生化檢驗報告的審核經(jīng)典實用

1、生化檢驗報告的審核臨床生化檢驗反應原理臨床生化檢驗反應原理及報告的審核及報告的審核生化檢驗報告的審核主要內(nèi)容主要內(nèi)容常見的生化反應原理常見的生化反應原理檢驗報告審核普遍存在的問題檢驗報告審核普遍存在的問題檢驗報告審核的建議檢驗報告審核的建議總結總結生化檢驗報告的審核終點分析法（平衡法）終點分析法（平衡法） 連續(xù)監(jiān)測法連續(xù)監(jiān)測法比濁測定法比濁測定法一、常見的生化反應原理一、常見的生化反應原理生化檢驗報告的審核 終點分析法是基于反應達到平衡時反應產(chǎn)物的終點分析法是基于反應達到平衡時反應產(chǎn)物的吸收光譜特征及其對光吸收強度的大小，對物質進吸收光譜特征及其對光吸收強度的大小，對物質進行定量的一類分析方法

2、。反應混合物進行一定時間行定量的一類分析方法。反應混合物進行一定時間反應后，達到平衡終點，即在顯色反應處于穩(wěn)定階反應后，達到平衡終點，即在顯色反應處于穩(wěn)定階段時，監(jiān)測其顏色對光的吸收強度，以此計算待測段時，監(jiān)測其顏色對光的吸收強度，以此計算待測物濃度。分為一點、兩點終點法物濃度。分為一點、兩點終點法終點分析法終點分析法生化檢驗報告的審核一點終點法一點終點法 一點終點法：一點終點法的特點是使用一點終點法：一點終點法的特點是使用一種或兩種試劑。當樣品和試劑混合后，待一種或兩種試劑。當樣品和試劑混合后，待測物與試劑的物理化學反應達到終點時，測測物與試劑的物理化學反應達到終點時，測定吸光度，計算待測物

3、質的濃度。該法要求定吸光度，計算待測物質的濃度。該法要求試劑本底顏色要深，該法具有代表性的試驗試劑本底顏色要深，該法具有代表性的試驗有：總蛋白、白蛋白、鎂測定有：總蛋白、白蛋白、鎂測定生化檢驗報告的審核tp反應曲線反應曲線生化檢驗報告的審核mg反應曲線反應曲線生化檢驗報告的審核 二點終點法：一般是用雙試劑，是自動二點終點法：一般是用雙試劑，是自動化生化分析儀常用的一種方法。該方法的化生化分析儀常用的一種方法。該方法的優(yōu)點是可以消除樣品、試劑的顏色、濁度優(yōu)點是可以消除樣品、試劑的顏色、濁度以及一些干擾物質的影響。代表性的試驗以及一些干擾物質的影響。代表性的試驗有葡萄糖等有葡萄糖等兩點終點法兩點終

4、點法生化檢驗報告的審核cre反應曲線反應曲線生化檢驗報告的審核 測定底物的消耗或產(chǎn)物生成的速度的化學測定底物的消耗或產(chǎn)物生成的速度的化學方法稱為連續(xù)監(jiān)測法（又稱動態(tài)分析法、速率方法稱為連續(xù)監(jiān)測法（又稱動態(tài)分析法、速率法或動力學法）。在反應速度恒定期（零級反法或動力學法）。在反應速度恒定期（零級反應期）來連續(xù)觀察和記錄一定反應時間內(nèi)底物應期）來連續(xù)觀察和記錄一定反應時間內(nèi)底物或產(chǎn)物量的變化。以單位時間酶促反應初速度或產(chǎn)物量的變化。以單位時間酶促反應初速度計算酶活力的大小和代謝物的濃度。計算酶活力的大小和代謝物的濃度。連續(xù)監(jiān)測法連續(xù)監(jiān)測法生化檢驗報告的審核酶促反應進程曲線酶促反應進程曲線生化檢驗報

5、告的審核酶促反應進程曲線酶促反應進程曲線生化檢驗報告的審核典型酶聯(lián)法反應曲線典型酶聯(lián)法反應曲線生化檢驗報告的審核amy反應曲線反應曲線生化檢驗報告的審核alt反應曲線反應曲線生化檢驗報告的審核 通過檢測物質對光的散射或透射強度通過檢測物質對光的散射或透射強度來測定物質的方法稱比濁法。比濁法可來測定物質的方法稱比濁法。比濁法可分為化學比濁法和免疫比濁法，免疫比分為化學比濁法和免疫比濁法，免疫比濁法又分為透射比濁和散射比濁。全自濁法又分為透射比濁和散射比濁。全自動生化儀常用透射比濁法，常用于特種動生化儀常用透射比濁法，常用于特種蛋白測定。其工作曲線為拋物線。蛋白測定。其工作曲線為拋物線。 比濁測定

