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文檔簡介
1、 1, 細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容有哪幾個(gè)方面、包含哪幾個(gè)層次? 細(xì)胞生物學(xué)Cell Biology是研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能及生活史的一門科學(xué)??煞譃槿齻€(gè)層次,即:顯微水平、超微水平和分子水平。 2. 簡述細(xì)胞學(xué)說的主要內(nèi)容 . 有機(jī)體是由細(xì)胞構(gòu)成的; . 細(xì)胞是構(gòu)成有機(jī)體的基本單位; . 新細(xì)胞來源于已存在細(xì)胞的分裂。 3.舉例說明細(xì)胞生物學(xué)與其他學(xué)科(如:醫(yī)學(xué)或農(nóng)業(yè))的關(guān)系 沒有參考答案,請(qǐng)大家任選一個(gè)方面,提供一些例證說明。 4.如何提高光學(xué)顯微鏡的分辨能力? . 增大鏡口率; .使用波長較短的光線; .增大介質(zhì)折射率。 5.熒光顯微鏡和普通顯微鏡有什么主要區(qū)別 .照明方式通常為落射式,即光源通過
2、物鏡投射于樣品上; .光源為紫外光,波長較短,分辨力高于普通顯微鏡; .有兩個(gè)特殊的濾光片,光源前的用以濾除可見光,目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線,用以保護(hù)人目。 6.什么是電鏡負(fù)染技術(shù) 就是用重金屬鹽如磷鎢酸或醋酸雙氧鈾對(duì)鋪展在載網(wǎng)上的樣品進(jìn)行染色;吸去染料,樣品干燥后,樣品凹陷處鋪了一薄層重金屬鹽,而凸的出地方則沒有染料沉積,從而出現(xiàn)負(fù)染效果。7. 什么是電鏡冰凍蝕刻(freeze-etching)技術(shù) 亦稱冰凍斷裂(freeze-fracture)。標(biāo)本置于干冰或液氮中,進(jìn)行冰凍。然后用冷刀驟然將標(biāo)本斷開,升溫后,冰在真空條件下迅即升華,暴露出了斷裂面的結(jié)構(gòu)。冰升華暴露出標(biāo)本內(nèi)部結(jié)構(gòu)的步
3、驟稱為蝕刻(etching)。蝕刻后,再向斷裂面上噴涂一層蒸汽碳和鉑。然后將組織溶掉,把金屬薄膜剝下來,此膜即為復(fù)膜(replica)。復(fù)膜顯示出了標(biāo)本蝕刻面的形態(tài),可置于電鏡下觀察。電鏡下的影像即代表標(biāo)本中細(xì)胞斷裂面處的結(jié)構(gòu)。 8.原核生物有什么主要特征? .沒有核膜,遺傳物質(zhì)集中在一個(gè)沒有明確界限的低電子密度區(qū),稱為擬核。 . DNA為單個(gè)裸露的環(huán)狀分子,通常沒有結(jié)合蛋白; .沒有恒定的內(nèi)膜系統(tǒng); .核糖體為70S型。 9.病毒(Virus)基本特征有哪些? .個(gè)體微小,可通除濾菌器,大多數(shù)病毒必須用電鏡才能看見; . 僅具有一種類型的核酸, DNA或RNA; .專營細(xì)胞內(nèi)寄生生活。10.
4、什么是蛋白質(zhì)感染因子(prion)? 是一種變異的蛋白質(zhì),可引起同類蛋白質(zhì)發(fā)生構(gòu)象改變,從而使變異蛋白數(shù)量增多,在細(xì)胞中積累,引起細(xì)胞病變,所以也叫朊病毒。羊瘙癢病、瘋牛病都是由蛋白質(zhì)感染因子引起的。 11.生物膜的基本結(jié)構(gòu)特征是什么? . 磷脂分子以疏水尾部相對(duì),極性頭部朝外,形成磷脂雙分子層,組成生物膜的基本骨架。 .蛋白分子以不同的方式鑲嵌在脂雙層分子中或結(jié)合在其表面,蛋白具有方向性和分布的不對(duì)稱性。 . 生物膜具有流動(dòng)性。12.簡述質(zhì)膜的主要功能 .為細(xì)胞的生命活動(dòng)提供相對(duì)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境; .選擇性的物質(zhì)運(yùn)輸,包括代謝底物的輸入與代謝產(chǎn)物的排出; .提供細(xì)胞識(shí)別位點(diǎn),并完成細(xì)胞內(nèi)外信息的
5、跨膜傳遞; .為多種酶提供結(jié)合位點(diǎn),使酶促反應(yīng)高效而有序地進(jìn)行; .介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基質(zhì)之間的連接; .參與形成具有不同功能的細(xì)胞表面特化結(jié)構(gòu)。13.什么是膜的整合蛋白? 整合蛋白可能全為跨膜蛋白(tansmembrane proteins),為兩性分子,疏水部分位于脂雙層內(nèi)部,親水部分位于脂雙層外部。由于存在疏水結(jié)構(gòu)域,整合蛋白與膜的結(jié)合非常緊密,只有用去垢劑(detergent)才能從膜上洗滌下來,如離子型去垢劑SDS,非離子型去垢劑Triton-X100。14.簡單擴(kuò)散有什么特點(diǎn)? 沿濃度梯度(電化學(xué)梯度)方向擴(kuò)散(由高到低); 不需能量; 沒有膜蛋白協(xié)助15.協(xié)助擴(kuò)散有什么特點(diǎn)
6、比自由擴(kuò)散轉(zhuǎn)運(yùn)速率高; 存在最大轉(zhuǎn)運(yùn)速率; 在一定限度內(nèi)運(yùn)輸速率同物質(zhì)濃度成正比。如超過一定限度,濃度再增加,運(yùn)輸也不再增加。因膜上載體蛋白的結(jié)合位點(diǎn)已達(dá)飽和; 有特異性,即與特定溶質(zhì)結(jié)合。 載體有離子載體和通道蛋白兩種類型。16. 主動(dòng)運(yùn)輸?shù)哪芰縼碓从心男┩緩剑?協(xié)同運(yùn)輸中的離子梯度動(dòng)力; ATP驅(qū)動(dòng)的泵通過水解ATP獲得能量; 光驅(qū)動(dòng)的泵利用光能運(yùn)輸物質(zhì),見于細(xì)菌。17.質(zhì)子泵由哪三種類型? . P-type:載體蛋白利用ATP使自身磷酸化(phosphorylation),發(fā)生構(gòu)象的改變來轉(zhuǎn)移質(zhì)子或其它離子,如植物細(xì)胞膜上的H+泵、動(dòng)物細(xì)胞的Na+-K+泵、Ca2+離子泵,H+-K+AT
7、P酶(位于胃表皮細(xì)胞,分泌胃酸); . V-type:位于小泡(vacuole)的膜上,由許多亞基構(gòu)成,水解ATP產(chǎn)生能量,但不發(fā)生自磷酸化,位于溶酶體膜、動(dòng)物細(xì)胞的內(nèi)吞體、高爾基體的囊泡膜、植物液泡膜上; . F-type:是由許多亞基構(gòu)成的管狀結(jié)構(gòu),H沿濃度梯度運(yùn)動(dòng),所釋放的能量與ATP合成耦聯(lián)起來,所以也叫ATP合酶(ATP synthase)。位于細(xì)菌質(zhì)膜,線粒體內(nèi)膜和葉綠體的類囊體膜上。18.蛋白質(zhì)上主要由哪兩類分選信號(hào)?. 信號(hào)序列(signal sequence):是存在于蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)上的線性序列,通常15-60個(gè)氨基酸殘基,有些信號(hào)序列在完成蛋白質(zhì)的定向轉(zhuǎn)移后被信號(hào)肽酶(si
