潔凈室空調(diào)滅菌方法

1、1潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)&滅菌法和無(wú)菌保證滅菌法和無(wú)菌保證2一、潔凈廠房一、潔凈廠房概述藥片是特殊商品，除了必須嚴(yán)格控制藥片的成份以外，還必須控制微生物量。隨著科學(xué)技術(shù)的深化，發(fā)現(xiàn)細(xì)菌等微生物在空氣中難以存活，它必須依附在塵埃上才能存活。科學(xué)家和工程師根據(jù)微生物生存特性，研制不同類型的過(guò)濾器，通過(guò)多道過(guò)濾，最終根據(jù)藥片生存要求，可以達(dá)到100,000級(jí)，10,000級(jí)和100級(jí)潔凈度要求。同時(shí)，通過(guò)冷凍除濕或氯化鈣轉(zhuǎn)輪除濕方法，達(dá)到生產(chǎn)車間舒適或低濕要求，溫度也可通過(guò)換熱器控制。3一、潔凈廠房一、潔凈廠房 藥品生產(chǎn)企業(yè)必須有整潔的生產(chǎn)環(huán)境。 廠區(qū)的地面、路面及運(yùn)輸?shù)炔粦?yīng)對(duì)藥品

2、的生產(chǎn)造成污染。 生產(chǎn)、行政、生活和輔助區(qū)的總體布置應(yīng)合理，不得互相防礙。 相鄰的廠房之間的生產(chǎn)操作不得相互防礙。 在遵守國(guó)家總體工業(yè)規(guī)劃的同時(shí)，選擇大氣含塵、含菌濃度低、無(wú)有害氣體，自然環(huán)境好的區(qū)域。平面布置合理，人流、物流分開(kāi)，避免交叉污染。廠區(qū)綠化盡量多種草坪，少種花粉類的植物。41-11-1潔凈廠房設(shè)計(jì)潔凈廠房設(shè)計(jì) 藥廠總平面布置和工藝布局的總設(shè)計(jì)藥廠總平面布置和工藝布局的總設(shè)計(jì)整潔的生產(chǎn)環(huán)境，人流物流分開(kāi)，相互不受影響，不會(huì)造成交叉污染。 潔凈廠房設(shè)計(jì)方法潔凈廠房設(shè)計(jì)方法全封閉全空調(diào)，人流物流放開(kāi)潔凈度通過(guò)緩沖逐級(jí)提高，達(dá)到無(wú)菌的要求。100級(jí)無(wú)菌室的設(shè)計(jì)，目前國(guó)際上一般采用比較經(jīng)濟(jì)

3、的做法：通過(guò)緩沖達(dá)到10萬(wàn)級(jí)，再通過(guò)緩沖達(dá)到1萬(wàn)級(jí)，最后在1萬(wàn)級(jí)房間局部加層流罩達(dá)到100級(jí)。51-21-2工藝布局工藝布局 按照生產(chǎn)工藝流程及所要求的空氣潔凈等級(jí)進(jìn)行合的理布局按照生產(chǎn)工藝流程及所要求的空氣潔凈等級(jí)進(jìn)行合的理布局，同一廠房?jī)?nèi)的生產(chǎn)操作不能相互影響，不同潔凈度區(qū)域之，同一廠房?jī)?nèi)的生產(chǎn)操作不能相互影響，不同潔凈度區(qū)域之間人員和物流出入，要設(shè)緩沖區(qū)，防止交叉污染。間人員和物流出入，要設(shè)緩沖區(qū)，防止交叉污染。 取樣室（可設(shè)在儲(chǔ)藏區(qū)）、稱量室、備料間空氣潔凈度與生取樣室（可設(shè)在儲(chǔ)藏區(qū)）、稱量室、備料間空氣潔凈度與生產(chǎn)要求一產(chǎn)要求一 致。致。 足夠大的中間儲(chǔ)藏室、設(shè)備清洗和儲(chǔ)存、衛(wèi)生設(shè)備

