微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用學(xué)案精校版PPT精品文檔

1、考綱要求展示考綱要求展示知識(shí)內(nèi)容知識(shí)內(nèi)容要求要求微生物的分離和培養(yǎng)微生物的分離和培養(yǎng)某種微生物數(shù)量的測(cè)定某種微生物數(shù)量的測(cè)定培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用3知識(shí)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建4一、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1. 培養(yǎng)基培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對(duì)概念：人們按照微生物對(duì)_的不同需求，配制出的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)成分：一般都含有碳源、成分：一般都含有碳源、_、水和、水和_，還需，還需要滿足不同微生物生長(zhǎng)對(duì)要滿足不同微生物生長(zhǎng)對(duì)_、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及_的要求。的要求。2. 無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)(

2、1)含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有_的的方法。方法。(2)關(guān)鍵：防止外來(lái)關(guān)鍵：防止外來(lái)_的入侵。的入侵。(3)方法：方法：消毒：消毒：_、化學(xué)藥劑消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、_。滅菌：滅菌：_滅菌、干熱滅菌、滅菌、干熱滅菌、_滅菌。滅菌。53. 實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基過(guò)程：計(jì)算、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基過(guò)程：計(jì)算、_、溶化、溶化、_、倒平板。、倒平板。(2)純化大腸桿菌的原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成純化大腸桿菌的原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成_，形成單個(gè)菌落，此菌落是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的，形成單個(gè)菌落，此菌落是由一個(gè)細(xì)胞繁

3、殖而來(lái)的子細(xì)胞群體。子細(xì)胞群體。(3)微生物的常用接種方法：微生物的常用接種方法：_和稀釋涂布平板法，和稀釋涂布平板法，接種過(guò)程仍然是接種過(guò)程仍然是_操作。操作。二、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)二、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)1. 分離原理：土壤中細(xì)菌之所以能分解尿素，是由于它們體分離原理：土壤中細(xì)菌之所以能分解尿素，是由于它們體內(nèi)能合成內(nèi)能合成_，這種物質(zhì)在把尿素分解成無(wú)機(jī)物的過(guò)程中，這種物質(zhì)在把尿素分解成無(wú)機(jī)物的過(guò)程中起到起到_作用。作用。62. 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用_。3. 實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣、制備實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣、制備_、微

4、生物的培養(yǎng)與、微生物的培養(yǎng)與觀察、細(xì)菌的計(jì)數(shù)。觀察、細(xì)菌的計(jì)數(shù)。三、分解纖維素的微生物的分離三、分解纖維素的微生物的分離1. 纖維素酶的組成：一種纖維素酶的組成：一種_，它至少包括三種組分，它至少包括三種組分，即即C1酶、酶、_酶和酶和_酶。酶。2. 篩選方法：剛果紅染色法，即通過(guò)是否產(chǎn)生篩選方法：剛果紅染色法，即通過(guò)是否產(chǎn)生_來(lái)來(lái)篩選纖維素分解菌。篩選纖維素分解菌。3. 實(shí)驗(yàn)操作步驟：土壤取樣、實(shí)驗(yàn)操作步驟：土壤取樣、_、_、將、將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上、樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上、_。7【自我校對(duì)自我校對(duì)】一、一、1. (1)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) (2)氮源氮源 無(wú)機(jī)鹽

5、無(wú)機(jī)鹽 pH 氧氣氧氣 2. (1)防止雜菌污染防止雜菌污染 (2)雜菌雜菌 (3)煮沸消毒法煮沸消毒法 紫外紫外線消毒法線消毒法 灼燒灼燒 高壓蒸汽高壓蒸汽 3. (1)稱量稱量 滅菌滅菌 (2)單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞 (3)平板劃線法平板劃線法無(wú)菌無(wú)菌二、二、1. 脲酶脲酶 催化催化 2. 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 3. 培養(yǎng)基培養(yǎng)基三、三、1. 復(fù)合酶復(fù)合酶 Cx 葡萄糖苷葡萄糖苷 2. 透明圈透明圈 3. 選擇培選擇培養(yǎng)養(yǎng) 梯度稀釋梯度稀釋 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落挑選產(chǎn)生透明圈的菌落8微生物的培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)一、培養(yǎng)基的類型及其應(yīng)用一、培養(yǎng)基的類型及其應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基類型培養(yǎng)基類型配制特