8、gnal peptidase)切除. .信號(hào)斑(signal patch):存在于完成折疊的蛋白質(zhì)中,構(gòu)成信號(hào)斑的信號(hào)序列之間可以不相鄰,折疊在一起構(gòu)成蛋白質(zhì)分選的信號(hào)。 19.細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的分選運(yùn)輸途徑主要有那些? . 門控運(yùn)輸(gated transport):如核孔可以選擇性的運(yùn)輸大分子物質(zhì)和RNP復(fù)合體,并且允許小分子物質(zhì)自由進(jìn)出細(xì)胞核。 .跨膜運(yùn)輸(transmembrane transport):蛋白質(zhì)通過跨膜通道進(jìn)入目的地。如細(xì)胞質(zhì)中合成的蛋白質(zhì)在信號(hào)序列的引導(dǎo)下,通過線粒體上的轉(zhuǎn)位因子,以解折疊的線性分子進(jìn)入線粒體。 . 膜泡運(yùn)輸(vesicular transport):蛋白
9、質(zhì)被選擇性地包裝成運(yùn)輸小泡,定向轉(zhuǎn)運(yùn)到靶細(xì)胞器。如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向高爾基體的物質(zhì)運(yùn)輸、高爾基體分泌形成溶酶體、細(xì)胞攝入某些營養(yǎng)物質(zhì)或激素,都屬于這種運(yùn)輸方式。20.細(xì)胞的外排主要由哪兩類途徑? 組成型的外排途徑(constitutive exocytosis pathway):所有真核細(xì)胞都有從高爾基體TGN區(qū)分泌囊泡向質(zhì)膜運(yùn)輸?shù)倪^程,其作用在于更新膜蛋白和膜脂、形成質(zhì)膜外周蛋白、細(xì)胞外基質(zhì)、或作為營養(yǎng)成分和信號(hào)分子。組成型的外排途徑通過default pathway完成蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)過程。在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中合成的蛋白質(zhì)除了某些有特殊標(biāo)志的蛋白駐留在ER或高爾基體中或選擇性地進(jìn)入溶酶體和調(diào)節(jié)性分泌泡外,其余
10、的蛋白均沿著粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體分泌泡細(xì)胞表面這一途徑完成其轉(zhuǎn)運(yùn)過程。 調(diào)節(jié)型外排途徑(regulated exocytosis pathway):分泌細(xì)胞產(chǎn)生的分泌物(如激素、粘液或消化酶)儲(chǔ)存在分泌泡內(nèi),當(dāng)細(xì)胞在受到胞外信號(hào)刺激時(shí),分泌泡與質(zhì)膜融合并將內(nèi)含物釋放出去。調(diào)節(jié)型的外排途徑存在于特化的分泌細(xì)胞。其蛋白分選信號(hào)存在于蛋白本身,由高爾基體TGN上特殊的受體選擇性地包裝為運(yùn)輸小泡。21.那些蛋白質(zhì)需要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成? 向細(xì)胞外分泌的蛋白、如抗體、激素; 膜蛋白,并且決定膜蛋白在膜中的排列方式; 需要與其它細(xì)胞組合嚴(yán)格分開的酶,如溶酶體的各種水解酶; 需要進(jìn)行修飾的蛋白,如糖蛋白; 22.
11、高爾基體具有那三個(gè)功能區(qū)隔? 高爾基體順面的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)(cis Golgi network,CGN),是高爾基體的入口區(qū)域,接受由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的物質(zhì)并分類后轉(zhuǎn)入中間膜囊。 高爾基體中間膜囊(medial Gdgi),多數(shù)糖基修飾,糖脂的形成以及與高爾基體有關(guān)的糖合成均發(fā)生此處。 高爾基體反面的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)(trans Golgi network,TGN), 由反面一側(cè)的囊泡和網(wǎng)管組成,是高爾基體的出口區(qū)域,功能是參與蛋白質(zhì)的分類與包裝,最后輸出。23.簡述溶酶體的功能 .細(xì)胞內(nèi)消化:在高等動(dòng)物細(xì)胞中,一些大分子物質(zhì)通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,如內(nèi)吞低密脂蛋白獲得膽固醇;在單細(xì)胞真核生物中,溶酶體的消化作用就
12、更為重要了。 . 細(xì)胞凋亡:溶酶體可清除,凋亡細(xì)胞形成的凋亡小體 .自體吞噬:清除細(xì)胞中無用的生物大分子,衰老的細(xì)胞器等。 .防御作用:如巨噬細(xì)胞可吞入病原體,在溶酶體中將病原體殺死和降解。 .參與分泌過程的調(diào)節(jié),如將甲狀腺球蛋白降解成有活性的甲狀腺素。.形成精子的頂體。 24.簡述溶酶體的形成過程 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上核糖體合成溶酶體蛋白進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔進(jìn)行N-連接的糖基化修飾進(jìn)入高爾基體Cis面膜囊磷酸轉(zhuǎn)移酶識(shí)別溶酶體水解酶的信號(hào)斑將N-乙酰葡糖胺磷酸轉(zhuǎn)移在12個(gè)甘露糖殘基上在中間膜囊切去N-乙酰葡糖胺形成M6P配體與trans膜囊上的受體結(jié)合選擇性地包裝成初級(jí)溶酶體。25.如何研究線粒體的蛋白質(zhì)合成?
13、利用3H標(biāo)記氨基酸培養(yǎng)細(xì)胞,用氯霉素和放線菌酮分別抑制線粒體和細(xì)胞質(zhì)蛋白質(zhì)合成,檢測標(biāo)記蛋白出現(xiàn)在哪些部位。 26.為什么說線粒體的行為類似于細(xì)菌? .具有自己的DNA和轉(zhuǎn)錄翻譯體系。 . DNA分子為環(huán)形。 .核糖體為70S型。 .蛋白質(zhì)合成的起始氨基酸是N-甲酰甲硫氨酸。 . RNA聚合酶對(duì)溴化乙錠敏感,但對(duì)放線菌素不敏感。 .蛋白質(zhì)合成可被氯霉素抑制。27.簡述線粒體的結(jié)構(gòu) .外膜 (out membrane):具有孔蛋白(porin)構(gòu)成的親水通道,通透性高。標(biāo)志酶為單胺氧化酶。 .內(nèi)膜 (inner membrane):心磷脂含量高、缺乏膽固醇,通透性很低,標(biāo)志酶為細(xì)胞色素氧化酶。線
14、粒體氧化磷酸化的電子傳遞鏈位于內(nèi)膜,內(nèi)膜向線粒體基質(zhì)褶入形成嵴,能顯著擴(kuò)大內(nèi)膜表面積。 .膜間隙(intermembrane space):是內(nèi)外膜之間的腔隙,標(biāo)志酶為腺苷酸激酶。 .基質(zhì)(matrix):為內(nèi)膜和嵴包圍的空間。催化三羧酸循環(huán),脂肪酸和丙酮酸氧化的酶類均位于基質(zhì)中,其標(biāo)志酶為蘋果酸脫氫酶。此外基質(zhì)還具有一套完整的轉(zhuǎn)錄和翻譯體系。28.什么是解偶聯(lián)劑(uncoupler)? 解偶聯(lián)劑使氧化和磷酸化脫偶聯(lián),氧化仍可以進(jìn)行,而磷酸化不能進(jìn)行,解偶聯(lián)劑為離子載體或通道,能增大線粒體內(nèi)膜對(duì)H+的通透性,消除H+梯度,因而無ATP生成,使氧化釋放出來的能量全部以熱的形式散發(fā)。如質(zhì)子載體2,
