微生物學(xué)的重點(diǎn)知識

1、微生物學(xué)的重點(diǎn)知識1676年，微生物學(xué)的先驅(qū)荷蘭人列文虎克（Antony van leeuwenhoek，微生物的發(fā)現(xiàn)者）首次觀察到了細(xì)菌。1、法國人巴斯德（Louis Pasteur）（18221895）(1) 發(fā)現(xiàn)并證實發(fā)酵是由微生物引起的；(2) 徹底否定了“自然發(fā)生”學(xué)說：著名的曲頸瓶試驗無可辯駁地證實，空氣內(nèi)確實含有微生物，是它們引起有機(jī)質(zhì)的腐敗；(3) 免疫學(xué)預(yù)防接種：巴斯德研究了幾種對人類和牲畜危害很大的疾病，如雞瘟、牛羊炭疽病、人的狂犬病等，并發(fā)現(xiàn)引起這些病害的病原體，制成疫苗，用以預(yù)防和治療疾病，為免疫學(xué)奠定基礎(chǔ)。（挽救了許多人、畜生命）。 (4)其他貢獻(xiàn)如巴斯德消毒法：60

2、65作短時間（15-20min）加熱處理，殺死有害微生物的方法。2、德國人柯赫（Robert Koch）（18431910）（1）微生物學(xué)基本操作技術(shù)方面的貢獻(xiàn)a）細(xì)菌純培養(yǎng)方法的建立；b）設(shè)計了各種培養(yǎng)基，實現(xiàn)了在實驗室內(nèi)對各種微生物的培養(yǎng)；c）流動蒸汽滅菌；d）染色觀察和顯微攝影；（2）對病原細(xì)菌的研究作出了突出的貢獻(xiàn)a）具體證實了炭疽桿菌是炭疽病的病原菌；b）發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌（1905年獲諾貝爾獎）；c）證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則著名的柯赫原則（四）微生物學(xué)發(fā)展過程中的重大事件1928 Griffith 發(fā)現(xiàn)細(xì)菌轉(zhuǎn)化；1929 Fleming 發(fā)現(xiàn)青霉素；1953

3、 Watson和Crick提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)； 1977 Woese 提出古生菌是不同于細(xì)菌和真核生物的特殊類群；19821983 Prusiner發(fā)現(xiàn)朊病毒(prion)；1995 第一個獨(dú)立生活的細(xì)菌(流感嗜血桿菌)全基團(tuán)組序列測定完成；1997 第一個真核生物 (啤酒酵母) 基因組測序完成。湯飛凡：沙眼病原體的分離和確證（國際領(lǐng)先）；2、保藏技術(shù)使其在一定時間內(nèi)不死亡 不會被其他微生物污染，不會因發(fā)生變異而丟失重要的生物學(xué)性狀。3、決定顯微鏡效果的三大因素：放大；分辨率（能辨別兩點(diǎn)之間最小距離的能力）；反差（被觀察物區(qū)別于背景的程度）。4、不同顯微鏡物鏡的分辨率：搜索物鏡：2.3um

4、低倍鏡：0.9um 高倍鏡：0.35um 油鏡：0.18um5、不具細(xì)胞結(jié)構(gòu)的病毒、類病毒，6、細(xì)菌的形態(tài)可分為：球狀、桿狀、螺旋狀三種。7、根據(jù)菌絲的形態(tài)和功能可分為：營養(yǎng)菌絲、氣生菌絲和孢子絲三種。8、四肽尾的第3個氨基酸不是L-Lys,而是被一種只有在原核微生物細(xì)胞壁上才有的內(nèi)消旋二氨基庚二酸所代替。9、革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有什么異同？各有哪些化學(xué)組成？答：革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁厚約20-80nm，結(jié)構(gòu)較簡單，含肽聚糖，革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁厚約10nm，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，分外壁層和內(nèi)壁層，外壁層又分三層：最外層是脂多糖，中間是磷脂層，內(nèi)層是脂蛋白。內(nèi)壁含肽聚糖，不含磷壁酸。化學(xué)組成：