6、點(diǎn)配制特點(diǎn)主要應(yīng)用主要應(yīng)用物理性物理性質(zhì)質(zhì)固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基加入瓊脂較多加入瓊脂較多菌種分離，菌種分離，鑒定，計(jì)數(shù)鑒定，計(jì)數(shù)半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基加入瓊脂較少加入瓊脂較少菌種保存菌種保存液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加入瓊脂不加入瓊脂工業(yè)生產(chǎn)，工業(yè)生產(chǎn)，連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)化學(xué)組化學(xué)組成成合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基由已知成分配制而成，成由已知成分配制而成，成分明確分明確菌種分類、鑒定菌種分類、鑒定天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基由天然成分配制而成，培由天然成分配制而成，培養(yǎng)基成分不明確養(yǎng)基成分不明確工業(yè)生產(chǎn)，工業(yè)生產(chǎn)，降低成本降低成本目的用目的用途途鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基添加某種指示劑或化學(xué)藥添加某種指示劑或化學(xué)藥劑劑菌

7、種的鑒別菌種的鑒別選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基添加添加(或缺少或缺少)某種化學(xué)成某種化學(xué)成分分菌種的分離菌種的分離9二、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成二、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成營(yíng)養(yǎng)物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)質(zhì)定義定義作用作用主要來(lái)源主要來(lái)源碳源碳源能提供碳元素能提供碳元素的物質(zhì)的物質(zhì)構(gòu)成生物體的構(gòu)成生物體的物質(zhì)，異養(yǎng)生物質(zhì)，異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)物的能源物質(zhì)無(wú)機(jī)物：無(wú)機(jī)物：CO2、NaHCO3有機(jī)物：糖類、脂肪酸有機(jī)物：糖類、脂肪酸、石油、花生粉餅等、石油、花生粉餅等氮源氮源能提供氮元素能提供氮元素的物質(zhì)的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮核酸以及含氮代謝產(chǎn)物代謝產(chǎn)物無(wú)機(jī)物：無(wú)機(jī)物：N2、NH3、氨、氨鹽、硝酸鹽鹽、硝酸鹽有機(jī)物：尿素

8、、牛肉膏有機(jī)物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等、蛋白胨等生長(zhǎng)因生長(zhǎng)因子子生長(zhǎng)不可少的生長(zhǎng)不可少的微量有機(jī)物微量有機(jī)物酶和核酸的成酶和核酸的成分分維生素、氨基酸、堿基維生素、氨基酸、堿基等等10(1)(1)微生物最常利用的碳源是糖類微生物最常利用的碳源是糖類( (特別是葡萄糖特別是葡萄糖) )，常，常利用的氮源是氨鹽、硝酸鹽。利用的氮源是氨鹽、硝酸鹽。(2)(2)在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源。在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源。(3)(3)微生物之所以需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子，是由于缺乏合成微生物之所以需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子，是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。這些物質(zhì)所需要的酶或合

9、成能力有限。11三、無(wú)菌技術(shù)三、無(wú)菌技術(shù)1. 消毒與滅菌的區(qū)別消毒與滅菌的區(qū)別滅菌方滅菌方法法條件條件結(jié)果結(jié)果常用方法常用方法消毒消毒較為溫和的物較為溫和的物理或化學(xué)方法理或化學(xué)方法僅殺死物體表僅殺死物體表面或內(nèi)部一部面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害分對(duì)人體有害的微生物的微生物(不包不包括芽孢和孢子括芽孢和孢子)煮沸消毒法，煮沸消毒法，還有化學(xué)藥劑還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、如酒精、氯氣、石炭酸等石炭酸等)消毒、消毒、紫外線消毒紫外線消毒滅菌滅菌強(qiáng)烈的理化因強(qiáng)烈的理化因素素殺死物體內(nèi)外殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所有的微生物，包括芽孢和孢包括芽孢和孢子子灼燒滅菌、干灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓熱滅菌、高壓蒸