15、4-二硝基酚(DNP)。29. 什么是集光復(fù)合體(light harvesting complex)? 由大約200個(gè)葉綠素分子和一些肽鏈構(gòu)成。大部分色素分子起捕獲光能的作用,并將光能以誘導(dǎo)共振方式傳遞到反應(yīng)中心色素。因此這些色素被稱為天線色素。葉綠體中全部葉綠素b和大部分葉綠素a都是天線色素。另外類胡蘿卜素和葉黃素分子也起捕獲光能的作用,叫做輔助色素。 30.什么是細(xì)胞的化學(xué)通訊,有哪些類型 是間接的細(xì)胞通訊,指細(xì)胞分泌一些化學(xué)物質(zhì)(如激素)至細(xì)胞外,作為信號(hào)分子作用于靶細(xì)胞,調(diào)節(jié)其功能。根據(jù)化學(xué)信號(hào)分子可以作用的距離范圍,可分為以下4類: 1.內(nèi)分泌(endocrine):內(nèi)分泌細(xì)胞分泌的
16、激素隨血液循環(huán)輸至全身,作用于靶細(xì)胞。其特點(diǎn)是:低濃度,僅為10-8-10-12M;全身性,隨血液流經(jīng)全身,但只能與特定的受體結(jié)合而發(fā)揮作用;長時(shí)效,激素產(chǎn)生后經(jīng)過漫長的運(yùn)送過程才起作用,而且血流中微量的激素就足以維持長久的作用。 2.旁分泌(paracrine):細(xì)胞分泌的信號(hào)分子通過擴(kuò)散作用于鄰近的細(xì)胞。包括:各類細(xì)胞因子(如表皮生長因子);氣體信號(hào)分子(如:NO)3.突觸信號(hào)發(fā)放:神經(jīng)遞質(zhì)(如乙酰膽堿)由突觸前膜釋放,經(jīng)突觸間隙擴(kuò)散到突觸后膜,作用于特定的靶細(xì)胞。4.自分泌(autocrine):與上述三類不同的是,信號(hào)發(fā)放細(xì)胞和靶細(xì)胞為同類或同一細(xì)胞,常見于癌變細(xì)胞。如:大腸癌細(xì)胞可自
17、分泌產(chǎn)生胃泌素,介導(dǎo)調(diào)節(jié)c-myc、c-fos和ras p21等癌基因表達(dá),從而促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖 31.簡述磷脂酰肌醇信號(hào)途徑中蛋白激酶C的活化過程? 在未受到刺激的細(xì)胞中,PKC以非活性形式分布于細(xì)胞溶質(zhì)中,當(dāng)細(xì)胞接受外界信號(hào)時(shí),PIP2水解,質(zhì)膜上DG瞬間積累,由于細(xì)胞溶質(zhì)中Ca2+濃度升高,導(dǎo)致細(xì)胞溶質(zhì)中PKC轉(zhuǎn)位到質(zhì)膜內(nèi)表面,被DG活化,進(jìn)而使不同類型的細(xì)胞中的不同底物蛋白的絲氨酸和蘇氨酸殘基磷酸化。32.簡述cAMP信號(hào)途徑中蛋白激酶A的活化過程? 蛋白激酶A(Protein Kinase A,PKA)由兩個(gè)催化亞基和兩個(gè)調(diào)節(jié)亞基組成,在沒有cAMP時(shí),以鈍化復(fù)合體形式存在。cAMP
18、與調(diào)節(jié)亞基結(jié)合,改變調(diào)節(jié)亞基構(gòu)象,使調(diào)節(jié)亞基和催化亞基解離,釋放出催化亞基?;罨牡鞍准っ窤催化亞基可使細(xì)胞內(nèi)某些蛋白的絲氨酸或蘇氨酸殘基磷酸化,于是改變這些蛋白的活性,進(jìn)一步影響到相關(guān)基因的表達(dá)。33.簡述細(xì)胞通信的作用 .調(diào)節(jié)代謝,通過對(duì)代謝相關(guān)酶活性的調(diào)節(jié),控制細(xì)胞的物質(zhì)和能量代謝; .實(shí)現(xiàn)細(xì)胞功能,如肌肉的收縮和舒張,腺體分泌物的釋放; .調(diào)節(jié)細(xì)胞周期,使DNA復(fù)制相關(guān)的基因表達(dá),細(xì)胞進(jìn)入分裂和增殖階段; .控制細(xì)胞分化,使基因有選擇性地表達(dá),細(xì)胞不可逆地分化為有特定功能的成熟細(xì)胞; .影響細(xì)胞的存活。 34.細(xì)胞通過哪些途徑使受體失活,對(duì)刺激產(chǎn)生適應(yīng)? 修飾或改變受體,如磷酸化,使受
19、體與下游蛋白隔離,即受體失活(receptor inactivation)。 暫時(shí)將受體移到細(xì)胞內(nèi)部,即受體隱蔽(receptor sequestration) 通過內(nèi)吞作用,將受體轉(zhuǎn)移到溶酶體中降解,即受體下行調(diào)節(jié)(receptor down-regulation) 35. G蛋白耦聯(lián)型受體有什么特點(diǎn)和作用? G蛋白耦聯(lián)型受體為7次跨膜蛋白,受體胞外結(jié)構(gòu)域識(shí)別胞外信號(hào)分子并與之結(jié)合,胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域與G蛋白耦聯(lián)。通過與G蛋白耦聯(lián),調(diào)節(jié)相關(guān)酶活性,在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生第二信使,從而將胞外信號(hào)跨膜傳遞到胞內(nèi)。G蛋白耦聯(lián)型受體包括多種神經(jīng)遞質(zhì)、肽類激素和趨化因子的受體,在味覺、視覺和嗅覺中接受外源理化因素的受體
20、亦屬G蛋白耦聯(lián)型受體。 36.什么是酶偶聯(lián)型受體? 酶偶聯(lián)型受體(enzyme linked receptor)可分為兩類:其一是本身具有激酶活性,如肽類生長因子(EGF等)的受體;其二是本身沒有酶活性,但可以連接胞質(zhì)酪氨酸激酶,如細(xì)胞因子受體超家族。 這類受體的共同點(diǎn)是:通常為單次跨膜蛋白;接受配體后發(fā)生二聚化而激活,起動(dòng)其下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。37.簡述NO的作用機(jī)理 血管內(nèi)皮細(xì)胞接受乙酰膽堿,引起胞內(nèi)Ca2+濃度升高,激活胞內(nèi)一氧化氮合酶,細(xì)胞釋放NO,NO擴(kuò)散進(jìn)入平滑肌細(xì)胞,與胞質(zhì)鳥苷酸環(huán)化酶(GTP-cyclase,GC)活性中心的Fe2結(jié)合,改變酶的構(gòu)象,導(dǎo)致酶活性的增強(qiáng)和cGMP合成增多
21、。cGMP可降低血管平滑肌中的Ca2+離子濃度。引起血管平滑肌的舒張,血管擴(kuò)張、血流通暢。38.用細(xì)胞松弛素B處理分裂期的動(dòng)物細(xì)胞將會(huì)產(chǎn)生什么現(xiàn)象?為什么? 動(dòng)物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂通過胞質(zhì)收縮環(huán)的收縮實(shí)現(xiàn),收縮環(huán)由大量平行排列的肌動(dòng)蛋白及其動(dòng)力結(jié)合蛋白組成,細(xì)胞松弛素B特異性的破壞微絲的結(jié)構(gòu),抑制胞質(zhì)分裂,因此形成雙核細(xì)胞。 39.細(xì)胞骨架由哪三類成分組成,各有什么主要功能? 細(xì)胞骨架由微絲(microfilament)、微管(microtubule)和中間纖維(intemediate filament)構(gòu)成。微絲確定細(xì)胞表面特征、使細(xì)胞能夠運(yùn)動(dòng)和收縮。微管確定膜性細(xì)胞器(membrane-enc
22、losed organelle)的位置、幫助染色體分離和作為膜泡運(yùn)輸?shù)膶?dǎo)軌。中間纖維使細(xì)胞具有張力和抗剪切力。 40.細(xì)胞內(nèi)主要由哪三類馬達(dá)蛋白? .肌球蛋白(myosin),能向微絲的(+)極運(yùn)動(dòng); .驅(qū)動(dòng)蛋白(kinesin),能向著微管(+)極運(yùn)動(dòng); .動(dòng)力蛋白(dynein),能向著微管(-)極運(yùn)動(dòng); 41.從組裝過程解釋中間纖維沒有極性的現(xiàn)象兩個(gè)單體形成兩股超螺旋二聚體; 兩個(gè)二聚體反向平行組裝成四聚體,三個(gè)四聚體長向連成原絲; 兩個(gè)原絲組成原纖維; 4根原纖維組成中間纖維。 由于IF是由反向平行的螺旋組成的,所以和微絲微蛋不同的是,它沒有極性。42.為什么用秋水仙素處理培養(yǎng)的細(xì)胞,
