食品安全與衛(wèi)生檢測

1、食品安全與衛(wèi)生檢測實訓(xùn)教學(xué)指導(dǎo)書（食品加工技術(shù)專業(yè)、食品安全監(jiān)測專業(yè)）吉林糧食高等?？茖W(xué)校2004年6月食品安全與衛(wèi)生檢測實訓(xùn)指導(dǎo)書依據(jù)食品安全與衛(wèi)生檢測課程教學(xué)大綱的要求，結(jié)合我校的實際情況，編寫本指導(dǎo)書，作這食品安全與衛(wèi)生檢測任課教師教學(xué)參考和食品工程專業(yè)教學(xué)用書。全書共分10個實訓(xùn)專題，建議教學(xué)學(xué)時為3050學(xué)時。食品安全與衛(wèi)生檢測是在學(xué)過分析化學(xué)、食品生物化學(xué)、食品微生物學(xué)等課程的基礎(chǔ)上開設(shè)的，與食品營養(yǎng)與檢測構(gòu)成了一個既相互聯(lián)系、又相對獨立的有機整體，是高職高專院校食品加工技術(shù)專業(yè)一門技術(shù)性、實踐性很強的專業(yè)基礎(chǔ)課程，是能夠把基礎(chǔ)課與專業(yè)課緊密聯(lián)結(jié)起來的一門應(yīng)用科學(xué)。該課程主要講授食

2、品的安全衛(wèi)生、食品衛(wèi)生檢測有關(guān)知識、食品衛(wèi)生檢測技術(shù)、食品安全管理、食品衛(wèi)生監(jiān)督、國家食品衛(wèi)生法與世界衛(wèi)生組織、典型食品安全衛(wèi)生案例分析等。通過本課程各教學(xué)環(huán)節(jié)，要求學(xué)生掌握從事食品生產(chǎn)與加工、食品營銷及檢測等職業(yè)崗位群工作所必須具備的基本知識、基本原理和基本技能；能合理運用所學(xué)知識和技能，提高食品品質(zhì)，保證食品的安全性。使學(xué)生在食品加工實踐中具備發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力；了解國內(nèi)外食品安全與檢測的科學(xué)技術(shù)動向。因此，本課程承擔著培養(yǎng)食品專業(yè)高級實用型專門人才和提高食品安全、衛(wèi)生檢測技術(shù)的雙重任務(wù)。在具體實施中，既可以采取理論與實訓(xùn)結(jié)合的教學(xué)形式，也可單獨組織實訓(xùn)教學(xué)。要強調(diào)所有實際

3、操作必須符合食品行業(yè)衛(wèi)生規(guī)范、職場衛(wèi)生健康、操作規(guī)程等的要求。要強調(diào)緊密結(jié)合生產(chǎn)實踐，改革實驗教學(xué)內(nèi)容，減少演示性、驗證性實驗，增加工藝性、設(shè)計性、綜合性實驗，逐步形成基本實踐能力與操作技能、綜合實踐能力與綜合技能有機結(jié)合的實踐教學(xué)體系。構(gòu)建具有高職高專食品專業(yè)特色的“實驗、認識實習(xí)、生產(chǎn)實習(xí)、專業(yè)綜合訓(xùn)練、畢業(yè)實習(xí)”的實踐教學(xué)模式。 吉林糧食高等?？茖W(xué)校 食品科學(xué)與工程系 2004年6月實訓(xùn)一 花生中黃曲霉毒素B1的檢測一、目的1、熟練掌握薄層層析法原理。2、掌握薄層層析操作作方法。二、原理樣品中黃曲霉毒素B1經(jīng)有機溶劑提取，濃縮、凈化以及薄層分離前處理后，在波長365nm紫外光下產(chǎn)生蘭紫色

4、熒光，根據(jù)其在薄層板上顯示熒光的最低檢出量來測定含量。三、試劑1 三氯甲烷、甲醇、苯、乙腈、丙酮2 正己烷（沸程3060）或石油醚（沸程6090）.3無水乙醚或乙醚經(jīng)無水硫酸鈉脫水4苯乙腈（98：2）混合溶液：量取98ml苯，加2ml乙腈，混勻。5甲醇水（55：45）溶液：配制方法同上。6三氟乙酸、無水硫酸鈉、氯化鈉7硅膠G，薄層色譜用。8AFTB1標準溶液的制備：用百萬分之一的微量分析天平精密稱取11.2mgAFTB1標準品，先加入2ml乙腈溶解后，再用苯稀釋至100ml。然后避光置于4冰箱中保存。最后進行AFTB1標準溶液濃度的測定。（此標準溶液濃度為10g/ml）。9AFTB1標準使用液

5、：精密吸取1ml10g/ml標準溶液于10ml容量瓶中，加苯乙腈混合液至刻度，混勻。此溶液濃度為1g/ml。10AFTB1標準使用液：精密吸取1.0ml1g/mlAFTB1標準使用液于5ml容量瓶中，加苯乙腈混合液稀釋至刻度，搖勻。此溶液濃度為0.2g/ml。11AFTB1標準使用液：精密吸取1.0mlAFTB1標準使用液于5ml容量瓶中，加苯乙腈混合液稀釋至刻度，搖勻。此溶液濃度為0.04g/ml。1250/L次氯酸鈉溶液：取100g漂白精，加入500ml水，攪拌均勻。另將160g工業(yè)用碳酸鈉（Na2CO3·10H2O）溶于500ml溫水中，再將兩液混合，攪拌，澄清后，再過濾即可。

6、四、儀器和用具1小型粉碎機、樣篩、電動振蕩器2全玻璃濃縮器、電子恒溫水浴鍋、薄層板涂布器3玻璃板：5cm×20cm。4展開槽：內(nèi)長25cm，寬6cm，高4cm。5紫外光燈：100125W，帶有波長365nm濾光片6微量進樣器、蒸發(fā)器：50ml五、操作步驟1樣品提取、凈化樣品去殼去皮粉碎后，稱取20g粉碎過篩樣品，置于250ml具塞錐形瓶中，加30ml正乙烷或石油醚和100ml甲醇水溶液，在瓶塞上涂上一層水，蓋嚴防漏。振蕩30min，靜置片刻，以疊成折疊式的快速定性濾紙過濾于分液漏斗中，等下層甲醇水溶液分清后，放出甲醇水溶液于另一具塞錐形瓶中。取20.0ml甲醇水溶液提取液（相當于4g