5、革蘭氏陽性菌含大量肽聚糖，含獨(dú)磷壁酸，不含脂多糖。革蘭氏陰性菌含極少肽聚糖，含獨(dú)脂多糖，不含磷酸壁。10、敘述革蘭氏染色的機(jī)制和步驟。答：將一大類細(xì)菌染上色，而另一類染不上色，一邊將兩大類細(xì)菌分開，作為分類鑒定重要的第一步。其染色步驟如下：1在無菌操作條件下，用接種環(huán)挑取少量細(xì)菌于干凈的載玻片上涂布均勻，固定。2用草酸銨結(jié)晶紫染色1min，水洗去掉浮色。3用碘碘化鉀溶液媒染1min，傾去多余溶液。4用中型脫色劑如乙醇或丙酮酸脫色，革蘭氏陽性菌不被褪色而呈紫色。革蘭氏陰性菌被褪色而成無色5用蕃紅染液復(fù)染1min，格蘭仕陽性菌仍呈紫色，革蘭氏陰性菌則呈現(xiàn)紅色。革蘭氏陽性菌和格蘭仕陰性菌即被區(qū)分開。

6、11、微生物的五大共性 （1）體積小、面積大；（2）吸收多、轉(zhuǎn)化快；（3）生長旺、繁殖快；（4）適應(yīng)強(qiáng)、易變異；（5）分布廣、種類多。 12、芽孢的耐熱性在于芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差和皮層的離子強(qiáng)度很高，從而使皮層產(chǎn)生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分，其結(jié)果造成皮層的充分膨脹，而核心部分的細(xì)胞質(zhì)卻變得高度失水，因此，導(dǎo)致核心具極強(qiáng)的耐熱性13、生長因子分為：氨基酸、維生素、嘧啶和嘌呤14、配置培養(yǎng)基的原則和方法1）、選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)；實驗室的常用培養(yǎng)基： 細(xì)菌：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（或簡稱普通肉湯培養(yǎng)基）；放線菌：高氏1號合成培養(yǎng)基；酵母菌：麥芽汁培養(yǎng)基；霉菌：查氏合成培養(yǎng)基；2）

7、、營養(yǎng)物的濃度及配比合適：C/N3）、控制pH條件4）、控制氧化還原電位5）、原料來源的選擇6）、滅菌處理15、培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用1按成份不同劃分：1）天然培養(yǎng)基(complex medium)：2）合成培養(yǎng)基(synthetic medium)： 2根據(jù)物理狀態(tài)劃分：固體培養(yǎng)基；半固體培養(yǎng)基；液體培養(yǎng)基。3按用途劃分：1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimum medium)：2）完全培養(yǎng)基(complete medium)：3）加富培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基(enrichment medium)4）鑒別培養(yǎng)基(differential medium) （參見P88）5）選擇培養(yǎng)基(selective medi

8、um)如 醋酸鉛培養(yǎng)基和伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基是：A、選擇培養(yǎng)基；B、鑒別培養(yǎng)基；C、加富培養(yǎng)基；D、基本培養(yǎng)基16、影響營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的因素有三個：1）營養(yǎng)物質(zhì)本質(zhì)的性質(zhì) 2）微生物所處的環(huán)境 3）微生物細(xì)胞的透過屏障17、微生物的物質(zhì)運(yùn)輸?shù)姆绞剑阂?、簡單擴(kuò)散（diffusion） 特點(diǎn)：1）被動的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式；2）物質(zhì)運(yùn)輸過程中不消耗能量；3）不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸；4）運(yùn)輸速率與膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差成正比。擴(kuò)散并不是微生物細(xì)胞吸收營養(yǎng)物質(zhì)的主要方式，水是唯一可以通過擴(kuò)散自由通過原生質(zhì)膜的分子，脂肪酸、乙醇、甘油、苯、一些氣體分子(O2、CO2)及某些氨基酸在一定程度上也可通過擴(kuò)散進(jìn)出細(xì)胞。二、促

9、進(jìn)擴(kuò)散（facilitated diffusion）特點(diǎn)：1）被動的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式；2）物質(zhì)運(yùn)輸過程中不消耗能量；3）參與運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)在運(yùn)輸過程中不發(fā)生化學(xué)變化；4）不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸；運(yùn)輸速率與膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差成正比；5）有載體(carrier)參與。通過促進(jìn)擴(kuò)散進(jìn)行跨膜運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)需要借助與載體(carrier)的作用才能進(jìn)入細(xì)胞，而且每種載體只運(yùn)輸相應(yīng)的物質(zhì)，具有較高的專一性。被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)有：氨基酸、單糖、維生素、無機(jī)鹽等三、主動運(yùn)輸（active transport）特點(diǎn)：1）主動的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式；2）物質(zhì)運(yùn)輸過程中需要消耗能量（ATP）；3）可以進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸；4）有載體（carr