4、清洗和儲(chǔ)存。 生產(chǎn)區(qū)和包裝區(qū)分開(kāi)，更衣室分開(kāi)。 不同潔凈度工作服分別清洗、整理。 取樣室、中心稱量室，采用層流設(shè)計(jì)。61-31-3 潔凈廠房建筑要求潔凈廠房建筑要求潔凈室（區(qū)）的內(nèi)表面應(yīng)平整光滑、無(wú)裂縫、接口嚴(yán)密、無(wú)顆潔凈室（區(qū)）的內(nèi)表面應(yīng)平整光滑、無(wú)裂縫、接口嚴(yán)密、無(wú)顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒。墻壁與地面的交界處宜成弧粒物脫落，并能耐受清洗和消毒。墻壁與地面的交界處宜成弧形或采取其他措施，以減少灰塵積聚和便于清潔。形或采取其他措施，以減少灰塵積聚和便于清潔。 潔凈室（區(qū)）內(nèi)各種管道、燈具、風(fēng)口以及其他公用設(shè)施，在潔凈室（區(qū)）內(nèi)各種管道、燈具、風(fēng)口以及其他公用設(shè)施，在設(shè)計(jì)和安裝時(shí)，應(yīng)考慮使

5、用中避免出現(xiàn)不易清潔的部位。與墻設(shè)計(jì)和安裝時(shí)，應(yīng)考慮使用中避免出現(xiàn)不易清潔的部位。與墻壁或天棚的連接部均應(yīng)密封。壁或天棚的連接部均應(yīng)密封。 潔凈室（區(qū)）應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)要求提供足夠的照明。主要工作室的照度宜為300勒克斯，對(duì)照度有特殊要求的生產(chǎn)部位可設(shè)置局部照明。廠房應(yīng)有緊急照明設(shè)施。 潔凈室（區(qū)）安裝的水池、地漏不得對(duì)藥品產(chǎn)生污染。100級(jí)潔凈 （區(qū)）不得設(shè)置地漏。71-41-4空調(diào)設(shè)計(jì)空調(diào)設(shè)計(jì)1-4-1 空氣平衡和流向 空氣從潔凈室流向次潔凈室。 生產(chǎn)區(qū)對(duì)外保持正壓（生產(chǎn)區(qū)對(duì)外保持正壓（1010PAPA） 活性物質(zhì)生產(chǎn)室保持負(fù)壓。 易產(chǎn)生粉塵的車間為負(fù)壓。 開(kāi)口工段為正壓。（或局部層流） 潔凈設(shè)

6、備間為負(fù)壓。 潔凈房間對(duì)隔層和機(jī)房為正壓。 生產(chǎn)車間內(nèi)辦公室保持正壓。81-41-4空調(diào)設(shè)計(jì)空調(diào)設(shè)計(jì)1-4-2 氣體組織 包裝車間、更衣室、走廊和浴室采用上送上回。 生產(chǎn)車間、灌裝車間、儲(chǔ)藏室采用上送下回。生產(chǎn)車間、灌裝車間、儲(chǔ)藏室采用上送下回。 潔凈車間不得采用走廊回風(fēng)。 潔凈區(qū)無(wú)法采用上送下回時(shí)，可采用側(cè)送側(cè)回，但要注意氣流是否流過(guò)生產(chǎn)操作面。 風(fēng)口設(shè)置時(shí)，注意氣體流能保護(hù)操作面。91-51-5 環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證1-5-1 環(huán)境控制確認(rèn)確認(rèn)100級(jí)無(wú)菌區(qū)，10,000級(jí)和100,000級(jí)潔凈區(qū)，輔助潔凈區(qū)室塵埃粒子的控制。 安裝確認(rèn)環(huán)境控制區(qū)域相應(yīng)的被批準(zhǔn)的設(shè)計(jì)圖及有關(guān)流向圖（空氣

