miR—182基因表達和肺癌相關(guān)性探究

1、mir182基因表達和肺癌相關(guān)性探究摘要目的分析肺癌局部mir-182的表達水 平，考察其與肺癌臨床特征的相關(guān)性。方法選取2012年3 月2013年5月在我科住院并行手術(shù)治療的非小細胞肺癌患 者62例，分離腫瘤組織并提取mir-182, rtpcr方法檢測 mir-182的表達水平，分析其肺癌臨床病例特征之間的相關(guān) 性。結(jié)果mir-182在不同年齡和性別的患者中表達沒有差 異（p>0. 05）； mir-182在肺癌組織中的表達與浸潤程度、淋 巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移和腫瘤分期具有明顯的相關(guān)性（p0. 05）o 1. 2試劑mircute mirna 提取分離試劑盒、real master m

2、ix probe 試劑盒（天根公司），5xreverse tanscriptase m-mlv buffer, dntp mixture （大連寶生物公司），引物和探針均 由上海閃晶公司設計并合成。mir-182、u6上游引物購至上 海生工生物工程有限公司。1.3 rt-pcr組織中總rna提?。喝?80 °c保存的組織，切成薄片, 用液氮研磨法磨成粉末，用天根公司mircute mirna提取分 離試劑盒（離心柱型）按說明書操作提取總mirnao用紫 外分光光度儀檢測rna溶液a260/280 nm比值，計算rna 濃度和純度，取a260/280 nm比值在1. 82. 1者用于進

3、一 步實驗。逆轉(zhuǎn)錄后，加入mir-182或內(nèi)參u6探針等，置于 熒光定量pcr上進行pcr擴增。以2-aact方法計算 mir-182的相對表達量5。1. 4統(tǒng)計學分析采用spss16. 0軟件包進行，計量資料采用(x±s)表 示，兩兩均數(shù)比較采用t檢驗，多組均數(shù)比較用單因素方差 分析，p0. 05)；肺癌男女患者之間mir-182沒有統(tǒng)計學差異 (p>0. 05)； mir-182在肺癌組織中的表達與浸潤程度、淋巴 結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移和腫瘤分期具有明顯的相關(guān)性(p肺癌位居世界癌癥死因之首，肺癌的發(fā)生也是一個極其復雜 的過程。大多數(shù)肺癌均起源于支氣管粘膜上皮，主要包括 鱗狀細胞癌

4、、小細胞癌、腺癌、大細胞癌四種基本類型。研 究表明，has-mir-155的高表達和has-let-7a-2的低表達可 能會降低肺腺癌患者的存活率7。還有研究人員對112個 nsclc病患的mirna表達數(shù)據(jù)進行檢測分析，發(fā)現(xiàn) has-mir-221和has-let-7a對于肺癌患者具有保護作用，而 has-mir-137、has-mir-372、has-mir-182 則會對預后有不 良的影響8 o目前文獻報道的與肺癌關(guān)系比較密切的mirna 有 mirna-126、mirna-221、mirna-222、has-mir-221、 mir-17-92 簇、mirna-128b、has-mir

5、-137、has-mirt82、 has-mir-372 及 mirna-let7 家族成員等9。目前，關(guān)于mir-182在惡性腫瘤中的表達及其發(fā)揮的 作用尚不明了，甚至有矛盾之處。mir-182通過下調(diào)腫瘤調(diào) 控基因brca1的表達來影響dna的修復，進而影響乳腺癌的 治療。而有研究顯示，mir-182高表達的er+乳腺癌患者， 對內(nèi)分泌治療敏感，無復發(fā)，生存期長，且mir-182與淋 巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)，這可能是由于mir-182在不同的腫瘤中 靶基因可能并不完全相同，而其下游靶基因的生物學效應決 定了 mir-182的作用10 o同時mir-182在腫瘤中檢測結(jié) 果不一致的原因也可能是由于

6、mirna的表達具有時序性、組 織特異性。本研究發(fā)現(xiàn)，mir-182可顯著表達于肺癌患者腫瘤部位, 其表達量在患者年齡和性別之間沒有統(tǒng)計學差異；而伴隨著 肺癌的發(fā)展，浸潤程度（t）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（n）、遠處轉(zhuǎn)移（m） 的發(fā)生，mir-182的表達呈現(xiàn)正相關(guān)，癌癥分期水平越高而 mir-182表達量也逐步增加，這些實驗結(jié)果都表達mir-182 在肺癌中的表達扮演了一個負面的作用，這與運用cox比例 風險回歸對157個mirna表達進行分析has-mir-182是危 險性的mirna取得的結(jié)果相似，其可能與在乳腺癌中扮演同 樣的機制，通過調(diào)控基因brca1的表達來影響dna的修復， 進而影響肺癌的進

7、程，亦有文獻報道將mir-182前體 has-mir-182轉(zhuǎn)染入低侵襲性的肺癌細胞系中，肺癌細胞系 滲入基質(zhì)膠膜的侵襲性增強，肺癌患者mir-182表達增加會 導致肺癌細胞侵襲力增強。此外，肺癌鱗癌和腺癌中mir-182 表達量雖有不同，但其不同分期癌癥表達趨勢相同，這可能 與不同類型肺癌的組織細胞的敏感性有關(guān)。綜上述，本研究發(fā)現(xiàn)mir-182在肺癌患者組織中表達水 平上調(diào)，且與肺癌臨床病理特征密切相關(guān)，局部組織的 mir-182有可能成為新一代的肺癌腫瘤標志物，并可用于肺 癌的臨床診斷，具有較好的臨床應用前景。參考文獻1楊健，張秀偉，文昱婷，等.mir-155在非小細胞 肺癌患者血清中的表

8、達及其臨床意義j.實用老年醫(yī)學， 2012, 6 (26)： 459-461.2張繼琛，婁凱，閆李俠.mir-451在肺癌細胞a549 及肺癌癌組織中的表達及其意義j.吉林醫(yī)學，2013, 4(34)： 605-607.3張林，高林波.mir-143和mir-145與腫瘤的研究 進展j.西安交通大學學報(醫(yī)學版)，2013, 34 (18)： 1-6.4郭鳳云，李靜，王玉翠，等.檢測人老化胎盤組織 中mir-182的表達j.現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2013, 3 (13)： 420-425.5王慧，楊雪晴，吳正升，等.mir-182在人乳腺癌 中的表達及意義j.安徽醫(yī)科大學學報，2011, 11 (

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