10、汽滅菌蒸汽滅菌122. 實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法的比較實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法的比較滅菌方滅菌方法法適用對(duì)象適用對(duì)象所需條件所需條件滅菌時(shí)間滅菌時(shí)間灼燒滅灼燒滅菌菌接種的金屬工具接種的金屬工具(如接種針、接種如接種針、接種環(huán)環(huán))在酒精燈的火焰在酒精燈的火焰外焰灼燒外焰灼燒直至燒紅直至燒紅干熱滅干熱滅菌菌耐高溫需干燥的耐高溫需干燥的物品物品(如玻璃器皿、如玻璃器皿、金屬用具金屬用具)干熱滅菌箱內(nèi)干熱滅菌箱內(nèi)160170 12 h高壓滅高壓滅菌菌培養(yǎng)基培養(yǎng)基100 kPa；121 1530 min131. 1. 芽孢是細(xì)菌發(fā)育后期形成的休眠體，耐高溫，故消毒僅殺芽孢是細(xì)菌發(fā)育后期形成的休眠體，耐高溫，故消毒僅

11、殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物而不包括其芽死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物而不包括其芽孢和孢子。孢和孢子。2. 2. 滅菌和消毒的實(shí)質(zhì)大都是使微生物的蛋白質(zhì)或核酸發(fā)生變滅菌和消毒的實(shí)質(zhì)大都是使微生物的蛋白質(zhì)或核酸發(fā)生變性。性。3. 3. 微生物分離中的無(wú)菌技術(shù)：獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止微生物分離中的無(wú)菌技術(shù)：獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，無(wú)菌技術(shù)可從如下四個(gè)方面展開：雜菌污染，無(wú)菌技術(shù)可從如下四個(gè)方面展開：(1)(1)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間，操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間，操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。(2)(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)

12、基等進(jìn)行滅菌。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。(3)(3)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。焰附近進(jìn)行。(4)(4)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。品相接觸。14【例例1】下列說(shuō)法正確的是下列說(shuō)法正確的是()A. 培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的B. 培養(yǎng)基只有兩類，液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基只有兩類，液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C. 除水以外的無(wú)機(jī)物只能提供無(wú)機(jī)鹽除水以外的無(wú)

13、機(jī)物只能提供無(wú)機(jī)鹽 D. 無(wú)機(jī)氮源不可能提供能量無(wú)機(jī)氮源不可能提供能量【解析解析】根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)，可分為液體培養(yǎng)基、半根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)，可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，在液體培養(yǎng)基中加入不同量的固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，在液體培養(yǎng)基中加入不同量的凝固劑可形成半固體或固體培養(yǎng)基；除水以外的無(wú)機(jī)物如凝固劑可形成半固體或固體培養(yǎng)基；除水以外的無(wú)機(jī)物如NH4HCO3，既可以是碳源，也可以是氮源，不僅僅能提供，既可以是碳源，也可以是氮源，不僅僅能提供無(wú)機(jī)鹽；無(wú)機(jī)氮源有時(shí)也能提供能量，如無(wú)機(jī)鹽；無(wú)機(jī)氮源有時(shí)也能提供能量，如NH3可以為硝化可以為硝化細(xì)菌提供能量。細(xì)菌提供能量。【答案答案

14、】A151. 培養(yǎng)基的配制原則培養(yǎng)基的配制原則目的要明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的選擇不同的原目的要明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的選擇不同的原料配制培養(yǎng)基。料配制培養(yǎng)基。營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：配制培養(yǎng)基時(shí)要注意各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：配制培養(yǎng)基時(shí)要注意各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例、例、pH要適宜。要適宜。2. 培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。源和無(wú)機(jī)鹽。不同培養(yǎng)基還要滿足不同微生物對(duì)不同培養(yǎng)基還要滿足不同微生物對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。氧氣的要求。161. (