7、流向、壓差、溫度、濕度、人流、物流）。系統(tǒng)描述和設(shè)計(jì)特征。有關(guān)文件有：DOP測(cè)試、完整性試驗(yàn)、環(huán)境參數(shù)文件 儀表校驗(yàn)文件、操作手冊(cè)和標(biāo)準(zhǔn)操作法。101-51-5 環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證 運(yùn)行確認(rèn)確認(rèn)整個(gè)環(huán)境調(diào)試、運(yùn)行時(shí)達(dá)到設(shè)計(jì)要求。搜集調(diào)試運(yùn)行時(shí)數(shù)據(jù)（溫度、相對(duì)濕度、風(fēng)速、換氣次數(shù)、風(fēng)壓、風(fēng)量、空氣流向以及機(jī)電設(shè)備運(yùn)行狀態(tài)參數(shù)）。測(cè)試總塵埃粒子和菌落數(shù)，證明系統(tǒng)運(yùn)行達(dá)到設(shè)計(jì)要求。主要性能測(cè)試：空氣平衡（空氣總風(fēng)量、新風(fēng)量、回風(fēng)量、空氣流向和空氣分配）；溫度、濕度和照度測(cè)試；空氣壓力和控制測(cè)試；懸浮粒子數(shù)測(cè)試；外界誘導(dǎo)空氣測(cè)試；粒子分散和過(guò)渡過(guò)程持續(xù)時(shí)間的測(cè)試微生物測(cè)試（懸浮菌和沉降菌）。11

8、1-51-5 環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證1-5-2 驗(yàn)證 塵埃粒子測(cè)定 浮游菌和沉降菌測(cè)定 初次測(cè)試不合格處理驗(yàn)證時(shí)，總塵埃粒子或空氣菌落數(shù)測(cè)試結(jié)果超過(guò)范圍需在不合格后緊接在原取樣點(diǎn)重做二次，二次結(jié)果合格都放入表格內(nèi)，可認(rèn)為通過(guò)驗(yàn)證。 重做菌落樣前房間需消毒12說(shuō)明說(shuō)明1 塵埃粒子、浮游菌、沉淀菌在驗(yàn)證區(qū)域滿足潔凈級(jí)別要求。2 如果超出標(biāo)準(zhǔn)，每超出標(biāo)準(zhǔn)的取樣點(diǎn)必須重新取樣2次測(cè)試。每次重新測(cè)試的結(jié)果必須符合驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)。重新測(cè)試的樣品必須盡可能在不合格結(jié)果后立刻取樣。3 重新測(cè)試取樣之前，必須清潔有菌落樣的區(qū)域。 134 4 驗(yàn)證取樣條件驗(yàn)證取樣條件4-1在取樣空氣系統(tǒng)驗(yàn)證區(qū)域必須連續(xù)運(yùn)行6小時(shí)以上

9、，層流必須運(yùn)行30分鐘以上、在取空氣有菌量的區(qū)域，必須在取樣消毒。一旦驗(yàn)證開(kāi)始，系統(tǒng)必須每天24小時(shí)，一周7天運(yùn)行。4-2 動(dòng)態(tài)是指灌裝機(jī)運(yùn)行（但無(wú)粉灌入），測(cè)試區(qū)內(nèi)有操作人員存在的情況下取樣。4-3 靜態(tài)是指在生產(chǎn)完成后，測(cè)試區(qū)無(wú)人的情況下，經(jīng)過(guò)15分鐘-20分鐘的凈化后，再對(duì)測(cè)試區(qū)進(jìn)行取樣。4-4記錄整個(gè)驗(yàn)證時(shí)期的溫度、濕度和壓差的操作參數(shù)。4-5高效過(guò)濾器每年必須進(jìn)行完整性測(cè)試和記錄。 14E-5E-5 歐洲和美國(guó)的歐洲和美國(guó)的GMPGMP對(duì)環(huán)境控制要求對(duì)環(huán)境控制要求1 1概論概論歐洲共同體藥物控制局（MACThe Medicines Control Agency）環(huán)境控制要求，驗(yàn)證環(huán)境