23、可以增加中期細(xì)胞的比例? 秋水仙素(colchicine)結(jié)合的微管蛋白可加合到微管上,但阻止其他微管蛋白單體繼續(xù)添加,從而破壞紡錘體結(jié)構(gòu),導(dǎo)致染色體不能分開,因此中期細(xì)胞的比例增加。43.為什么維生素C缺乏會(huì)引起壞血癥? VC是脯氨酰-4羥化酶及脯氨酰-3羥化酶的輔助因子,VC缺乏導(dǎo)致膠原的羥化反應(yīng)不能充分進(jìn)行,使膠原分子間不能交聯(lián)形成正常的膠原原纖維。因而,膳食中缺乏維生素C可導(dǎo)致血管、肌腱、皮膚變脆,易出血,稱為壞血病。44. 簡述細(xì)胞外基質(zhì)的生物學(xué)作用 .影響細(xì)胞的存活與死亡 .決定細(xì)胞的形狀 .調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖 .控制細(xì)胞的分化 .參與細(xì)胞的遷移 45.什么是緊密連接? 緊密連接(ti
24、ght junction)又稱封閉小帶(zonula occludens),存在于脊椎動(dòng)物的上皮細(xì)胞間,是封閉連接的主要形式。相鄰細(xì)胞之間的質(zhì)膜緊密結(jié)合,沒有縫隙,能防止溶液中的分子沿細(xì)胞間隙滲入體內(nèi),從而保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定。46.橋粒和粘合帶處的細(xì)胞粘附分子屬于哪一種類型,各連接那一類細(xì)胞骨架? 橋粒和粘合帶處的細(xì)胞粘附分子均屬于鈣粘素。橋粒與細(xì)胞內(nèi)的中間纖維連接,粘合帶與細(xì)胞內(nèi)的肌動(dòng)蛋白纖維連接。47.細(xì)胞粘附分子間的作用機(jī)制有哪三種方式? .兩相鄰細(xì)胞表面的同種CAM分子間的相互識(shí)別與結(jié)合(親同性粘附); . 兩相鄰細(xì)胞表面的不同種CAM分子間的相互識(shí)別與結(jié)合(親異性粘附).兩相
25、鄰細(xì)胞表面的相同CAM分子借細(xì)胞外的多價(jià)連接分子而相互識(shí)別與結(jié)合。 48. 細(xì)胞核有什么功能,由哪幾部分構(gòu)成? 細(xì)胞核的主要功能有兩個(gè)方面:遺傳、發(fā)育。 細(xì)胞核的主要結(jié)構(gòu)包括:核被膜、核仁、核基質(zhì)、染色質(zhì)、核纖層等5部分。 49.簡述核小體結(jié)構(gòu)模型 .每個(gè)核小體單位包括200bp左右的DNA和一個(gè)組蛋白八聚體及一個(gè)分子的組蛋白H1。 .組蛋白八聚體構(gòu)成核小體的核心顆粒,由H2A、H2B、H3、H4各兩分子形成。 . DNA分子以左手螺旋纏繞在核心顆粒表面。 .相鄰核心顆粒之間為一段連接線DNA,連結(jié)線上有組蛋白H1和非組蛋白。50.異染色質(zhì)有什么特點(diǎn)? .在間期核中處于凝縮狀態(tài),無轉(zhuǎn)錄活性。
26、.是遺傳惰性區(qū),含永不表達(dá)的基因。 .復(fù)制時(shí)間晚于其它區(qū)域,在細(xì)胞周期中表現(xiàn)為晚復(fù)制,早凝縮,即異固縮現(xiàn)象(heteropycnosis)。 51.多線染色體主要有什么特點(diǎn) 體積巨大,這是由于核內(nèi)有絲分裂的結(jié)果,即染色體多次復(fù)制而不分離。 多線性,每條多線染色體由5004000條解旋的染色體合并在一起形成。 體細(xì)胞聯(lián)會(huì),同源染色體緊密配對(duì),并合并成一個(gè)染色體。 橫帶紋,染色后呈現(xiàn)出明暗相間的帶紋。 具有膨突和環(huán),是基因活躍轉(zhuǎn)錄的區(qū)域。52.什么是核型(karyotype)? 核型是細(xì)胞分裂中期染色體特征的總和,包括染色體的數(shù)目、大小和形態(tài)特征等方面。 53.細(xì)胞周期可分為哪4個(gè)期? G1期(g
27、ap1):指從有絲分裂完成到期DNA復(fù)制之前的間隙時(shí)間; S期(synthesis phase):指DNA復(fù)制的時(shí)期,只有在這一時(shí)期H3-TDR才能摻入新合成的DNA中; G2期(gap2):指DNA復(fù)制完成到有絲分裂開始之前的一段時(shí)間; M期又稱D期(mitosis or division):細(xì)胞分裂開始到結(jié)束。54.說明減數(shù)分裂(Meiosis)的遺傳學(xué)意義 減數(shù)分裂的特點(diǎn)是DNA復(fù)制一次,而細(xì)胞連續(xù)分裂兩次,形成單倍體的精子和卵子,通過受精作用又恢復(fù)二倍體,減數(shù)分裂過程中同染色體間發(fā)生交換和重組,使配子的遺傳多樣化,增加了后代的適應(yīng)性,因此減數(shù)分裂不僅是保證生物種染色體數(shù)目穩(wěn)定的機(jī)制,同
28、且也是物種適應(yīng)環(huán)境變化不斷進(jìn)化的機(jī)制。 55.讓M期的細(xì)胞與間期的細(xì)胞融合,誘導(dǎo)間期細(xì)胞產(chǎn)生PCC,請(qǐng)描述各時(shí)期PCC的形態(tài)及形成原因。 G1期PCC為單線狀,因DNA未復(fù)制。 S期PCC為粉末狀,這與DNA由多個(gè)部位開始復(fù)制有關(guān)。 G2期PCC為雙線染色體,說明DNA復(fù)制已完成。56.舉出兩種以上人工細(xì)胞同步化的方法,并說明優(yōu)缺點(diǎn)。(任意2種方法) .有絲分裂選擇法:有絲分裂細(xì)胞與培養(yǎng)皿的附著性低,振蕩脫離器壁收集。優(yōu)點(diǎn):操作簡單,同步化程度高,細(xì)胞不受藥物傷害。缺點(diǎn):獲得的細(xì)胞數(shù)量較少。(分裂細(xì)胞約占1%2%).細(xì)胞沉降分離法:不同時(shí)期的細(xì)胞體積不同,可用離心的方法分離。優(yōu)點(diǎn):可用于任何懸
29、浮培養(yǎng)的細(xì)胞。缺點(diǎn):同步化程度較低。 . DNA合成阻斷法:選用DNA合成的抑制劑,可逆地抑制DNA合成。常用TDR雙阻斷法,在細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期的培養(yǎng)基中加入過量TDR,S期細(xì)胞被抑制,停在G1/S交界處。移去TDR,釋放時(shí)間大于TS時(shí)再次加入過量TDR。優(yōu)點(diǎn):同步化程度高,幾乎將所有的細(xì)胞同步化。缺點(diǎn):產(chǎn)生非均衡生長,個(gè)別細(xì)胞體積增大。 .中期阻斷法:利用破壞微管的藥物(如:秋水仙素、秋水仙酰胺)將細(xì)胞阻斷在中期。優(yōu)點(diǎn)是無非均衡生長現(xiàn)象,缺點(diǎn)是可逆性較差。 57.簡述細(xì)胞有絲分裂的過程。 前期的主要事件是:染色體凝集,分裂極的確定,核膜解體及核仁消失。 前中期:指從核膜解體至染色體排列到赤
30、道面之前的時(shí)期。 中期:染色體排列到赤道面上的時(shí)期。 后期:染色體開始分離到到達(dá)兩極的時(shí)期。 末期:子核形成和胞質(zhì)分裂。58. 簡述減數(shù)分裂前期細(xì)胞核的變化。 前期分為細(xì)線期、合線期、粗線期、雙線期和終變期5個(gè)亞期。 細(xì)線期:染色體呈細(xì)線狀,凝集于核的一側(cè)。 合線期:同源染色體開始配對(duì),SC開始形成,并且合成剩余0.3%的DNA。在光鏡下可以看到兩條結(jié)合在一起的染色體,稱為二價(jià)體(bivalent)。每一對(duì)同源染色體都經(jīng)過復(fù)制,含四個(gè)染色單體,所以又稱為四分體(tetrad) 粗線期:染色體變短,結(jié)合緊密,這一時(shí)期同源染色體的非姊妹染色單體之間發(fā)生交換的時(shí)期。 雙線期:配對(duì)的同源染色體相互排斥
