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文檔簡介

1、在進行分析測試方面的研究時,一般采用移液槍(pipette)量取少量或微 量的液體。對于移液槍的正確使用方法及其一些細節(jié)操作,是很多人都會忽略的。 現(xiàn)在分幾個方面詳細敘述。量程的調節(jié)在調節(jié)量程時,如果耍從大體積調為小體積,則按照正常的調節(jié)方法,逆時 針旋轉旋鈕即可;但如果要從小體積調為大體積時,則可先順吋針旋轉刻度旋鈕 至超過量程的刻度,再回調至設定體積,這樣可以保證量取的最高精確度。 在該過程中,干萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內部機械裝置而損壞了移液 槍。槍頭(吸液嘴)的裝配在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲 兒下,這時錯誤的做法,因為這樣會導

2、致移液槍的內部配件(如彈簧)因敲擊產 生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至會導致刻度調節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移 液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉動即可使其緊密結合。如果是 多道(如8道或12道)移液槍,則可以將移液槍的第一道對準第一個槍頭,然 后傾斜地插入,往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標志是略為超過c®環(huán), 并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。移液的方法移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,移液器 保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液 體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。這時可以采取 兩種移

3、液方法。一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至第一停點,然后慢慢松開按鈕回原點。 接著將按鈕按至第一停點排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的 液體。最后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉移高粘液休、生物活性液休、易起泡液體或極 微量的液體,其原理就是先吸入多于設置量程的液體,轉移液體的時候不用吹出 殘余的液體。先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至第 一停點排出設置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點(千萬別再往下 按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。移液器的正確放置使用完畢,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。當移液器槍頭里 有液體時,切勿將移

4、液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。維護保養(yǎng)時的注意事項> 如不使用,要把移液槍的量程調至最大值的刻度,使彈贊處于松弛狀態(tài)以保 護彈簧。> 最好定期清洗移液槍,可以用肥皂水或60 %的異丙醇,再用蒸僻水清洗, 自然晾干。> 高溫消毒之前,耍確保移液器能適應高溫。> 校準是可以在20-25度環(huán)境屮,通過重復幾次秤量蒸錮水的方法來進行。> 使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時吸取液休后懸空垂直放置兒秒中,看 看液面是否下降。>如果漏液,原因大致有一下幾方面:1、槍頭是否匹配;2彈簧活塞是否正常;艮如果是易揮發(fā)的液體(許多有機溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽

5、壓的 問題??梢韵任艓状我后w,然后再移液??烧{式自動取液器的操作方法:用擁指和食指旋轉取液器上部的旋紐,使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容蚩體枳的數(shù)字,在取液湍下端插上一個槊料吸頭,并旋緊以保證氣密,然 后四指并攏握住取液器上部,用拘指按住柱塞桿頂端的按鈕,向下按到第一停點,將取液器的吸頭插入待取的溶液中,緩慢松開按鈕, 吸上液體,并停8m2秒蝕(粘性人的溶液町加長停留時何),將吸頭沿器壁滑出容器用吸水紙擦去吸頭表面可能附若的液體,排液時 吸頭接觸傾斜的器壁(移液器保持豎宜狀態(tài)),先將按鈕按到第-停點,停留秒鐘(耕性大的液體要加長停留時間).再按壓到第二停點, 吹出吸頭尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸

6、頭.可按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸移液湍使用注總事項(1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。為獲得較高的精度,吸頭需預先吸収-次樣品溶液.然后再正式移液.因為吸収血請蛋白質洛液或冇機溶劑時,吸頭內壁會殘留一層” 液膜”,造成排液量偏小而產生誤差。(3) 濃度和粘度大的液體,會產生課差,為消除其保差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調節(jié)旋紐改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設定。(4) 可用分析天平稱晝所取純水的垂量并進行計算的方法,來校正取液器,1ml蒸憎水20'c時重09982g(5) 移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是非

7、常不可取的,長期操作會便內部零件松散而損壞移液器。(6) 移液器未裝吸頭時.切莫移液。(7) 在設置量程時,請注意所設斌程在移液器娥程范慟內不耍將按鈕旋出量程,否則會卡住機械裝站 損壞了移液器。數(shù)字清淸楚楚在顯 示窗中,旋轉到所需量程(8) 移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性.強腐蝕性的液體(如濃酸.濃堿.有機物等)。(9) 嚴禁便用移液器吹打混勻液體。(10) 不耍用人晟程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需耍移取晟程范用以外較人駅的液體.請使川移液管進行操 作移液器的種類和使用準確的分析方法對于生物化學實驗是極為重要的,在各種生物化涕分析技術中,首先要熟練學握的就旻準確的移液技術。