10、控制要達(dá)到A，B，C，D條件。美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)209E中提出無(wú)菌100級(jí)，清潔10,000級(jí)和輔助100,000級(jí)的微粒和微生物控制要求。2 2A A，B B，C C，D D分級(jí)定義分級(jí)定義A級(jí)高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)，即直接影響操作的區(qū)域。像隧道滅菌烘箱、無(wú)菌灌裝、瓶子開(kāi)口處、高壓滅菌冷卻區(qū)等需用100級(jí)層流。直接影響產(chǎn)品質(zhì)量，稱A級(jí)。B級(jí) 間接影響無(wú)菌操作區(qū)，直接環(huán)繞A級(jí)區(qū)域的地方，像無(wú)菌灌裝房間、高壓滅菌冷卻房間。 C和D級(jí)進(jìn)入無(wú)菌生產(chǎn)區(qū)的過(guò)度性潔凈區(qū)。準(zhǔn)備間、更衣間和緩沖間。153 3 歐洲潔凈級(jí)別要求歐洲潔凈級(jí)別要求 潔凈級(jí)別潔凈級(jí)別 總平均粒子數(shù)總平均粒子數(shù) 浮游菌浮游菌 沉淀菌沉淀菌歐洲（EU）20

11、9E美國(guó) 0.5M5MCFU/M3CFU/4 HoursA級(jí)（靜態(tài)） 100級(jí) 25P/ft3或875P/M3011A級(jí)（動(dòng)態(tài)） 100級(jí) 100P/ft3或3500P/M3011B級(jí)（靜態(tài)） 100級(jí) 100P/ft3或3500P/M3022B級(jí)（動(dòng)態(tài)） 10,000級(jí) 10,000P/ft3或350,000P/M358P/ft3或200P/M3555C級(jí)（靜態(tài)） 10,000級(jí) 10,000P/ft3或350,000P/M358P/ft3或 200P/M3 2020C級(jí)（動(dòng)態(tài)） 100,000級(jí) 100,000P/ft3或3,500,000P/M3580P/ft3或 20,00P/M3 5

12、050D級(jí)（靜態(tài)） 100,000級(jí) 100,000P/ft3或3,500,000P/M3580P/ft3或 20,00P/M3 10050 165 5 驗(yàn)證取樣標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證取樣標(biāo)準(zhǔn)5-1空氣有菌量應(yīng)用生物空氣取樣器取樣，使用標(biāo)準(zhǔn)TSA培養(yǎng)基盤(pán)。5-2 所有工作水平面的空氣有菌量和顆粒取樣應(yīng)在工作活動(dòng)平面層流方向取樣（灌裝線瓶子開(kāi)口處，及離地750-1000mm）。5-3 每個(gè)取樣點(diǎn)的工作水平取樣1ft3的空氣樣，測(cè)試大于等于0.5m的顆?？倲?shù)。計(jì)算每立方英尺的空氣顆粒平均數(shù)。5-4在A，B，C和D級(jí)的每個(gè)房間的工作水平應(yīng)取樣5次，每次1立方英尺，測(cè)總顆粒數(shù)。17E-6E-6 日常生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控日常

13、生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控1 1無(wú)菌生產(chǎn)區(qū)環(huán)境監(jiān)控?zé)o菌生產(chǎn)區(qū)環(huán)境監(jiān)控1-11-1生產(chǎn)潔凈級(jí)別劃分生產(chǎn)潔凈級(jí)別劃分潔凈級(jí)別潔凈級(jí)別適應(yīng)室（區(qū)）適應(yīng)室（區(qū)）EU209EA級(jí)（靜態(tài)）100級(jí) 無(wú)菌灌裝機(jī)、滅菌隧道、高壓無(wú)菌斧出料冷卻車A級(jí)（動(dòng)態(tài)）100級(jí) 同上B級(jí)（靜態(tài)）100級(jí) 無(wú)菌灌裝室（區(qū)）、高壓滅菌斧的冷卻室（區(qū)）B級(jí)（動(dòng)態(tài)）10,000級(jí) 同上C級(jí)（靜態(tài)）10,000級(jí) 進(jìn)高壓滅菌斧準(zhǔn)備間、清洗設(shè)備室、消毒、更衣、緩沖、走廊C級(jí)（動(dòng)態(tài)）100,000級(jí) 同上D級(jí)（靜態(tài)）100,000級(jí) 洗瓶、隧道、洗衣房、更衣室、第一緩沖室、進(jìn)洗室前緩沖室181-51-5 環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證1-5-3 歐美潔凈級(jí)

