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文檔簡介
1、實驗八 尿沉渣檢查Examination of urinary sediment 非染色法尿沉渣顯微鏡檢查實驗原理 尿液經(jīng)離心沉淀后,置顯微鏡下觀察其有形成分,如細胞、管型、結(jié)晶等。 試劑器材載玻片、蓋玻片、滴管、 10ml 刻度離心管、離心機、普通光學(xué)顯微鏡 操作步驟1未離心直接涂片法(1)混勻 將尿液標本混勻。(2)制備涂片 取混勻后的尿液 1滴于載玻上, 加蓋玻片,避免產(chǎn)生氣泡。(3)觀察計數(shù) 先用低倍鏡觀察全片細胞、管型等成分的分布情況,再用 高倍鏡確認。管型要觀察計數(shù)至少 20 個低倍鏡視野;細胞要觀察計數(shù)至少 10 個高倍鏡視野;結(jié)晶按高倍鏡視野中分布范圍估計報告。(4)結(jié)果報告
2、細胞以最低數(shù) 最高數(shù) /HP、管型以最低數(shù) 最高數(shù) /LP 報告。 結(jié)晶以所占視野面積報告,無結(jié)晶為 (-) ;結(jié)晶約占 1/4 視野為(+) ;約占 1/2 視野為(+) ;約占 3/4 視野為(+) ;滿視野時為 (+) 。如果細胞、管型數(shù)量 過多難以計算時,則可按結(jié)晶的報告方式報告結(jié)果。2離心沉淀涂片法( 1 )離心 刻度離心管,倒入混勻后的新鮮尿液10ml,相對離心力(RCF)500g 離心 5min。(2)棄上清 棄去上清液,留下 0.2ml 尿沉渣并混勻。(3)涂片 用微量吸管取混勻尿沉渣 0.02ml ,滴在載玻片上,用蓋玻片覆蓋(4)觀察計數(shù) 與未離心直接涂片法相同。(5)結(jié)果
3、報告 與未離心直接涂片法相同。3定量尿沉渣分析板法 定量尿沉渣分析板為特制的一次性使用的硬質(zhì)塑料計數(shù)板 (見圖 5-2),每塊 板上有 10 個計數(shù)池,每個計數(shù)池又有 1 個計數(shù)區(qū),每個計數(shù)區(qū)有 10 個大方格, 每個大方格又分為 9 或 16 個小方格,計數(shù)池的高度為 0.1mm,每個大方格的面 積為 1mm2,故每個大方格的容積為 0.1l;10 個大方格的總?cè)莘e為 1l ,每個 樣本用 1 個計數(shù)池。(1)未離心法 直接吸取混勻尿液 1 滴充入定量尿沉渣分析板計數(shù)池內(nèi), 在低倍鏡下計數(shù) 10個大方格內(nèi)管型總數(shù), 在高倍鏡下計數(shù) 10個大方格內(nèi)細胞總 數(shù),此即每微升的尿液中某種有形成分的數(shù)
4、量。 結(jié)果報告以每微升某種細胞或管 型數(shù)報告。(2)離心法 尿液標本處理同離心尿沉淀涂片法,然后充池計數(shù),方法同圖 5-2 定量尿沉渣分析示意圖 注意事項1. 最好取晨尿在 1h 內(nèi)檢查。2. 一般應(yīng)留取中段尿, 婦女尿內(nèi)可因混有陰道分泌物而可見大量的上皮細胞 和白細胞,必要時可沖洗外陰后留取中段尿檢查。3. 鏡檢時光線要適宜, 光線過強可使透明管型漏檢。 低倍鏡發(fā)現(xiàn)管型, 須用 高倍鏡辨認。4. 鏡下發(fā)現(xiàn)紅細胞,應(yīng)進一步作形態(tài)分類, 以鑒別腎小球性及非腎小球性血 尿。5. 計數(shù)時要注意有無其他異常巨大細胞、寄生蟲蟲卵、細菌、滴蟲、粘液絲 等,男性標本還要注意有無精子及卵磷脂小體等。注意事項1
5、. 標本要新鮮,以防有形成分分解破壞。2. 染色時間要恰當(dāng), 染色時間過久可引起淡染細胞向濃染細胞轉(zhuǎn)化, 有礙識 別。3. 膽紅素尿時,有形成分可被當(dāng)成黃色,掩蓋其真實的顏色,應(yīng)注意區(qū)分。4. 采集標本后應(yīng)在 1h 之內(nèi)完成檢查,否則可將標本加甲醛并置 4保存。 參考范圍尿沉渣檢查主要有形成分參考值見下表 5-9 。表 5-9 尿沉渣檢查主要成分參考值成分未離心法離心法分析板法男女紅細胞0 偶見 /HP 03/HP 012/ l 024/ l白細胞03/HP05/HP012/ l 026/ l透明管型0 偶見 /LP 0偶見 /LP 12/l上皮細胞少見少見結(jié)晶少見少見臨床意義1. 紅細胞增加
6、,常見于腎小球腎炎、泌尿系結(jié)石、結(jié)核、惡性腫瘤、外傷等 因素,女性也可因污染經(jīng)血而呈陽性。2. 尿內(nèi)白細胞增加,表示泌尿系統(tǒng)有化膿性炎癥,如急性和慢性腎盂腎炎、 膀胱炎、尿道炎等。女性陰道炎、宮頸炎、附件炎時可因分泌物污染尿液,尿中 可見白細胞增多,常同時伴有大量扁平上皮細胞。3. 透明管型增多見于急性腎小球性腎炎、 急性腎盂腎炎、 惡性高血壓、慢性 腎臟疾病、充血性心力衰竭等。發(fā)熱、麻醉后、過度運動等,尿中透明管型亦可 增多。正常人尿中也可偶見。4. 顆粒和細胞管型的存在常提示有腎實質(zhì)病變, 多見于急性或慢性腎小球性 腎炎、腎病綜合征等。5. 慢性腎功能不全時, 尿內(nèi)出現(xiàn)腎衰竭管型, 提示預(yù)后不良。 蠟樣管型的出 現(xiàn)提示腎臟有長期而嚴重的病變,見于慢性腎小球腎炎的晚期和腎淀粉樣變時。方法評價 未離心法簡單易行,但陽性率低,極易漏檢,較適用于血尿、膿尿等外觀明 顯渾濁的標本。離心法較費時、繁瑣,但方法靈敏、重復(fù)性好,陽性率高。尿沉 渣分析板法, 可報告每微升尿液內(nèi)所含各種尿沉渣的數(shù)量, 使得尿沉渣檢查更規(guī) 范化和標準化。染色法可將尿沉渣中有形成分著
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