7、樣品）置于另一個125ml分液漏斗中，加20mlCHCl3，振搖2min，靜置分層（如出現(xiàn)乳化則可滴加甲醇使其分層），放出CHCl3層，經(jīng)盛有約10g先用CHCl3濕潤的無水硫酸鈉的慢速定量濾紙過濾于50ml蒸發(fā)皿中，分液漏斗中再加5mlCHCl3重復(fù)振搖提取，CHCl3層一并濾于蒸發(fā)皿中，最后用少量CHCl3洗濾器，洗液并于蒸發(fā)皿中。將蒸發(fā)皿放在通風櫥內(nèi)于65水浴上通風揮干，然后放在冰箱內(nèi)冰卻23min后，準確加入1ml苯乙腈混合液（或?qū)HCl3用濃縮蒸餾器減壓吹干蒸干，然后再準確加入1ml苯乙腈混合液）。用帶橡皮頭的滴管的管尖將殘渣充分混合，如果有苯的結(jié)晶析出，則將蒸發(fā)皿取下，繼續(xù)溶解、

8、混合，晶體則立即消失，再用此滴管吸取上清液轉(zhuǎn)移于2ml具塞試管中。2樣品的測定（單向展開法）（1）薄層板的制備：稱取約3g硅膠G，加入相當于硅膠量23倍左右的水，用力研磨12min至成糊狀后立即倒入涂布器內(nèi)，推成5×20cm，厚度約0.25mm的簿層板三塊。在空氣中干燥大約15min后，放入100烘箱內(nèi)活化2h，取出在干燥器中保存。一般可保存23d，若放置時間較長，可再進行干燥活化后使用。（2）點樣：將簿層板邊緣附著的吸附劑刮凈，在距薄層板下端3cm處做一個基線，然后在基線上用微量注射器滴加樣液。一塊板可滴加4個點，點距邊緣和點間距約為1cm，點直徑約為3mm。要求在同一塊板上滴加點

9、的大小應(yīng)一致，可用吹風機冷風邊吹邊加。滴加的樣點如下：第一點：10l、0.04g/mlAFTB1標準使用液。第二點：20l樣品溶液。第三點：20l樣液10l0.04g/mlAFTB1標準使用液。第四點：20l樣液10l0.2g/mlAFTB1標準使用液。（3）展開與觀察：加入10ml無水乙醚于展開槽內(nèi)，預(yù)展12cm，取出揮干。再于另一展開槽內(nèi)加入10ml丙酮：三氯甲烷（8：92）溶劑，展開1012cm，取出在紫外光下觀察結(jié)果，方法如下：第一點滴加10lAFTB1標準使用液，其中含AFTB10.04g/ml（最低檢出量5g/kg）?？勺鳛闄z驗薄層板好壞及色譜是否合適，能檢出最低檢出量。如果展開后

10、此點無熒光，則說明薄層板或色譜條件存在問題。第三點和第四點上滴加了樣液和AFTB1標準液，可使樣液中的AFTB1熒光點和標液AFTB1熒光點重疊。加以認證。第三點是用來檢驗最低檢出量在樣液中是否能正常呈現(xiàn)，如果第一點呈陽性，第三點呈陰性則說明樣品的提取存在問題，可能存在熒光猝滅劑，應(yīng)重新提取。第四點主要是起定位作用。AFTB1的Rf值約0.6。第二點起判斷作用。如果第二點（樣液）在AFTB1標準點的相應(yīng)位置（Rf0.6）處呈陰性，而其它各點均呈陽性，則說明樣品中AFBT1的含量在5g/kg（最低檢出量）以下，如果第二點在其相應(yīng)位置上呈陽性，則需進行確證試驗。（4）確證試驗：為了證明在薄層板上樣

11、液呈現(xiàn)的熒光確系由AFTB1產(chǎn)生的，則在樣點上滴加三氟乙酸，產(chǎn)生AFTB1的衍生物，繼續(xù)展開后，此衍生物的Rf值約為0.1左右。方法如下：依次在薄層板左邊滴加兩個點：第一點：10l 0.04g/mlAFTB1標準使用液。第二點：20l樣液。在以上兩點處各加一小滴三氟乙酸蓋于其上，經(jīng)反應(yīng)5min后，用電吹風機吹熱風2min，熱風吹到薄層板上的溫度不得高于40，再于薄板右邊滴加以下兩點。第三點：10l0.04g/mlAFTB1標準使用液。第四點：20l樣液。同前展開后，在紫外光下觀察樣液是否產(chǎn)生與AFTB1標準點相同的衍生物。第三點和第四點，可作為樣液與標準衍生物的空白對照。（5）稀釋定量：樣液中

12、的AFTB1熒光點的熒光強度與AFTB1標準點（最低檢出量）的熒光強度一致，則表示樣品AFTB1含量在5g/kg；如樣液中熒光強度比最低檢出量強，則根據(jù)其強度估計減少點樣量或?qū)右合♂尯笤冱c樣，直至樣液點的熒光強調(diào)與最低檢出量的熒光強度一致為止，滴加樣式如下：第一點：10g/ml AFTB1標使液。第二點：根據(jù)具體情況點10l樣液。第三點：根據(jù)具體情況點15l樣液。第四點：根據(jù)具體情況點20l樣液。（6）計算： X=0.0004× （31）式中：X 樣品中AFTB1的含量，g/kg；V1 稀釋前樣液的體積，ml；V2 出現(xiàn)同樣最低熒光強度時滴加樣液的點樣量，l；D 樣液的總稀釋倍數(shù)；

13、m 稀釋前相當樣品的質(zhì)量，g；0.0004 AFTB1的最低檢出量，g。注意事項1本法的靈敏度較高，容易產(chǎn)生誤差。如薄層板制作不平整、不均勻，點樣的間距太小等都會產(chǎn)生誤差。2AFTB1標準儲備液應(yīng)密封于具塞試管中，在4oc冰箱中避光保存。如果在保存期間體積明顯減少，應(yīng)及時補充溶劑。使用前，應(yīng)對其測定標準液的濃度。3AFT是一種劇毒和強致癌性物質(zhì)，因此，在使用時特別注意其安全保護。如實驗時應(yīng)佩戴口罩，配標液時應(yīng)戴乳膠手套。如被標液污染時應(yīng)及時用50g/L次氯酸鈉溶液浸泡消毒。實驗結(jié)束后應(yīng)做好清洗消毒工作，對于剩余的AFT標液以及呈陽性樣液，應(yīng)先用50g/L次氯酸鈉處理后方可倒在指定的地方。實驗所

