臨床血液基礎(chǔ)及血球三分類儀

1、全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（三分群）基礎(chǔ)理論一、血液生理概要1、血液：血液是由血細(xì)胞（紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板）和血漿組成的紅色、粘稠、不透明、帶腥味的混懸液。離體后的血液自然凝固后，分離出來的淡黃色液體稱為血清，血液加抗凝劑后分離出來的淡黃色液體稱為血漿。2、血液的組成：3、血液的功能：運(yùn)輸功能：氣體、營養(yǎng)物質(zhì)、代謝產(chǎn)物等協(xié)調(diào)功能：激素、酶類維護(hù)機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定：pH、溫度防御功能：止血、抗微生物、免疫反應(yīng)等4、白細(xì)胞（1）人體外周血中的白細(xì)胞包括粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，根據(jù)粒細(xì)胞胞漿中所含的特殊顆粒，將粒細(xì)胞分為中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞。白細(xì)胞的主要功能是通過不同的方式和機(jī)制消滅病原

2、體，消除過敏原及參與免疫反應(yīng)、產(chǎn)生抗體，是機(jī)體抵御病原微生物等異物的主要防線。 （2）白細(xì)胞的生理（3）參考值范圍白細(xì)胞計(jì)數(shù)：成人：（410）109/L 新生兒：（1520）109/L 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)： 百分率（%） 絕對值（109/L ） 淋巴細(xì)胞 2040 （0.84） 單核細(xì)胞 38 （0.120.8） 中性粒細(xì)胞 5070 （27） 嗜酸性粒細(xì)胞 0.55 （0.020.5） 嗜堿性粒細(xì)胞 01 （01）5、紅細(xì)胞：（1）紅細(xì)胞檢測的主要臨床意義是用于貧血的診斷和治療。正常的成熟紅細(xì)胞形態(tài)為雙凹圓盤狀，細(xì)胞大小一致，平均直徑7.2m，厚度約2m，淡粉紅色，中央1/3為生理淡染區(qū)，胞質(zhì)內(nèi)

3、無異常結(jié)構(gòu)。在各種貧血時(shí)，紅細(xì)胞可出現(xiàn)大小不一。凡直徑10m者稱為大紅細(xì)胞， 15m者稱為巨紅細(xì)胞，常見于巨幼細(xì)胞性貧血、肝臟疾病等；直徑6m者稱為小紅細(xì)胞，多見于缺鐵性貧血等疾病。（2）紅細(xì)胞生理：紅細(xì)胞是血液中數(shù)量最多的有形成分，成熟紅細(xì)胞的平均壽命約120d，衰老紅細(xì)胞主要在脾破壞，分解為鐵、珠蛋白和膽紅素。（3）紅細(xì)胞的功能：交換和攜帶氣體。通過胞內(nèi)血紅蛋白來實(shí)現(xiàn)。（4）參考值范圍：女性：（3.55.0）1012/L 男性：（4.05.5）1012/L 新生兒：（6.07.0）1012/L6、血紅蛋白（1）血紅蛋白是成熟紅細(xì)胞的主要成分，是一種微紅色的膠體物質(zhì)，是呼吸載體，每克血紅蛋白

4、可攜帶氧1.34ml。血紅蛋白約65%合成于有核紅細(xì)胞，35%合成于網(wǎng)織紅細(xì)胞。正常血紅蛋白由珠蛋白與亞鐵血紅素組成。（2）參考范圍：女性：110150g/L 男性：120170g/L 新生兒：170200g/L7、血小板（1）骨髓中的骨髓造血干細(xì)胞分化成巨核細(xì)胞后，其胞漿裂解剝落即形成血小板。全身約有1/3的血小板滯留于脾臟細(xì)胞間，這種現(xiàn)象稱“脾池化”，脾池內(nèi)的血小板與循環(huán)中的血小板可互換。初生成的血小板體積較大，黏著力強(qiáng)，易于聚集和發(fā)生釋放反應(yīng)，有很強(qiáng)的止血和凝血功能，在循環(huán)血液中只有出生成的血小板有止血功能，且只能維持2d。血小板一部分在發(fā)揮其生理功能時(shí)解體，另一部分血小板衰老后在脾臟、