6、法比濁測定法生化檢驗報告的審核比濁測定法比濁測定法注意事項：注意事項：抗原或抗體量（測定物）大大過剩，可出現(xiàn)可抗原或抗體量（測定物）大大過剩，可出現(xiàn)可溶性復合物，造成誤差。溶性復合物，造成誤差。應維持反應管中抗體蛋白（底物）始終過剩。應維持反應管中抗體蛋白（底物）始終過剩。 易受到脂血的影響。易受到脂血的影響。 生化檢驗報告的審核二、報告審核中的普遍問題二、報告審核中的普遍問題責任心不強，未對結果進行認真審核責任心不強，未對結果進行認真審核對檢測儀器或試劑方法學不夠了解對檢測儀器或試劑方法學不夠了解專業(yè)知識欠缺，工作經(jīng)驗不足專業(yè)知識欠缺，工作經(jīng)驗不足對儀器檢測的結果及室內(nèi)質控結果過對儀器檢測的

7、結果及室內(nèi)質控結果過于相信于相信生化檢驗報告的審核三、報告審核的建議三、報告審核的建議結合臨床資料審核結合臨床資料審核結合分析項目間的內(nèi)在聯(lián)系審核（專業(yè)知識）結合分析項目間的內(nèi)在聯(lián)系審核（專業(yè)知識）結合影響檢驗結果因素審核結合影響檢驗結果因素審核u檢驗項目的方法學和線性檢驗項目的方法學和線性u檢驗標本的影響檢驗標本的影響u檢驗儀器性能影響檢驗儀器性能影響結合當日檢驗結果總體趨勢審核結果結合當日檢驗結果總體趨勢審核結果生化檢驗報告的審核結合臨床資料結合臨床資料 結合病人的性別、年齡、臨床診斷、其他結合病人的性別、年齡、臨床診斷、其他檢查結果審核檢查結果審核 例：某病人檢測的例：某病人檢測的tp為

8、為110g/l，該標本沒，該標本沒有脂血等影響檢測結果的因素有脂血等影響檢測結果的因素 臨床診斷：多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷：多發(fā)性骨髓瘤 另：胰島素與低血糖、病人輸注藥物對結果另：胰島素與低血糖、病人輸注藥物對結果的影響的影響生化檢驗報告的審核檢驗項目間的內(nèi)在聯(lián)系檢驗項目間的內(nèi)在聯(lián)系各檢測參數(shù)間存在大小、比例、邏輯關系各檢測參數(shù)間存在大小、比例、邏輯關系例：例：hdl-c+ldl-ctc、dbil tbil ck-mb ck(m+b) -hbdh ldh(h+m) 原發(fā)性甲亢：原發(fā)性甲亢：t3、t4 、tsh等等生化檢驗報告的審核影響檢驗結果的因素影響檢驗結果的因素 試劑線性范圍：試劑線性范圍：

9、了解檢驗項目試劑的線性范圍，對超過了解檢驗項目試劑的線性范圍，對超過或低于范圍的項目，必須進行相應的減量稀釋或低于范圍的項目，必須進行相應的減量稀釋或增量后重新測定?；蛟隽亢笾匦聹y定。生化檢驗報告的審核線性范圍線性范圍 在實際工作中，用連續(xù)監(jiān)測法會遇到檢驗在實際工作中，用連續(xù)監(jiān)測法會遇到檢驗結果為結果為0或者負值的情況，此時不能盲目相信或者負值的情況，此時不能盲目相信該結果低就出具低值報告，應查看其反應曲線該結果低就出具低值報告，應查看其反應曲線例：某病人的尿液例：某病人的尿液amy檢測結果為檢測結果為0u/l 其反應曲線如下圖：其反應曲線如下圖：生化檢驗報告的審核amy反應曲線反應曲線生化檢

10、驗報告的審核amy反應曲線分析反應曲線分析分析：由于測定物質濃度過高分析：由于測定物質濃度過高處理：對測定物質進行十倍左右的稀釋再測定，處理：對測定物質進行十倍左右的稀釋再測定，直到反應曲線恢復正常結果才可靠直到反應曲線恢復正常結果才可靠生化檢驗報告的審核影響檢驗結果的因素影響檢驗結果的因素檢測項目的方法學：檢測項目的方法學： 要了解該項目試劑采用的方法學：要了解該項目試劑采用的方法學： 例：某病人在測定心肌酶譜時，其例：某病人在測定心肌酶譜時，其ck:246u/l、 ck-mb:286u/l，標本無溶血等因素影響，標本無溶血等因素影響 其結果中其結果中ck-mbck生化檢驗報告的審核檢測項目