15、2011合肥質(zhì)檢合肥質(zhì)檢)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的下列操作制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的下列操作中，不正確的是中，不正確的是()A. 操作流程是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌和倒平板操作流程是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌和倒平板B. 將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同倒入燒杯中再加水，去紙將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同倒入燒杯中再加水，去紙C. 滅菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加滅菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%瓊脂，并使其溶解瓊脂，并使其溶解D. 將培養(yǎng)基冷卻到約將培養(yǎng)基冷卻到約50度時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板度時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板【解析解析】牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的操作步驟是計(jì)算、稱量、溶牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的操作步

16、驟是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板；將稱好的牛肉膏與稱量紙一同放在燒杯化、滅菌、倒平板；將稱好的牛肉膏與稱量紙一同放在燒杯中，加入少量水，加熱，牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用中，加入少量水，加熱，牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻璃棒撈出稱量紙；滅菌前將蛋白胨和氯化鈉加入燒杯；等玻璃棒撈出稱量紙；滅菌前將蛋白胨和氯化鈉加入燒杯；等培養(yǎng)基冷卻到培養(yǎng)基冷卻到50度左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板。度左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板?！敬鸢复鸢浮緾17土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)一、實(shí)驗(yàn)原理一、實(shí)驗(yàn)原理1. 篩選菌株：常用選擇培養(yǎng)基。篩選菌株：常用選擇培養(yǎng)基。2. 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：測(cè)定微生物數(shù)量的常用方

17、法有稀釋涂布統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。3. 設(shè)置對(duì)照。設(shè)置對(duì)照。18二、實(shí)驗(yàn)流程二、實(shí)驗(yàn)流程1. 土壤取樣：一般在距地表約土壤取樣：一般在距地表約38 cm的土壤層取樣的土壤層取樣(富含有富含有機(jī)物、潮濕、機(jī)物、潮濕、pH7)。2. 制備培養(yǎng)基：準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基。牛制備培養(yǎng)基：準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照，用來(lái)判斷選擇培養(yǎng)基是否起到肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照，用來(lái)判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用。了選擇作用。3. 微生物的培養(yǎng)與觀察：將土樣以微生物的培養(yǎng)與觀察：將土樣以1、1

18、01、102依次等依次等比稀釋至比稀釋至107稀釋度，按照濃度從低到高的順序涂布平板。稀釋度，按照濃度從低到高的順序涂布平板。注明培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)日期以及平板培養(yǎng)樣品的稀釋度。將注明培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)日期以及平板培養(yǎng)樣品的稀釋度。將涂布好的培養(yǎng)皿放在涂布好的培養(yǎng)皿放在30 溫度下培養(yǎng)。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延溫度下培養(yǎng)。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，會(huì)有不同的菌落產(chǎn)生。比較牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇長(zhǎng)，會(huì)有不同的菌落產(chǎn)生。比較牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基中菌落的數(shù)量、形態(tài)等，并做好記錄。培養(yǎng)基中菌落的數(shù)量、形態(tài)等，并做好記錄。4. 細(xì)菌的計(jì)數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，進(jìn)行計(jì)數(shù)，防止因培養(yǎng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，進(jìn)

19、行計(jì)數(shù)，防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。求出平均值，根據(jù)平板所時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。求出平均值，根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。19【例例2】某同學(xué)在某同學(xué)在101、102、103倍稀釋液的平均菌落數(shù)為倍稀釋液的平均菌落數(shù)為2 760、295和和46，則菌落總數(shù)，則菌落總數(shù)(個(gè)個(gè)/mL)為為()A. 2.76104B. 2.95104C. 4.6104 D. 3.775104【解析解析】菌落計(jì)數(shù)法，注意是計(jì)算不同稀釋度的平均菌落數(shù)。首菌落計(jì)數(shù)法，注意是計(jì)算不同稀釋度的平均菌落數(shù)。首先選擇平均菌落數(shù)在先選擇平均菌落數(shù)在30300之