5、肝臟、骨髓單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)中破壞。（2）參考范圍：（100300）109/L8、血液標(biāo)本的采集（1）靜脈采血法部位：主要是肘靜脈。其次：手背部、手腕部等靜脈，幼兒可采用頸外靜脈采血。采血器材：一次性注射器，檢驗(yàn)用真空定量采血裝置。采血步驟及注意事項(xiàng)（略）（2）毛細(xì)血管采血法部位：左手無名指指尖內(nèi)側(cè)。嬰幼兒可采拇指或足跟內(nèi)側(cè)，特殊人員視情況而定。采血器材：一次性采血針、微量吸管采血步驟及注意事項(xiàng)（略）9、血液標(biāo)本的保存 標(biāo)本若不能及時(shí)檢測或需要保留以備復(fù)查時(shí)，應(yīng)在室溫保存。抗凝血在室溫下，WBC、RBC、PLT可穩(wěn)定24h，白細(xì)胞分類可穩(wěn)定6-8h，血紅蛋白可穩(wěn)定數(shù)日，但2h后粒細(xì)胞形態(tài)即可發(fā)

6、生變化，故需做鏡下分類者應(yīng)及早推制血片。雖然4條件下可延長血液貯存期，但會(huì)影響PLT和MPV值。二、血液分析儀二、血液分析儀1、現(xiàn)代血液分析儀特點(diǎn)：自動(dòng)化程度增高、檢測參數(shù)增多、精度增高、速度增快、指控功能強(qiáng)大、智能化程度增高。2、血液分析儀檢測原理：電阻抗法（庫爾特原理）設(shè)計(jì)基礎(chǔ)光散射法3、血液分析儀主要功能：血細(xì)胞計(jì)數(shù)功能血細(xì)胞分類功能電阻抗法原理（庫爾特原理）1、20世紀(jì)50年代初，美國庫爾特（Coulter WH）發(fā)明并申請了粒子計(jì)數(shù)技的設(shè)計(jì)專利，其原理是根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì)，對電解質(zhì)溶液中懸浮顆粒在通過計(jì)數(shù)小孔時(shí)引起的電阻變化進(jìn)行檢測作為基礎(chǔ)，來進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測定。2、庫爾

7、特原理圖 細(xì)胞計(jì)數(shù)池中，小孔內(nèi)外兩個(gè)電極和稀釋液（等滲電解質(zhì)溶液）構(gòu)成一個(gè)電流回路，在負(fù)壓作用下，血細(xì)胞通過小孔，電極能感應(yīng)到一個(gè)瞬間的電壓變化，并將其轉(zhuǎn)換成脈沖信號。脈沖大小反映細(xì)胞體積，脈沖的數(shù)量代表細(xì)胞計(jì)數(shù)的結(jié)果。3、電阻抗法儀器的主要組成信號發(fā)生器（脈沖檢測器）放大器（把微伏放大為伏級的脈沖信號）閥值調(diào)節(jié)（計(jì)數(shù)不同細(xì)胞有不同的閥值）甄別器（去除假脈沖信號）整形器（把波形調(diào)整為標(biāo)準(zhǔn)一致的平頂波）計(jì)數(shù)系統(tǒng)（把不同的脈沖區(qū)分成不同細(xì)胞并計(jì)數(shù)）4、白細(xì)胞檢測原理 根據(jù)電阻抗的原理，經(jīng)溶血?jiǎng)┨幚砻撍牟煌w積的白細(xì)胞（35-450fL）通過小孔時(shí)產(chǎn)生脈沖的大小的明顯差異而區(qū)分相應(yīng)的三群細(xì)胞5、紅