14、別比較潔凈級(jí)別潔凈級(jí)別 總平均粒子數(shù)總平均粒子數(shù) 浮游菌浮游菌 沉沉淀菌淀菌歐洲（EU）209E美國(guó) 0.5M5MCFU/M3CFU/4 HoursA級(jí)（靜態(tài)） 100級(jí) 25P/ft3或875P/M3011A級(jí)（動(dòng)態(tài)） 100級(jí) 100P/ft3或3500P/M3011B級(jí)（靜態(tài)） 100級(jí) 100P/ft3或3500P/M3022B級(jí)（動(dòng)態(tài)） 10,000級(jí) 10,000P/ft3或350,000P/M358P/ft3或200P/M355C級(jí)（靜態(tài)） 10,000級(jí) 10,000P/ft3或350,000P/M358P/ft3或 200P/M3 2020C級(jí)（動(dòng)態(tài)） 100,000級(jí) 10

15、0,000P/ft3或3,500,000P/M3580P/ft3或 20,00P/M3 5050D級(jí)（靜態(tài)） 100,000級(jí) 100,000P/ft3或3,500,000P/M3580P/ft3或 20,00P/M3 1005019滅菌法和無(wú)菌保證滅菌法和無(wú)菌保證 滅菌的定義：將物體上的所有微生物包括細(xì)菌芽孢全部殺死或除去的措施 。 滅菌法是指殺死或除去所有微生物的方法，是滅菌藥劑生產(chǎn)的主要過(guò)程，對(duì)于注射劑尤為重要。微生物包括細(xì)菌、真菌、病毒等，凡有生命的地方都有微生物存在，微生物繁殖很快。細(xì)菌的芽胞具有較強(qiáng)的的抗熱力，不易殺死，因此滅菌效果，應(yīng)以殺死芽胞為標(biāo)準(zhǔn)。在藥劑中選擇滅菌方法，與微生

16、物學(xué)上的要求不盡相同，不但要達(dá)到滅菌的目的，而且要保證藥物的穩(wěn)定性。常見(jiàn)的滅菌法有熱壓滅菌、干熱滅菌、紫外線照射滅菌、過(guò)濾除菌和化學(xué)藥劑滅菌。 20F與Fo值在滅菌中的意義與作用 微生物致死間曲線與D值 ：人們對(duì)微生物死亡的動(dòng)力學(xué)研究表明，其死亡速度屬一級(jí)過(guò)程，在一定溫度下符合下述方程式中N。為原始微生物數(shù)，Nt為殘存的微生物t時(shí)殘存的微生物。殘存數(shù)的對(duì)數(shù)時(shí)間作圖，得一條直線，直線的斜率K2.303，K為速度常數(shù)，單位為時(shí)間。21F與Fo值在滅菌中的意義與作用 為了方便起見(jiàn)，引用D，并定義D為一定溫度下殺死被滅菌物品中微生物數(shù)的90(降低一個(gè)對(duì)數(shù)值 )所需時(shí)間，可描述為：22F與Fo值在滅菌中

17、的意義與作用滅菌方法 微生物溫度 介質(zhì)或樣品 D值（min） 蒸汽滅菌 嗜熱脂肪芽孢桿菌1055葡萄糖水溶液 87.8蒸汽滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌1215葡萄糖水溶液2.4蒸汽滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌121注射用水3.0蒸汽滅菌梭狀芽孢桿菌1055葡萄糖水溶液1.3干熱滅菌枯草芽胞桿菌135紙16.6紅外線滅菌枯草芽胞桿菌160玻璃板18D值因微生物的種類、環(huán)境、滅菌溫度不同而各異,下表為不同滅菌法不同微生物的D值 ： 23F與Fo值在滅菌中的意義與作用 Z值：一旦在不同溫度下對(duì)特定的微生物的在特定介質(zhì)或環(huán)境中求得D值后，就可用logD值對(duì)溫度作圖，在一定溫度范圍內(nèi)，logD與T呈直線關(guān)系，直線的斜率