31、,開始分離,交叉端化,部分位點(diǎn)還在相連。部分動(dòng)物的卵母細(xì)胞停留在這一時(shí)期,形成燈刷染色體。 終變期:交叉幾乎完全端化,核膜破裂,核仁解體。是染色體計(jì)數(shù)的最佳時(shí)期。 59.細(xì)胞周期具有哪幾個(gè)主要的檢驗(yàn)點(diǎn)(check point)? . G1期檢驗(yàn)點(diǎn):DNA是否損傷,細(xì)胞外環(huán)境是否適宜,細(xì)胞體積是否足夠大。 . S期檢驗(yàn)點(diǎn): DNA是否復(fù)制完成。 . G2期檢驗(yàn)點(diǎn):DNA是否損傷,細(xì)胞體積是否足夠大。 . M期檢驗(yàn)點(diǎn):紡錘體是否連到染色體上。60.什么是細(xì)胞周期引擎? MPF等細(xì)胞周期依賴性激酶可推動(dòng)細(xì)胞周期不斷運(yùn)行,稱為細(xì)胞周期引擎。 61.原癌基因激活的機(jī)制有哪些? 點(diǎn)突變:原癌基因的產(chǎn)物通能
32、促進(jìn)細(xì)胞的生長和分裂,點(diǎn)突變的結(jié)果使基因產(chǎn)物的活性顯著提高,對(duì)細(xì)胞增殖的刺激也增強(qiáng),從而導(dǎo)致癌癥。 DNA重排:原癌基因在正常情況下表達(dá)水平較低,但當(dāng)發(fā)生染色體的易位時(shí),處于活躍轉(zhuǎn)錄基因強(qiáng)啟動(dòng)子的下游,而產(chǎn)生過度表達(dá)。如Burkitt淋巴瘤和漿細(xì)胞瘤中,c-myc基因移位至人類免疫球蛋白基因后而活躍轉(zhuǎn)錄。 啟動(dòng)子或增強(qiáng)子插入:某些病毒基因不含v-onc,但含有啟動(dòng)子、增強(qiáng)子等調(diào)控成分,插入c-onc的上游,導(dǎo)致基因過度表達(dá)。 基因擴(kuò)增:在某些造血系統(tǒng)惡性腫瘤中,瘤基因擴(kuò)增是一個(gè)極常見的特征,如前髓細(xì)胞性白血病細(xì)胞系和這類病人的白血病細(xì)胞中,c-myc擴(kuò)增8-32锫。癌基因擴(kuò)增的染色體結(jié)構(gòu)有:
33、原癌基因的低甲基化:致癌物質(zhì)的作用下,使原癌基因的甲基化程度降低而導(dǎo)致癌癥,這是因?yàn)橹掳┪镔|(zhì)降低甲基化酶的活性。 62.簡述細(xì)胞凋亡的特點(diǎn) 又叫程序性細(xì)胞死亡(programmed cell death PCD)是一種基因指導(dǎo)的細(xì)胞自我消亡方式,有以下特點(diǎn) .細(xì)胞以出芽的方式形成許多凋亡小體。凋亡小體內(nèi)有結(jié)構(gòu)完整的細(xì)胞器,還有凝縮的染色體,可被鄰近細(xì)胞吞噬消化,因?yàn)槭冀K有膜封閉,沒有內(nèi)容物釋放,不引起炎癥。 .線粒體無變化,溶酶體活性不增加。 .內(nèi)切酶活化,DNA有控降解,凝膠電泳圖譜呈梯狀 63. 什么是Hayflick極限?有什么理論依據(jù)? “Hayflick”極限,即細(xì)胞最大分裂次數(shù)。
34、細(xì)胞增殖次數(shù)與端粒DNA長度有關(guān)。DNA復(fù)制一次端粒DNA就縮短一段,當(dāng)縮短到Hayflick點(diǎn)時(shí),細(xì)胞停止復(fù)制,走向衰亡。端粒的長度與端聚酶的活性有關(guān),端聚酶是一種反轉(zhuǎn)錄酶,正常體細(xì)胞中缺乏此酶。 五、簡答題 1、細(xì)胞學(xué)說的主要內(nèi)容是什么?有何重要意義? 答:細(xì)胞學(xué)說的主要內(nèi)容包括:一切生物都是由細(xì)胞構(gòu)成的,細(xì)胞是組成生物體的基本結(jié)構(gòu)單位;細(xì)胞通過細(xì)胞分裂繁殖后代。細(xì)胞學(xué)說的創(chuàng)立對(duì)當(dāng)時(shí)生物學(xué)的發(fā)展起了巨大的促進(jìn)和指導(dǎo)作用。其意義在于:明確了整個(gè)自然界在結(jié)構(gòu)上的統(tǒng)一性,即動(dòng)、植物的各種細(xì)胞具有共同的基本構(gòu)造、基本特性,按共同規(guī)律發(fā)育,有共同的生命過程;推進(jìn)了人類對(duì)整個(gè)自然界的認(rèn)識(shí);有力地促進(jìn)了
35、自然科學(xué)與哲學(xué)的進(jìn)步。 2、細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展可分為哪幾個(gè)階段? 答:細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展大致可分為五個(gè)時(shí)期:細(xì)胞質(zhì)的發(fā)現(xiàn)、細(xì)胞學(xué)說的建立、細(xì)胞學(xué)的經(jīng)典時(shí)期、實(shí)驗(yàn)細(xì)胞學(xué)時(shí)期、分子細(xì)胞生物學(xué)時(shí)期。 3、為什么說19世紀(jì)最后25年是細(xì)胞學(xué)發(fā)展的經(jīng)典時(shí)期? 答:因?yàn)樵?9世紀(jì)的最后25年主要完成了如下的工作:原生質(zhì)理論的提出;細(xì)胞分裂的研究;重要細(xì)胞器的發(fā)現(xiàn)。這些工作大大地推動(dòng)了細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展。 六、論述題 1、什么叫細(xì)胞生物學(xué)?試論述細(xì)胞生物學(xué)研究的主要內(nèi)容。 答:細(xì)胞生物學(xué)是研究細(xì)胞基本生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué),它是在三個(gè)水平(顯微、亞顯微與分子水平)上,以研究細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、細(xì)胞衰
36、老與死亡、細(xì)胞信號(hào)傳遞、真核細(xì)胞基因表達(dá)與調(diào)控、細(xì)胞起源與進(jìn)化等為主要內(nèi)容的一門科學(xué)。 細(xì)胞生物學(xué)的主要研究內(nèi)容主要包括兩個(gè)大方面:細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能、細(xì)胞重要生命活動(dòng)。涵蓋九個(gè)方面的內(nèi)容:細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;生物膜與細(xì)胞器的研究;細(xì)胞骨架體系的研究;細(xì)胞增殖及其調(diào)控;細(xì)胞分化及其調(diào)控;細(xì)胞的衰老與凋亡;細(xì)胞的起源與進(jìn)化;細(xì)胞工程;細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。 2、試論述當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)研究最集中的領(lǐng)域。 答:當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)研究主要集中在以下四個(gè)領(lǐng)域:細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);細(xì)胞增殖調(diào)控;細(xì)胞衰老、凋亡及其調(diào)控;基因組與后基因組學(xué)研究。人類亟待通過以上四個(gè)方面的研究,闡明當(dāng)今主要威脅人類的四大疾?。喊┌Y、心血