8、細(xì)胞檢測原理（注意白細(xì)胞增高干擾）（1）稀釋血液中含有白細(xì)胞，當(dāng)血液進(jìn)入紅細(xì)胞檢測通道時(shí)，紅細(xì)胞檢測的各項(xiàng)參數(shù)中均含有白細(xì)胞因素。正常時(shí)，血液紅細(xì)胞與白細(xì)胞的比列約為（500-750）:1，因此，白細(xì)胞因素可忽略不計(jì)。（2）當(dāng)病理情況下，如白血病時(shí)，白細(xì)胞數(shù)明顯增高，同時(shí)又伴有貧血時(shí)，使所得紅細(xì)胞參數(shù)可產(chǎn)生明顯誤差。（3）紅細(xì)胞其他參數(shù)的檢測：MCV、MCH、MCHC、HCT、RDW等6、血紅蛋白檢測原理（比色原理） 7、血小板檢測原理 根據(jù)電阻抗法，血小板隨紅細(xì)胞在一個(gè)系統(tǒng)中進(jìn)行檢測，在紅細(xì)胞/血小板計(jì)數(shù)池中計(jì)數(shù)2fL30fL的顆粒為血小板。為了增加血小板準(zhǔn)確性，設(shè)置了血小板直方圖（浮動(dòng)界標(biāo)

9、計(jì)數(shù)、擬合曲線技術(shù)等）。8、血液分析儀檢測參數(shù)英文縮寫詞和中文名稱及單位。英文縮寫 中文名稱 單位 英文縮寫 中文名稱 單位WBC 白細(xì)胞計(jì)數(shù) 109/L MCV 紅細(xì)胞平均體積 fLLymph# 淋巴細(xì)胞絕對值 109/L MCH 紅細(xì)胞平均血紅蛋白量 pgMid# 中間細(xì)胞絕對值 109/L HCT 血細(xì)胞比容/紅細(xì)胞壓積 %Gran# 中性粒細(xì)胞絕對值 109/L RDW-SD 紅細(xì)胞體積分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差 fLLymph% 淋巴細(xì)胞百分率 % RDW-CV 紅細(xì)胞體積分布寬度變異系數(shù) %Mid% 中間細(xì)胞百分率 % PLT 血小板計(jì)數(shù) 109/L Gran% 中性粒細(xì)胞百分率 % MPV

10、血小板平均體積 fLRBC 紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 1012/L PCT 血小板比容/血小板壓積HGB 血紅蛋白 g/L PDW 血小板體積分布寬度 %MCHC 紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度 g/L P-LCR 大血小板比率 %三、血液分析儀的臨床應(yīng)用1、細(xì)胞直方圖：細(xì)胞體積分布圖形，橫坐標(biāo)為細(xì)胞體積大小，縱坐標(biāo)為不同體積細(xì)胞的相對頻率（數(shù)量）。（1）白細(xì)胞直方圖 正常白細(xì)胞直方圖，在35450fL范圍內(nèi)將白細(xì)胞分為3群，左側(cè)峰又高又陡為淋巴細(xì)胞峰，最右側(cè)又低又寬為中性粒細(xì)胞峰，左右兩峰間的谷區(qū)較平坦為單核細(xì)胞區(qū)。白細(xì)胞直方圖變化的部分原因淋巴細(xì)胞峰左側(cè)異常：提有核紅細(xì)胞、血小板聚集、巨大血小板、未溶解紅細(xì)胞、

11、瘧原蟲、冷凝集蛋白、脂類顆粒、異形淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞峰右移，與單核細(xì)胞谷左側(cè)相連并抬高：急性淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、異形淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞谷抬高、增寬：原始或幼稚細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞增多、嗜堿性粒細(xì)胞增多、單核細(xì)胞增多單核細(xì)胞谷與中性粒細(xì)胞峰之間異常：未成熟的中性粒細(xì)胞、異常細(xì)胞亞群、嗜酸性粒細(xì)胞增多中性粒細(xì)胞峰右移、抬高、增寬：中性粒細(xì)胞絕對值增多直方圖多區(qū)出現(xiàn)異常：以上多種原因引起（2）紅細(xì)胞直方圖 正常紅細(xì)胞直方圖，在36360fL范圍內(nèi)分布兩個(gè)細(xì)胞群體，從50125fL區(qū)域有一個(gè)兩側(cè)對稱、較狹窄的曲線，為正常大小的紅細(xì)胞，從125200fL區(qū)域有另一個(gè)低而寬的曲線，為大紅

