[精品]凝膠凝集技術(shù)篩選和鑒定抗體_第1頁
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文檔簡介

1、凝膠凝集技術(shù)1原理在微柱凝膠試驗(yàn)屮,用特制的微柱代替普通試管,微柱內(nèi)注入匍聚糖、蛋白g或玻璃微 珠等物質(zhì),并可在這些物質(zhì)上預(yù)先分別結(jié)合上抗球蛋口抗體。由于凝膠顆粒具有分子篩作用, 抗原抗體反應(yīng)后的紅細(xì)胞通過離心經(jīng)過微柱,無igg結(jié)合的紅細(xì)胞穿過凝膠到達(dá)底部,而紅 細(xì)胞上若有igg抗體結(jié)合則會(huì)被凝膠中的抗igg拉住,紅細(xì)胞被阻止在凝膠柱上層或中間。 2標(biāo)本與試劑2.1如果待測(cè)的血清和血漿是冰凍保存的,血樣在使用前需離心,確保沒有顆粒物質(zhì);2.2挑選抗igg凝膠卡:檢查每1個(gè)凝膠卡是否于涸是否完整,做好試驗(yàn)標(biāo)記,若是抗體 篩選可選擇23個(gè)微量管,抗體鑒定則需與多個(gè)微量管(根據(jù)試劑紅細(xì)胞譜的細(xì)胞甜種

2、選擇 微量管數(shù),并注意葩有口身與陽性對(duì)照);2.3使用適川于微柱凝膠的試劑紅細(xì)胞組,或參照試劑的要求制備紅細(xì)胞懸液。通常配制 0. 8%紅細(xì)胞懸液。3方法3.1揭開凝膠卡的鋁封,在不同的微量管中,根據(jù)試劑使用說明書的要求分別加入一定量的 (通常50口)不同的篩選或鑒定試劑紅細(xì)胞;3. 2根據(jù)試劑使川說明書的要求在這些微量管中加入一定量的(通常25山)血清或血漿;3.3將凝膠卡置37°c凝膠孵冇箱15分鐘;用凝膠試驗(yàn)離心機(jī),離心觀察結(jié)果。4結(jié)果判讀與解禪4.1細(xì)胞完全沉積在微量管底部為陰性結(jié)呆;4.2所有細(xì)胞仍簾在微量管頂部為強(qiáng)陽性結(jié)果;4.3凝集的強(qiáng)弱判斷請(qǐng)參見圖。凝膠檢測(cè)反應(yīng)級(jí)數(shù)圖陰性所有細(xì)胞均穿 過凝膠介質(zhì),聚集在微型管 底部。2+凝集細(xì)胞彌散 入凝膠介質(zhì)中, 在微型管中穿 越的距離較長。1 +凝集細(xì)胞出現(xiàn)的 彌散穿過凝膠介 質(zhì),可能在接近 微型管底部處形 成聚集。3+凝集細(xì)胞開始 向凝膠介質(zhì)中 彌散,在凝膠 介質(zhì)頂部附近 聚集。4+凝集細(xì)胞在凝膠介質(zhì)的頂端形成一個(gè)細(xì)胞層.混

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