14、用玻璃器皿消毒后再進行清洗（用50g/L次氯酸那浸泡5min）。實訓(xùn)二、食品中N亞硝胺化合物的檢測一、目的1、熟練掌握食品中N-亞硝胺化合物的測定原理。2、掌握食品中N-亞硝胺化合物的測定方法。二、測定原理本法是測定食品中揮發(fā)性N亞硝胺總量的方法。食品中揮發(fā)性亞硝胺經(jīng)水蒸氣蒸餾純化后，經(jīng)過紫外光照射，分解釋放為亞硝酸根。然后利用強堿性離子交換樹脂濃縮，在酸性條件下與對位氨基苯磺酸形成重氮鹽，最后與N萘乙烯二胺二鹽酸鹽形成紅色偶氮染料。顏色的深淺與N亞硝胺的含量成正比。三、試劑10.1mol/L磷酸緩沖溶液（PH7）：分別吸取0.1mol/L磷酸氫二鈉（Na2HPO4）61.9ml和0.1mol

15、/L磷酸氫二鈉（NaH2PO4）39.0ml，將兩者混合而成緩沖溶液。2300g/L醋酸溶液30.5mol/L氫氧化鈉溶液41.7mol/L鹽酸溶液5100g/ml二乙基亞硝胺標準溶液6100g/ml亞硝酸鈉標準溶液71mol/L氫氧化鈉溶液：用正丁醇飽和810g/L硫酸鋅溶液9強堿性離子交換樹脂：交鏈度8，粒度150目。10顯色劑：顯色劑A10g/L對位氨基苯磺酸的300g/L醋酸溶液顯色劑B2g/LN1萘乙烯二胺二鹽酸鹽的300g/L醋酸溶液顯色劑C10g/L對位氨基苯磺酸的1.7mol/L鹽酸溶液顯色劑D10g/LN1萘乙烯二胺二鹽酸鹽溶液四、儀器和用具分光光度計、紫外燈：BR69盤形殺

16、菌燈（10W）。五、操作方法1亞硝胺標準曲線繪制準確吸取亞硝胺標準溶液0.0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10ml，分別放入小培養(yǎng)皿中，在小培養(yǎng)皿中分別加入PH7的磷酸緩沖溶液，使溶液的總體積為2.0ml，搖勻。在紫外光下照1min。然后依次加入0.5ml顯色劑A，搖勻，再加入0.5ml顯色劑B，使溶液呈玫瑰紅色后，分別在550nm波長下用分光光度計測定其吸光度，然后繪制其標準曲線。2樣品的制備液體樣品：稱取10.020.0g樣品（根據(jù)樣品中亞硝胺的含量大小稱量），移入100ml容量瓶中，加入0.5mol/L氫氧化鈉溶液，調(diào)整其濃度為1mol/L，搖勻后過濾，收集濾液備用。固體

17、樣品：將固體樣品搗碎或研磨攪拌均勻，稱取20.0g，用正丁醇飽和過的1mol/L氫氧化鈉溶液將其轉(zhuǎn)移入100ml容量瓶中至刻度，搖勻后浸泡過夜，最后離心取清液備用。3揮發(fā)性N亞硝胺總量的測定吸取樣品50ml清液置于蒸餾瓶內(nèi)，將其進行夾層保溫水蒸氣蒸餾，收集餾出液25ml，用300g/L醋酸溶液調(diào)節(jié)其PH值至34。再繼續(xù)蒸餾，再收集餾出液25ml，用0.5mol/L氫氧化鈉調(diào)至PH78。在紫外光下照射15min，通過強堿性離子（氯離子型）交換柱（1cm×0.5cm）濃縮，用少量蒸餾水水洗，然后用1mol/L氯化鈉溶液洗脫亞硝酸根，然后分管收集洗脫液，每管1ml，直至所收集的洗脫液加入顯

18、色劑不顯色為止。在管中各加入1.0mlPH7的磷酸緩沖溶液、0.5ml顯色劑A，搖勻，然后再加入0.5ml顯色劑B，待溶液呈玫瑰紅色后，在分光光度計以550nm波長下測定其吸光度，根據(jù)其吸光度，從標準曲線中查得每管亞硝胺的含量，計算其總含量。六、計算X×1000 （32）式中：X揮發(fā)性N亞硝胺含量，g/kg；m1相當于揮發(fā)性N亞硝胺標準的量，g；m測定時樣品溶液相當于樣品的量，g。注意事項對于亞硝酸鹽含量高的樣品，由于二甲胺與亞硝酸鹽在酸性條件下能結(jié)合產(chǎn)生亞硝胺，因此，會影響N亞硝胺的測定結(jié)果?？梢杂猛瑯拥谋壬ㄓ嬎愠鰜喯跛猁}相當于揮發(fā)性N亞硝胺含量X0，然后再減去X0得到實際樣品中

19、揮發(fā)性N亞硝胺含量。實訓(xùn)三、稻米中久效磷殘留量的檢測（氣相色譜法）一、目的1、了解稻米中久效磷殘留量的測定原理。2、學(xué)會氣相色譜儀的使用方法。二、原理久效磷屬有機磷化合物，在富氫焰上燃燒時會以氫磷氧形式放射出特征光，采用磷型火焰光度檢測器檢測特異性極強。稻米樣品中久效磷采用丙酮作為提取劑進行索氏提取，石油醚液液分配凈化，二氯甲烷萃取，濃縮后氣相色譜磷型火焰光度檢測器檢測。三、儀器與試劑氣相色譜儀，磷型火焰光度檢測器，索氏抽提器，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。久效磷標準儲備液：準確稱取久效磷標準品，用無水乙醇配成濃度約1mg/ml。久效磷標準使用液：根據(jù)所用儀器的靈敏度將久效磷標準儲備液用無水乙醇稀釋至適宜濃度。

20、丙酮、石油醚、二氯甲烷、無水乙醇、氯化鈉、無水硫酸鈉。四、實驗步驟1、提取稱取約40g粉碎稻米樣品，置于索氏抽提器濾紙筒中，加入100ml丙酮，于6769水浴回流提取6h，提取液經(jīng)50水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮并定容至35ml，待凈化。2、凈化待凈化提取液倒入250ml的分液漏斗中，加入100ml的1%硫酸鈉溶液，混勻，用石油醚(每次25ml）分4次洗，棄去石油醚層。加入25ml飽和氯化鈉溶液，再用二氯甲烷（每次25ml）萃取4次，合并二氯甲烷層，于40的水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮近干，用無水乙醇溶解并定容至0.5ml，待氣相色譜分析。3、檢測（1）色譜柱 玻璃柱，內(nèi)徑3mm，長1m，內(nèi)裝40g/L OV