37、管疾病、艾滋病和肝炎等傳染病的發(fā)病機(jī)制,并采取有效措施達(dá)到治療的目的。 七、翻譯題 1、cell biology細(xì)胞生物學(xué) 2、cell theory細(xì)胞學(xué)說 3、protoplasm原生質(zhì) 4、protoplast原生質(zhì)體 五、簡答題 1、病毒的基本特征是什么? 答:病毒是“不完全”的生命體。病毒不具備細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),但卻具備生命的基本特征(復(fù)制與遺傳),其主要的生命活動(dòng)必需在細(xì)胞內(nèi)才能表現(xiàn)。病毒是徹底的寄生物。病毒沒有獨(dú)立的代謝和能量系統(tǒng),必需利用宿主的生物合成機(jī)構(gòu)進(jìn)行病毒蛋白質(zhì)和病毒核酸的合成。病毒只含有一種核酸。病毒的繁殖方式特殊稱為復(fù)制。 2、為什么說支原體是目前發(fā)現(xiàn)的最小、最簡單的
38、能獨(dú)立生活的細(xì)胞生物? 答:支原體的的結(jié)構(gòu)和機(jī)能極為簡單:細(xì)胞膜、遺傳信息載體DNA與RNA、進(jìn)行蛋白質(zhì)合成的一定數(shù)量的核糖體以及催化主要酶促反應(yīng)所需要的酶。這些結(jié)構(gòu)及其功能活動(dòng)所需空間不可能小于100nm。因此作為比支原體更小、更簡單的細(xì)胞,又要維持細(xì)胞生命活動(dòng)的基本要求,似乎是不可能存在的,所以說支原體是最小、最簡單的細(xì)胞。 六、論述題 1、如何理解“細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位”。 答:細(xì)胞是構(gòu)成有機(jī)體的基本單位。一切有機(jī)體均由細(xì)胞構(gòu)成,只有病毒是非細(xì)胞形態(tài)的生命體。細(xì)胞具有獨(dú)立的、有序的自控代謝體系,細(xì)胞是代謝與功能的基本單位細(xì)胞是有機(jī)體生長與發(fā)育的基礎(chǔ)細(xì)胞是遺傳的基本單位,細(xì)胞具有遺傳的
39、全能性細(xì)胞是生命起源和進(jìn)化的基本單位。沒有細(xì)胞就沒有完整的生命 2、試論述原核細(xì)胞與真核細(xì)胞最根本的區(qū)別。 答:原核細(xì)胞與真核細(xì)胞最根本的區(qū)別在于:生物膜系統(tǒng)的分化與演變:真核細(xì)胞以生物膜分化為基礎(chǔ),分化為結(jié)構(gòu)更精細(xì)、功能更專一的基本單位細(xì)胞器,使細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)與職能的分工是真核細(xì)胞區(qū)別于原核細(xì)胞的重要標(biāo)志;遺傳信息量與遺傳裝置的擴(kuò)增與復(fù)雜化:由于真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)雜化,遺傳信息量相應(yīng)擴(kuò)增,即編碼結(jié)構(gòu)蛋白與功能蛋白的基因數(shù)首先大大增多;遺傳信息重復(fù)序列與染色體多倍性的出現(xiàn)是真核細(xì)胞區(qū)別于原核細(xì)胞的一個(gè)重大標(biāo)志。遺傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯的裝置和程序也相應(yīng)復(fù)雜化,真核細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的轉(zhuǎn)錄與翻譯
40、有嚴(yán)格的階段性與區(qū)域性,而在原核細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄與翻譯可同時(shí)進(jìn)行。 七、翻譯 1、virus病毒 2、viroid類病毒 3、HIV艾滋病病毒 4、bacteria細(xì)菌 1、超薄切片的樣品制片過程包括哪些步驟? 答案要點(diǎn):取材,固定,包埋,切片,染色。 2、熒光顯微鏡在細(xì)胞生物學(xué)研究中有什么應(yīng)用? 答案要點(diǎn):熒光顯微鏡是以紫外線為光源,照射被檢物體發(fā)出熒光,在顯微鏡下觀察形狀及所在位置,圖像清晰,色彩逼真。熒光顯微鏡可以觀察細(xì)胞內(nèi)天然物質(zhì)經(jīng)紫外線照射后發(fā)熒光的物質(zhì)(如葉綠體中的葉綠素能發(fā)出血紅色熒光);也可觀察誘發(fā)熒光物質(zhì)(如用丫啶橙染色后,細(xì)胞中RNA發(fā)紅色熒光,DNA發(fā)綠色熒光),根據(jù)發(fā)光部位,
41、可以定位研究某些物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的變化情況。 3、比較差速離心與密度梯度離心的異同。 答案要點(diǎn):二者都是依靠離心力對(duì)細(xì)胞勻漿懸浮扔中的顆粒進(jìn)行分離的技術(shù)。差速離心是一種較為簡便的分離法,常用于細(xì)胞核和細(xì)胞器的分離。因?yàn)樵诿芏染坏慕橘|(zhì)中,顆粒越大沉降越快,反之則沉降較慢。這種離心方法只能將那些大小有顯著差異的組分分開,而且所獲得的分離組分往往不很純;而密度梯度離心則是較為精細(xì)的分離手段,這種方法的關(guān)鍵是先在離心管中制備出蔗糖或氯化銫等介質(zhì)的濃度梯度并將細(xì)胞勻漿裝在最上層,密度梯度的介質(zhì)可以穩(wěn)定沉淀成分,防止對(duì)流混合,在此條件下離心,細(xì)胞不同組分將以不同速率沉降并形成不同沉降帶。 4、為什么電子顯微
42、鏡不能完全替代光學(xué)顯微鏡? 答案要點(diǎn):電子顯微鏡用電子束代替了光束,大大提高了分辨率,電子顯微鏡相對(duì)光學(xué)顯微鏡是個(gè)飛躍。但是電子顯微鏡:樣品制備更加復(fù)雜;鏡筒需要真空,成本更高;只能觀察“死”的樣品,不能觀察活細(xì)胞。光學(xué)顯微鏡技術(shù)性能要求不高,使用容易;可以觀察活細(xì)胞,觀察視野范圍廣,可在組織內(nèi)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系;而且一些新發(fā)展起來的光學(xué)顯微鏡能夠觀察特殊的細(xì)胞或細(xì)胞結(jié)構(gòu)組分。因此,電子顯微鏡不能完全代替光學(xué)顯微鏡。 5、相差顯微鏡在細(xì)胞生物學(xué)研究中有什么應(yīng)用? 答案要點(diǎn):相差顯微鏡通過安裝特殊裝置(如相差板等)將光波通過樣品的光程差或相差位轉(zhuǎn)換為振幅差,由于相差板上部分區(qū)域有吸光物質(zhì),使兩組光
43、線之間增添了新的光程差,從而對(duì)樣品不同同造成的相位差起“夸大作用”,樣品表現(xiàn)出肉眼可見的明暗區(qū)別。相差顯微鏡的樣品不需染色,可以觀察活細(xì)胞,甚至研究細(xì)胞核、線粒體等到細(xì)胞器的形態(tài)。 6、比較放大率與分辨率的含義。 答案要點(diǎn):二者都是衡量顯微鏡性能的指標(biāo)。通常放大率是指顯微鏡所成像的大小與樣本實(shí)際大小的比率;而分辨率是指能分辨或區(qū)分出的被檢物體細(xì)微結(jié)構(gòu)的最小間隔,即兩個(gè)點(diǎn)間的最小距離。放大率對(duì)分辨率有影響,但分辨率不僅僅取決于放大率。 7、掃描隧道顯微鏡具有哪些特點(diǎn)? 答案要點(diǎn):高分辨率:具有原子尺度的高分辨率本領(lǐng),側(cè)分辨率為0.10.2nm,縱分辨率可達(dá)0.001nm;直接探測樣品的表面結(jié)構(gòu):