10、ier）參與。18、糖酵解主要有四種途徑：EMP途徑、HMP途徑、ED途徑、磷酸解酮酶途徑。19、 大量元素：凡是生長所需濃度在10-310-4mol/L范圍內(nèi)的元素，可稱為大量元素，包括P、S、K、Mg、Ca、Na和Fe等。 微量元素：凡是生長所需濃度在10-610-8mol/L范圍內(nèi)的元素，則稱為微量元素，包括Cu、Zn、Mn、Mo、和Co等。20、在生產(chǎn)實踐中縮短遲緩期的常用手段（參見P130）：(1) 通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短；(2) 利用對數(shù)生長期的細(xì)胞作為種子；(3) 盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大；(4) 適當(dāng)擴(kuò)大接種量21、抗生素作用機(jī)制：抑制細(xì)

11、菌細(xì)胞壁合成：如青霉素等；破壞細(xì)胞質(zhì)膜：如多粘菌素、短桿菌肽等；作用于呼吸鏈以干擾氧化磷酸化；抑制蛋白質(zhì)合成：如四環(huán)素、紅霉素、鏈霉素等；抑制核酸合成等：如灰黃霉素、放線菌素D等；22、絲狀真菌的生長繁殖主要有：無性孢子、有性孢子和準(zhǔn)性繁殖23、病毒區(qū)別于其他微生物的原因是具有獨(dú)特的繁殖方式。24、植物病毒用敏感植物葉片產(chǎn)生壞死斑或稱枯斑。25、毒粒結(jié)構(gòu)類型：裸露的螺旋毒粒；裸露的二十面體毒粒；有包膜的二十面體毒粒和有包膜的螺旋毒粒26、毒粒殼體結(jié)構(gòu)類型：螺旋對稱殼體；二十面體對稱殼體；雙對稱結(jié)構(gòu)27、什么是一步生長曲線？它可分幾期？各期有何特點(diǎn)？ 一步生長曲線 ： 定量描述烈性噬菌體增殖規(guī)律

12、的實驗曲線稱作一步生長曲線或一級生長曲線。兩個特征性的數(shù)據(jù)：潛伏期 從噬菌體吸附細(xì)菌細(xì)胞至細(xì)菌細(xì)胞釋放出新的噬菌體的最短時間。又可分為隱晦期和胞內(nèi)累積期。裂解量 每個被感染的細(xì)菌釋放新的噬菌體的平均數(shù)28、病毒的復(fù)制周期：自病毒吸附于細(xì)胞開始，到子代病毒從感染細(xì)胞釋放到細(xì)胞外的病毒復(fù)制過程。 吸附； 侵入； 脫殼； 病毒大分子的合成； 裝配與釋放。28、非增值性感染的類型：流產(chǎn)感染、限制性感染、潛伏感染。29、溶源轉(zhuǎn)變：原噬菌體引起的溶源性細(xì)菌除免疫性外的其他的表形改變，包括溶源菌細(xì)胞表面性質(zhì)的改變和致病性轉(zhuǎn)變被稱為溶源轉(zhuǎn)變 (lysogenic conversion)。30、亞病毒因子包括衛(wèi)星病毒和朊病毒。31、微生物基因組結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)1、原核生物（細(xì)菌、古生菌）的基因組1）染色體為雙鏈環(huán)狀的DNA分子（單倍體）；2）基因組上遺傳信息具有連續(xù)性；3）功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)；4）結(jié)構(gòu)基因的單拷貝及rRNA基因的多拷貝；5）基因組的重復(fù)序列少而短。2、真核微生物（啤酒酵母）的基因組1）典型的真核染色體結(jié)構(gòu)；2）沒有明顯的操縱子結(jié)構(gòu)；3）有間隔區(qū)（即非編碼區(qū)）和內(nèi)含子序列；4）重復(fù)序列多。32、質(zhì)粒的主要類型：1）、致育因子2）、抗性因子3）、Col質(zhì)粒4）、毒性質(zhì)粒5）、代