12、細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞。當(dāng)紅細(xì)胞體積大小發(fā)生變化時(shí)，峰可左移或右移，或出現(xiàn)雙峰。（3）血小板直方圖 正常血小板直方圖，在230fL范圍內(nèi)分布，呈左偏態(tài)分布，集中分布于215fL內(nèi)。當(dāng)血小板體積增大時(shí)，有明顯的拖尾現(xiàn)象。小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片干擾會(huì)出現(xiàn)尾部抬高。2、檢測參數(shù)臨床意義（1）白細(xì)胞參數(shù)中性粒細(xì)胞：病理性增多：急性感染或炎癥、廣泛組織損傷或壞死、急性溶血、急性失血、急性中毒、惡性腫瘤等。減少：中性粒細(xì)胞絕對值低于1.5 109/L，稱為粒細(xì)胞減少癥； 低于0.5 109/L時(shí)稱為粒細(xì)胞缺乏癥。病因：病毒感染性疾病、血液系統(tǒng)疾病（再障、某些急性白血?。?、物理化學(xué)因素（放射線等）、單核-巨噬細(xì)胞系

13、統(tǒng)功能亢進(jìn)（門脈性肝硬化）、系統(tǒng)性紅斑狼蒼、某些自身免疫性疾病、過敏性休克等 。淋巴細(xì)胞：病理性增多：病毒感染性疾病、再障（相對增多）、淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤、組織移植后排斥反應(yīng)等。減少：主要見于應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素、烷化劑、抗淋巴細(xì)胞球蛋白、接觸放射線、免疫缺陷性疾病、丙種球蛋白缺乏癥等。單核細(xì)胞：病理性增多：某些感染（瘧疾、黑熱病、結(jié)核病等）、血液?。▎魏思?xì)胞白血病、骨髓增生異常綜合征等）、急性傳染病或急性感染的恢復(fù)期。減少：臨床意義不大。 （2）紅細(xì)胞參數(shù) MCV（fL） MCH（pg） MCHC（g/L） 舉 例正常細(xì)胞性貧血 82-95 27-31 320-360 再障、急性失血性貧

14、血、急 性溶血性貧血、白血病等 大細(xì)胞性貧血 巨幼紅細(xì)胞性貧血單純小細(xì)胞性貧血 慢性感染、炎癥、肝病、尿 毒癥、惡性腫瘤、風(fēng)濕性疾 病等所致的貧血小細(xì)胞低色素性貧血 缺鐵性貧血、地中海貧血、 鐵粒幼細(xì)胞性貧血等 MCV RDW 常 見 疾 病大細(xì)胞均一性貧血 增高 正常 部分再障大細(xì)胞非均一性貧血 增高 增高 巨幼紅細(xì)胞性貧血、免疫溶血性貧血、鐮狀細(xì)胞性貧血正細(xì)胞均一性貧血 正常 正常 急性失血性貧血、慢性病、脾切除正細(xì)胞非均一性貧血 正常 增高 再障、PHN、骨髓纖維化、骨髓發(fā)育不良小細(xì)胞均一性貧血 減低 正常 珠蛋白生成障礙性貧血、球形細(xì)胞增多癥小細(xì)胞非均一性貧血 減低 增高 缺鐵性貧血（3）血小板參數(shù)PLT減少：通常50 109/L ，患者即有自動(dòng)出血癥狀。見于：血小板生成障礙、血小板破壞過多、血小板消耗增多、血小板自身異常、血小板分布異常（脾大、肝硬化等） PLT增多：慢性粒細(xì)胞性白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性血小