21、-210/chromosorbWAWD-MCS(80100目)。（2）溫度 柱溫185，氣化室和檢測器溫度240。（3）氣體流速 載氣：氮氣100ml/min；空氣：200ml/min；氫氣：150ml/min。注意事項：1國際上多用乙腈作為有機磷農(nóng)藥的提取試劑及分配凈化試劑，如AOAC，F(xiàn)DA等采取與有機氯農(nóng)藥提取凈化大致相同的方法來提取，凈化有機磷農(nóng)藥，即用乙腈或石油醚提取，用乙腈/水分配或乙腈/石油醚分配等方法凈化。但乙腈毒性大，價格貴，且不易購買，故本法采用二氯甲烷提取，并在提取時根據(jù)樣品性狀加適量無水Na2SO4、中性氧化鋁、活性炭以脫水、脫油、脫色，基本上一次完成提取、凈化的目的。

22、另有用各種吸附柱（如弗羅里矽土柱、活性炭等）或用掃集共蒸餾方法凈化。 2分析測定有機磷農(nóng)藥時，由于農(nóng)藥的性質(zhì)不同，故應(yīng)注意擔體與固定液的選擇，一般原則是：被分離的農(nóng)藥是極性化合物，則選擇極性固定液；若被分離的農(nóng)藥是非極性化合物，則選擇非極性固定液，若選擇前者，各農(nóng)藥的出峰順序一般為極性小的農(nóng)藥先出峰，極性大的農(nóng)藥后出峰；若選擇后者，則按沸點高低出峰，低沸點的化合物先出峰。3有些熱穩(wěn)定性差的有機磷農(nóng)藥如敵敵畏在用氣相色譜儀測定時比較困難，主要原因是易被擔體所吸附，同時因?qū)岵环€(wěn)定而引起分解。故可采用縮短色譜柱到11.3m，或減小固定液涂漬的厚度和降低操作溫度（如本法）等措施來克服上述困難。實訓(xùn)四

23、、香腸中亞硝酸鹽的測定（鹽酸萘乙二胺法）一、目的1、熟練掌握樣品制備、提取的基本要求。2、進一步學(xué)習(xí)并熟練掌握分光光度計的使用方法和技能。3、鹽酸萘乙二胺法測亞硝酸的原理和操作要點。二、原理樣品經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)除去脂肪后，在弱酸條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化，生成重氮化合物，再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色顏料，在538nm波長下測定其吸光度與標準比較定量。本法最低檢出限為0.0001g/kg。 三、試劑1亞鐵氰化鉀溶液：稱取106g亞鐵氰化鉀K4Fe（CN）6·3H2O，溶于水后稀釋至1000ml。2乙酸鋅溶液：稱取220g乙酸鋅Zn（CH3COO）2·2H2O，加30m

24、l冰乙酸溶于水，稀釋至1000ml。3飽和硼砂溶液：稱取5g硼酸鈉Na2B4O7·10H2O，溶于100ml熱水中，冷卻后備用。44g/L對氨基苯磺酸溶液：稱取0.4g對氨基苯磺酸，溶于100ml 20%的鹽酸中，避光保存。52g/L鹽酸萘乙二胺溶液：稱取0.2g鹽酸萘乙二胺，溶于100ml水中，避光保存。6亞硝酸鈉標準溶液：精密稱取0.1000g在硅膠干燥器中干燥24h的亞硝酸鈉，用蒸餾水溶解移入500ml容量瓶中，并稀釋至刻度。此溶液亞硝酸鈉含量為200g/ml。7亞硝酸鈉標準使用液：臨用前，吸取亞硝酸鈉標準溶液5.00ml置于200ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，此溶液亞硝酸鈉含

25、量為5g/ml。四、操作方法1樣品處理稱取5.0g經(jīng)絞碎混勻的樣品，將其置于50ml燒杯中，加入12.5ml硼砂飽和溶液，攪拌均勻，用70左右的水約300ml，將樣品全部轉(zhuǎn)移入500ml容量瓶中，置沸水浴中加熱15min后，取出冷卻至室溫，然后邊轉(zhuǎn)動邊加入5ml亞鐵氰化鉀溶液，搖勻后再加入5ml乙酸鋅溶液以沉淀蛋白質(zhì)，加水至刻度，混勻，放置0.5h，除去上層脂肪后將清液用濾紙過濾，棄去初濾液約30ml，收集濾液備用。2測定吸取40ml上述濾液于50ml比色管中，另吸取0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50ml亞硝酸鈉標準使用液（相當于0、1、2、3、

26、4、5、7.5、10、12.5g亞硝酸鈉），分別置于50ml比色管中。在樣品管和標準系列中分別加入2ml4g/L對氨基苯磺酸溶液，混勻后靜置35min，再分別加入1ml2g/L鹽酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混勻后靜置15min，然后以2cm比色杯，用零管調(diào)節(jié)零點，于538nm波長下測定吸光度，并繪制標準曲線比較定量。五、結(jié)果計算X（34）式中：X樣品中亞硝酸鹽的含量，g/kg；m樣品質(zhì)量，g；A測定用樣液中亞硝酸鈉的含量，g；V1樣品處理液總體積，ml；V2比色時吸取樣品處理液體積，ml。注意事項1顯色時的PH值以1.93.0為宜，顯色后穩(wěn)定性與室溫有關(guān)，一般認為顯色溫度為1530，在2030

27、min內(nèi)比色為好。2當樣品中亞硝酸鹽含量高時，過量的亞硝酸鹽可以將生成偶氮化合物氧化，使紅色消失，對結(jié)果產(chǎn)生影響，可以采取先放入試劑，然后再滴加試液的方法，防止氧化。實訓(xùn)五、蘑菇罐頭中亞硫酸鹽的測定（鹽酸副玫瑰苯胺法）一、目的1、學(xué)習(xí)鹽酸副玫瑰苯胺法的原理及操作要點。2、熟悉分光光度法的基本操作技術(shù)。二、原理亞硫酸鹽與四氯汞鈉反應(yīng)吸收后，生成穩(wěn)定的化合物，再與甲醛和鹽酸副玫瑰苯胺作用，經(jīng)分子重排后生成紫紅色絡(luò)合物，顏色的深淺與二氧化硫濃度成正比，在550nm波長測定其吸光度，與標準系列比較定量。三、試劑1四氯汞鈉吸收液：稱取27.2g氯化高汞及11.9g氯化鈉，溶于水中并稀釋至1000ml，放

