1 /r T2 ) (C S /C U ) 100r T1 =樣品溶液中全反式維生素A乙酸酯和13-順維生素A乙酸酯峰面積的和r T2=標(biāo)準(zhǔn)溶液中全反式維生素A乙酸酯和13-順維生素A乙酸酯峰面積的和C S =標(biāo)準(zhǔn)溶液中維生素A濃度(g/mL)C U =樣品溶液中維生素A（維生素A，C20H30O）濃度(g/mL)。方法4該方法涉及到用正己烷進(jìn)行液-液萃取來(lái)提取樣品中的維生素A，再用正己烷皂化及用四氫呋喃和乙腈的混合物（1:1）來(lái)將殘留物重新溶解。它可以用于油溶性維生素A、油和水溶性維生素A和油和水溶性礦物質(zhì)維生素A