8、為此要用到各 種形式的移液管,其中有一些是學生們在化學實驗中未用過而在生化實驗中是常用的。1滴管使用方便,可用于半定量移液,其移液量為1ml5ml.常用2ml.可換不同大小的滴頭。滴管有長、短兩種,新出的一種帶刻度和緩 沖泡的滴骨,可以比普通滴管更準確地移液,并防止液體吸入滴頭。2移液管(吸管)吸管便用就應洗至內壁不掛水珠.1ml以上的吸管用吸管專用刷刷洗,0.1ml. 0.2ml和0.5ml的吸管可用洗滌劑浸泡.必要時可以川 超聲淸洗器淸洗。由于倂酸洗液致癌,應盡鍛避免使用。若有大駅成批的吸管洗后沖洗.可使用沖洗桶.將吸管尖端向上置于桶內.用 自來水多次沖洗后再用蒸懈水或無離子水沖洗。吸骨分

9、為兩種,一種是無分度的,稱為大肚吸符(移液管),粘確度較離,其相對誤差a級為07%08%, b級為45%0.16%,液 體自標線流至口端(留有殘液).a級等待15s. b級答待3s。另一種吸管為分度吸管(吸量管),管身為一粗細均勻的玻璃管,上而均 勻刻有表示容積的分度線,其準確度低于胖肚吸管,相對誤差a級為0.8%0.2%, b級為1.6%0.4%, a級.b級在吸管身上有a、 b字樣.有快好則為快流式,有”吹”字則為吹出式.無pt字的吸管不可將管尖的殘留液吹岀。吸.放溶液前耍用吸水紙擦拭管尖。3微量進樣器微址進樣器常用作氣相和液相色譜儀的進樣器,在生化實驗中主要是用作電泳實驗的加樣器,通???/p>

10、分為無存液和有存液兩種。(1) 10pl以下的極微量液體進樣。無存液微雖進樣器:進樣器的不銹鋼芯子直接通到針尖端處,不會出現(xiàn)存液。(2) 10pl100pl有存液微晟進樣器:不銹鋼的針尖管部分是空管進樣器的柱塞不能到達,因而管內會存有空氣或液體其使用注意事 項是:不吋吸取濃堿溶液,以免腐蝕玻璃和不銹鋼零件;因為有存液所以吸液時要來冋多拉兒次,將針尖管內的氣泡全部排盡: 針尖管內孔極小,使用后尤其是吸取過蛋白質溶液后,必須立即活洗針尖管,防止堵塞。若遇針尖管堵塞,不可用火燒,只能用q>0.1 mm的不銹鋼絲耐心昭通;進樣器未潤濕時不可來回干拉芯子,以免磨損而漏氣;若進樣器內發(fā)黑,有不銹鋼氧

11、化物.可用芯子薩 少量肥皂水,來回拉幾次即可除之。4自動取液器這種取液器在生化實驗中大址地使用,它們主要用于多次垂復的快速定眾移液,可以只用一只手操作,十分方便。移液的準確度(即容址 誤差)為±(0.5%仁5%),移液的粘密度(即重復性誤差)更小些,為<0.5%.収液器可分為二種:一種是固定容雖的,常用的有100p l等多種規(guī)格。每種取液器都有其專用的聚丙烯塑料吸頭,吸頭通常是一次性 使用.當然也可以超聲淸洗后重復使用,而11此種吸頭還可以進行120'c高壓滅菌:另一種是可訓容駅的取液器.常用的有200pl. 50 opl和1000pl等兒種??烧{式自動取液器的操作方法

12、是用捋指和食指旋轉取液器上部的旋鈕,使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體枳的數(shù)字,在取液器下端插上一個塑 料吸頭,并旋緊以保證氣密,然后四指并攏握住取液湍i:部,用押指按住柱塞桿頂端的按鈕,向下按到第一停點,將取液器的吸頭插入 待取的溶液中,緩慢險開按鈕,吸上液體,并停tyf 1-2秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時何).將吸頭沿器壁滑出容器,用吸水紙擦去吸 頭表面可能附若的液體,排液時吸頭接觸傾斜的器咯 先將按鈕按到第一停點,停留-秒鐘(粘性大的液體耍加長停留時間),再按壓到第 二停點,吹出吸頭尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸頭,可按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸。自動取液器的使用注總事項是: 吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。 為

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