28、置過夜，過濾后備用。212g/L氨基磺酸銨溶液。32g/L甲醛溶液：吸取0.55ml無聚合沉淀的36%甲醛，加水稀釋至100ml混勻。4淀粉指示液：稱取1g可溶性淀粉，用少許水調(diào)成糊狀，緩緩傾入100ml沸水中，邊加邊攪拌，煮沸，放冷備用，此溶液臨用時現(xiàn)配。5亞鐵氰化鉀溶液：稱取10.6g亞鐵氰化鉀K4Fe（CN）6·3H2O，加水溶解并稀釋至100ml。6乙酸鋅溶液：稱取22g乙酸鋅Zn（CH3COO）2·2H2O溶于少量水中，加入3ml冰乙酸后加水稀釋至100ml。7鹽酸副玫瑰苯胺溶液：稱取0.1g鹽酸副玫瑰苯胺C19H18N3Cl·4H2O于研缽中，加少量水

29、研磨使溶解并稀釋至100ml。取出20ml置于100ml容量瓶中，加6mol/L鹽酸溶液充分搖勻，使溶液由紅變黃，如不變黃可再滴加少量鹽酸至出現(xiàn)黃色，再加水稀釋至刻度，混勻，備用（如無鹽酸副玫瑰苯胺可用鹽酸品紅代替）。鹽酸副玫瑰苯胺的精制方法：稱取20g鹽酸副玫瑰苯胺置于400ml水中，用50ml2mol/L鹽酸使其酸化，徐徐攪拌，加4-5g活性碳，加熱煮沸2min。將混合物倒入大漏斗(保溫)中，趁熱過濾。濾液放置過夜，出現(xiàn)結(jié)晶，然后再用布氏漏斗抽濾，將結(jié)晶再懸浮于1000ml乙醚：乙醇(10+1)的混合液中，振搖35min，再用布氏漏斗抽濾，用乙醚反復(fù)洗滌至醚層不帶色為止。置于硫酸干燥器中干

30、燥，研細后貯于棕色瓶中保存。80.1mol/L(1/2I2)溶液：90.1000mol/L硫代硫酸鈉（Na2S2O3·5H2O）標準溶液。10二氧化硫標準溶液：稱取0.5g亞硫酸氫鈉，溶于200ml四氯汞鈉吸收液中，靜置過夜，將上清液用定量濾紙備用。二氧化硫溶液標定：吸取10.0ml亞硫酸氫鈉四氯汞鈉溶液于250ml碘量瓶中，加水100ml，準確加入20.00ml0.1mol/L（1/2I2）溶液及5ml冰乙酸搖勻，置于暗處2min后，立即用0.1000mol/L硫代硫酸鈉（Na2S2O3·5H2O）標準溶液滴定至淡黃色。用0.5ml淀粉指示液繼續(xù)滴至無色。另取100ml，

31、準確加入20.00ml0.1mol/L（1/2I2）溶液和5ml冰乙酸，按相同方法做試劑空白試驗。計算：C1（37）式中：C1二氧化硫標準溶液濃度，mg/ml；V1測定用亞硫酸氫鈉四氯汞鈉溶液消耗硫代硫酸鈉標準溶液體積，ml；V2試劑空白消耗硫代硫酸鈉標準溶液體積，ml；C0硫代硫酸鈉（Na2S2O3·5H2O）標準溶液濃度，mol/L；32.031/2SO2的摩爾質(zhì)量，g/mol。11二氧化硫使用液：臨用前將二氧化硫標準溶液用四氯汞鈉吸收液稀釋成每毫升相當于2g二氧化硫。120.5mol/L氫氧化鈉溶液13硫酸溶液：（11）四、操作方法1樣品處理稱取蘑菇罐頭樣品，開罐后倒入組織搗碎

32、機中搗成勻漿。稱取20g勻漿，置100ml容量瓶中，加入20ml四氯汞鈉吸收液，加入亞鐵氰化鉀及乙酸鋅溶液各2.5ml，最后用水定容到100ml，混勻，靜置1h，過濾后備用。2測定吸取0.505.0ml上述樣品處理液于25ml具塞比色管中。另分別吸取0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00ml二氧化硫標準使用液（相當于0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、3.0、4.0g二氧化硫），分別置于25ml具塞比色管中。分別于樣品及標準管中各加入四氯汞鈉吸收液至10ml，然后各加入1ml 12g/L氨基磺酸銨液、1ml2g/L甲醛溶液及1ml鹽酸副玫瑰苯胺，搖勻后

33、放置20min，以1cm比色杯用0管調(diào)節(jié)零點，在550nm波長處測定其吸光度并繪制標準曲線。3計算X（38）式中：X樣品中二氧化硫的含量，g/kg；A測定用樣液中二氧化硫的含量，g；m樣品質(zhì)量，g；V測定用樣液體積，ml。注意事項1鹽酸副玫瑰苯胺溶液中鹽酸用量直接影響顯色，量多顯色淺，量少顯色深，因此要注意鹽酸的用量。2二氧化硫標準使用液的濃度隨放置時間逐漸降低，故臨用前需用新標定的二氧化硫標液稀釋。3為了消除亞硝酸對顯色的干擾影響，故加入氨基磺酸銨，促使亞硝酸分解。HNO2NH2SO2ONH4NH4HSO4N2H2O3 本方法為直接比色法，顯色溫度及顯色時間均影響顯色，因此應(yīng)嚴格控制顯色的時

34、間和溫度一致。一般顯色時間為1030min，溫度1025顯色比較穩(wěn)定，高于30結(jié)果偏低。實訓(xùn)六、小麥粉中過氧化苯甲酰的測定（氣相色譜法）一、目的熟練掌握氣相色譜操作技術(shù)。二、原理小麥粉中的過氧化苯甲酰被還原鐵粉和鹽酸反應(yīng)產(chǎn)生的原子態(tài)氫還原，生成苯甲酸，經(jīng)提取凈化后用氣相色譜儀測定，然后與標準系列比較定量。三、試劑1乙醚、丙酮、石油醚（沸程6090）2鹽酸（11）溶液350g/L氯化鈉溶液4還原鐵粉510g/L碳酸鈉的50g/L氯化鈉水溶液：稱取1g碳酸氫鈉溶于100ml50g/L氯化鈉溶液中。6石油醚：乙醚（31）混合溶液7苯甲酸標準貯備液：準確稱取苯甲酸（基準試劑）0.1000g，用丙酮溶解