11、的方法學檢測項目的方法學 分析：分析：ck是由是由m和和b兩類亞基組成的二聚體，兩類亞基組成的二聚體，其構成為其構成為ck-mb(心型心型)約占約占0-3%、 ck-mm(肌肌型型)約占約占97-100%、 ck-bb（腦型）約占（腦型）約占0-1% 生化檢驗報告的審核檢測項目的方法學檢測項目的方法學 ck-mb采用的檢測方法為免疫抑制法采用的檢測方法為免疫抑制法 原理原理:正常人體中，正常人體中，ck同工酶中同工酶中ck-mm ck-mb ck-bb,其中其中ck-bb含量極少，可忽含量極少，可忽略。免疫抑制法正是建立于忽略略。免疫抑制法正是建立于忽略ck-bb的基礎的基礎上。采用抗體抑制其

12、上。采用抗體抑制其m亞基活性，使亞基活性，使ck-mm失失去活性，而去活性，而ck-mb失去一半的活性。單測定失去一半的活性。單測定b亞基的活性，其結果亞基的活性，其結果2即為即為ck-mb活性活性生化檢驗報告的審核檢測項目的方法學檢測項目的方法學 原因分析：由于在患輕度或中度腦損傷、腦原因分析：由于在患輕度或中度腦損傷、腦 血管意外及腦手術后血管意外及腦手術后 、新生兒產(chǎn)程窒息造成、新生兒產(chǎn)程窒息造成 腦組織發(fā)生實質性損害腦組織發(fā)生實質性損害 的病人中，的病人中，ck-bb會會升高，這時該方法測定的升高，這時該方法測定的ck-mb的活性相當?shù)幕钚韵喈斢谑怯谑莄k-mb+2ck-bb的活性之和

13、，造成的活性之和，造成 ck-mb活性假性升高活性假性升高生化檢驗報告的審核檢測項目的方法學檢測項目的方法學為什么為什么ck-mb 2ck不可能不可能 該測定該測定ck-mb活性活性=ck-mb+2ck-bb,如果如果ck-bb ck-mm,結果要乘結果要乘2，即，即ck-mb+2ck-bb ck-bb+ck-mb+ck-mm,測定的測定的ck-mb 活性活性 ck活性，但活性，但ck-mb 2ck不可能不可能解決方法：其他方法測定解決方法：其他方法測定ck-mb的質量的質量 生化檢驗報告的審核檢驗標本的影響檢驗標本的影響 標本脂血會使反應濁度增加，透光度下降，標本脂血會使反應濁度增加，透光度

14、下降，吸光度增加，從而造成檢驗結果不準確。如吸光度增加，從而造成檢驗結果不準確。如tp、tg、ua顯著增高，顯著增高，ggt顯著下降或為顯著下降或為0 標本溶血會使標本溶血會使k+、alt、ast、ldh等檢驗等檢驗結果顯著升高結果顯著升高抗凝劑的錯誤使用抗凝劑的錯誤使用生化檢驗報告的審核儀器性能影響儀器性能影響 儀器老化、故障、清洗管道堵塞、水質儀器老化、故障、清洗管道堵塞、水質不純等均會對檢驗結果造成影響不純等均會對檢驗結果造成影響光路老化：表現(xiàn)為光路老化：表現(xiàn)為alt、ast等項目結果重復等項目結果重復性較差性較差水質不純、反應杯清洗不干凈：表現(xiàn)為無機物水質不純、反應杯清洗不干凈：表現(xiàn)為

15、無機物質結果不準質結果不準生化檢驗報告的審核檢驗結果的總體趨勢檢驗結果的總體趨勢 即使質控在控，也要注意當日檢驗結果的即使質控在控，也要注意當日檢驗結果的總體的分布趨勢總體的分布趨勢如如k+的參考區(qū)間為的參考區(qū)間為3.55.5，中值為，中值為4.5，如，如果當日結果大部分甚至全部低于果當日結果大部分甚至全部低于4.5，即使當，即使當日質控在控，任要考慮結果是否偏低，應重新日質控在控，任要考慮結果是否偏低，應重新校準、質控后再測定校準、質控后再測定 如在質控中如在質控中 tc(-1s),hdl (+1s) ,ldl(+1s),雖然在控，如出現(xiàn)大部分雖然在控，如出現(xiàn)大部分hdl+ldl tc，也應考慮重新對三項目校標、質控后再測定也應考慮重新對三項目校標、質控后再測定生化檢驗報告的審核四、總結四、總結不要盲目相信儀器檢測的結果一定準確不要盲目相信儀器檢測的結果一定準確檢驗人員要增強對報告審核的責任心檢驗人員要增強對