生理學(xué)ABO血型鑒定試驗報告

1、實驗名稱：ABO血型鑒定實驗人員：實驗日期： 年 月 日室溫：27C大氣壓：1個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓（一）實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)ABO型血的鑒定原理和方法。觀察紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象，了解抗原抗體反應(yīng)。（二）實驗原理血型就是紅細(xì)胞膜上特異抗原的類型。在ABO血型系統(tǒng)中，紅細(xì)胞膜上抗原分 A和B兩種抗原，而血清抗體分抗 A和抗B兩種抗體。A抗原加抗A抗體或B抗原加 抗B抗體，則產(chǎn)生凝集現(xiàn)象。血型鑒定是將受試者的紅細(xì)胞加入標(biāo)準(zhǔn)A型血清（含有抗B抗體）與標(biāo)準(zhǔn)B型血清（含有抗 A抗體）中，觀察有無凝集現(xiàn)象，從而測 知受試者紅細(xì)胞膜上有無 A或/和B抗原。在ABO血型系統(tǒng)，根據(jù)紅細(xì)胞膜上是否 含A、B抗原而分為A B、AB O四型

2、。（三）實驗材料消毒采血針；載玻片；消毒棉簽；抗 A、抗B血型定型試劑；75%乙醇；受檢者血液（四）實驗步驟（1） 取雙凹玻片一塊，用干凈紗布輕拭使之潔凈， 在玻片兩端用臘筆標(biāo)明 A及B, 并分別各滴入A及B標(biāo)準(zhǔn)血清一滴。（2） 細(xì)胞懸液制備從指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml 生理鹽水的小試管內(nèi)，混 勻，即得約 5紅細(xì)胞懸液。采血時應(yīng)注意先用 75酒精消毒指尖或耳垂。（ 3）用滴管吸取紅細(xì)胞懸液，分別各滴一滴于玻片兩端的血清上，注意勿使滴管與血清相接觸（4）竹簽兩頭分別混合，攪勻（5）1030min后觀察結(jié)果。如有凝集反應(yīng)可見到呈紅色點(diǎn)狀或小片狀凝集塊浮 起。先用肉眼看有無凝集現(xiàn)象，肉眼不易分

3、辨時，則在低倍顯微鏡下觀察，如有 凝集反應(yīng)，可見紅細(xì)胞聚集成團(tuán)。（6）判斷血型根據(jù)被試者紅細(xì)胞是否被 A，B型標(biāo)準(zhǔn)血清所凝集，判斷其血型（五）實驗結(jié)果：表1實驗情況標(biāo)準(zhǔn)A血清標(biāo)準(zhǔn)B血清人血凝集情況不凝集凝集從上表可知：人血與標(biāo)準(zhǔn) A血清（含抗B抗體）混合后不發(fā)生凝集；人血與標(biāo)準(zhǔn) B 血清（含抗A抗體）混合后發(fā)生凝集。（六）討論：血型通常是指紅細(xì)胞膜上特異性抗原的類型。若將血型不相容的兩個人的血液滴加在玻片上并使之混合，則紅細(xì)胞可凝集成簇，這一現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞凝集。在 補(bǔ)體的作用下，可引起凝集的紅細(xì)胞破裂，發(fā)生溶血。當(dāng)給人體輸入血型不相容 的血液時，在血管內(nèi)可發(fā)生紅細(xì)胞凝集和溶血反應(yīng)，甚至危及生命

4、。紅細(xì)胞凝集 的本質(zhì)是抗原-抗體反應(yīng)。紅細(xì)胞膜上抗原的特異性取決于抗原決定簇，這些抗原 在凝集反應(yīng)中被稱為凝集原。能與紅細(xì)胞膜上的凝集原起反應(yīng)的特異抗體則稱為 凝集素。凝集素為丫 -球蛋白，存在于血漿中。發(fā)生抗原 -抗體反應(yīng)時，由于每個 抗體上具有210個抗原結(jié)合位點(diǎn)，因此抗體可在若干個帶有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞 之間形成橋梁，使它們聚集成簇，從而發(fā)生凝血。根據(jù)紅細(xì)胞膜上是否存在A抗原和B抗原可將血液分為四種 ABO血型：紅細(xì)胞膜上只含有 A抗原者為A型；只 含B抗原者為B型；含有A與B兩種抗原者為AB型；A和B兩種抗原均無者為 0 型。不同血型的人的血清中含有不同的抗體，但不會含有與自身紅細(xì)胞抗原

5、相對 應(yīng)的抗體。在A型血的血清中，只含有抗B抗體；B型血的血清中只含有抗 A抗體； AB型血的血清中沒有抗 A和抗B抗體；而0型血的血清中則含有抗 A和抗B兩種 抗體。表2 ABO血型中的抗原和抗體血型紅細(xì)胞膜上所含的抗原血清中所含的抗體0無A也無B抗A和抗BAA抗BBB抗AABA和B無抗A也無抗B正確鑒定血型是保證輸血安全的基礎(chǔ)。常規(guī)ABO血型的定型包括正向定型和反向定型。正向定型是用抗 A與抗B抗體檢測來檢查紅細(xì)胞上有無 A或B抗體；反向抗體是用已知血型的紅細(xì)胞檢測血清中有無抗A或抗B抗體，結(jié)果見表10-3.同時進(jìn)行正向定型和反向定型是為了相互印證。表3 紅細(xì)胞常規(guī)ABC定型（+為發(fā)生凝集；為不凝集）正向定型反向定型血型B型血清A型血清