44、可繪出立體三維結(jié)構(gòu)圖像;可以在真空、大氣、液體(接近于生理環(huán)境的離子強(qiáng)度)等多種條件下工作;非破壞性測量:由于沒有高能電子束,對(duì)表現(xiàn)沒有破壞作用(如輻射、熱損傷等),能對(duì)生理狀態(tài)下的生物大分子和活細(xì)胞膜表面的結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究,樣品不會(huì)受到損傷而保持完好;掃描速度快,獲取數(shù)據(jù)的時(shí)間短,成像快。 六、論述題 1、試比較電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的區(qū)別。 答案要點(diǎn):光學(xué)顯微鏡是以可見光為照明源,將微小的物體形成放大影像的光學(xué)儀器;而電子顯微鏡則是以電子束為照明源,通過電子流對(duì)樣品的透射或反射及電磁透鏡的多級(jí)放大后在熒光屏上成像的大型儀器。它們的不同在于:照明源不同:光鏡的照明源是可見光,電鏡的照明源是電子束
45、;由于電子束的波長遠(yuǎn)短于光波波長,因而電鏡的放大率及分辨率顯著高于光鏡。透鏡不同:光鏡為玻璃透鏡;電鏡為電磁透鏡。分辨率及有效放大本領(lǐng)不同:光鏡的分辨率為0.2m左右,放大倍數(shù)為1000倍;電鏡的分辨率可達(dá)0.2nm,放大倍數(shù)106倍。真空要求不同:光鏡不要求真空;電鏡要求真空。成像原理不同:光鏡是利用樣品對(duì)光的吸收形成明暗反差和顏色變化成像;而電鏡則是利用樣品對(duì)電子的散射和透射形成明暗反差成像。生物樣品制備技術(shù)不同:光鏡樣品制片技術(shù)較簡單,通常有組織切片、細(xì)胞涂片、組織壓片和細(xì)胞滴片等;而電鏡樣品的制備較復(fù)雜,技術(shù)難度和費(fèi)用都較高,在取材、固定、脫水和包埋等環(huán)節(jié)上需要特殊的試劑和操作,還需要
46、制備超薄切片。 七、翻譯 1、cell line細(xì)胞系 2、cell strain細(xì)胞株 3、cell culture細(xì)胞培養(yǎng) 4、cell engineering細(xì)胞工程 5、cell fusion細(xì)胞融合6、primary culture cell原代細(xì)胞 7、subculture cell傳代細(xì)胞 8、monoclonal antibody、單克隆抗體 第四章 細(xì)胞膜與細(xì)胞表面 五、簡答題 1、簡述細(xì)胞膜的生理作用。 答案要點(diǎn):(1)限定細(xì)胞的范圍,維持細(xì)胞的形狀。(2)具有高度的選擇性,(為半透膜)并能進(jìn)行主動(dòng)運(yùn)輸使細(xì)胞內(nèi)外形成不同的離子濃度并保持細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和外界環(huán)境之間的必要差別。(
47、3)是接受外界信號(hào)的傳感器,使細(xì)胞對(duì)外界環(huán)境的變化產(chǎn)生適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)。(4)與細(xì)胞新陳代謝、生長繁殖、分化及癌變等重要生命活動(dòng)密切相關(guān)。 2、生物膜的基本結(jié)構(gòu)特征是什么?與它的生理功能有什么聯(lián)系? 答案要點(diǎn):生物膜的基本結(jié)構(gòu)特征:磷脂雙分子層組成生物膜的基本骨架,具有極性的頭部和非極性的尾部的脂分子在水相中具有自發(fā)形成封閉膜系統(tǒng)的性質(zhì),以非極性尾部相對(duì),以極性頭部朝向水相。這一結(jié)構(gòu)特點(diǎn)為細(xì)胞和細(xì)胞器的生理活動(dòng)提供了一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的環(huán)境,使細(xì)胞與外界、細(xì)胞器與細(xì)胞器之間有了一個(gè)界面;蛋白質(zhì)分子以不同的方式鑲嵌其中或結(jié)合于表面,蛋白質(zhì)的類型、數(shù)量的多少、蛋白質(zhì)分布的不對(duì)稱性及其與脂分子的協(xié)同作用賦予生物
48、膜不同的特性與功能;這些結(jié)構(gòu)特征有利于物質(zhì)的選擇運(yùn)輸,提供細(xì)胞識(shí)別位點(diǎn),為多種酶提供了結(jié)合位點(diǎn),同時(shí)參與形成不同功能的細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)特征。 3、試比較單位膜模型與流動(dòng)鑲嵌模型的優(yōu)缺點(diǎn)。 答案要點(diǎn):單位膜模型的主要內(nèi)容:兩暗一明,細(xì)胞共有,厚約7.5nm,各種膜都具有相似的分子排列和起源。單位膜模型的不足點(diǎn):膜是靜止的、不變的。但是在生命系統(tǒng)中一般功能的不同常伴隨著結(jié)構(gòu)的差異,這樣共同的單位膜結(jié)構(gòu)很難與膜的多樣性與特殊性一致起來。膜的厚度一致:不同膜的厚度不完全一樣,變化范圍在510nm。蛋白質(zhì)在脂雙分子層上為伸展構(gòu)型:很難理解有活性的球形蛋白怎樣保持其活性,通常蛋白質(zhì)形狀的變化會(huì)導(dǎo)致其活性發(fā)生深
49、刻的變化。流動(dòng)鑲嵌模型的主要內(nèi)容:脂雙分子層構(gòu)成膜的基本骨架,蛋白質(zhì)分子或鑲在表面或部分或全部嵌入其中或橫跨整個(gè)脂類層。優(yōu)點(diǎn):強(qiáng)調(diào)膜的流動(dòng)性:認(rèn)為膜的結(jié)構(gòu)成分不是靜止的,而是動(dòng)態(tài)的,細(xì)胞膜是由流動(dòng)的脂類雙分子層中鑲嵌著球蛋白按二維排列組成的,脂類雙分子層像輕油般的流體,具有流動(dòng)性,能夠迅速地在膜平面進(jìn)行側(cè)向運(yùn)動(dòng);強(qiáng)調(diào)膜的不對(duì)稱性:大部分膜是不對(duì)稱的,在其內(nèi)部及其內(nèi)外表面具有不同功能的蛋白質(zhì);脂類雙分子層,內(nèi)外兩層脂類分子也是不對(duì)稱的。 4、紅細(xì)胞質(zhì)膜蛋白及膜骨架的成分是什么? SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析血影蛋白成分,紅細(xì)胞膜蛋白主要包括血影蛋白(或稱紅膜肽)、錨蛋白、帶3蛋白、帶4.1蛋白和
50、肌動(dòng)蛋白,還有一些血型糖蛋白。膜骨架蛋白主要成分包括:血影蛋白、肌動(dòng)蛋白、錨蛋白和帶4.1蛋白等。 5、簡述細(xì)胞膜的基本特性。 答案要點(diǎn):細(xì)胞膜的最基本的特性是不對(duì)稱性和流動(dòng)性。細(xì)胞膜的不對(duì)稱性是由膜脂分布的不對(duì)稱性和膜蛋白分布的不對(duì)稱性所決定的。膜脂分布的不對(duì)稱性表現(xiàn)在:膜脂雙分子層內(nèi)外層所含脂類分子的種類不同;脂雙分子層內(nèi)外層磷脂分子中脂肪酸的飽和度不同;脂雙分子層內(nèi)外層磷脂所帶電荷不同;糖脂均分布在外層脂質(zhì)中。膜蛋白的不對(duì)稱性表現(xiàn)在:糖蛋白的糖鏈主要分布在膜外表面;膜受體分子均分布在膜外層脂質(zhì)中;腺苷酸環(huán)化本科分布在膜內(nèi)表面。膜的流動(dòng)性是由膜內(nèi)部脂質(zhì)分子和蛋白質(zhì)分子的運(yùn)動(dòng)性所決定的。膜脂