35、并轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中后定容，此溶液濃度為1mg/ml。8苯甲酸標準使用液：準確吸取苯甲酸標準貯備溶液10.00ml于100ml容量瓶中，用丙酮稀釋定容，此溶液濃度為100g/ml。四、儀器和用具1氣相色譜儀，附有氫火焰離子化檢測器。2微量注射器：10l。2 150ml具塞三角瓶 150m分液漏斗 50ml具塞比色管 五、操作方法1樣品處理準確稱取試樣5.00g置于具塞三角瓶中，加入0.01g還原鐵粉，約20粒玻璃珠（6mm左右）和20ml乙醚，混合均勻。逐滴加入0.5ml鹽酸，回旋搖動，用少量乙醚沖洗三角瓶內(nèi)壁后放置過夜（至少12h），搖勻，靜置片刻，將上清液用快速濾紙濾入150ml分液

36、漏斗中。用乙醚洗滌三角瓶內(nèi)的殘渣，每次用15ml（標準曲線溶液每次用10ml），共洗滌三次。最后用少量乙醚沖洗過濾漏斗和濾紙，濾液合并于分液漏斗中。取50g/L氯化鈉溶液30ml倒入分液漏斗中，回旋搖動30S，防止氣體頂塞，并適當放氣。靜止分層后棄去下層水溶液。再用氯化鈉溶液重復(fù)洗滌一次，棄去下層水溶液。加入10g/L碳酸氫鈉的50g/L氯化鈉水溶液15ml，回旋搖動2min（切勿劇烈振蕩，以免乳化，并適當放氣）。靜止分層后，將下層堿液放入50ml具塞比色管（預(yù)先放置34藥勺固體氯化鈉）中。分液漏斗中的醚層再用堿性溶液重復(fù)提取一次，合并下層溶液于比色管中。加入0.8ml（11）鹽酸溶液，適當搖

37、動，充分驅(qū)除殘留的乙醚和反應(yīng)產(chǎn)生的CO2氣體（若室溫較低時可將比色管置于50水浴中加熱），至管內(nèi)無乙醚的氣味為止。再加入5.00ml石油醚乙醚（31）混合溶液，充分振搖1min后靜止分層，棄去下層溶液。2繪制標準曲線準確吸取苯甲酸標準使用液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0ml分別置于150ml具塞三角瓶中，除不加還原鐵粉外，其它操作按1中“加入約20粒玻璃珠棄去下層溶液”方法操作。其制備液的最終濃度分別為0、20、40、60、80、和100g/ml。然后用微量注射器分別取不同濃度的苯甲酸溶液2.0l注入氣相色譜儀中。以其苯甲酸峰面積為縱坐標，苯甲酸濃度為橫坐標，繪制標準曲線。3測

38、定色譜條件：內(nèi)徑3mm、長2m的玻璃柱，填裝涂布5%（m/m）DEGS1%磷酸固定液的（6080目）Chromosorb W/AW DMCS。調(diào)節(jié)載氣（氮氣）流速，使苯甲酸于（510）min內(nèi)出峰。柱溫為180，檢測器和進樣口溫度為250。不同型號儀器調(diào)整為最佳工作條件。進樣測定：用10l微量注射器取2.0l測定液，注入氣相色譜儀中，取試樣的苯甲酸峰面積與標準曲線比較定量。4結(jié)果計算X×0.992（39）式中：X試樣中的過氧化苯甲酰含量，g/kg；C由標準曲線上查出的試樣被測液中相當于苯甲酸溶液的濃,g/ml；m樣品的質(zhì)量，g；0.992苯甲酸換算成過氧化苯甲酰的換算系數(shù)。實訓(xùn)七、飲

39、料中苯甲酸鈉、糖精鈉含量的測定（高效液相色譜法）一、目的1、學(xué)習(xí)及了解高效液相色譜儀的工作原理及操作要點。2、掌握高效液相色譜法測定糖精鈉、苯甲酸鈉的原理及方法。3、學(xué)會使用高效液相色譜儀、學(xué)會以識別色譜圖。二、原理樣品加熱除去二氧化碳和乙醇，調(diào)節(jié)PH至近中性后，過濾，然后經(jīng)高效液相色譜儀反相色譜分離，根據(jù)保留時間和峰面積進行定性定量。三、試劑1甲醇：經(jīng)濾膜（0.5m）過濾。2氨水（11）：氨水與水等體積混合。30.02mol/L乙酸銨溶液：稱取1.54g乙酸銨，加水至1000ml溶解，經(jīng)濾膜10.45m過濾。4糖精鈉標準貯備液：準確稱取0.0851g經(jīng)120烘干4h后的糖精鈉，加水溶解定容至

40、100ml。此溶液糖精鈉含量為1.0mg/ml。5糖精鈉標準使用液：吸取糖精鈉標準貯備液10.0ml于100ml容量瓶中，加水至刻度。經(jīng)濾膜（0.45m）過濾。此溶液每毫升相當于0.10mg糖精鈉。四、儀器和用具高效液相色譜儀、紫外檢測器。五、測定方法1、樣品處理稱取5.010.0g樣品中，用氨水（11）調(diào)至PH7，加水定容至適當體積，經(jīng)濾膜（0.45m）過濾，濾液用作HPLC分析。2、高效液相色譜參考條件1色譜柱：YWGC184.6mm×150mm，5m，或其他型號C18柱。2流動相：甲醇乙酸銨溶液（0.02mol/L）（595）。3流速：1.0ml/min。4進樣量：10l。5檢

41、測器：紫外檢測器，波長230nm，靈敏度0.2AUFS。根據(jù)保留時間定性，外標峰面積法定量。六、結(jié)果計算X（313）式中：X樣品中糖精鈉的含量，g/kg(L)；m1進樣體積中糖精鈉的質(zhì)量，mg；m2樣品質(zhì)量，g；V1樣點稀釋總體積，ml；V2進樣體積，ml。實訓(xùn)八、食品中鉛含量的測定一、目的1、掌握分光光度法測定食品中鉛含量的方法。2、熟悉樣品處理方法。二、原理樣品經(jīng)消化后，在PH8.59.0時，鉛離子與雙硫腙生成紅色絡(luò)合物，溶于三氯甲烷，絡(luò)合物顏色的深淺與樣品中鉛的含量成正比。反應(yīng)式如下：三、試劑1氨水（11）：氨水與水等體積混合。26mol/L鹽酸：量取100ml鹽酸，加水稀釋至200ml