20、間的，當(dāng)只有一個(gè)稀釋倍數(shù)的平之間的，當(dāng)只有一個(gè)稀釋倍數(shù)的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí)，則以該平均菌落乘以稀釋倍數(shù)即為該樣均菌落數(shù)符合此范圍時(shí)，則以該平均菌落乘以稀釋倍數(shù)即為該樣品的細(xì)菌總數(shù)；若有兩個(gè)稀釋倍的平均菌落數(shù)均在品的細(xì)菌總數(shù)；若有兩個(gè)稀釋倍的平均菌落數(shù)均在30300之間，之間，則按兩者菌落總數(shù)之比值來(lái)決定，若比值小于則按兩者菌落總數(shù)之比值來(lái)決定，若比值小于2應(yīng)采取兩者的平應(yīng)采取兩者的平均數(shù)，若大于均數(shù)，若大于2，則取其中較小的菌落總數(shù)。本題，則取其中較小的菌落總數(shù)。本題295、46在在30300之間，之間，46103與與295102比值為比值為1.6，應(yīng)取二者平均數(shù)，應(yīng)取二者平均數(shù)(4610

21、3295102)23.775104。若所有稀釋倍數(shù)的菌落數(shù)。若所有稀釋倍數(shù)的菌落數(shù)均不在均不在30300之間，則應(yīng)以最接近之間，則應(yīng)以最接近300或或30的平均菌落乘以稀釋的平均菌落乘以稀釋倍數(shù)。倍數(shù)。【答案答案】D20微生物計(jì)數(shù)規(guī)則微生物計(jì)數(shù)規(guī)則1. 選擇菌落數(shù)在選擇菌落數(shù)在30300的平板計(jì)數(shù)。的平板計(jì)數(shù)。2. 若某兩個(gè)或多個(gè)稀釋濃度下獲得的菌落數(shù)均符合條件時(shí)，若某兩個(gè)或多個(gè)稀釋濃度下獲得的菌落數(shù)均符合條件時(shí)，再看兩者菌落數(shù)的比值，若小于再看兩者菌落數(shù)的比值，若小于2，則取兩者的平均值；，則取兩者的平均值；若大于若大于2，則取最小值。，則取最小值。3. 計(jì)算方法：每克樣品中的菌落數(shù)計(jì)算方法

22、：每克樣品中的菌落數(shù)(C/V)M。C：某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)；：某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)；V：涂布平：涂布平板所用稀釋液的體積板所用稀釋液的體積(mL)；M：稀釋倍數(shù)。：稀釋倍數(shù)。212. 用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確的是的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確的是()A. 涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B. 涂布了兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是涂布了兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和和260，取平均值，取平均值

23、238C. 涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212和和256，取平，取平均值均值163D. 涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和和250，取平，取平均值均值233【解析解析】在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至少在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至少3個(gè)平板，才能增強(qiáng)實(shí)個(gè)平板，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。C項(xiàng)雖涂布了項(xiàng)雖涂布了3個(gè)平板，但是，其中個(gè)平板，但是，其中1個(gè)平個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不能簡(jiǎn)單地

24、將了錯(cuò)誤，因此，不能簡(jiǎn)單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。【答案答案】D22分解纖維素的微生物的分離一、實(shí)驗(yàn)原理一、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)流程二、實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)(此步是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的此步是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來(lái)確定菌株數(shù)量的多少來(lái)確定)梯度稀釋梯度稀釋將樣品涂布到鑒別將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。23【例例3】纖維素分解菌的篩選原理是纖維素分解菌的篩選原理是()A. 剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物B. 剛果紅可以與水解的纖維二糖和葡萄糖形成紅色復(fù)合剛果紅可以與水解的纖維二糖和葡萄糖形成紅色復(fù)合物物C. 剛果紅可以與纖維素酶形成紅色復(fù)合物剛果紅可以與纖維素酶形成紅色復(fù)