51、的流動(dòng)性和膜蛋白的運(yùn)動(dòng)性使得細(xì)胞膜成為一種動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu);膜脂分子的運(yùn)動(dòng)表現(xiàn)在側(cè)向擴(kuò)散;旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng);擺動(dòng)運(yùn)動(dòng);翻轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng);膜蛋白的分子運(yùn)動(dòng)則包括側(cè)向擴(kuò)散和旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)。 六、論述題 1、動(dòng)物細(xì)胞連接主要有哪幾種類型,各有何功能? 答案要點(diǎn):細(xì)胞連接的類型:封閉連接或閉鎖連接:緊密連接;錨定連接:1、與中間纖維相關(guān)的錨定連接:橋粒和半橋粒;2、與肌動(dòng)蛋白纖維相關(guān)的錨定連接:粘合帶和粘合斑;通訊連接:間隙連接。緊密連接是封閉連接的主要形式,普遍存在于脊椎動(dòng)物體表及體內(nèi)各種腔道和腺體上皮細(xì)胞之間。是指相鄰細(xì)胞質(zhì)膜直接緊密地連接在一起,能阻止溶液中的分子特別是大分子沿著細(xì)胞間的縫隙滲入體內(nèi),維持細(xì)胞一個(gè)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境
52、。緊密連接具有:1、形成滲漏屏障,起重要的封閉作用;2、隔離作用,使游離端與基底面質(zhì)膜上的膜蛋白行使各自不同的膜功能;3、支持功能。橋粒:又稱點(diǎn)狀橋粒,位于粘合帶下方。是細(xì)胞間形成的鈕扣式的連接結(jié)構(gòu),跨膜蛋白(鈣粘素)通過附著蛋白(致密斑)與中間纖維相聯(lián)系,提供細(xì)胞內(nèi)中間纖維的錨定位點(diǎn)。中間纖維橫貫細(xì)胞,形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),同時(shí)還通過橋粒與相鄰細(xì)胞連成一體,形成整體網(wǎng)絡(luò),起支持和抵抗外界壓力與張力的作用。半橋粒相當(dāng)于半個(gè)橋粒,但其功能和化學(xué)組成與橋粒不同。它通過細(xì)胞質(zhì)膜上的膜蛋白整合素將上皮細(xì)胞錨定在基底膜上, 在半橋粒中,中間纖維不是穿過而是終止于半橋粒的致密斑內(nèi)。存在于上皮組織基底層細(xì)胞靠近基底
53、膜處,防止機(jī)械力造成細(xì)胞與基膜脫離。粘合帶:又稱帶狀橋粒,位于緊密連接下方,相鄰細(xì)胞間形成一個(gè)連續(xù)的帶狀連接結(jié)構(gòu),跨膜蛋白通過微絲束間接將組織連接在一起,提高組織的機(jī)械張力。粘合斑:細(xì)胞通過肌動(dòng)蛋白纖維和整聯(lián)蛋白與細(xì)胞外基質(zhì)之間的連接方式,微絲束通過附著蛋白錨定在連接部位的跨膜蛋白上。存在于某些細(xì)胞的基底,呈局限性斑狀。其形成對(duì)細(xì)胞遷移是不可缺少的。體外培養(yǎng)的細(xì)胞常通過粘著斑粘附于培養(yǎng)皿上。間隙連接:是動(dòng)物細(xì)胞間最普遍的細(xì)胞連接,是在相互接觸的細(xì)胞之間建立的有孔道的連接結(jié)構(gòu),允許無機(jī)離子及水溶性小分子物質(zhì)從中通過,從而溝通細(xì)胞達(dá)到代謝與功能的統(tǒng)一。間隙連接在代謝偶聯(lián)中的作用:使代謝物(如氨基酸
54、、葡萄糖、核苷酸、維生素等)及第二信使(cAMP、Ca2+等)直接在細(xì)胞之間流通。間隙連接在神經(jīng)沖動(dòng)信息傳遞過程中的作用:在由具有電興奮性的細(xì)胞構(gòu)成的組織中,通過間隙連接建立的電偶聯(lián)對(duì)其功能的協(xié)調(diào)一致具有重要作用。間隙連接在早期胚胎發(fā)育和細(xì)胞分化過程中具有重要;間隙連接對(duì)細(xì)胞增殖的控制也有一定作用。 2、胞外基質(zhì)的組成、分子結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能是什么? 答案要點(diǎn):組成細(xì)胞外基質(zhì)的大分子可大致分為四大類:膠原、彈性蛋白、非膠原糖蛋白及氨基聚糖和蛋白聚糖。膠原:膠原是胞外基質(zhì)最基本結(jié)構(gòu)成份之一,是細(xì)胞外基質(zhì)中最主要的水不溶性纖維蛋白。動(dòng)物體內(nèi)含量最豐富的蛋白,普遍存在于體內(nèi)各種器官和組織,是細(xì)胞外基質(zhì)
55、中的框架結(jié)構(gòu),可由成纖維細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞及某些上皮細(xì)胞合成并分泌到細(xì)胞外。膠原的分子結(jié)構(gòu):膠原纖維的基本結(jié)構(gòu)單位是原膠原;原膠原是由三條肽鏈盤繞成的三股螺旋結(jié)構(gòu);原膠原肽鏈具有Gly-x-y重復(fù)序列(G:甘氨酸,x常為脯氨酸,y常為羥脯氨酸或羥賴氨酸),對(duì)膠原纖維的高級(jí)結(jié)構(gòu)的形成是重要的;在膠原纖維內(nèi)部,原膠原蛋白分子呈1/4交替平行排列,一個(gè)原膠原分子的頭部與下一個(gè)原膠原分子的尾部有一個(gè)小的間隔分隔,形成周期性橫紋。膠原的功能:a、構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的骨架結(jié)構(gòu),細(xì)胞外基質(zhì)中的其它組分通過與膠原結(jié)合形成結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)合體;b、在不同組織中,膠原組裝成不同的纖維形式,以適應(yīng)特定功能的需要;c
56、、膠原可被膠原酶特異降解,而參入胞外基質(zhì)信號(hào)傳遞的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中。氨基聚糖和蛋白聚糖:氨基聚糖(GAG),又稱糖胺聚糖,是由重復(fù)的二糖單位構(gòu)成的長鏈多糖,二糖單位:一是氨基己糖(氨基葡萄糖或氨基半乳糖),另一個(gè)是糖醛酸。氨基聚糖可分為:透明質(zhì)酸、4-硫酸軟骨素、6-硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸乙酰肝素、肝素和硫酸角質(zhì)素等。透明質(zhì)酸及其生物學(xué)功能:透明質(zhì)酸是一種重要的糖胺聚糖,透明質(zhì)酸是增殖細(xì)胞和遷移細(xì)胞的胞外基質(zhì)主要成分,也是蛋白聚糖的主要結(jié)構(gòu)組分;透明質(zhì)酸在結(jié)締組織中起強(qiáng)化、彈性和潤滑作用;透明質(zhì)酸使細(xì)胞保持彼此分離,使細(xì)胞易于運(yùn)動(dòng)遷移和增殖并阻止細(xì)胞分化;在胞外基質(zhì)中,透明質(zhì)酸傾向于向外膨脹,產(chǎn)生壓力,使結(jié)締組織具有抗壓的能力。蛋白聚糖:存在于所有結(jié)締組織和細(xì)胞外基質(zhì)及許多細(xì)胞表面,是由氨基聚糖與核心蛋白的絲氨酸殘基共價(jià)連接形成的巨分子,若干蛋白聚糖單體借連接蛋白以非共價(jià)鍵與透明質(zhì)酸結(jié)合形成多聚體。蛋白聚糖的功能:軟骨中的蛋白聚糖是最大巨分子之一, 賦予軟骨以凝膠樣特性和抗變形能力;蛋白聚糖可視為細(xì)胞外的激素富集與儲(chǔ)存庫,可與多種生長因子(如成纖維細(xì)胞生長因子FGF、轉(zhuǎn)化生長因子TGF等)結(jié)合,有利于激素分子進(jìn)一步與細(xì)胞表面受體結(jié)合,有效完成信號(hào)的傳導(dǎo)。層粘連蛋白和纖連蛋白:a、層粘連蛋白:是各種動(dòng)物胚胎及成體組織的基膜的主要結(jié)構(gòu)組分之一,是高分子糖蛋白(相對(duì)分子量820KD)
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