18、logD2logD1T2T1， 由于此斜率為負(fù)值，為避免引入負(fù)數(shù)，而提出Z值的概念，ZTT1logD2logD1，故定義Z值為降低一個(gè)logD值需的溫度數(shù)，也可以認(rèn)為Z值是降低微生物數(shù)90所需要的溫度數(shù)。24F與Fo值在滅菌中的意義與作用25F與Fo值在滅菌中的意義與作用 不同溶液以嗜熱脂肪芽孢村菌測(cè)定Z值 溶液Z值5葡萄糖水溶液10.3注射用水8.45葡萄糖乳酸鹽林格氏溶液11.3PH7磷酸緩沖液7.626F與Fo值在滅菌中的意義與作用 F值與Fo值數(shù)學(xué)表達(dá)或可表示如下： t是測(cè)量被滅菌物溫度的時(shí)間間隔， F為在一定溫度（T），給Z值所產(chǎn)生的滅菌效力與參比溫度（To）給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果

19、相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間（equivalent time）以分為單位。 27F與Fo值在滅菌中的意義與作用 Fo值 ：為一定滅菌溫度（T）Z值為121，并假設(shè)特別耐濕熱的微生物指示劑（嗜熱脂肪芽胞桿菌）的Z值為10，則 顯然，F(xiàn)o值為一定滅菌溫度（T）Z值為10 所產(chǎn)生的滅菌效果力相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間（分）。也就是說(shuō)Fo是將各種滅菌溫度使微生物的致死力轉(zhuǎn)換為滅菌物品完全暴露于121使微生物致死效力。 28滅菌法和無(wú)菌保證滅菌法和無(wú)菌保證 Fo值的計(jì)算對(duì)于驗(yàn)證滅菌效果極為有用，故用Fo來(lái)監(jiān)測(cè)滅菌效果肯有重要的意義。由于Fo是將不同滅菌溫度折算到相當(dāng)于121濕熱滅菌時(shí)的效力，故Fo值可作為滅菌過(guò)程的比較參

20、數(shù)。 當(dāng)產(chǎn)品以121濕熱滅菌時(shí)，滅菌器內(nèi)的溫度雖能迅速升到121，而被菌物品內(nèi)部則不然，通過(guò)由于包裝材料性能及其他因素影響而使。升溫度各異，而Fo將隨著產(chǎn)品溫度（T）變化而呈指數(shù)的變化。故溫度即使很小的差別（如0.1-1）,將對(duì)Fo值產(chǎn)生顯著的影響。所以要求測(cè)定滅菌物品內(nèi)的實(shí)際溫度。 29滅菌法和無(wú)菌保證滅菌法和無(wú)菌保證 為了使Fo測(cè)定準(zhǔn)確，先應(yīng)選擇靈敏度高，重現(xiàn)性好，精密度為0.1的熱電偶，并對(duì)熱電偶進(jìn)行校驗(yàn)。滅菌時(shí)應(yīng)將熱電偶的探針置于被測(cè)物的內(nèi)部，經(jīng)滅菌器通向柜外的濕度記錄儀，有些滅菌記錄儀（digistrip recolder）附有Fo計(jì)算器，在滅菌過(guò)程中和滅菌后，自動(dòng)顯示Fo值。 另外

21、，還應(yīng)考慮一些其他因素對(duì)Fo值的影響，有人對(duì)溶液粘度，容器充填量及容器在滅菌器內(nèi)的數(shù)量與排布進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)Fo均有影響，而以后者影響最大。故要注意滅菌器內(nèi)各層、四角、中間位置熱分布是否均勻，并進(jìn)行實(shí)際測(cè)定，作出合理排布，以便測(cè)得Fo值更可靠。 30滅菌方法滅菌方法無(wú)菌保證值（Sterility Assurance Level即SAL）：我國(guó)及歐美藥典都把無(wú)菌保證值（ SAL ）不得大于百萬(wàn)分之一作為最終滅菌產(chǎn)品無(wú)菌保證的要求，即SAL106在Fo的計(jì)算時(shí)則使用以下定義： 無(wú)菌保證值（ SAL ）lg（微生物存活概率）6（F0 D污 lgN污）/ D污6F0D污（lgN污+6） 其中D污