42、。3酚紅指示液：1g/L酚紅乙醇溶液。420%鹽酸羥氨溶液：稱取20g鹽酸羥氨，加水溶解至約50ml，加2滴酚紅指示液，加（1+1）氨水，調(diào)PH至8.59.0（由黃變紅，再多加2滴），用雙硫腙三氯甲烷溶液提取至三氯甲烷層呈綠色不變?yōu)橹?，再用三氯甲烷洗兩次，棄去三氯甲烷層，水層?mol/L鹽酸呈酸性，加水至100ml。520檸檬酸銨溶液：稱取50g檸檬酸銨，溶于100ml水中，加2滴酚紅指示劑，加（11）氨水調(diào)PH8.59.0，用雙硫腙三氯甲烷溶液提取數(shù)次，每次1020ml至三氯甲烷層綠色不變?yōu)橹?，棄去三氯甲烷層，再用三氯甲烷洗兩次，每?ml，棄去三氯甲烷層，加水稀至250ml。610%氰化

43、鉀溶液。7三氯甲烷：不應(yīng)含氧化物。檢驗方法：量取10mL三氯甲烷，加25mL新煮沸過的水，振搖3min，靜置分層后，取10mL水液，加數(shù)滴15%碘化鉀及淀粉指示液，振搖后應(yīng)不呈蘭色。處理方法：在三氯甲烷中加入1/101/20體積地20%硫代硫酸鈉溶液洗滌，再用水洗后加入少量無水氯化鈣脫水后進行蒸餾，棄去最初及最后的蒸餾液，收集中間餾出液備用。8淀粉指示液：稱取0.5g可溶性淀粉，加5ml水攪勻后，慢慢倒入100ml沸水中，隨倒隨攪拌，煮沸，放冷備用。910g/L硝酸：量取1ml硝酸加水稀釋至100ml。10雙硫腙三氯甲烷溶液：保存冰箱中，必要時用下述方法純化。稱取0.5g研細的雙硫腙溶于50m

44、l三氯甲烷中，如不全溶，可用濾紙濾于250ml分液漏斗中，用（1+99）氨水提取3次，每次100ml，將提取液用棉花過濾至500ml分液漏斗中，用6mol/L鹽酸調(diào)至酸性，將沉淀出的雙硫腙用三氯甲烷提取23次，每次20ml，合并三氯甲烷層，用等量水洗滌兩次，棄去洗滌液，在50水浴上蒸去三氯甲烷。精制的雙硫腙置硫酸干燥器中，干燥備用?；?qū)⒊恋沓龅碾p硫腙用200、200、100ml三氯甲烷提取三次，合并三氯甲烷層為雙硫腙溶液。11雙硫腙使用液：吸取1.0ml雙硫腙溶液，加三氯甲烷至10ml混勻。用1cm比色杯，以三氯甲烷調(diào)零點，于波長510nm處測吸光度（A），用下式算出配制100ml雙硫腙使用液

45、（70%透光率）所需雙硫腙溶液的毫升數(shù)V。V=（314）12鉛標準溶液：精密稱取0.1598g硝酸鉛，加10ml 1%硝酸，全部溶解后，移入100ml容量瓶中并加水稀釋至刻度。此溶液每毫升相當于1mg鉛。13鉛標準使用液：吸取1.0ml鉛標準液移入100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度。此溶液每毫升相當于10g鉛。四、操作方法1樣品處理：（1）硝酸硫酸消化法：根據(jù)樣品含水分的多少來確定取樣量的不同。含水分較多的果蔬類稱取25.050.0g洗凈并打成勻漿的樣品；飲料類可吸取10.020ml樣品；含水分較少的固體樣品可吸取5.010.0g的粉碎樣品將試樣轉(zhuǎn)移入250500ml定氮瓶中，對干燥的試樣可先

46、加少許水濕潤。加數(shù)粒玻璃珠、1015ml硝酸，放置片刻，在通風櫥內(nèi)小火緩緩加熱，待作用緩和，放冷。沿瓶壁緩慢加入5ml或10ml硫酸，再繼續(xù)加熱，至瓶內(nèi)液體開始變成棕色時，不斷沿瓶壁滴加硝酸至有機質(zhì)分解完全。加大火力，至產(chǎn)生白煙，此時溶液應(yīng)透明并無色或微帶黃色，放冷。在消化過程中應(yīng)注意控制熱源強度。在瓶中加入20ml水并煮沸，至產(chǎn)生白煙為止（除去殘余的硝酸），如此處理兩次，冷卻。將溶液移入50ml或100ml容量瓶中，用水洗滌定氮瓶，洗液并入容量瓶中，冷卻后加水至刻度，混勻。此液每10ml相當于15g樣品，相當加入硫酸量1ml。取與消化樣品相同量的硝酸和硫酸，按同一方法作試劑空白試驗。（2）灰

47、化法：稱取5.0g或吸取5.0ml樣品（液體樣品應(yīng)先在水浴上蒸干）置于坩堝中，加熱至炭化。在高溫爐內(nèi)灰化3h，取出放冷后，加入1ml硝酸潤濕灰分，用小火蒸干，在550下灼燒1h，放冷，取出坩堝。然后加入1ml(1+1)硝酸，加熱使灰分溶解，移入50ml容量瓶中，用水洗滌坩堝，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混勻備用。2測定吸取10.0ml消化液和相同量的試劑空白液，分別置125ml分液漏斗中，各加水至20ml。分別依次加入200g/L檸檬酸銨溶液20ml、200g/L鹽酸羥胺溶液1ml和2滴酚紅指示液，用（1+1）氨水調(diào)至紅色，再各加100g/L氰化鉀溶液2ml，混勻。各加入5.0ml雙硫腙使用

48、液，劇烈振搖1min，靜置分層后，將三氯甲烷層經(jīng)脫脂棉濾入1cm的比色杯中，以零管調(diào)節(jié)零點，在波長510nm處測吸光度。吸取0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50ml鉛標準使用液（相當0、1、2、3、4、5g鉛），分別置于125ml分液漏斗中，各加入1%硝酸溶液至20ml。以下按樣品溶液依次處理，然后分別測定吸光度，繪制標準曲線。五、結(jié)果計算：X=（315）式中：X樣品中鉛的含量，mg/kg或mg/L；A1測定用樣品消化液中鉛的含量，g；A2試劑空白液中鉛的含量，g；m樣品質(zhì)量（體積），g（ml）；V1樣品消化液的總體積，ml。V2測定用樣品消化液的總體積，ml。注意事項：