22、為污染菌的D121值，N污為滅菌前污染菌的數(shù)量。 在生產(chǎn)實(shí)踐中，耐熱性差的產(chǎn)品，在F0小于8時(shí)，只要強(qiáng)化工藝控制手段，仍能達(dá)到無(wú)菌的標(biāo)準(zhǔn)，相反當(dāng)工藝失控時(shí)，即使F0大于8，也不一定能達(dá)到無(wú)菌要求。31滅菌法和無(wú)菌保證滅菌法和無(wú)菌保證 因產(chǎn)品熱穩(wěn)定性較差，所選滅菌程序?yàn)椋?0960min，所以在生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格對(duì)微生物進(jìn)行控制。 首先在灌裝開(kāi)始和結(jié)束各取樣10瓶，置于100下曝?zé)?0min，進(jìn)行需氧和厭氧條件培養(yǎng)，應(yīng)不長(zhǎng)菌，證明產(chǎn)品中不存在耐熱孢子，可設(shè)定產(chǎn)品中污染菌的耐熱性（D121）不超過(guò)0.5。 故使用D121為0.7的枯草芽孢桿菌做為生物指示劑，進(jìn)行生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)。以確認(rèn)產(chǎn)品的無(wú)菌保證值S

23、AL達(dá)到6。 32滅菌方法滅菌方法根據(jù)公式 F0D污（lgN污+6）= DBi（lgNBi+1） 其中D污為污染菌的D121值，N污為滅菌前污染菌的數(shù)量， DBi為生物指示劑的D121值，NBi為生物指示劑的用量。F0值的計(jì)算：查得L為0.063，故F00.063603.78加上升溫及降溫階段，實(shí)際F0可達(dá)5以上。為保險(xiǎn)起見(jiàn)，取F04.9進(jìn)行計(jì)算污染菌數(shù)的控制計(jì)算：F0D污（lgN污+6） 將F04.9和D污0.3代入，得 lgN污（4.9-0.56）/0.53.75 N污5.6103生物指示劑用量計(jì)算：F0DBi（lgNBi+1） 將F04.9和DBi0.6代入，得lgNBi（4.9-0.7

24、）/0.76 N污1.010633滅菌方法滅菌方法 常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過(guò)濾除菌法?？筛鶕?jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。只要產(chǎn)品允許，應(yīng)盡可能選用最終滅菌法（即產(chǎn)品分裝至包裝容器后再滅菌）滅菌。若產(chǎn)品不適合采用最終滅菌法，可選用過(guò)濾除菌法或無(wú)菌生產(chǎn)工藝達(dá)到無(wú)菌保證要求，只要可能，應(yīng)對(duì)非最終滅菌的產(chǎn)品作補(bǔ)充性滅菌處理（如流通蒸汽滅菌）。 34滅菌方法滅菌方法 一、濕熱滅菌法 本法系指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽、過(guò)熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法 。該法滅菌能力強(qiáng)，為熱力滅菌中最有效、應(yīng)用最廣泛的

25、滅菌方法。藥品、容器、培養(yǎng)基、無(wú)菌衣、膠塞以及其它遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品，均可用本法滅菌。流通蒸汽不能完全殺滅細(xì)菌孢子，一般可作為不耐熱無(wú)菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。 35滅菌方法滅菌方法 濕熱滅菌條件采用的程序多種，但必須保證物品滅菌后的SAL10-6。對(duì)熱穩(wěn)定的物品，可采用過(guò)度殺滅法，其SAL應(yīng)10-12。熱敏感產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0可低于8min，但應(yīng)在生產(chǎn)全過(guò)程中，對(duì)產(chǎn)品中污染的微生物嚴(yán)加監(jiān)控，并采取各種措施防止耐熱菌污染及降低微生物污染水平，確保被滅菌產(chǎn)品達(dá)到無(wú)菌保證要求。36滅菌方法滅菌方法 濕熱滅菌工藝驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)進(jìn)行熱分布試驗(yàn)、熱穿透試驗(yàn)和生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)。以確定滅菌柜空載及不同裝載時(shí)腔室中的熱分布狀況及可能存在的冷點(diǎn)；在空載條件下，確認(rèn)121時(shí)腔室各點(diǎn)的溫度差值應(yīng)1；使用插入實(shí)際物品或模擬物品內(nèi)的溫度探頭，確認(rèn)滅菌柜在不同裝載時(shí)，最冷