49、1雙硫腙 學(xué)名二苯基硫卡巴腙（Dithizone，又名：打薩腙，二苯磺腙等。代號H2Dz或Dz）。藍黑色或紫色結(jié)晶粉末，難溶于水，能溶于堿性水溶液中，可溶于大多數(shù)有機溶劑中，并呈綠色。雙硫腙能與許多金屬形成絡(luò)合物，這些絡(luò)合物能溶于三氯甲烷或四氯化碳并且呈現(xiàn)顏色。若控制一定的反應(yīng)條件，則可提高雙硫腙對重金屬的選擇性，常用的控制方法是控制溶液PH值或加入適當?shù)难诒蝿瑥亩捎秒p硫腙比色法對食品中的多種微量礦物質(zhì)元素進行測定。市售的雙硫腙常含有氧化生成的二苯硫卡巴二腙，此化合物不與金屬元素形成絡(luò)合物，但能溶于氯仿或四氯化碳呈黃色或棕色，干擾測定，因此對市售雙硫腙要進行提純處理。方法如下：稱取1g雙硫

50、腙，加入200ml四氯化碳或氯仿使其溶解，移入500ml分液漏斗中，加入（1+100）氨水溶液200ml，振搖數(shù)次，此時雙硫腙在氨水溶液中，氧化物殘留在有機溶液中。再用（1+100）氨水溶液對有機溶液層進行數(shù)次提取，至氨液不變橙色為止。合并氨水層，加（1+1）鹽酸中和并使其呈酸性，此時雙硫胺沉淀析出，再加入四氯化碳或氯仿20ml抽提3次，收集抽提液于另一分液漏斗中，用水洗滌數(shù)次，將抽提液移入三角瓶中，先回收四氯化碳，再在水浴上蒸去殘留的四氯化碳，在干燥器內(nèi)干燥備用。2純雙硫腙（或其溶液）應(yīng)在低溫（45）下避光保存以免被氧化。3在測定過程中，溶液的PH值對其影響較大，應(yīng)控制PH8.59.0內(nèi)。4

51、所用試劑應(yīng)盡可能作提純處理。檸檬酸銨、雙硫腙必須提純，其余試劑可根據(jù)試劑等級或通過空白試驗，再決定是否需要提純。5儀器在使用之前，應(yīng)用10%20%硝酸處理，再用無鉛水沖洗，以防止其對結(jié)果的影響。實訓(xùn)九、食品中總砷含量的測定一、目的1、熟悉樣品中總砷信量的測定方法。2、進一步熟悉分光光度法。二、原理樣品經(jīng)消化后，利用鋅與酸作用所產(chǎn)生原子態(tài)氫，在碘化鉀和氯化亞錫存在下將樣品中高價砷還原成三價砷，與氫作用生成砷化氫，經(jīng)銀鹽溶液吸收后，形成紅色膠體，溶液的顏色呈紅色。顏色的深淺與砷的含量成正比，與標準系列比較定量。反應(yīng)式如下：三、試劑硝酸、硫酸、鹽酸、氧化鎂、無砷鋅粒硝酸高氯酸混合液（4+1）：量取8

52、0mL硝酸，加20mL高氯酸混勻。硝酸鎂及硝酸鎂溶液：稱取1.5g硝酸鎂Mg(NO3)2·6H2O溶于水中，稀釋至100mL。50g/L碘化鉀溶液：貯于棕色瓶中。酸性氯化亞錫溶液：稱取40g氯化亞錫（SnCL2·2H2O）加鹽酸溶解并稀釋至100mL，加入數(shù)顆金屬錫粒。6mol/L鹽酸：量取50mL鹽酸加入稀釋至100mL。100g/L乙酸鉛溶液。乙酸鉛棉花：用100g/L乙酸鉛溶液浸透脫脂棉后，壓除多余溶液，并使疏松，在100 以下于燥后，貯于玻璃瓶中。200g/L氫氧化鈉溶液。100g/L硫酸：量取5.7mL硫酸加入80mL水中，冷卻后再加入釋釋至100mL。二乙氨基二

53、硫代甲酸銀三乙醇胺三氯甲烷溶液：稱取0.25g二乙氨基二硫代甲酸銀 (C2H5)2NCS2Ag置于乳缽中，加少量三氯甲烷研磨，移入100mL量筒中，加入1.8mL三乙醇胺，再用三氯甲烷分次洗滌乳缽，洗液一并移入量筒中，再用三氯甲烷稀釋至100mL，放置過夜，濾入棕色瓶中貯存。砷標準溶液：精確稱取0.1320g經(jīng)硫酸干燥器干燥或在100干燥2h的三氧化二砷，加5mL 200g/L氫氧化鈉溶液5mL，溶解后10%硫酸25mL，轉(zhuǎn)移入1000mL容量瓶中，用新煮沸冷卻的水稀釋至刻度，貯存于棕色玻塞瓶中。此溶液每毫升相當于0.1mg砷。砷標準使用液：吸取1.0mL砷標準溶液，置于100mL容量瓶中，加

54、1mL10%硫酸溶液，加水稀釋至刻度，此溶液每毫升相當于1g。四、儀器（1）分光光度計。（2）砷化氫吸收裝置五、操作方法1、樣品處理硝酸高氯酸硫酸法：根據(jù)樣品含水量的高低確定取樣量的不同。含水分較少的固體食品取5.010.0g的粉碎樣品；醬類食品稱取10.020.0g樣品；含水分較高的果蔬類稱取25.050.0g打成勻漿的樣品；飲料類可吸取1020mL。將試樣置于250500mL定氮瓶中，干燥的試樣可先加少許水潤濕，加數(shù)粒玻璃珠，1015mL硝酸高氯酸混合液，放置片刻，小心緩緩加熱，待作用緩和后放冷。然后沿瓶壁加入5mL或10mL硫酸，再繼續(xù)加熱，直至瓶中開始變成棕色時，不斷沿瓶壁滴加硝酸高氯酸混合液使有機物質(zhì)分解完全。加大火力至產(chǎn)生白煙，溶液呈現(xiàn)澄清無色或微帶黃色，放冷。注意操作過程中防止爆炸。在瓶內(nèi)加20mL水煮沸來除去殘余的硝酸至產(chǎn)生白煙為止。如此處理兩次，放冷。將冷卻后的溶液移入50ml或100ml容量瓶中，用水洗滌定氨瓶，洗滌并入容量瓶中，冷卻，加水至刻度混勻。此溶液每毫升相當于1g樣品，相當加入硫酸量1ml。取與消化樣品相同量的硝酸高氯酸混合液和硫酸置